CN102812116A - 包括用于保持琼脂培养基的工具的皮式培养皿 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于容纳微生物的琼脂培养基的皮式培养皿，所述皮式培养皿包括容纳所述培养基的基部和能被置于所述基部上的盖。所述基部和所述盖基本上是圆形的，并且所述皮式培养皿的特征在于所述基部包括至少一种用于防止培养基收缩的工具，所述工具从所述基部的外周突出且被置于所述基部的外周之上。

Description

包括用于保持琼脂培养基的工具的皮式培养皿

本发明的技术领域属于体外诊断领域，更准确地说是微生物诊断领域。本发明特别涉及具有用于保持琼脂培养基的工具的皮式培养皿。

皮式培养皿在微生物学领域的使用，已知有数十年。实际上，这些培养皿用作培养基的容器，用于允许微生物的生长和检测。皮式培养皿通常是圆形的，并且由容纳培养基的底部和盖组成，所述盖被放置于底部上，以便避免培养基被存在于外部环境中的微生物污染，同时允许空气通过，这对于许多微生物的生长是必须的。皮式培养皿有两种主要的形式：

标准皮式培养皿，标准ISO 24988-2008对其做了限定，和

称为“接触式”皮式培养皿的皮式培养皿，其使得进行表面取样成为可能，并且为了取样的目的，其所具有的特定形式使得琼脂培养基伸出底部。

不管培养皿的类型如何，其作为检测和鉴定微生物的工具，在培养基的质量和性能方面发挥关键作用。确实，培养皿特别是必须具有优选透明且完美的表面，以便避免使读取失真。

尽管皮式培养皿的设计质量很高，但是在使用某些琼脂培养基时，一旦将其倒入培养皿并且凝固时，可能发生培养基的收缩。这通常在一定储存时间后发生。这一问题对微生物学家而言是熟知的，且与培养基的组成直接相关。实际上，存在于培养基中的某些化合物(如表面活性剂或脂质试剂)实质上降低所述培养基粘附于其被倒入的培养皿的底部的能力。例如，使用Ottaviani Agosti培养基时，就是这种情况，Ottaviani Agosti培养基用于根据NF EN ISO 11290标准寻找单核增生性李斯特菌(Listeriamonocytogenes)并对其进行计数。此外，皮式培养皿的形状通常是圆形的，其并不利于将琼脂保持在合适的位置。接下来发生的是，琼脂培养基首先与竖直壁分离。接着发生琼脂培养基向皮式培养皿的中央径向收缩的现象。当处理后一情况时，所述培养基完全终止与皮式培养皿分离，风险就是离开所述培养皿。

因此本发明的目的是提供能限制容纳于皮式培养皿中的琼脂培养基的收缩作用的圆形皮式培养皿。

本发明的另一方面因此是提供具有用于防止琼脂培养基收缩的工具的皮式培养皿，所述工具并不妨碍皮式培养皿的读取。

这些以及其他目的是由本发明实现的，其首先涉及用来容纳培养微生物的皮式培养皿，包括容纳所述培养基的基部能置于所述基部的盖，所述基部和所述盖基本上都是圆形的，所述皮式培养皿的特征在于，所述基部包括至少一个用于防止培养基收缩的工具，所述工具从所述基部的外周突出并且被置于所述基部的外周上。

根据本发明皮式培养皿的具体实施方案，用于防止培养基收缩的工具由连续的肋状凸起(nervure)构成。

根据可选的实施方案，用于防止培养基收缩的工具由至少一个非连续的肋状凸起构成。

有利的是，本发明的皮式培养皿包括用于将盖锁定于所述基部的工具。

根据优选的实施方案，锁定工具包括至少一个径向紧固片(patte radiale)和至少一个径向护套(gaine radiale)，它们分别置于盖或基部上，并且协作锁定皮式培养皿。

