CN102818890A

CN102818890A - 一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法

Info

Publication number: CN102818890A
Application number: CN 201110155458
Authority: CN
Inventors: 黄静芳; 徐红星
Original assignee: Suzhou Vocational Health College
Current assignee: Suzhou Vocational Health College
Priority date: 2011-06-10
Filing date: 2011-06-10
Publication date: 2012-12-12

Abstract

本发明公开了一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法,具体步骤为，首先用间接免疫荧光法分别检测系统性红斑狼疮患者的抗核抗体及双链DNA，然后用欧蒙免疫印迹法测定抗核抗体谱，最后用酶联免疫吸附试验检测系统性红斑狼疮患者的单链DNA。本发明的检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法，简化了现有的检测方法，提高了检测效率及确诊率，有助于系统性红斑狼疮的临床诊断和治疗。

Description

一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法

技术领域

本发明涉及医学领域，具体涉及一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法。

背景技术

系统性红斑狼疮是一种急骤或缓慢发病、侵犯多系统多器官的自身免疫性疾病。其主要免疫学特征是产生多种自身抗体，形成免疫复合物而致病。自身抗体的检测是系统性红斑狼疮诊断的重要指标，目前国内许多医院已经开展了自身抗体的检测。明确系统性红斑狼疮患者抗核抗体的滴度、荧光模式及其与各种自身抗体之间的相互关系，对系统性红斑狼疮的诊断、治疗的有很高的临床价值。

基于以上问题，发明一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法，已成为本技术领域内丞待解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法，解决了现有技术中系统性红斑狼疮的诊断方法比较复杂的问题。

本发明的一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法，具体步骤为：

步骤1）以Hep-2/大鼠肝细胞为基质，用间接免疫荧光法检测系统性红斑狼疮患者的抗核抗体，测定四个滴度：1:100,1:320,1:1000,1:3200；

步骤2）以短膜虫为基质，用间接免疫荧光法检测系统性红斑狼疮患者的双链DNA；

步骤3）用欧蒙免疫印迹法测定抗核抗体谱；

步骤4）用酶联免疫吸附试验检测系统性红斑狼疮患者的单链DNA。

有益效果：经检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法，化了现有的检测方法，提高了检测效率及确诊率，有助于系统性红斑狼疮的临床诊断和治疗。

具体实施方式

实施例1

以2008年至2010年苏州市立医院门诊或住院病人中的109例系统性红斑狼疮患者为检测对象，其中女性95例，男性14例，年龄14-82岁，平均年龄43岁。所有系统性红斑狼疮患者病例均符合美国风湿病协会的诊断标准。

具体检测步骤如下：

步骤3）用欧蒙免疫印迹法测定抗核抗体谱（抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗CENPB抗体、抗ANuA抗体、抗His抗体、抗Rib.P抗体）；

所有试剂均由德国欧蒙公司提供，具体操作按说明书进行。

检测结果如下：

1.抗核抗体的滴度、荧光模式检测结果

109例系统性红斑狼疮(SLE)患者中，抗核抗体(ANA)的阳性为107例，阳性率为98.2%，大于等于1：1000的抗核抗体高滴度患者有77例，阳性率达70.6%，其中43.1%的系统性红斑狼疮患者的抗核抗体滴度为1：1000；其荧光核型有颗粒型、均质型、颗粒合并均质型、颗粒合并核仁型、颗粒合并着丝点型、颗粒合并胞浆型，以颗粒型和均质型为主，分别占56.9%和33.9%。具体结果见表1。

2.系统性红斑狼疮(SLE)患者中各种自身抗体检测结果

抗核抗体谱中，抗SSA抗体的阳性率最高，为57.8%；抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗ANuA抗体、抗His抗体、抗Rib.P抗体的阳性率也较高，分别为35.8%、32.1%、40.4%、37.6%、32.1%；抗Scl-70抗体、抗CENPB抗体的阳性率较低。抗ds-DNA抗体和抗ss-DNA抗体也有比较高的阳性率，达33.9%、54.1%。具体结果见表2。

3.系统性红斑狼疮（SLE）患者自身抗体在各种荧光核型中的分布

各种自身抗体中，抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗ss-DNA抗体，其荧光模式主要表现为颗粒型，分别占69.2%、74.3%、61.9%、63.0%、59.3%；抗ANuA抗体、抗His抗体、抗Rib.P抗体、抗ds-DNA抗体，其荧光模式表现为颗粒型或均质型各一半；抗Scl-70抗体主要为均质型、抗CENPB抗体为着丝点型。具体结果见表3。

由此得出如下结论：

抗核抗体属非特异指标，可在许多疾病出现，但其滴度可作为系统性红斑狼疮患者活动性的指标之一。本109例系统性红斑狼疮患者中，抗核抗体（ANA）的阳性率为98.2%，大于等于1：1000的抗核抗体高滴度患者的阳性率达70.6%，其中43.1%的系统性红斑狼疮患者患者的抗核抗体滴度为1：1000。说明受检患者多数为初发病例或活动期患者，随着病情的缓解，抗核抗体滴度随之下降。所以，定期检查抗核抗体滴度有助于病情的监控。抗核抗体靶抗原检测由传统的细胞核扩展到现在的整个细胞，包括细胞核、细胞浆等。本检测结果显示了六种荧光模式，包括颗粒型、均质型、颗粒合并均质型、颗粒合并核仁型、颗粒合并着丝点型、颗粒合并胞浆型，以常见的颗粒型和均质型为主。

系统性红斑狼疮免疫学的显著特点为出现各种自身抗体。本方法共检测出十一种自身抗体，分别为抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗ANuA抗体、抗His抗体、抗Rib.P抗体、抗Scl-70抗体、抗CENPB抗体、抗ds-DNA抗体和抗ss-DNA抗体。其中抗SSA抗体的阳性率最高，为57.8%；其次，抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗ANuA抗体、抗His抗体、抗Rib.P抗体的阳性率也较高，抗Scl-70抗体、抗CENPB抗体的阳性率较低。抗ds-DNA抗体和抗ss-DNA抗体也有比较高的阳性率。各种自身抗体中，抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗ss-DNA抗体，其荧光模式主要表现为颗粒型；抗ANuA抗体、抗His抗体、抗Rib.P抗体、抗ds-DNA抗体，其荧光模式表现为颗粒型或均质型各一半；抗Scl-70抗体主要为均质型、抗CENPB抗体为着丝点型。故根据荧光模式可初步判断相应抗体的性质范围，但应注意一种抗体可出现不同的荧光模式，不同的抗体也可出现相同的荧光模式。

系统性红斑狼疮的起始和发病机制尚不清楚，其诊断较为复杂。通过检测抗核抗体荧光模式、抗核抗体的滴度及各种自身抗体的检测，有助于系统性红斑狼疮的临床诊断和治疗。

上述实施例只是为了说明本发明的技术构思及特点，其目的是在于让本领域内的普通技术人员能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡是根据本发明内容的实质所作出的等效的变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims

1. 一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法，其特征在于，具体步骤为：

步骤3）用欧蒙免疫印迹法测定抗核抗体谱；

2.根据权利要求1所述的检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法，其特征在于，所述步骤3）中，抗核抗体谱包括抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗CENPB抗体、抗ANuA抗体、抗His抗体和抗Rib.P抗体。