CN102807605B - Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe、其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了具有通式I(式中n=6、8、10、12、14和16)的6种靶向性抗血栓化合物,还提供了它们的制备方法,通过对它们在抗血小板聚集活性、抗血栓活性、清除NO自由基活性以及自主装性能中的研究,表明这6种新型化合物不但具有优秀的抗血栓作用,而且具有清除NO自由基的活性。本发明中的化合物在抗血栓的同时有清除NO的作用优势,因此通式I代表的6种化合物在临床中具有很好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种人工合成的化合物及其制备方法,特别涉及通式I代表的6种化合物,Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe(式中n为6、8、10、12、14或16),还涉及它们的制备方法,进一步涉及它们抗血小板聚集活性、抗血栓活性、清除NO自由基活性以及自主装性能中的作用及应用,本发明属于生物医药领域。
背景技术
血栓性疾病是危害人民健康的重大疾病之一,含RGD序列的化合物可与活化的血小板表面GPIIb/IIIa受体结合而具有靶向性和抗血栓作用。NO是重要的信息和效应分子,过多的NO会和超氧阴离子发生反应,生成具有反应活性的过氧亚硝基,进而引发细胞毒性、神经损伤和缺血再灌注损伤等疾病。Nitronyl nitroxide是一类稳定的咪唑类氮氧自由基,可以迅速清除体内的一氧化氮,为溶/抗栓提供了很有前途的药用分子建筑模块。按照一般的认识,含多肽的两亲性分子,例如脂肪醇链修饰的多肽,在适当的条件下通过分子间非共价键相互作用可发生自组装,形成纳米结构。借助纳米结构可改善多肽在体内的输送、延缓多肽在体内的降解速率和提高多肽的体内活性。根据这些认识,发明人提出了本发明。
发明内容
本发明所要解决的第一个技术问题是提供具有通式I的6种化合物(用4a-f表示):
通式I
式中,n=6、8、10、12、14或16。
化合物4a中n=6,化合物4b中n=8,化合物4c中n=10,化合物4d中n=12,化合物4e中n=14,化合物4f中n=16。
本发明所要解决的第二个技术问题是提供具有通式I的化合物的制备方法,该方法包括:
1)在溴素(Br2)存在下2-硝基丙烷在6N NaOH水溶液中缩合为3-二甲基-2,3-二硝基丁烷;
2)在氯化铵(NH4Cl)及锌粉(Zn)存在下2,3-二甲基-2,3-二硝基丁烷在含水的乙醇溶液中还原为2,3-二甲基-2,3-二羟胺基丁烷;
3)在甲醇中2,3-二甲基-2,3-二羟胺基丁烷与对硝基苯甲醛缩合为1,3-二羟基-2-(4’-羟基苯基)苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑烷;
4)在二氧化铅(PbO2)存在下,3-二羟基-2-(4’-羟基苯基)-4,4,5,5-四甲基咪唑烷在甲醇中氧化为2-(4’-羟基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧咪唑啉;
5)在氢化钠(NaH)存在下2-(4’-羟基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧咪唑啉在无水THF中与溴代乙酸乙酯缩合为1,3-二氧基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酸乙酯;
6)在甲醇中1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酸乙酯皂化为1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酸;
7)在DCC和HOBt存在下1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酸在无水THF中与HCl·H-Lys(Boc)-OCH3缩合为Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-Boc-Lys-OCH3;
8)在含氯化氢的乙酸乙酯中Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-Boc-Lys-OCH3脱除Boc生成Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3;
9)在DCC和HOBt存在下Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰 基)-Lys-OCH3在无水THF中与饱和脂肪酸缩合为Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-OCH3;
10)在甲醇中将Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-OCH3皂化为Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys;
