CN102830222B - 一种固体颗粒状生化试剂的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种固体颗粒状生化试剂的制备方法，解决了现有的生化试剂在失重或颠簸的情况下无法精确计量的问题。本发明主要由以下步骤构成：（1）配置生化试剂；（2）通过分液泵分配液滴；（3）将液滴滴入液氮中，与液滴相接触的液氮吸热气化形成气流，该气流使液滴漂浮于液氮表面，当液滴完全固化后该液滴形成冰珠并沉入液氮底部；（4）将冰珠转入冻干机中冷冻干燥后即制得成品。本发明具有精确度高、操作简便且检测结果好等优点。
Description
技术领域
本发明涉及的是一种生化试剂的制备方法，具体涉及的是一种固体颗粒状生化试剂的制备方法。
背景技术
生化分析是各级医疗机构检验医学中最基本和必备的诊断方法。在这种分析过程中必须借助与各种检查项目对应的生化试剂，常规生化分析所采用的生化试剂一般为液态和通过机械混匀后的固体粉末以及采用普通冻干工艺的冻干试剂这三种形态。生产后两种形态的生化试剂是为了获得比液体试剂更长保存期限，但是最终使用前都要复溶于水，做普通液态生化试剂使用。
但在许多特殊情况下，如：航天飞机的失重条件下或在车船剧烈颠簸的条件下时，使用便携式全自动生化分析仪即可实现分析检测的正常工作，但该便携式全自动生化分析仪需要将各个项目中参与反应的生化试剂精确到2±1%ul。并且，所述的机械混匀后的固体粉末以及冻干试剂这两种形态的生化试剂因为其制作工艺决定其在微小剂量下不能精确计量，最终导致以上试剂在特殊条件下时无法使用。
发明内容
本发明的目的在于解决现有的生化试剂在失重或颠簸的情况下无法精确计量的问题，提供一种可精确计量且操作简便的一种固体颗粒状生化试剂的制备方法。
实现本发明的技术方案如下：
一种固体颗粒状生化试剂的制备方法，主要由以下步骤构成：
（1）配置生化试剂；
（2）通过分液泵分配液滴；
（3）将液滴滴入液氮中，与液滴相接触的液氮吸热气化形成气流，该气流使液滴漂浮于液氮表面，当液滴完全固化后该液滴形成冰珠并沉入液氮底部；
（4）将冰珠转入冻干机中冷冻干燥后即制得成品。
为了利于形成固体颗粒状形态，在所述步骤（1）配置的生化试剂中加入赋形剂。
作为最优的选择方式，所述赋形剂为蔗糖、甘露醇、聚乙二醇、葡聚糖和牛血清白蛋白中的一种或多种。
作为一种优选，所述步骤（2）中分配的液滴体积相同。
另外，所述液滴体积为2±1%ul。
本发明具有以下优点及有益效果：
1、通过本发明的步骤，有效解决现有的生化试剂在失重或颠簸的情况下无法准确计量的问题，通过本发明可计量好后再制成颗粒，使用时，只需直接取颗粒进行溶解后对待测物品进行检测，无需再重新进行用量的选取，使用非常的方便，尤其是在进行实验的时候，可直接取用制备好的颗粒状生化试剂，无需每次操作时重新定量，可节约大量的实验操作时间，使用非常方便，提高操作效率；
2、本发明将生化试剂制备成体积一定、形态均匀一致的颗粒形状，本发明的生化试剂采用固体形态可有效增加生化试剂的存储时间，同时，该生化试剂采用颗粒形状不仅使该生化试剂便于取用，而且也便于分装；
3、本发明将赋形剂加入生化试剂中，可在利用液氮使其固化时更加容易，同时，该赋形剂也不影响生化试剂的测试结果，具有即有利于形成固态又不影响测试结果的优点；
4、因为生化试剂中一般含有活性酶，这种物质不能接触高温条件否则会失去酶活性，影响检测结果，进而本发明采用冷冻的方式对生化试剂进行干燥，通过本发明可有效保证生化试剂中的酶活性，保证该生化试剂的检测效果；
5、本发明操作方便、效益高、极其适合推广应用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
实施例
一种固体颗粒状生化试剂的制备方法，主要由以下步骤构成：
（1）配置浓缩生化试剂；
本实施例以丙氨酸氨基转移酶（ALT）固体颗粒生化试剂的制备为例，该丙氨酸氨基转移酶按2.4倍浓缩，其配方如表1：
表1
| 三羟甲基氨基甲烷 | 28.952g |
| L-丙氨酸 | 106.462g |
| α-酮戊二酸二钠盐，二合水 | 8.107g |
| EDTA.Na2.2H2O | 6.405g |
| 叠氮钠 | 0.5g |
| NADH.Na2.3H2O | 0.475g |
| D-乳酸脱氢酶 | 7.2ku |
| 纯水 | 1000mL |
在上述物质混合过程中加入8g/L的表面活性剂Triton X-100，有效控制颗粒溶解过程中气泡的产生。
同时，在上述配方中加入赋形剂，使本发明制得的固态颗粒更加地稳定，且该赋形剂也不影响本发明的检测结果。本发明中赋形剂可以采用蔗糖、甘露醇、聚乙二醇、葡聚糖和牛血清白蛋白中的一种或多种。不同的生化试剂中该赋形剂的用量也不相同，可根据操作人员的经验合理添加，因而上述蔗糖、甘露醇、聚乙二醇、葡聚糖和牛血清白蛋白加入的量均根据不同的需求确定。在本实施例中，加入甘露醇为赋形剂，其浓度选择为300Mm/L。
当加入纯水中的物质混合均匀后，可通过盐酸或氢氧化钠调节到适合的pH即完成配制。
按上述过程配制的生化试剂取部分用纯净水稀释2.4倍后在日立7160全自动生化分析仪上对同一份新鲜血清进行了检测，检测次数为20次，检测结果如下表2：
表2
检测发现，该试剂能有效地检测出血清中的丙氨酸氨基转移酶。
