CN102697701B

CN102697701B - 具有美白保湿功效的护肤组合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN102697701B
Application number: CN 201210152909
Authority: CN
Inventors: 何聪芬; 程华; 董银卯; 王领; 黄福山; 崔希庆
Original assignee: Beijing Technology and Business University
Current assignee: Beijing Technology and Business University
Priority date: 2012-05-16
Filing date: 2012-05-16
Publication date: 2013-05-08
Anticipated expiration: 2032-05-16
Also published as: CN102697701A

Abstract

本发明公开了一种具有美白保湿功效的外用护肤组合物，所述组合物由下述重量份配比的原料组成：松茸1～8重量份、金针菇1～8重量份、竹荪1～4重量份、灰树花1～4重量份。本发明提供的美白保湿提取物制备方法操作简单，生产成本低；本发明提供的得到的美白祛斑延缓衰老提取物呈浅黄色或黄色，澄清透亮；经实验证实具有很好的美白、保湿抗过敏功效，并且可以有效地抚平皱纹防止皱纹产生延缓衰老。

Description

具有美白保湿功效的护肤组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种护肤组合物，具体地说是一种具有美白祛斑保湿功效的护肤组合物及其制备方法与应用。

背景技术

目前市售的美白产品多种多样，功效各异。美白产品多事化学制剂，多含铅及含汞，虽然可以短时间内提亮皮肤颜色，但是长期使用必然会加快皮肤衰老，并且如果铅汞含量超标，经皮肤吸收后会对人体造成很大的伤害。

目前多有中药美白产品问世，其经提取后得到的提取物作为护肤品添加剂使用，可以有效地克服上述问题。但是中药原料的选择及配伍关系极其重要，选择或配伍不好不仅影响功效且会带来其他的副作用，有可能在美白的同时使皮肤脱水或加速皱纹的产生或者造成皮肤过于敏感，过敏现象频发。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有美白保湿功效且同时具有祛斑延缓衰老功效的护肤组合物。

本发明的另一目的在于提供上述护肤组合物的制备方法。

本发明的第三目的在于提供上述方法制备得到的提取物的用途。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种具有美白保湿功效的外用护肤组合物，所述组合物由下述重量份配比的原料组成：

松茸1～8重量份、金针菇1～8重量份、竹荪1～4重量份、灰树花1～4重量份。

所述组合物的最佳重量份配比为：

松茸2重量份、金针菇2重量份、竹荪1重量份、灰树花1重量份。

一种制备所述护肤组合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

（1）将松茸、金针菇、竹荪和灰树花按所述配比混合，粉碎成粉末；

（2）将步骤（1）的粉末加水混合均匀；加热、超声提取得到提取液；

（3）所述提取液冷却后经40～60目粗滤后静置，再精滤至澄清得到过滤液；

（4）所述过滤液经高温灭菌，保藏备用。

所述步骤（1）中粉末粒度为60～80目。

所述步骤（2）粉末与水的质量比为1∶40～1∶60；超声提取的温度为70℃～80℃，超声频率为40kHz，超声功率200～250W，提取时间可为1.5h～2.0h。

所述步骤（3）中，所述提取液冷却后温度为25℃～35℃；所述粗滤后静置时间为0.5h～1.0h。

所述步骤（3）得到的过滤液中加入海藻糖和甘油，所述海藻糖和甘油的加入量分别为过滤液总质量的2～3wt%和4～6wt%。

所述步骤（4）中，对过滤液的灭菌温度为90℃，灭菌时间为30min；所述灭菌后的过滤液冷却至30～45℃，加入防腐剂即得所述组合物的活性提取物。

一种具有美白保湿功效的外用护肤提取物，所述提取物由上述组合物经所述的方法制备得到的。

所述的外用护肤提取物在制备具有美白保湿功效的护肤制剂中的应用。

本发明制备得到的提取物可作为护肤制剂的添加剂使用，与护肤品领域常规辅料配合制备得到的护肤制剂具有很好的美白保湿祛斑及防过敏功效。

本发明的有益效果：本发明提供的美白保湿提取物制备方法操作简单，生产成本低；本发明提供的得到的美白祛斑延缓衰老提取物呈浅黄色或黄色，澄清透亮；经实验证实具有很好的美白、保湿抗过敏功效，并且可以有效地抚平皱纹防止皱纹产生延缓衰老。