11)在DCC和HOBt存在下Boc-Asp(OBzl)在无水THF中与Phe-OBzl缩合为Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl;
12)在含氯化氢的乙酸乙酯中Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除Boc生成Asp(OBzl)-Phe-OBzl;
13)在DCC和HOBt存在下Boc-Arg(NO2)-Gly在无水THF中与Asp(OBzl)-Phe-OBzl缩合为Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl;
14)在含氯化氢的乙酸乙酯中Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除Boc生成Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl;
15)在DCC和HOBt存在下Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys在无水THF中Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl缩合为Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl;
16)在含三氟甲磺酸的三氟醋酸溶液中Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除OBzl和NO2生成Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe。
本发明所要解决的第三个技术问题是通过研究它们在抗血小板聚集活性、抗血栓活性、清除NO自由基活性以及自主装性能中的作用,表明了这6种新型化合物不但具有优秀的抗血栓作用,而且具有清除NO自由基的活性。
本发明所要解决的第四个技术问题是提供本发明的化合物在制备治疗药物中的用途:本发明的化合物用途之一是在制备抗血栓药物中的应用;本发明的化合物用途之二是在制备清除NO自由基药物中的应用;本发明的化合物用途之三是在制备抗血栓和清除NO自由基双重功能药物中的应用。
本发明中的化合物在抗血栓的同时有清除NO的作用优势,因此通式I代表的6种化合物在临床中具有很好的应用前景。
附图说明
图1为本发明化合物的合成路线;
i)DCC,HOBt,NMM;ii)NaOH水溶液;iii)氯化氢/乙酸乙酯溶液(4N);iv)CF3COOH,CF3SO3H;v)Br2,NaOH水溶液;vi)Zn,NH4Cl;vii)CH3OH;viii)PbO2;ix)NaH;
化合物1a-4a中n=6,化合物1b-4b中n=8,化合物1c-4c中n=10,化合物1d-4d中n=12,化合物1e-4e中n=14,化合物1f-4f中n=16;
图2为化合物4a在水溶液中形成的纳米球的代表性透射电镜照片。
缩略术语
THF 四氢呋喃
HOBt N-羟基苯并三氮唑
DCC 二环己基羰二亚胺
DCU 二环己基脲
NMM N-甲基吗啉
TLC 薄层色谱
Boc 叔丁氧羰基
具体实施方式
为了进一步阐述本发明,下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的,它们仅用来对本发明进行具体描述,不应当理解为对本发明的限制。
实施例1 制备2,3-二甲基-2,3-二硝基丁烷
将69g(0.78mol)2-硝基丙烷加入130ml 6N NaOH水溶液中,在冰水浴搅拌条件下,滴加20ml(0.38mol)Br2,1hr内滴加完,然后加入240ml乙醇,90℃搅拌回流3hrs,出现片状不溶物,将反应液乘热倒入800ml冰水中,抽滤,得白色片状结晶55g(81%),即为本实施例标题所述的化合物。ESI-MS(m/e):177[M+H]+.
实施例2 制备2,3-二甲基-2,3-二羟胺基丁烷
将7g(40mmol)2,3-二甲基-2,3-二硝基丁烷和4g NH4Cl混悬于80ml 50%的乙醇水溶液中,冰浴下搅拌,在3hr内加入16g锌粉。锌粉加完后,撤去冰浴,继续室温搅拌反应3hr,然后将反应液抽滤。滤饼用50%的乙醇水溶液反复洗涤,合 并滤液及洗涤液,用浓盐酸调节pH=2,减压蒸至泥浆状。加入适量碳酸钾,拌匀后,使用索氏提取器,氯仿为提取剂,抽提6hrs后,减压蒸提取液至少量,加入石油醚后析出白色结晶2.60g(44%),即为本实施例标题所述的化合物。ESI-MS(m/e):149.1[M+H]+.
实施例3 制备1,3-二羟基-2-(4’-羟基苯基)苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑烷
将1.47g(10mmol)对硝基苯甲醛与1.48g(10mmol)2,3-二甲基-2,3-二羟胺基丁烷溶于10ml甲醇中,室温搅拌16hrs后,TLC显示原料点消失,滤出白色固体2g(85%)直接用于下一步反应。样品经TLC纯化后得到本实施例标题所述的化合物。ESI-MS(m/e):253.1[M+H]+.