这类锁定工具描述于例如US patent 6,969,607中。

有利的是，本发明的皮式培养皿包括2-12个非连续的肋状凸起。

特别是，用于防止培养基收缩的工具的高度为0.15-5毫米。

所述用来避免培养基收缩的工具距基部的竖直边缘0.5-15毫米。

本发明的另一目的涉及制备琼脂培养基的方法，包括以下步骤：

-安排本发明的皮式培养皿，

-将熔化的琼脂培养基分配于所述皮式培养皿内，以便使其覆盖基部的整个底部，

-使琼脂培养基冷却，从而使用于防止收缩的工具被锚定于琼脂培养基中。

通过参考附图，阅读下面详述的说明，会更好地理解本发明，在附图中：

图1表示根据第一实施方案的皮式培养皿的基部的部分透视图。

图2表示根据第二实施方案的皮式培养皿的基部的部分透视图。

图3表示根据第一实施方案的皮式培养皿的基部的横截面视图。

图4表示根据第二实施方案的皮式培养皿的基部的横截面视图。

图5表示本发明皮式培养皿的横截面视图，其含有琼脂培养基。

参考附图，随后的限制，在附图中：

图6表示根据第三方面的皮式培养皿的基部的部分透视图。

图7表示根据第四方面的皮式培养皿的基部的部分透视图。

本发明的皮式培养皿通常具有基部和盖。在图1中，可以看到根据第一实施方案的皮式培养皿的基部10。该基部10由基本上平且圆的底部12和圆形竖直壁14构成。基部10与未显示的皮式培养皿的盖一样由通常用于该类型产品的塑料材料如聚苯乙烯制成。根据第一实施方案，基部10的底部12还包括连续的圆形肋状凸起16，连续的肋状凸起16突出于圆形竖直壁14并沿圆形竖直壁14延伸。该肋状凸起16的作用是保持琼脂培养基成层状排列于皮式培养皿中。肋状凸起16因此充当培养基30的锚定点。这清晰地显示于图5中。

在图13中可以详细地看出，圆形肋状凸起16具有基本上为三角形的横截面。特别是，应注意到，形成肋状凸起斜面的三角形的边的斜度不同。实际上，总而言之，斜面161具有面向圆形竖直壁14的陡坡是可取的。如上文所解释的，肋状凸起16充当培养基的锚定点的作用。实际上，如果另外其可以防止培养基离开底部，则这种锚定担负防止所述培养基收缩的任务。收缩通常以降低培养基层的直径来表现自身，从而使得培养基层的边缘不再与圆形竖直壁14的内面接触。斜面161的陡坡增强肋状凸起16抵抗收缩的能力。在另一具体实施方案中，实际上可以设想使斜面161倒转，从而增加锚定现象。

肋状凸起16的高度必须比培养基层的深度低得多。这是必须的，因为与肋状凸起16成一直线的培养基的非常精致的层会在此位置产生培养基的弱区(zone de faiblesse)，在所述弱区，后者在非常强和/或重复机械压力的情况下会破裂。此外，肋状凸起不可以妨碍培养基的接种。上端接近培养基的表面的肋状凸起，在应用接种工具的过程中，在不计算上文所解释的破裂风险的情况下，会表现出诸如接种环的缺点。过高的肋状凸起的所有这些缺点应当用高度太低从而不再充当其锚定点的作用的肋状凸起的缺点来平衡。

还更可取的是，肋状凸起16的高度优选为0.15-5毫米(mm)。应当理解到，根据肋状凸起横截面的形状来选择高度值。换言之，当期望具有高度较低的肋状凸起时，这一高度的肋状凸起的保持能力的降低，可以用改善保持的肋状凸起形状来补充，如具有倒转的斜面161的肋状凸起。

图2和4现实根据第二实施方案的皮式培养皿的基部20。该基部20与基部10一样包括基本上平且圆形的底部22以及圆形竖直壁24。相比之下，其不同于图1和3所述的基部10，这是由于其不包括一个单一的连续肋状凸起，而是几个圆弧形的非连续肋状凸起26，沿着圆形竖直壁14延伸。这些肋状凸起彼此被(恒定或不恒定的)10-170°的角隔开。必须指出，两两考虑的肋状凸起26之间的距离是可变的。就肋状凸起的长度而言，其与10-170°的角一致。因此，对于直径为90mm的皮式培养皿而言，该距离为7mm至13cm。同样，一个皮式培养皿内非连续肋状凸起的长度在肋状凸起间可以改变。