附图说明

图1为本发明提取物对L-酪氨酸酶的活性抑制率曲线；

图2为本发明提取物对DPPH自由基的清除率柱形图；

图3为本发明活性提取物水合率的变化曲线；

图4为本发明活性提取物失水率的变化曲线。

具体实施方式

下述实施例中所使用的试验方法均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，均可从商业途径得到。

实施例1美白保湿提取物的制备

（1）将松茸、金针菇、竹荪和灰树花按2∶2∶1∶1比例混合，即20g∶20g∶10g∶10g，粉碎（粉碎设备：多功能粉碎机GX-04，上海高翔食品机械厂）并过60目～80目筛得到粉末，置于通风干燥处保存，备用；

（2）超声提取：将制备得到的粉末和去离子水以质量比为1∶40的比例混合搅拌均匀，置于70℃条件下超声提取，超声频率为40kHz，超声功率250W，（加热与超声提取设备：KH-250B型超声波清洗器，昆山禾创超声仪器有限公司）提取1.5h得提取液；

（3）沉淀抽滤：将提取液采用流水冷却至35℃，用孔径为40目的沙网粗滤，将粗滤液静置0.5h，用圆滤板进行精滤（精滤抽滤设备：SHZ-Ⅲ型循环水式多用真空泵，上海知信实验仪器有限公司）得到澄清透亮的过滤液；

（4）灭菌防腐：将过滤液置于90℃条件（加热设备：恒温水浴锅，余姚市亚星仪器仪表有限公司）灭菌30min；然后将溶液流水冷却30℃，加入复合防腐剂K₁₄₅+MTI，其中K₁₄₅和MTI的加入量分别为溶液总质量的0.1%和0.06%及制备得到活性提取物，将制备提取物放置在20℃～45℃条件下，避光保存。

实施例2美白保湿提取物的制备

（1）将松茸、金针菇、竹荪和灰树花按1∶8∶4∶4比例混合，即3.5g∶28g∶14g∶14g，粉碎并过80目筛得到粉末，置于通风干燥处保存，备用；

（2）超声提取：将制备得到的粉末和去离子水以质量比为1∶60的比例混合搅拌均匀，置于80℃条件下超声提取，超声频率为40kHz，超声功率200W，提取时间2.0h得提取液；

（3）沉淀抽滤：将提取液采用流水冷却至25℃，用孔径为60目的沙网粗滤，将粗滤液静置1.0h，用圆滤板进行精滤得到澄清透亮的过滤液；

（4）所述步骤（3）得到的过滤液中加入海藻糖和甘油混合均匀，所述海藻糖和甘油的加入量分别为过滤液总质量的2wt%和4wt%。

（5）灭菌防腐：将过滤液置于90℃条件，灭菌30min；然后将溶液流水冷却45℃，加入复合防腐剂K₁₄₅+MTI，其中K₁₄₅和MTI的加入量分别为溶液总质量的0.1%和0.06%及制备得到活性提取物，将制备提取物放置在20℃～45℃条件下，避光保存。

实施例3美白保湿提取物的制备

（1）将松茸、金针菇、竹荪和灰树花按8∶1∶2∶3比例混合，即40g∶5g∶10g∶15g，粉碎并过80目筛得到粉末，置于通风干燥处保存，备用；

（2）超声提取：将制备得到的粉末和去离子水以质量比为1∶50的比例混合搅拌均匀，置于75℃条件下超声提取，超声频率为40kHz，超声功率250W，提取时间2.0h得提取液；

（3）沉淀抽滤：将提取液采用流水冷却至30℃，用孔径为60目的沙网粗滤，将粗滤液静置1.0h，用圆滤板进行精滤得到澄清透亮的过滤液；

（4）所述步骤（3）得到的过滤液中加入海藻糖和甘油混合均匀，所述海藻糖和甘油的加入量分别为过滤液总质量的3wt%和6wt%。

（5）灭菌防腐：将过滤液置于90℃条件，灭菌30min；然后将溶液流水冷却40℃，加入复合防腐剂K₁₄₅+MTI，其中K₁₄₅和MTI的加入量分别为溶液总质量的0.1%和0.06%及制备得到活性提取物，将制备提取物放置在20℃～45℃条件下，避光保存。