（2）将上述浓缩生化试剂通过分液泵分配液滴；将配置好的液体通过分液泵进行分液，分出的液体体积大小均相同，且该液滴的大小可根据不同的需求进行选择，如：1ul、2ul、4ul、6ul等，本实施例中优选为每滴液体体积2ul，每滴液体体积的精确度达到±1%ul。本实施例中分液泵采用美国IVEK分液泵。
（3）将液滴滴入液氮中，与液滴相接触的液氮吸热气化形成气流，该气流使液滴漂浮于液氮表面，当液滴完全固化后该液滴形成冰珠并沉入液氮底部；
液滴在液氮中固化的具体过程如下：
液滴滴入液氮表面，由于水基液体在液氮中会急剧冷却而产生“沸腾”现象，这种沸腾是由于液滴接触液氮后，液氮局部快速吸热，液氮由液态迅速转化为气态，产生大量氮气流，这个氮气流会将液滴托起一个微小间隙，只有当液滴在完全固化成冰珠以后氮气才会减小，最终因为冰的密度大于液氮的密度导致冰珠沉入液氮底部。
液滴滴入液氮到液滴完全固化的这段时间与液滴体积大小有关，且氮气流将液滴托起后减小了液滴接触液氮的面积，会使液滴完全固化成冰珠的时间延长，为了有效避免在液滴完全固化沉入液氮底部以前与后面滴入的液滴接触，导致液滴产生粘连现象，可调节液滴滴入的位置以及速率，进而有效地从空间及时间上进行控制，防止粘连现象产生。
（4）将冰珠转入冻干机中冷冻干燥后即制得成品，将在液氮中形成的冰珠取出，并将其放置于冻干机专用的冻干瓶中，然后立即将冻干瓶装在外挂式冻干机的接口上干燥，本实施例中该生化试剂的干燥时间为2h，干燥后即制得本发明的成品。
本实施例中对通过上述方法制得的部分固体颗粒生化试剂进行了检测并对其进行了编号，标号为1～5，其检测结果如表3：
表3
通过上述检测结果可得知：本实施例制得的固体颗粒状生化试剂的外观美观、溶解效率高、强度较好，进而有效保证每颗固体颗粒中有效成分重量确定，溶解后获得的液体精度高。
本实施例还利用上述固体颗粒状生化试剂在便携式全自动生化分析仪上对同一份新鲜血清进行了检测，该血清与表2中检测所用的血清相同，检测次数也为20次，检测结果如表4：
表4
通过表2、3、4中的实验结果可以看出，本发明所得的固体颗粒生化试剂形态能够满足使用要求，性能与冻干前没有明显变化，完全适合便携式全自动生化分析仪使用。
根据以上实施方式就可以很好的实现本发明，但本发明的实施方式不限于此。
Claims (3)
1.一种固体颗粒状生化试剂的制备方法，其特征在于，主要由以下步骤构成：
（1）配置生化试剂；
（2）通过分液泵分配液滴；
（3）将液滴滴入液氮中，与液滴相接触的液氮吸热气化形成气流，该气流使液滴漂浮于液氮表面，当液滴完全固化后该液滴形成冰珠并沉入液氮底部；
（4）将冰珠转入冻干机中冷冻干燥后即制得成品；
其中，步骤（1）配置的生化试剂中加有表面活性剂Triton X-100和赋形剂；
步骤（2）中分配的液滴体积相同。
2. 根据权利要求1所述的一种固体颗粒状生化试剂的制备方法，其特征在于，所述赋形剂为蔗糖、甘露醇、聚乙二醇、葡聚糖和牛血清白蛋白中的一种或多种。
3. 根据权利要求1或2所述的一种固体颗粒状生化试剂的制备方法，其特征在于，所述液滴体积为2±1%ul。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: No. C237, 2nd Floor, Innovation Center Building, High tech Zone, Chengdu, Sichuan Province, 610000 Patentee after: Chengdu Smart Technology Co.,Ltd. Country or region after: China Address before: No. C237, 2nd Floor, Innovation Center Building, High tech Zone, Chengdu, Sichuan Province, 610000 Patentee before: CHENGDU SEAMATY TECHNOLOGY Co.,Ltd. Country or region before: China |
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| CP03 | Change of name, title or address | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Preparation method of solid granular biochemical reagent Granted publication date: 20141126 Pledgee: Bank of China Limited Chengdu Jincheng Branch Pledgor: Chengdu Smart Technology Co.,Ltd. Registration number: Y2024980031489 |
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| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |