CN102827069A

CN102827069A - 以绿原酸为原料制备两种有机复合物的方法及其用途

Info

Publication number: CN102827069A
Application number: CN2012102943650A
Authority: CN
Inventors: 林翠梧; 蒙法艳; 罗轩; 黄丽; 陈海燕
Original assignee: Guangxi University
Current assignee: Guangxi University
Priority date: 2012-08-17
Filing date: 2012-08-17
Publication date: 2012-12-19
Anticipated expiration: 2032-08-17
Also published as: CN102827069B

Abstract

本发明公开了以绿原酸为原料制备两种有机复合物的方法及其用途。这两种有机复合物是绿原酸（HAC）与2,2’-联吡啶(2,2’-bipy)形成的有机复合物化学名称为(CA)·(2,2’-Hbipy)和绿原酸与1,10-邻菲罗啉(1,10-phen)形成的有机复合物(CA)·(1,10-Hphen)。通过试验，绿原酸与2,2’-联吡啶形成的有机复合物(CA)·(2,2’-Hbipy)对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌和白色念珠菌有较好的抑菌效果；绿原酸与邻菲罗啉形成的有机复合物(CA)·(1,10-Hphen)对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌有较好的抑菌效果，本产品是抗菌剂应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的食品、药品产品。

Description

以绿原酸为原料制备两种有机复合物的方法及其用途

技术领域

本发明涉及有机复合物制备方法及其用途，具体涉及以绿原酸为原料制备两种有机复合物的方法及其用途。

背景技术

包含药物活性成分的药物研究通常以各种固态形式存在，例如异质同晶，主-客体复合物，共晶，溶剂化物，以及有机复合物（也称为盐）。共晶是广为人知但相对较少被开发的一类化合物。他们可以被定义为基于氢键相互作用或非共价相互作用的多组分组成晶体系统。形成共晶的反应是一种了解不同分子间相互作用的很好手段，可以在超分子的合成中提供实际的指导。共晶在制药行业中是一个很重要的工具，因为通过药物共晶的形成可以提高药物的物理性质，如活性药物成分的溶解性、吸湿性、热稳定性和加工性能等，目前已经成为研究的一个热门领域。虽然晶体工程及其超分子合成在药学研究中的实际应用仍然是新兴行业,培养共晶已经正成为制作固体制剂公认的方法。

和共晶相似，有机复合物也是分子间通过非共价作用，有着不同物理和化学性质的多组分组成系统，与共晶不同的是，有机复合物在晶体形成的过程中，组分间发生了质子的转移。研究表明，有机复合物可以使得药物中的活性药物成分生物活性更强，但是30%以上的制药化合物缺乏适合成盐的条件。所以制备具有好的物理和化学性质的药物盐，成为研究的热门课题。

绿原酸是一种缩酚酸，属酚类化合物，它广泛分布于植物界，具有抗菌、抗病毒、利胆、增高白血球等多种药理作用，是保健品、食品、药品、化妆品等工业的重要原料。

发明内容

本发明的目的是提供以绿原酸为原料的两种有机复合物的制备方法及其用途。

本发明为绿原酸与2，2’-联吡啶和1,10-邻菲罗啉形成的有机复合物，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌、白色念珠菌和沙门氏菌均有良好的抑菌效果，这种抑菌作用具有积极的应用价值，这对于扩大绿原酸药源，并对其进行合理开发应用具有重要意义。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下。

1.一种以绿原酸为原料的有机复合物的制备方法，

1)有机复合物的化学名称为：(CA)·(2,2’-Hbipy)；

结构为：分子量：510.16

理化性质：淡黄色针状晶体，易溶于甲醇和乙醇；

2)制备方法步骤如下：

a.将绿原酸溶于5mL无水乙醇中，倒入50mL烧杯中搅拌，得到绿原酸溶液；

b.按照与绿原酸摩尔比为1∶1的比例，称取2,2’-联吡啶溶于10mL无水乙醇中，并将溶液缓慢的滴入步骤a得到的绿原酸溶液中，在常温条件下搅拌30分钟后，放置空气中缓慢挥发几天，得到黄色块状晶体；化合物通过IR、元素分析以及单晶x-ray确定结构为绿原酸与2,2’-联吡啶形成的1∶1的有机复合物(CA)·(2,2’-Hbipy)。

上述绿原酸与2,2’-联吡啶形成的有机复合物(CA)·(2,2’-Hbipy)是抗菌剂，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌和白色念珠菌有较好的抑菌效果，本产品应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。

2.一种以绿原酸为原料的有机复合物的制备方法，

1)有机复合物的化学名称为：(CA)·(1,10-Hphen)；

结构为：分子量：534.16

理化性质：黄色针状晶体，易溶于乙醇和甲醇；

2)制备方法步骤如下：

b.按照与绿原酸摩尔比为1∶1的比例，称1,10-邻菲罗啉溶于10mL无水乙醇中，并将溶液缓慢的滴入步骤a得到的绿原酸溶液中，在常温条件下搅拌30分钟后，放置空气中缓慢挥发几天，得到黄色块状晶体；化合物通过IR、元素分析以及单晶x-ray确定结构为1,10-邻菲罗啉形成的1∶1的有机复合物(CA)·(1,10-Hphen)。

上述绿原酸与1,10-邻菲罗啉形成的有机复合物(CA)·(1,10-Hphen)是抗菌剂，对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌有较好的抑菌效果，本产品应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行说明。

实施例1

将绿原酸(35.4mg,0.1mmol)溶于5mL无水乙醇中，倒入50mL烧杯中搅拌，将2,2’-联吡啶(15.62mg,0.1mmol)溶于10mL无水乙醇，并缓慢的滴入绿原酸乙醇溶液中，在常温搅拌30分钟后，放置空气中缓慢挥发几天，得到黄色块状晶体。经过IR、元素分析以及单晶x-ray确定结构为绿原酸与2,2’-联吡啶形成1：1的有机复合物(CA)·(2,2’-Hbipy)，产率60%。

实施例2

将绿原酸(35.4mg,0.1mmol)溶于5mL无水乙醇中，倒入50mL烧杯中搅拌，将1,10-邻菲罗啉(19.82mg,0.1mmol)溶于10mL无水乙醇，并缓慢的滴入绿原酸甲醇溶液中，在常温搅拌30分钟后，放置空气中缓慢挥发几天，得到黄色块状晶体。经过IR、元素分析以及单晶x-ray确定结构为绿原酸与1,10-邻菲罗啉形成1：1的有机复合物(CA)·(1,10-Hphen)，产率80%。

药理实验例1：(CA)·(2,2’-Hbipy)有机复合物的抑菌作用

1.材料、试剂

1.1材料与试剂

(CA)·(2,2’-Hbipy)，普通营养肉汤、胰蛋白胨大豆营养肉汤

1.2供试菌种

金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌、白色念珠菌均由广西大学动科院药理实验室提供。

2.实验方法

2.1实验样品：(CA)·(2,2’-Hbipy)有机复合物

2.2(CA)·(2,2’-Hbipy)有机复合物抑菌作用

2．2．1菌液的制备：取一接种环试验菌接种于适宜的营养肉汤中，37℃培养18h，临用前进行1：10稀释。

2．2．2待测化合物的配制：电子天平准确称取32mg或16mg化合物，用1mL二甲基亚枫（DMSO）溶解，即成待测化合物原液。

2．2．3最下抑菌浓度（MIC）的测定：取灭菌EP管10支并编号，第1管加入用营养肉汤0.9mL，其余各管均加入0.5mL，然后向第1管加入待测化合物原液0.1mL，混匀，吸出0.5mL放入第2管，依此法逐管进行稀释至第9管，弃去0.5mL，第10管不加药液作为生长对照管（用DMSO溶解的待测化合物需在生长对照管中0.1mL DMSO），最后分别向各管加50uL的稀释菌液，37℃恒温培养18h，观察细菌生长情况，对照管中必须有细菌生长，细菌不生长的最低浓度为化合物对该细菌的最小抑菌浓度（MIC）。

2．2．4结果判定标准：化合物对细菌的MIC越小，表明该化合物的抗菌活性越大，化合物对不同种类的细菌均有抗菌活性，表明该化合物抗菌谱广。

3.结果与分析

3．1最小抑菌浓度（MIC）的测定：抑菌作用如表1所示。

表1(CA)·(2,2’-Hbipy)对4种细菌的抑菌作用

Table1The antibacterial activities of Syringea Reticulata extract to four bacteria

注：“+”表示有细菌生长，“-”表示无细菌生长。

由表1可知：绿原酸与2,2’-联吡啶形成的有机复合物对4种供试菌均有较好的抑制作用，其金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌、白色念珠菌的最小抑菌浓度都为200ug/mL，对大肠杆菌的最小抑菌浓度都为100ug/mL，本发明产品可以作为抗菌剂应用于食品、医药等行业，制备具有抑菌作用的各种形式的产品。

药理实验例2：(CA)·(1,10-Hphen)有机复合物的抑菌作用

1.材料、试剂

1.1材料与试剂

(CA)·(1,10-Hphen)，普通营养肉汤、胰蛋白胨大豆营养肉汤

1.2供试菌种

金黄色葡萄球菌、沙门氏菌由广西大学动科院药理实验室提供。

2.实验方法

2.1体外抑菌试验（纸片法）操作步骤：

(1)菌悬液的制备：金黄色葡萄球菌、沙门氏菌接种到普通琼脂培养基上，37℃培养12h，取出用灭菌生理盐水将菌落洗下，按比浊法配制成菌浓度为6×108cfu/mL菌悬液。

(2)药液的配制：取20mg样品，加1mL灭菌蒸馏水，加热溶解，配成20mg/ml的药液，按倍比稀释法将药液分别配成10mg/mL、5mg/Ml、2.5mg/ml、1.25mg/mL、0.625mg/mL、0.3125mg/mL、0.7812mg/ml、0.3906mg/mL、0.1953mg/mL、0.0976mg/mL、0.0488mg/mL。

(3)方法：用无菌棉签沾取菌悬液，棉签贴管壁将多余的菌液旋转挤出，均匀地涂布琼脂平皿上，稍置片刻。用无菌小镊子取灭菌滤纸片浸入药液中使其充分浸透后取出，在药瓶边轻蘸一下，去掉多余的药液，然后将纸片对号平贴在平皿分区的中央，37℃恒温箱中培养12-18h，取出，用直尺量取抑菌圈的大小。

(4)结果判定：抑菌圈直径≥10mm的能够抑制细菌生长的最小药物浓度为该药对某细菌的MIC。其测试结果如表2所示。

表2样品(CA)·(1,10-phen)对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的体外抑菌试验结果（纸片法）

注：抑菌圈直径（Ф）以mm为单位，同一浓度，Ф越大，表明药物抗菌能力强。试验用细菌浓度为6×10⁸cfu/mL

上述表2的数据表明，样品(CA)·(1,10-Hphen)对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌均有较好的抑制作用，对金黄色葡萄球菌的MIC分别是6.25mg/mL，对沙门氏菌的MIC分别是3.125mg/mL。

结论：该发明合成了两个新的有机复合物，(CA)·(2,2’-Hbipy)和(CA)·(1,10-Hphen)。通过试管法，测试了(CA)·(2,2’-Hbipy)对金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌、白色念珠菌和大肠杆菌的抗菌作用，发现(CA)·(2,2’-Hbipy)对4种供试菌均有较好的抑制作用，对黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌、白色念珠菌的最小抑菌浓度都为200μg/mL，对大肠杆菌的最小抑菌浓度都为100μg/mL；通过纸片法，测试了样品(CA)·(1,10-Hphen)对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的抗菌作用，发现(CA)·(1,10-Hphen)对2种供试菌有较好的抑制作用，对金黄色葡萄球菌的MIC分别是6.25mg/mL，对沙门氏菌的MIC分别是3.125mg/mL。本发明的两种产品可以作为抗菌剂应用于食品、医药等行业，制备具有抑菌作用的各种形式的产品。

Claims

1.一种以绿原酸为原料的有机复合物的制备方法，其特征在于，

1)化学名称为：(CA)·(2,2’-Hbipy)；

结构为：分子量：510.16

理化性质：淡黄色针状晶体，易溶于甲醇和乙醇；

2)制备方法步骤如下：

2.一种以绿原酸为原料的有机复合物(CA)·(2,2’-Hbipy)的用途，其特征在于，绿原酸与2,2’-联吡啶形成的有机复合物(CA)·(2,2’-Hbipy)是抗菌剂，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌和白色念珠菌有较好的抑菌效果，本产品应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。

3.一种以绿原酸为原料的有机复合物的制备方法，其特征在于，

1)化学名称为：(CA)·(1,10-Hphen)；

结构为：分子量：534.16

理化性质：黄色针状晶体，易溶于乙醇和甲醇；

2)制备方法步骤如下：

4.一种以绿原酸为原料的有机复合物(CA)·(1,10-Hphen)的用途，其特征在于，绿原酸与1,10-邻菲罗啉形成的有机复合物(CA)·(1,10-Hphen)是抗菌剂，对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌有较好的抑菌效果，本产品应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。