CN102645448A - 利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法 - Google Patents
利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102645448A CN102645448A CN2012101035704A CN201210103570A CN102645448A CN 102645448 A CN102645448 A CN 102645448A CN 2012101035704 A CN2012101035704 A CN 2012101035704A CN 201210103570 A CN201210103570 A CN 201210103570A CN 102645448 A CN102645448 A CN 102645448A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- stripe rust
- wheat stripe
- growth
- solution
- growth cycle
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 230000012010 growth Effects 0.000 title claims abstract description 45
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 241001123583 Puccinia striiformis Species 0.000 title abstract description 7
- 241000209140 Triticum Species 0.000 claims description 44
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 claims description 44
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 41
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 5
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 4
- 230000035784 germination Effects 0.000 claims description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 3
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 claims 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims 1
- JEGUKCSWCFPDGT-UHFFFAOYSA-N h2o hydrate Chemical compound O.O JEGUKCSWCFPDGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法，在常压以及选定的温度下，用C80微量热仪即时测出小麦条锈病菌萌发培养液的热流值并存储于计算机中，经计算后得到小麦条锈病菌的生长周期曲线。本发明的操作简便、可靠性高，通过测得的生长周期曲线可以清晰地辨别小麦条锈病生长周期中的各个生长阶段以及各个生长阶段的时间长短、热量变化的快慢以及具体数值，从而为小麦条锈病菌的研究和防治提供有力的参考。
Description
技术领域
本发明属于植物病害监测研究技术领域，涉及一种利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法。
背景技术
小麦条锈病是由小麦条锈菌(Puccinia striiformisWest.f.sp.tritici)引起的世界性小麦重要病害，主要在我国西北、西南、华北和淮北等地冬麦区和西北春麦区发生。该病害具有分布广、传播快、危害面积大等特点，一般流行年份可使小麦减产20％～30％，大流行年份则可使小麦减产60％～90％，甚至绝收，为此对小麦条锈病菌的生长问题研究也是一个关系到国家民生的重大课题。
目前本领域对于小麦条锈病菌生长周期的测定主要采用计数法或光电比浊法：计数法包括稀释平板计数法以及显微镜直接计数法，是将少量纯种单细胞小麦条锈病菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量，进而绘制曲线，该方法虽然原理简单，但操作复杂繁琐，精确度不高；光电比浊法是利用在可见光的450～650nm波段内微生物细胞浓度与透光度成反比的原理而采用的一种自动控制的方法，但该法只能检测含有大量细菌的悬浮液，对颜色太深的样品具有一定的局限性，致使其测定对培养液的选择性较大。
发明内容
本发明的目的在于对现有技术存在的问题加以解决，提供一种操作简便、自主和可靠性高的利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法，通过该方法可以清晰地确定出小麦条锈病菌生长速率最快的时间段和条件，从而为小麦条锈病的防治提供有力的参考。
为实现上述发明目的而提供的测定小麦条锈病菌生长周期的方法包括下述的测定步骤：
1、根据田间采集的典型的小麦条锈病叶片，通过震荡法获取小麦条锈病菌的菌种，配制菌种浓度为0.05g/l～0.10g/l；
2、取重量百分比为2％～5％的灭菌水或蔗糖液或葡萄糖液或麦芽糖液与重量百分比为95％～98％的蒸馏水配制成小麦条锈病菌萌发培养液，培养液的pH为6～7；
3、分别在两个试管A、B中加入等量的配适温度为10℃～30℃的培养液，然后在试管A中添加小麦条锈病菌的菌种，添加比例为每10ml培养液中添加0.6～1mg菌种，将试管A、B置于摇床中震荡24小时；
4、在常压以及选定的温度28℃下，从试管A、B中移取溶液3ml分别加入C80微量热仪的样品池和参比池(参比池主要用来消除培养液引起的误差，例如溶解热)中，用C80微量热仪每间隔40秒时间自动记录样品池在该时段的热流(Heatflow)值Pt并存储于计算机中，通过公式