从图4可以看出，这些非连续肋状凸起26具有横截面，其在形状上基本上与肋状凸起16的形状形同，即基本上为三角形。从图2可以看出，非连续肋状凸起26具有箭头状末端(extrémités  en pointe de flèches)。实际上，肋状凸起26的高度渐进降低，直到肋状凸起消失。换而言之，肋状凸起26的三个至高点在这些肋状凸起的末端的每一个处会聚。然而，应当指出，所述末端的形式仅构成一具体实施方案，并且设想具有不同形状的肋状凸起是非常可能的。

如图2和4所示基部包括总计6个肋状凸起。然而，可以设想，具有包括更少或更多非连续肋状凸起的基部。实际上，基部可以包括例如2个非连续肋状凸起，在所述情况下，所述肋状凸起会具有更大的实质长度。基部可以包括例如10个肋状凸起，在这种情况下，后一种情况的这些肋状凸起比图2和4所示实施方案的肋状凸起具有较小的实长。无论如何，重要的是，全部非连续肋状凸起26的总长至少等于甚至大于放置所述非连续肋状凸起26的圆的周长的一半。

肋状凸起16或26分别距圆形竖直壁14或24的距离也是需要考虑的重要因素。实际上，肋状凸起的放置遵循几项要求：

-首先，肋状凸起放置不应使得它们妨碍接种的皮式培养皿的可视分析。实际上，微生物的鉴定经历生长于琼脂培养基上的菌落的可视分析，就分析的方位而言，菌落会向微生物学家提供重要的数据。因此肋状凸起的存在首先不应对这类可视分析构成妨碍；

-其次，肋状凸起的放置必须使得它们能有效防止琼脂收缩。为此，它们比应距圆形竖直壁太远，在这种情况下它们的作用有限，也不能太接近圆形竖直壁，在这种情况下，培养基会使得培养基脆弱，因为肋状凸起和圆形竖直壁之间的材料太小，从而使得琼脂培养基有断裂风险。

另外，有利的是，肋状凸起与圆形竖直壁之间的距离必须有利地位0.5-15mm。

图6表示根据第三实施方案的皮式培养皿的基部30。该基部30基本上平且圆的底部32以及圆形竖直壁34。相比之下，其与图1和3以及图2和4分别所示的前两个实施方案的不同之处在于，它们不包括底部32上的肋状凸起，而是包括圆柱形突起(stud)。这些突起彼此被10-170°的角隔开。必须指出，两两考虑时，突起36之间的距离，也是可变的。

对于其部分，图7以皮式培养皿的基部40的形式表示第四实施方案。该基部40包括基本上平且圆的底部42以及圆形竖直壁44。肋状凸起46以圆弧形排列于底部42上。这些肋状凸起46基本上是径向定向的。这些突起彼此以(恒定或非恒定)10-170°的角隔开。必须指出，两两考虑时，突起36之间的距离是可变的。肋状凸起的数量和间隔根据该实施方案的变型而改变。作为实例，设想排列4-20之间的许多肋状凸起是可能的。

根据未显示的另一具体实施方案，皮式培养皿的基部包括几个系列的同轴肋状凸起。这些系列的肋状凸起，独立于彼此，可以是连续或非连续的肋状凸起。因此，设想具有几个系列的连续肋状凸起、几组非连续肋状凸起或连续肋状凸起与非连续肋状凸起的组合，是可能的。在皮式培养皿的基部包括几个系列的非连续肋状凸起的情况下，在一系列内或在不同的系列间，这些非连续肋状凸起的长度可以相同或不同。此外，非连续肋状凸起可以径向排列或相对比彼此偏移。

根据最后一实施方案，肋状凸起的一般形式可变化。实际上，附图所述实施方案的肋状凸起对于连续的肋状凸起一般具有圆形形状，或者对于非连续肋状凸起具有圆弧形。然而，具有直线节段形式的肋状凸起是可能的。