实施例4 制备2-(4’-羟基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧咪唑啉
将475mg(2mmol)1,3-二羟基-2-(4’-羟基苯基)-4,4,5,5-四甲基咪唑烷溶解于50ml甲醇中,加入2.5g PbO2,室温搅拌30min后,TLC显示原料点消失。抽滤除去固体,滤液室温下减压蒸干,柱层析分离(氯仿为洗脱剂),得蓝黑色晶体370mg(80%),即为本实施例标题所述的化合物。ESI-MS(m/e):250.1[M+H]+。
实施例5 制备1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酸乙酯
400mg(1.6mmol)2-(4’-羟基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧基咪唑啉溶解于30ml干燥四氢呋喃中,冰浴下加入NaH粉末,2ml溴代乙酸乙酯,60℃搅拌回流1h后,TLC显示原料点消失。抽滤除去固体,滤液室温下减压蒸干,柱层析分离(氯仿为洗脱剂),得蓝色晶体470mg(87%),即为本实施例标题所述的化合物。ESI-MS(m/e):336.2[M+H]+。
实施例6 制备1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酸
将400mg(1mmol)1,3-二氧基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧基乙酸乙酯溶解于2ml甲醇中,冰浴下向反应液中滴加2N氢氧化钠水溶液,检测pH值至12,冰浴搅拌0.5h后,TLC显示原料点消失,向反应液中滴加饱和硫酸氢钾水溶液至PH为7,反应液室温下减压蒸除大部分溶剂,继续用饱和硫酸氢钾水溶液调PH至2,乙酸乙酯萃取,合并乙酸乙酯层,无水硫酸钠干燥后,TLC检测为单一点,过 滤,减压蒸干,得蓝色晶状物320mg(87%),即为本实施例标题所述的化合物。ESI-MS(m/e):308.1[M+H]+。
实施例7 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-Boc-Lys-OCH3
将550mg(1.79mmol)1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酸溶解于20ml干燥THF溶液中,冰水浴下加入242mg(1.79mmol)N-羟基苯并三氮唑(HOBt)后,向上述混合液中加入403mg(1.49mmol)二环己基羰二亚胺(DCC)。得到反应液(I),搅拌30min,待用。将424mg(1.63mmol)HCl·H-Lys(Boc)-OCH3溶解于20ml无水THF中,得到反应液(II)。冰浴下把反应液(II)滴加到反应液(I)中,加入1-2滴NMM调pH至8-9,先冰浴下搅拌1小时,再室温搅拌12小时,TLC显示HCl·Lys(Boc)-OCH3已经消失,开始后处理。过滤除去DCU,滤液室温下减压蒸干,加入60ml EtOAc进行超声溶解,再次过滤除去DCU后,滤液依次使用5%NaHCO3萃洗三次,饱和NaCl萃洗三次,5%KHSO4萃洗三次,饱和NaCl萃洗三次,5%NaHCO3萃洗三次,饱和NaCl萃洗三次。将乙酸乙酯层用无水Na2SO4干燥过夜。过滤除去Na2SO4,旋干除去溶剂,经柱层析分离纯化,得到纯品标题化合物,蓝色晶体400mg,,即为本实施例标题所述的化合物,产率为45%。ESI-MS(m/e):550[M+H]+。
实施例8 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3
将500mg(0.91mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-Boc-Lys-OCH3在冰浴条件下溶于10ml 4N氯化氢-乙酸乙酯溶液中,立即放上装有棉花及CaCl2的干燥管。冰浴搅拌反应0.5h后,反应液变为紫红色浑浊液,点板监测原料Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-Boc-Lys-OCH3消失后,开始后处理。温水浴条件下,抽干溶剂EtOAc,得到紫红色粉末。再用少量EtOAc两次,均抽干。再加入乙醚3次,每次均抽干乙醚,得到标题化合物,为紫红色固体粉末396mg,,即为本实施例标题所述的化合物,产率97%。ESI-MS(m/e):450[M+H]+。
实施例9 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-辛酰基-Lys-OCH3(1a)
将155mg(1.08mmol)CH3(CH2)6COOH溶解于15ml干燥THF溶液中,冰水浴下加入133mg HOBt(0.98mmol)后,向上述混合液中滴加入10ml DCC(221mg,1.08mmol)的干燥THF溶液,得到反应液(I),搅拌30min,待用。将400mg(0.89mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3溶解于20ml无水THF中,得到反应液(II)。冰浴下把反应液(II)滴加到反应液(I)中,加入1-2滴NMM调pH至8-9,先冰浴下搅拌1小时,再室温搅拌12小时,TLC显示Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3已经消失,开始后处理。过滤除去DCU,滤液室温下减压蒸干,加入40mlEtOAc进行超声溶解,再次过滤除去DCU后,滤液依次使用5%NaHCO3萃洗三次,饱和NaCl萃洗三次,5%KHSO4萃洗三次,饱和NaCl萃洗三次,5%NaHCO3萃洗三次,饱和NaCl萃洗三次。将乙酸乙酯层用无水Na2SO4干燥过夜。过滤除去Na2SO4,旋干除去溶剂,经柱层析分离纯化,得到纯品本实施例标题所述的化合物,蓝色晶体240mg,产率为47%。ESI-MS(m/e):576[M+H]+。
实施例10 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-癸酰基-Lys-OCH3(1b)
按照实施例9的方法由186mg(1.08mmol)CH3(CH2)8COOH和400mg(0.89mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3制得241mg(45%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色晶体。ESI-MS(m/e):604[M+H]+。
实施例11 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十二酰基-Lys-OCH3(1c)
按照实施例9的方法由216mg(1.08mmol)CH3(CH2)10COOH和400mg
(0.89mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3制得252mg(45%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色晶体。ESI-MS(m/e):632[M+H]+。
实施例12 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十四酰基-Lys-OCH3(1d)
按照实施例9的方法由246mg(1.08mmol)CH3(CH2)12COOH和400mg
(0.89mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3制得270mg(46%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色晶体。ESI-MS(m/e):660[M+H]+。
实施例13 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十六酰基-Lys-OCH3(1e)
按照实施例9的方法由276mg(1.08mmol)CH3(CH2)14COOH和400mg(0.89mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3制得257mg(42%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色晶体。ESI-MS(m/e):688[M+H]+。
实施例14 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十八酰基-Lys-OCH3(1f)
按照实施例9的方法由306mg(1.08mmol)CH3(CH2)16COOH和400mg(0.89mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3制得254mg(40%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色晶体。ESI-MS(m/e):716[M+H]+。
实施例15 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-辛酰基-Lys(2a)
将500mg(0.87mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-辛酰基-Lys-OCH3溶解于10ml甲醇中,冰浴搅拌下,加入NaOH(2N)将反应液的pH值调至14,冰浴搅拌反应1小时,点板,TLC显示原料Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-辛酰基-Lys-OCH3消失,开始后处理。使用饱和KHSO4将反应液pH调至7,旋干溶剂甲醇和水,向残余物中加入10ml蒸馏水,使用饱和KHSO4将其pH调至2,使用乙酸乙酯萃取,每次20ml,萃取三次。将乙酸乙酯层合并,使用饱和NaCl萃洗三次,将乙酸乙酯层使用无水Na2SO4干燥过夜。过滤除去Na2SO4,旋干除去溶剂,得到本实施例标题所述的化合物,蓝色油状物478mg,产率为98%。ESI-MS(m/e):[M+H]+。
实施例16 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-癸酰基-Lys(2b)
按照实施例15的方法,Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-癸酰基-Lys-OCH3524mg(0.87mmol)皂化得508mg(99%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色油状物。ESI-MS(m/e):590[M+H]+。
实施例17 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十二酰基-Lys(2c)
按照实施例15的方法,Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十二酰基-Lys-OCH3549mg(0.87mmol)皂化得526mg(98%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色油状物。ESI-MS(m/e):618[M+H]+。
实施例18 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十四酰基-Lys(2d)
按照实施例15的方法,Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十四酰基-Lys-OCH3573mg(0.87mmol)皂化得550mg(98%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色油状物。ESI-MS(m/e):646[M+H]+。
实施例19 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十六酰基-Lys(2e)
按照实施例15的方法,Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十六酰基-Lys-OCH3597mg(0.87mmol)皂化得568mg(97%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色油状物。ESI-MS(m/e):674[M+H]+。
实施例20 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十八酰基-Lys(2f)
按照实施例15的方法,Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十八酰基-Lys-OCH3622mg(0.87mmol)皂化得562mg(98%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色油状物。ESI-MS(m/e):702[M+H]+。
实施例21 制备Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl
按照实施例9的方法,由1.600g(5.0mmol)Boc-Arg(NO2)-OH和2.026g(6.0mmol)TosH·H-Gly-OBzl制得2.24g(96%)本实施例标题所述的化合物,为淡黄色油状体。ESI-MS(m/e):467[M+H]+。
实施例22 制备Boc-Arg(NO2)-Gly
按照实施例15的方法,Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 2.24g(4.8mmol)皂化得1.713g(95%)本实施例标题所述的化合物,为淡黄色油状物。ESI-MS(m/e):375[M-H]-。
实施例23 制备Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl
按照实施例9的方法,由1.620g(5.0mmol)Boc-Asp(OBzl)-OH和2.568g(6.0mmol)TosH·H-Phe-OBzl制得2.548g(91%)本实施例标题所述的化合物,为淡黄色油状物。ESI-MS(m/e):561[M+H]+。
实施例24 制备Asp(OBzl)-Phe-OBzl
将2.548g(4.6mmol)Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl溶于25ml 4N氯化氢-乙酸乙酯溶液中并室温搅拌2小时,TLC(氯仿/甲醇,30∶1)显示Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl消失。减压浓缩除去乙酸乙酯,残留物反复加少量乙醚进行减压浓缩以除去氯化氢。最后加少量乙醚将残留物研磨成1.904mg(92%),即为本实施例标题所述的化合物,为黄色油状物。ESI-MS(m/e):413[M+H]+。
实施例25 制备Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl
按照实施例9的方法,由1.715g(4.56mmol)Boc-Arg(NO2)-Gly-OH和1.909g(4.14mmol)HCl·H-Asp(OBzl)-Phe-OBzl反应,经柱层析纯化,制得2.032g(60%)本实施例标题所述的化合物,为无色固体。ESI-MS(m/e):819[M+H]+。
实施例26 制备Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl
按照实施例24的方法,1.963g(2.4mmol)Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl制得1.62g(94%)本实施例标题所述的化 合物,为无色固体。ESI-MS(m/e):719[M+H]+。
实施例27 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-辛酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl(3a)
将420mg(0.75mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-辛酰基-Lys溶解于20ml干燥THF溶液中,冰水浴下加入112mg(0.83mmol)HOBt后,向上述混合液中滴加入10ml DCC(185mg,0.90mmol)的干燥THF溶液,得到反应液(I),搅拌30min,待用。将503mg(0.70mmol)Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl溶解于20ml无水THF中,得到反应液(II)。冰浴下把反应液(II)滴加到反应液(I)中,加入3-4滴NMM调pH至8-9,先冰浴下搅拌1小时,再室温搅拌12小时,TLC显示Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl已经消失,溶液呈蓝色混悬状,开始后处理。室温下减压蒸干,加入50ml CH2Cl2进行超声溶解,溶液依次使用5%NaHCO3萃洗三次,饱和NaCl萃洗三次,5%KHSO4萃洗三次,饱和NaCl萃洗三次,5%NaHCO3萃洗三次,饱和NaCl萃洗三次。将CH2Cl2层用无水Na2SO4干燥过夜。过滤除去Na2SO4,旋干除去溶剂,经柱层析分离后,进行薄层层析分离纯化后,得到纯品本实施例标题所述的化合物,蓝色晶体406mg,产率为46%。ESI-MS(m/e):1262[M+H]+.Mp:110-111℃.[α]D 25=-44.00(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3292,3067,2929,2858,2358,1737,1638,1539,1455,1389,1359,1260,1184,834,746,698
实施例28 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-癸酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl(3b)
按照实施例27的方法由441mg(0.75mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-癸酰基-Lys和503mg(0.70mmol)Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl反应,经柱层析纯化得406mg(45%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色晶体。ESI-MS(m/e):1290[M+H]+.Mp:136-137℃.[α]D 25=-20.67(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3290,3067,2927,2855,1735,1637,1541,454,1388,1359,1259,1182,833,749,696,595,541
实施例29 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十二酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl(3c)
按照实施例27的方法由462mg(0.75mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十二酰基-Lys和503mg(0.70mmol)Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl反应,经柱层析纯化得414mg(45%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色晶体。ESI-MS(m/e):1318[M+H]+.Mp:131-132℃.[α]D 25=-18.33(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3293,3069,2926,2854,2360,1737,1639,1540,1455,1388,1361,1259,1181,836,744,698
实施例30 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十四酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl(3d)
按照实施例27的方法由484mg(0.75mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十四酰基-Lys和503mg(0.70mmol)Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl反应,经柱层析纯化得433mg(46%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色晶体。ESI-MS(m/e):1346[M+H]+.Mp:136-137℃.[α]D 25=-38.00(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3290,3068,2925,2853,1737,1638,1537,1450,1389,1359,1259,1184,834,746,698,587
实施例31 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十六酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl(3e)
按照实施例27的方法由505mg(0.75mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十六酰基-Lys和503mg(0.70mmol)Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl反应,经柱层析纯化得413mg(43%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色晶体。ESI-MS(m/e):1374[M+H]+.Mp:131-104℃.[α]D 25=-29.33(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3290,3068,2924,2852,1737,1636,1540,1450,1389,1359,1260,833,745,698,596
实施例32 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十八酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl(3f)
按照实施例27的方法由525mg(0.75mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑 啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十八酰基-Lys和503mg(0.70mmol)Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl反应,经柱层析纯化得392mg(40%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色晶体。ESI-MS(m/e):1402[M+H]+.Mp:136-137℃.[α]D 25=-10.33(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3289,3068,2924,2853,1737,1637,1543,1449,1389,1359,1260,1183,834,746,697
实施例33 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-辛酰基-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe(4a)
将100mg(0.008mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-辛酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl溶于4ml三氟醋酸及1ml三氟甲磺酸中,冰浴下反应0.5h,TLC显示Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-辛酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl消失,加入大量无水乙醚搅拌,反应液中有棕色固体物质析出,搅拌10min后,静置,将上层清液弃去,再次加入无水乙醚搅拌,静置,倾倒出上层清液,如此反复多次加入乙醚,倾倒上层清液,抽干乙醚,得到棕黄色固体粉末。使用少量水溶解,滴加稀氨水将样品的水溶液pH值调至7,使用SephdexG15除盐,水为洗脱剂,收集样品液冻干得到48mg(59%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色粉末,ESI-MS(m/e):1038[M+H]+.Mp:103-104℃.[α]D 25=-14.33.(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3205,1661,1533,1400,1354,1255,1170,1031,836,641,576,518
实施例34 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-癸酰基-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe(4b)
按照实施例33的方法,100mg(0.078mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-癸酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除硝基及苄基得50mg(60.2%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色粉末。ESI-MS(m/e):1066[M+H]+.Mp:116-117℃.[α]D 25=-10.53(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3215,2932,1659,1528,1446,1352,1251,1170,1030,836,640,576,518
实施例35 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十二酰基-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe(4c)