实施例4美白保湿提取物的制备

（1）将松茸、金针菇、竹荪和灰树花按2∶2∶1∶1比例混合，即20g∶20g∶10g∶10g，粉碎并过80目筛得到粉末，置于通风干燥处保存，备用；

（2）超声提取：将制备得到的粉末和去离子水以质量比为1∶60的比例混合搅拌均匀，置于75℃条件下超声提取，超声频率为40kHz，超声功率250W，提取时间2.0h得提取液；

（4）所述步骤（3）得到的过滤液中加入海藻糖和甘油混合均匀，所述海藻糖和甘油的加入量分别为过滤液总质量的2wt%和5wt%。

实施例5本发明美白保湿乳液的制备

表1乳液配方

制备工艺：

（1）B相：用丁二醇预先分散汉生胶搅拌均匀，待用；B相其他原料加入后搅拌均匀，加热至80～85℃，保温30min；

（2）A相：各原料称好后加热至80～85℃，保温30min；

（3）将A相倒入B相中，均质（2800r/min）3min～5min后，搅拌（30r/min）10min后开始降温；当温度降到40℃以下，加入C相，搅拌（30r/min）均匀；

（4）当温度降到38℃以下，停止搅拌，陈化24小时；灌装。

本发明功效实验

1、实施例1制备的活性提取物的美白祛斑功效试验一

活性提取物的美白祛斑功效试验一为对L-酪氨酸酶活性抑制试验。

酪氨酸酶是黑色素形成过程中主要的限速酶，该酶的活性大小决定着黑色素形成的数量，当前化妆品市场上的美白产品绝大多数以酪氨酸酶抑制剂为主。

L-酪氨酸酶与其底物L-酪氨酸可以发生催化反应，当在反应体系中添加有L-酪氨酸酶活性抑制作用的试剂后，对催化反应可以产生抑制作用，通过测定添加有L-酪氨酸酶活性抑制作用的试剂前后475nm处吸光度值的变化，来评价该有L-酪氨酸酶活性抑制作用的试剂对L-酪氨酸酶活性的抑制率。

具体试验过程如下：

1）称取17.91g十二水磷酸氢二钠溶于500mL蒸馏水中，得到溶液a；称取7.8g二水磷酸二氢钠溶于500mL蒸馏水中，得到溶液b；将92.6mL溶液a和107.4mL溶液b混合，得到200mL pH为6.8的PBS缓冲溶液；

2）称取0.05g L-酪氨酸，先用少量0.1mol/L的盐酸溶解，待其溶解后用上述配制的pH为6.8的PBS缓冲液定容至100mL；

试验过程中，各组中各物质的加入量如表2所示。

表2提取物对L-酪氨酸酶的活性抑制试验中各物质的加入量

注：C₁组和T₁组均加入0.5mL酪氨酸酶，酶活为100U/mL。

3）C₀组各溶液配好摇匀后，在37℃水浴锅中水浴加热10min，波长475nm下调零。C₁组溶液配好摇匀后，37℃水浴10min后加入0.5ml酶活为100U/mL的酪氨酸酶，继续水浴10分钟，测定吸光度值；

4）T₀组各溶液配好摇匀后，在37℃水浴锅中水浴加热10min，波长475nm下调零。T₁组溶液配好摇匀后，37℃水浴10min后加入0.5ml酶活为100U/mL的酪氨酸酶，继续水浴10分钟，测定吸光度值；

5）计算酪氨酸酶的活性抑制率T（%），T（%）=（C₁-T₁）/C₁×100%。

试验设三次重复，三次重复的平均结果如图1所示。结果表明，当提取物浓度为2%时，酪氨酸酶活性抑制率达到66.5%，随着浓度的增大，抑制率也呈上升趋势，当4%浓度时，抑制率达到88.0%，表明实施例1制备的活性提取物具有良好的美白效果。发明人利用实施例2、3、4制备的提取物重复上述实验，结果同实施例1。

2、实施例5制备制剂的美白祛斑功效试验二

活性提取物的美白祛斑功效试验二为人体美白功效试验，包括加速皮肤黑色素的转移、代谢和提高皮肤亮度试验。下述美白功效试验均采用人体测试方式，用皮肤黑红色素测试仪和皮肤色度测试探头+MPA 9测试仪测定皮肤的黑色素含量和亮度。

