CN102894002A - 一种含有小檗碱和多抗霉素的复配杀菌剂及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种环境相容性、高效低毒、由小檗碱和多抗霉素组成的复配杀菌剂，尤其用于防治葡萄霜霉病的应用研究。复配组合物中小檗碱和多抗霉素两种成分的增效比例为1：2至1：16。它在应用防治葡萄霜霉病方面表现突出。

Description

一种含有小檗碱和多抗霉素的复配杀菌剂及其应用

技术领域

本发明涉及一种复配杀菌剂，更具体的说，本发明涉及的是一种用于防治葡萄霜霉病的生物源杀菌剂。

背景技术

长期以来，由于在生产中为了保证农产品产量和质量大量使用化学杀菌剂，对生态环境产生巨大压力，且致使某些病原菌迅速产生抗药性，进一步加大了杀菌剂用量，从而造成农产品农药残留量严重超标，对人畜、环境造成巨大危害。开发和利用环境相容性、对人类无害的生物农药资源日益受到各国的青睐。

生物源农药有效成分是自然存在的，一般无毒，易于降解，在生态环境中积累毒性可能性小，具有环境相容性。对需求不断增长的有机食品、绿色食品具有保证作用，避免或减轻了应用化学农药造成的负面影响，且具有使病原菌难以产生抗药性等优点，是理想的农药类型。多抗霉素是农用生物制剂，在环境中消解快。小檗碱为一种季铵生物碱，存在于小檗科等四个科十个属的许多植物中。1826年M.-E.夏瓦利埃和G.佩尔坦从Xanthoxylonclava树皮中首次提取获得，近年来备受临床医生、科研界和患者的关注，同时也被科研单位和厂家用作农药推广应用。小檗碱和多抗霉素复配用于防治葡萄霜霉病还未见报道。

葡萄霜霉病主要危害叶片，也能侵染嫩梢、花序、幼果等幼嫩组织。葡萄霜霉病在我国各葡萄产区几乎均有分布，多发生在雨水较多的地区和年份，在5-6月份开始发生。病害流行年份，病叶焦枯早落，病梢扭曲，发育不良，对树势和产量影响很大，为葡萄上的主要病害之一。现在，生产上用于防治葡萄霜霉病的农药主要是化学农药，但低毒、低残留的生物源杀菌剂应用还很少。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有环境相容性、高效低毒、含有小檗碱和多抗霉素的复配杀菌剂，本发明的另一目的还提供了该复配杀菌剂的用途，该复配杀菌剂在防治葡萄霜霉病方面表现突出。本发明探讨了小檗碱及其复配组合物在农业领域中的应用，尤其是针对葡萄霜霉病防治研究而完成的。

一种含有小檗碱和多抗霉素的复配杀菌剂，特殊之处在于其有效成分包括小檗碱和多抗霉素，小檗碱和多抗霉素的质量配比为1：2～1：16，最佳质量配比为1：8。

所述小檗碱和多抗霉素在整个复配杀菌剂中的重量百分含量分别为小檗碱0.1～10%，多抗霉素1～20%，余量为常规辅料添加物。

本发明的复配杀菌剂在防治葡萄霜霉病中的应用。

小檗碱和多抗霉素单剂分别应用于防治葡萄霜霉病均具有一定的防治效果，小檗碱和多抗霉素复配应用防治葡萄霜霉病，表现出明显的增效作用。具有以下优势：

1、具有增效作用。小檗碱和多抗霉素两者以1：2至1：16的配比范围内均表现出增效作用，其中以1：8的配比增效最大，增效系数为1.75。

3、复配杀菌剂减少了药剂的投入量。复配后不仅提高了防治葡萄霜霉病的田间效果，300倍和400倍还分别减少了18.18%和38.64%的农药用量。

4、生物源农药小檗碱和多抗霉素作用方式不同，复配后不易使病菌产生抗药性。

本发明通过室内毒力测定和田间试验生物源农药小檗碱和多抗霉素单独使用和复配后对葡萄霜霉病的效果，确立了两生物源农药的最优配比，供生产使用，以达到减少农药环境污染、阻止病菌抗药性产生的目的。

具体实施方式

以下给出本发明的具体实施方式，用来对本发明的构成进行进一步说明。

应用实例

一、室内生物测定试验

（一）试验方法

1试验条件

试验靶标为葡萄霜霉病（Plasmopara viticola），样本采自于田间。

2仪器设备

仪器设备主要有电子天平、喷雾器械、人工气候箱、生物培养箱、培养皿、移液器等。

3试验设计

3.1试材准备

选用葡萄感病品种赤霞珠盆栽，自上向下4叶位-6叶位，剪取相同部位、长势一致、用湿棉球包裹叶柄放置在培养皿中，保湿备用。

3.2试验药剂

34％多抗霉素原药，山东科大创业生物有限公司产品。97％小檗碱盐酸盐，陕西旭煌植物科技发展有限公司产品。

3.3试验步骤

3.3.1孢子囊悬浮液配制

选择发病叶片，用4℃蒸馏水洗下叶片背面霜霉病菌孢子囊，配成悬浮液（浓度控制在每ml 1-6×10⁶个孢子囊），4℃下存放备用。

3.3.2药剂配制

两种原药均用蒸馏水进行溶解，配成10000mg/L母液备用。每个多抗霉素和小檗碱盐酸盐复配比例均稀释成5-7个浓度梯度。

3.3.3药剂处理

将药液均匀喷施于叶片背面，待药液自然风干后，将各处理叶片叶背向上，按处理标记后排放在保湿盒中。试验设不含药剂的处理作空白对照。

3.3.4叶盘法（Schwinn等，1982）

用打孔器将喷施药剂的健叶打成直径1cm的叶盘，放于含湿滤纸的培养皿内，每皿10个叶盘，每处理重复三次，用准备好的新鲜孢子囊悬浮液点滴10μL接种于叶盘背面中央。接种后盖上皿盖，置于人工气候室，在连续光照/黑暗12h交替，培养温度为23℃，5-7d调查试验结果。

4调查方法

按照叶盘病情分级方法调查每个处理的发病情况。叶盘病情分级方法如下：0级：无病斑；1级：病斑面积占整个叶面积的5%以下；3级：病斑面积占整个叶面积的6%-25%；5级：病斑面积占整个叶面积的26%-50%；7级：病斑面积占整个叶面积的51%-75%；9级：病斑面积占整个叶面积的76%以上。

5数据统计及分析

5.1计算方法

5.2统计分析

根据各药剂浓度对数值及对应的防效几率值作回归分析，计算各药剂的EC₅₀等数值。根据Wadley法计算混剂的增效系数（SR），评价混剂的联合作用类型。根据增效系数（SR）来评价药剂混用的增效作用，即SR<0.5为拮抗作用，0.5≤SR≤1.5为相加作用，SR>1.5为增效作用。增效系数（SR）按下列公式计算：

$X_1=\underset{P_A/A+P_B/B}{\overset{P_A+P_B}{---------------}}\&times;100$

式中：X₁---混剂的EC₅₀理论值，单位为mg/L；P_A---混剂中A的百分含量，单位为%；P_B---混剂中B的百分含量，单位为%；A---混剂中A的EC₅₀值，单位为mg/L；B---混剂中B的EC₅₀值，单位为mg/L；

$\mathrm{SR}=\underset{X_2}{\overset{X_1}{----------}}$

式中：SR---混剂的增效系数；X₁---混剂EC₅₀理论值，单位mg/L；X₂---混剂EC₅₀实测值，单位mg/L。

（二）试验结果

采用叶盘法评价了小檗碱和多抗霉素两种单剂及其不同配比混剂对葡萄霜霉病的防治效果，结果表明两种单剂室内对葡萄霜霉病菌均表现出良好的抑制效果，EC₅₀分别为11.2245mg/L和34.1447mg/L。小檗碱和多抗霉素两者在1：2至1：16的配比范围内均表现出增效作用，尤其1：8配比增效最为显著，增效系数为1.75。

表1小檗碱和多抗霉素最佳配比筛选结果表

二、田间药效评价试验

根据室内筛选出的小檗碱和多抗霉素最佳复配比例1：8，制成了4.5%小檗碱·多抗霉素复配杀菌剂，其中含0.5%小檗碱和4.0%多抗霉素。田间以10%多抗霉素WP 600倍、0.5%小檗碱AS 300倍作为对照药剂，开展了田间药效试验。