按照实施例33的方法,100mg(0.076mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十二酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除硝基及苄基得53mg(64%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色粉末。ESI-MS(m/e):1094[M+H]+.Mp:107-108℃.[α]D 25=-21.00(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3193,2930,1668,1546,1401,1260,1173,1033,838,643,577,519
实施例36 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十四酰基-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe(4d)
按照实施例33的方法,100mg(0.074mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十四酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除硝基及苄基得48mg(58%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色粉末。ESI-MS(m/e):1122[M+H]+.Mp:128-129℃.[α]D 25=-66.00(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3292,2927,2855,1661,1642,1562,1531,1446,1395,1353,1251,1172,1031,836,639
实施例37 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十六酰基-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe(4e)
按照实施例33的方法,100mg(0.072mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十六酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除硝基及苄基得42mg(49%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色粉末。ESI-MS(m/e):1150[M+H]+.Mp:130-131℃.[α]D 25=-31.33(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3336,2925,2853,1652,1531,1455,1393,1359,1253,1169,1031,834,700,640,517
实施例38 制备Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十八酰基-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe(4f)
按照实施例33的方法,100mg(0.071mmol)Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-十八酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除硝基及苄基得47mg(56%)本实施例标题所述的化合物,为蓝色粉末。ESI-MS(m/e):1178[M+H]+.Mp:141-142℃.[α]D 25=-4.33(c=1mg/ml,CH3OH).IR(KBr):3221,2926,2854,1661,1531,1446,1350,1251,1171,1031,640,577,519
实验例1 4a-f静脉注射给药的抗血栓活性试验
插管由3段构成,中段长80mm,内径3.5mm,两端为相同的聚乙烯管,长100mm,内径1mm,外径2mm,该管的一端拉成尖管(用于插入大鼠颈动脉或静脉),3段管的内壁均硅烷化。将提前称重的长60mm的丝线放入中段聚乙烯粗管内,粗管的两端分别与两根聚乙烯细管的未拉细端相套(其中一段将丝线压住0.5mm固定)。用注射器通过尖管端将管中注满肝素生理盐水溶液(50IU/kg)备用。
将200-220g雄性SD大鼠用20%乌拉坦溶液(6ml/kg,i.p.)进行麻醉。麻醉大鼠仰卧位固定,分离出大鼠的左颈外静脉,近心端和远心端分别穿入手术线,结扎远心端,在暴露的左颈外静脉上小心地剪一斜口,将上面制备好的旁路管道的未压线端尖管由斜口插入左颈外静脉开口的近心端,用注射器通过另一端的尖管推入准确量的肝素生理盐水(50IU/kg),此时的注射器用装有生理盐水,阿司匹林的生理盐水溶液或不同浓度化合物的生理盐水溶液的注射器代替,缓慢推入准确量的液体,随后分离右颈总动脉,于近心端夹动脉夹,近心端和远心端分别穿入手术线,结扎远心端,在离动脉夹不远处将右颈总动脉小心地剪一斜口。从聚乙烯管的尖部拔出注射器,将聚乙烯管的尖部插入动脉斜口的近心端。旁路管道的两端都用4号手术缝线与动静脉固定。打开动脉夹,使血流通过旁路管道从动脉流向静脉,此即大鼠动静脉旁路抗栓模型。从开始循环时计时,15min后从旁路管道中取出挂有血栓的丝线,精确称重,丝线前后的质量差即为血栓湿重,统计并评价化合物的体内抗栓活性。结果表明,4a-f有优秀的抗血栓活性(表1)。
表1 1nmol/kg 4a-f经静脉注射给药的抗血栓活性a
n=12;b)与生理盐水组比,P<0.01
实验例2 4a-f抗血小板聚集活性评价
猪颈动脉取血,用3.8%枸橼酸钠(V枸橼酸钠∶V全血=1∶9)抗凝。1000g/min离心10分钟得富血小板血浆(PRP)。以ADP,PAF,AA,TH为诱导剂(来源于SIGMA公司)诱导血小板聚集。4a-f用含50%DMSO的生理盐水溶解。每个数据平行测3次。结果如表2所示。
表2 4a-f对ADP,PAF,AA,及TH诱导的血小板聚集作用的影响(n=3)
表2数据说明化合物4a-f均具有抗血小板聚集活性。
实验例3 4a-f清除NO自由基活性测定
空白对照组:向0.5ml EP管中加入2.5μLMGD(7.325mg/mL),再加入2.5μLFeSO4·7H2O(3.475mg/mL),之后加入10μL蒸馏水,最后加5μLSNAP(1.1μmoL/mL)剧烈混合后,将混合液吸入石英毛细管,1min后测定NO自由基,记录谱图。
实验组:向0.5ml EP管中加入2.5μLMGD(7.325mg/mL),再加入2.5μLFeSO4·7H2O(3.475mg/mL),之后加入10μL待测样品,最后加入5μLSNAP(1.1μmoL/mL)剧烈混合后,将混合液吸入石英毛细管,1min后测定NO自由基,记录谱图。
每种化合物每个浓度下分别测量6次。记录每次的谱图峰高计算化合物在每个浓度下的清除率:清除率=(空白对照峰高-给药组峰高)/空白对照峰高。结果如表3所示。
表3 化合物4a-fNO清除活性(n=6)
表3数据说明化合物4a-f均具有清除NO自由基的作用。