选取30个自愿者，男女各半，受试部位前2～3天不能使用任何产品；用干的面巾纸将双手前臂内侧擦拭干净并做4×4cm²试验区域测定标记，用皮肤黑红色素测试仪和皮肤色度测试探头+MPA 9测试仪测定受试皮肤的黑色素含量和皮肤亮度；用乳胶指套将测试样品（实施例5制备）和空白组按2.0±0.1mg样品/cm²的用量分别涂抹在左右手臂上，涂抹后分别测量第1～4周每个区域的黑色素含量和皮肤亮度。

（1）黑色素含量变化分析

皮肤黑色素含量变化反映在测试周期内，试验区域皮肤黑色素含量随时间变化规律。其值越大，皮肤黑色素含量越大，反之，皮肤黑色素含量。黑色素含量差值（ΔT）=使用产品后各时间点黑色素含量（Tn）-使用产品前黑色素含量（T0）。

表3受试部位皮肤黑色素含量与初始值的差值

由表3可知，在测试周期4周内，空白组受试部位皮肤的黑色素含量呈正值，数值无明显变化，说明涂抹的基质不具有转移黑色素的能力。样品组受试部位皮肤的黑色素含量与初始值的差值一直为负值；第2周时黑色素含量差值为-4.48，且值随着时间的延长而降低，说明实施例5制备的含有美白提取物的护肤品具有转移或降低黑色素含量的能力。发明人使用其他实施例制备的提取物替换实施例5中的活性提取物制备得到的护肤制剂重复上述实验，结果同实施例5。

（2）皮肤亮度的变化分析

皮肤亮度变化反映在测试周期内，考察实验区域皮肤亮度L值随时间变化规律。其值越大，皮肤亮度越大，反之，皮肤亮度越低。

皮肤亮度差值（ΔT）=使用产品后各时间点L值（Tn）-使用产品前L值（T0）。

表4受试部位皮肤亮度L值与初始值的差值

由表4可知，在测试的周期内，空白组受试部位的皮肤亮度数值略有变化，但不明显，说明涂抹的基质不具有提高皮肤亮度的能力。样品组受试部位皮肤的皮肤亮度L值与初始值的差值一直为正值，且随着测试时间的延长而升高，第4周时皮肤亮度L值与初始值的差值达0.81，说明实施例5制备的含有活性提取物的护肤品具有较好的美白效果。发明人使用其他实施例制备的提取物替换实施例5中的活性提取物制备得到的护肤制剂重复上述实验，结果同实施例5。

3、实施例4制备的活性提取物的抗衰老美容功效试验为清除DPPH自由基（DPPH·）实验

DPPH·是一种很稳定的以氮为中心的自由基，若提取物能将其清除，则表示提取物具有降低羟自由基、烷自由基或氧化自由基的有效浓度和打断脂质过氧化链反应的作用。DPPH·在有机溶剂中非常稳定，呈紫色，在517nm处有一个特征吸收峰，当其遇到自由基清除剂时，DPPH·的孤电子被配对，使其颜色变浅，在最大吸收波长处的吸光度变小。因此，可通过测定吸光度的变化来评价其对DPPH·的清除效果。

准确称取20mg DPPH·（sigma公司），用无水乙醇定容至250ml容量瓶中，得到浓度为20mmol/L的DPPH·溶液，将实施例4制备的活性提取物稀释成不同浓度的测试液。分别取2ml不同浓度的测试液及2ml 20mmol/L DPPH·，混匀后反应30min，测定517nm波长下的吸光度，对照溶剂用无水乙醇代替，按下式计算抑制率。抑制率（%）=[1-(A_i－A_j)/Ac]×100；其中，A_i为2ml DPPH·溶液与2ml不同浓度的测试液组成的混合液的吸光度；A_j为2ml不同浓度的测试液与2ml无水乙醇组成的混合液的吸光度；Ac为2ml DPPH·溶液与2ml无水乙醇组成的混合液的吸光度。

上述制备的美白祛斑延缓衰老提取物对DPPH·的清除作用的清除率结果如图2所示，从图中可以看出，随着美白祛斑延缓衰老提取物浓度的增大，DPPH自由基清除率也逐渐增大，说明美白祛斑延缓衰老提取物清除DPPH自由基效果显著，具有延缓衰老的美容功效。发明人利用实施例1、2、3制备的提取物重复上述实验，结果同实施例4，在此不赘述。