设想具有沿着圆形竖直壁的正弦曲线的一般形状的连续肋状凸起是可能的。

实施例

测量包括用于防止收缩的工具的皮式培养皿和常规皮式培养皿中琼脂培养基的收缩

用两种类型的皮式培养皿进行琼脂培养基收缩的测量：常规皮式培养皿和包括可能避琼脂培养基收缩的工具的免皮式培养皿。所述工具由一系列6个非连续肋状凸起构成，所述肋状凸起径向排列。

对于所有皮式培养皿而言，制备琼脂培养基并将其分布于培养皿中的方案是相同的。对于每一类型的培养皿，测定了两种不同的孵育方案。

测定1:

琼脂培养基的产生和向皮式培养皿中分配：

所用的培养基是bioMérieuxOttaviani Agosti(Ref.43641)培养基。

将16.5kg干燥形式的该培养基在水中稀释，以获得228升(L)培养基。由此产生720常规l皮式培养皿和720个具有肋状凸起的培养皿。

皮式培养皿的储存和孵育条件：

将按上文所述所产生的常规皮式培养皿和具有肋状凸起的皮式培养皿孵育于下列条件下：

○实际储存条件：10-15°C，4天(后勤储存室)，接着2-8°C.

○常规孵育条件：33-37°C，2天(培养箱)

测定2:

琼脂培养基的产生和向皮式培养皿中的分布：

制备相同数量的bioMérieux

Ottaviani Agosti(Ref.43641)培养基。由此产生620个常规皮式培养皿和620个具有肋状凸起的培养皿。

皮式培养皿的储存和孵育条件：

将按上文所述所产生的常规皮式培养皿和具有肋状凸起的皮式培养皿孵育于下列条件下：

○实际储存条件：10-15°C，5天(后勤储存室)

○常规孵育条件：33-37°C，2天(培养箱)

对于在上述两个测定中所产生的每一个皮式培养皿，在储存/孵育后进行培养皿中琼脂培养基收缩的可视分析。

下文的表1列出了所有结果：

表1

上文所述测定非常清楚地表明，不管储存或孵育条件如何，存在于皮式培养皿中的肋状凸起极大地降低甚至消除培养皿中所容纳的琼脂培养基的收缩现象。

Claims (11)

1.用于容纳微生物的琼脂培养基的皮式培养皿，包含容纳所述培养基的基部和能被置于所述基部上的盖，所述基部和所述盖基本上是圆形的，所述皮式培养皿的特征在于，所述基部包括至少一个用于防止所述培养基收缩的工具，所述工具从所述基部的外周突出且被置于所述外周之上。

2.如权利要求1所述的皮式培养皿，其中用于防止所述培养基收缩的所述工具由至少一个连续的肋状凸起构成。

3.如权利要求2所述的皮式培养皿，其中所述连续的肋状凸起是圆形的或正弦形的。

4.如权利要求1所述的皮式培养皿，其中用于防止所述培养基收缩的所述工具由至少一个非连续的肋状凸起构成。

5.如前述权利要求之一所述的皮式培养皿，其还包括将所述盖锁定于所述基部上的工具。

6.如前述权利要求之一所述的皮式培养皿，其中所述锁定工具包括至少一个径向紧固片和至少一个径向护套，它们分别被置于所述盖或所述基部上，并协作锁定所述皮式培养皿。

7.如权利要求4-6中任一项所述的皮式培养皿，包括2-12个非连续的肋状凸起。

8.如权利要求2-7中任一项所述的皮式培养皿，包括数个系列的同轴的，连续和/或非连续的肋状凸起。

9.如前述权利要求之一所述的皮式培养皿，其中用于防止所述培养基收缩的所述工具具有0.15-5mm的高度。

10.如前述权利要求之一所述的皮式培养皿，其中用于防止所述培养基收缩的工具位于所述基部的圆形竖直边缘0.5-15毫米的距离。

11.制备琼脂培养基的方法，包括如下步骤：

-安排权利要求1-10任一项所述的皮式培养皿，

-将熔化的琼脂培养基分配于所述皮式培养皿内，从而使其覆盖所述基部的整个底部，

-使所述琼脂培养基冷却，从而使所述用于防止收缩的工具被锚定于所述琼脂培养基中。

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