实验例4 化合物4a-f抗血管舒张活性评价
250g左右雄性Wistar大鼠断颈处死、剪开胸骨、暴露出心脏、用镊子夹起心脏、沿胸椎取下胸主动脉。立即在K-H缓冲液中将胸主动脉与其它组织分离,并保持血管内皮完整。在K-H缓冲液中把胸主动脉剪成2mm宽的数段血管环待用。
打开MD3000生物信号采集处理系统,调试仪器,定标。把胸主动脉环悬挂于肌肉张力换能器上、浸入持续通氧(95%O2+5%CO2)的浴槽中、调节胸主动脉环的张力位1g。
待1g预张力的基线走平后,往浴槽中加NE(10-5M,20μL,终浓度10-8M),血管条收缩,5~6min稳定后,加入20μL测试物,待胸主动脉达到稳定后,往浴槽中加入Ach(10-3M,20μL,终浓度10-6M),待胸主动脉环舒张达到稳定后,记录张力的变化。用K-H缓冲液将主动脉环洗3-5次。重复实验。结果如表4所示。
表4 化合物4a-f对Wistar雄性大鼠胸主动脉环的抗舒张作用(n=6)
表4数据说明化合物4a-f均具有抗Ach引起的血管舒张作用。
实验例5 4a-f的自主装性能评价
1)水溶液中4a-f纳米球的粒径
在Nano-ZS90纳米粒度测定仪上测定4a-f在1×10-12mg/ml的粒径。结果表明,4a-f在水溶液中可组装为纳米球,粒径为206至262nm(表5)。
表5 4a-f在水溶液中形成的纳米球的粒径
2)4a-f的纳米球的形态
将4a-f配成浓度为1×10-11mg/ml的水溶液,然后将此溶液滴在铜网上,挥发干溶剂后在JEM-1230透射电子显微镜下观察纳米球的形态。测定表明,4a-f形成规则的纳米球。4a的透射电子显微镜照片作为代表,用图2描述。
以上所述仅为本发明的优选实施例,对本发明而言仅是说明性的,而非限制性的;本领域普通技术人员理解,在本发明权利要求所限定的精神和范围内可对其进行许多改变,修改,甚至等效变更,但都将落入本发明的保护范围内。
Claims (5)
2.制备权利要求1所述的具有通式Ⅰ的化合物的方法,其特征在于由以下步骤构成:
1) 在溴素存在下2-硝基丙烷在6N NaOH水溶液中缩合为2, 3-二甲基-2,3-二硝基丁烷;
2) 在氯化铵及锌粉存在下2,3-二甲基-2,3-二硝基丁烷在含水的乙醇溶液中还原为2,3-二甲基-2,3-二羟胺基丁烷;
3) 在甲醇中2,3-二甲基-2,3-二羟胺基丁烷与对硝基苯甲醛缩合为1,3-二羟基-2-(4’-羟基苯基) -4,4,5,5-四甲基咪唑烷;
4) 在二氧化铅存在下1, 3-二羟基-2-(4’-羟基苯基)-4,4,5,5-四甲基咪唑烷在甲醇中氧化为2-(4’-羟基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧咪唑啉;
5) 在氢化钠存在下2-(4’-羟基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧咪唑啉在无水THF中与溴代乙酸乙酯缩合为1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酸乙酯;
6) 在甲醇中1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧基乙酸乙酯皂化为1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酸;
7) 在DCC和HOBt存在下1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酸在无水THF中与HCl·H-Lys(Boc)-OCH3缩合为Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-Boc-Lys-OCH3;
8) 在含氯化氢的乙酸乙酯中Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-Boc-Lys-OCH3脱除Boc生成Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3;
9) 在DCC和HOBt存在下Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Lys-OCH3在无水THF中与饱和脂肪酸缩合为Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-OCH3;
10) 在甲醇中将Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-OCH3皂化为Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys;
11) 在DCC和HOBt存在下Boc-Asp(OBzl)在无水THF中与Phe-OBzl缩合为Boc-Asp(OBzl)-Phe -OBzl;
12) 在含氯化氢的乙酸乙酯中Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除Boc生成Asp(OBzl)-Phe -OBzl;
13) 在DCC和HOBt存在下Boc-Arg(NO2)-Gly在无水THF中与Asp(OBzl)- Phe-OBzl缩合为Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl;
14) 在含氯化氢的乙酸乙酯中Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除Boc生成Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe -OBzl;
15) 在DCC和HOBt存在下Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys在无水THF中与Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe -OBzl缩合为Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl;
16) 在含三氟甲磺酸的三氟醋酸溶液中Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除OBzl和NO2生成Nα-(1,3-二氧-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-2-苯基-4’-氧乙酰基)-Nω-脂肪酰基-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe。
3.权利要求1所述的具有通式Ⅰ的化合物在制备抗血栓药物中的应用。
4.权利要求1所述的具有通式Ⅰ的化合物在制备清除NO自由基药物中的应用。
5.权利要求1所述的具有通式Ⅰ的化合物在制备抗血栓和清除NO自由基双重功能药物中的应用。
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