4、实施例2制备活性提取物的保湿功效试验

下述各种保湿功效试验均采用人体测试方式，用水分测试仪测定皮肤的水分含量和水分散失量（即TEWL值）；选取30个自愿者，男女各半。

（1）活性提取物的水分含量和水合率变化

试验组为受试部位涂抹含有实施例2制备的活性提取物；

空白组为受试部位涂抹不含本发明活性提取物的化妆品基质。

水分含量变化反映在测试周期内，实验区域水分含量随时间变化规律。其值越大，水分含量越大，反之，水分含量越小。

水分含量差值（ΔT）=使用后各时间点水分含量（Th）-起始水分含量（T0）。

表5活性提取物的水分含量差值

使用1小时后与空白组相比较，试验组的水分含量明显增加；在测试周期4小时内，试验组的水分含量一直高于空白组。

水合率=（使用后各时间点水分含量-起始水分含量）/起始水分含量，则试验组和空白组的水合率变化曲线如图3所示，由该图可知，空白组的水合率变化相对稳定，试验组在样品使用1小时后，其水合率明显高于空白组，4小时内试验组的水合率一直高于空白组。发明人利用实施例1、3、4制备的活性提取物重复上述实验，结果同实施例2。

（2）活性提取物水分散失情况

试验组为受试部位涂抹含有实施例3制备的活性提取物；

空白组为受试部位涂抹不含美白祛斑延缓衰老提取物的化妆品基质。

水分散失变化反映在测试周期内，实验区域水分散失随时间变化规律。其值越小，水分散失越少，锁水能力越强；反之，锁水能力越弱。

失水量差值（ΔT）=使用后各时间点水分散失量（Th）-起始水分散失量（T0）。

表6活性提取物的失水量差值

使用1小时后与空白组相比较，试验组的水分散失量明显降低；在测试周期4小时内，试验组的失水量一直低于空白组。

失水率=（使用后各时间点水分散失量-起始水分散失量）/起始水分散失量，此值越小，说明水分散失越少，试验样品锁水效果越明显；试验组和空白组的失水率变化曲线如图4所示，由该图可知，受试部位涂抹样品1小时后，试验组的失水率明显低于空白组；在测试周期4小时内，试验组的失水率一直低于空白组，且一直为负值；试验组与空白组相比，有即时锁水效果，且持续锁水能力佳。发明人利用实施例1、3、4制备的活性提取物重复上述实验，结果同实施例2。

Claims

1.一种具有美白保湿功效的外用护肤组合物，其特征在于所述组合物原料药为：松茸1～8重量份、金针菇1～8重量份、竹荪1～4重量份、灰树花1～4重量份。

2.如权利要求1所述的外用护肤组合物，其特征在于所述组合物原料药为：松茸2重量份、金针菇2重量份、竹荪1重量份、灰树花1重量份。

3.一种权利要求1或2所述护肤组合物的制备方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：

（1）将松茸、金针菇、竹荪和灰树花按权利要求1或2所述配比混合，粉碎成粉末；

（3）所述提取液冷却后经40～60目过滤后静置，再过滤至澄清得到过滤液；

（4）所述过滤液经高温灭菌，保藏备用。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述步骤（1）中，粉末粒度为60～80目。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述步骤（2）中，粉末与水的质量比为1：40～1：60；超声提取的温度为70℃～80℃，超声频率为40kHz，超声功率200～250W，提取时间为1.5h～2.0h。

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述步骤（3）中，所述提取液冷却后温度为25℃～35℃；所述40～60目过滤后静置时间为0.5h～1.0h。

7.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述步骤（3）中，得到的过滤液中加入海藻糖和甘油，所述海藻糖和甘油的加入量分别为过滤液总质量的2～3wt%和4～6wt%。

8.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述步骤（4）中，对过滤液的灭菌温度为90℃，灭菌时间为30min；灭菌后的过滤液冷却至30～45℃，加入防腐剂即得。

9.一种具有美白保湿功效的外用护肤提取物，其特征在于：所述提取物由权利要求1或2所述组合物经权利要求3至8中任意一项所述的方法制备得到的。

10.权利要求9所述的外用护肤提取物在制备具有美白保湿功效的护肤制剂中的应用。