（一）试验方法

1试验条件

1.1试验对象、作物和品种的选择

试验对象为葡萄霜霉病（Plasmopara viticola），试验品种为红玫瑰葡萄。

1.2作物栽培及环境条件

试验园片篱架式栽培，树龄4年生，历年霜霉病发生普遍而均匀。试验期间（8月15日-9月20日）葡萄生育期为新梢抽生期。所有试验小区的栽培条件（土壤类型、施肥、生育阶段、株行距等）和树体长势均一，并与当地的栽培措施相一致。

2试验设计和安排

2.1药剂

2.1.1试验药剂

4.5%小檗碱·多抗霉素复配杀菌剂，烟台市农科院配制。

2.1.2对照药剂

10%多抗霉素WP，广东省东莞市瑞德丰生物科技有限产品；

0.5%小檗碱AS，浙江华京生物科技开发有限公司产品。

2.1.3药剂用量与处理安排

每小区葡萄株树为10株，重复4次。

表2供试药剂试验设计

3施药方法

3.1使用方法

兑水喷雾，用少量水先溶解后再加足所需水量；喷雾时使叶片正反面均匀着药，滴水为止。

3.2施药器械

施药器械采用SDR-120型电动喷雾器，喷孔直径0.8mm，工作压力2.0巴。

3.3施药时间和次数

田间葡萄霜霉病发生前期首次施药，共喷施3次。具体施药日期为2011年7月2日、7月18日和7月31日。

3.4使用容量

用药液量为150L/667m²。

3.5防治其他病虫害的药剂资料

试验期间，各小区除喷施试验药剂外，未喷施其他任何杀菌剂。

4调查、记录和测量方法

4.1调查方法、时间和次数

4.1.1调查时间和次数

药前无葡萄霜霉病，施药结束后8d（8月8日）调查一次药效。

4.1.2调查方法

每小区调查10个新梢，每梢自上而下调查全部叶片，分别记载各级病叶数。叶片病情分级方法：0级：无病斑；1级：病斑面积占整个叶面积的5%以下；3级：病斑面积占整个叶面积的6%-5%；5级：病斑面积占整个叶面积的26%-50%；7级：病斑面积占整个叶面积的51%-75%；9级：病斑面积占整个叶面积的76%以上。

4.1.3药效计算方法

4.2对作物的直接影响

试验药剂、对照药剂对供试葡萄品种安全、无药害。

（二）试验结果

4.5％小檗碱·多抗霉素复配杀菌剂300-400倍均表现出良好的防效，300-400倍防效均在65.98%以上，5％水平上显著高于10%多抗霉素WP 600倍和0.5%小檗碱AS 300倍的防效，且复配杀菌剂300倍和400倍分别减少了18.18%和38.64%的农药用量，增加了防治葡萄霜霉病药剂的选择性。此期间调查，各处理对供试寄主植物安全，无药害。

注：表中数据均为各处理平均数据

三、混剂安全性评价

复配组合物中小檗碱和多抗霉素含量小于或相当于市售产品的含量，因此其对人畜的毒性与对作物的安全性是符合要求的。复配杀菌剂经认定机构毒性试验结果表明属于微毒类农药：

大鼠急性经口毒性LD50♂>5000mg/kg，♀>5000mg/kg；

大鼠急性经皮毒性LD50♂>5000mg/kg，♀>5000mg/kg；

兔眼刺激积分为0（1h），48h后为0（1：100）稀释，对眼无刺激性；

兔眼刺激积分为0（4h），对皮肤无刺激性。

Claims (4)

1.一种含有小檗碱和多抗霉素的复配杀菌剂，特征在于其有效成分包括小檗碱和多抗霉素，小檗碱和多抗霉素的质量配比为1：2～1：16。

2.如权利要求1所述一种含有小檗碱和多抗霉素的复配杀菌剂，特征在于小檗碱和多抗霉素的质量配比为1：8。

3.权利要求1或2所述含有小檗碱和多抗霉素的复配杀菌剂在防治葡萄霜霉病中的应用。

4.如权利要求1或2所述一种含有小檗碱和多抗霉素的复配杀菌剂，特征在于所述有效成分小檗碱和多抗霉素在整个复配杀菌剂中的重量百分含量分别为小檗碱0.1～10%，多抗霉素为1～20%。