lnPt＝lnP0+kt
进行指数增长期微生物的生长速率常数k的定量计算，式中Pt、P0、k和t分别是时间t时的热流、初始热流、对数期生长速率常数和生长时间，以时间t为横坐标，用lnPt对t作图就可得到对数期生长速率常数k的曲线图，即小麦条锈病菌生长周期曲线，由此获得小麦条锈病菌处于各个生长阶段的时间以及热量变化的具体数值，进而确定出小麦条锈病菌生长速率最快的时间段和条件，为小麦条锈病的防治提供了有力的参考。
具体实施过程中，小麦条锈病菌萌发的适宜培养液的适温范围因基质不同而略有差异，由灭菌水与蒸馏水配置的培养液的适温范围为10℃～20℃，在蒸馏水与蔗糖液、葡萄糖液或麦芽糖液配置的培养液的适温范围为10℃～15℃。
与现有技术相比，本发明所述的测定方法操作简便、实时、定量、可靠性高，它利用C80微量热即时记录小麦条锈病菌生长期间的热流变化的方法获得小麦条锈病菌的生长周期曲线，通过该生长周期曲线可以清晰地辨别小麦条锈病生长周期中的各个生长阶段以及各个生长阶段的时间长短、热量变化的快慢以及具体数值，从而为小麦条锈病菌的研究和防治提供了有力的参考。
附图说明
附图是本发明一个实施例方法测得的小麦条锈病菌的生长周期曲线图。图中横轴为时间坐标t轴，纵轴为对数热流坐标lnPt轴。
具体实施方式
以下结合一个实施例对本发明内容做进一步说明。
1、制备菌种——根据田间采集的典型的小麦条锈病叶片，通过震荡法获取小麦条锈病菌的菌种，配制菌种浓度为0.08g/l；
2、配制培养液——取2％重量的葡萄糖液与98％重量的蒸馏水配制成小麦条锈病菌萌发培养液500ml，培养液pH为6～7；
3、分别移取10ml培养液至两个试管A、B中，然后向A中添加0.8mg的小麦条锈病菌，B中培养液作为参比液，培养液温度为10℃～15℃，将试管A、B置于摇床中震荡24小时；
4、在常压以及选定的温度28℃下，从试管A、B中移取溶液3ml分别加入C80微量热仪的样品池和参比池中，用C80微量热仪每间隔40s时间即时自动记录样品池在该时段的热流值Pt并存储于计算机中，通过公式
lnPt＝lnP0+kt (1)
进行指数增长期微生物的生长速率常数k的定量计算，以时间t为横坐标，用lnPt对t作图就可得到对数期生长速率常数k的曲线图，即小麦条锈病菌生长周期曲线。
表1：小麦条锈病菌生长曲线的部分原始数据
根据公式(1)并通过计算机对测得数据进行计算后，得到如附图所示的小麦条锈病菌的生长周期曲线图，并可以得到小麦条锈病菌处于各个阶段的热量变化的具体数值。从图中可以看出，微生物生长周期大致分为四个阶段A-B、B-C、C-D、D-E，它们分别对应着小麦条锈病菌生长周期的延缓期、对数期、稳定期和衰亡期四个阶段，其中的对数期B-C阶段为小麦条锈病菌生长最快的阶段，也是最佳防治阶段。
Claims (3)
1.一种利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法，其特征在于包括下述的测定步骤：
1.1根据田间采集的典型的小麦条锈病叶片，通过震荡法获取小麦条锈病菌的菌种，配制菌种浓度为0.05g/l～0.10g/l；
1.2取重量百分比为2％～5％的灭菌水或蔗糖液或葡萄糖液或麦芽糖液与重量百分比为95％～98％的蒸馏水配制成小麦条锈病菌萌发培养液，培养液的pH为6～7；
1.3分别在两个试管A、B中加入等量的配适温度为10℃～30℃的培养液，然后在试管A中添加小麦条锈病菌的菌种，添加比例为每10ml培养液中添加0.6～1mg菌种，将试管A、B置于摇床中震荡24小时；
1.4在常压以及选定的温度28℃下，从试管A、B中移取溶液3ml分别加入C80微量热仪的样品池和参比池中，用C80微量热仪每间隔40秒时间即时自动记录样品池在该时段的热流值Pt并存储于计算机中，通过公式
lnPt＝lnP0+kt
进行指数增长期微生物的生长速率常数k的定量计算，式中Pt、P0、k和t分别是时间t时的热流、初始热流、对数期生长速率常数和生长时间，以时间t为横坐标，用lnPt对t作图就可得到对数期生长速率常数k的曲线图，即小麦条锈病菌生长周期曲线。
2.根据权利要求1所述的利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法，其特征是在两个试管A、B中加入的培养液由灭菌水与蒸馏水配置而成，其配适温度为10℃～20℃。
3.根据权利要求1所述的利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法，其特征是在两个试管A、B中加入的培养液由蔗糖液或葡萄糖液或麦芽糖液与蒸馏水配置而成，其配适温度为10℃～15℃。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2012101035704A CN102645448A (zh) | 2012-04-10 | 2012-04-10 | 利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2012101035704A CN102645448A (zh) | 2012-04-10 | 2012-04-10 | 利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102645448A true CN102645448A (zh) | 2012-08-22 |
Family
ID=46658403
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2012101035704A Pending CN102645448A (zh) | 2012-04-10 | 2012-04-10 | 利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102645448A (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104034676A (zh) * | 2014-05-26 | 2014-09-10 | 中国科学院南京土壤研究所 | 基于Biolog微平板及微量热法判断可提高土壤微生物活性碳源因子的方法 |
| CN106033067A (zh) * | 2015-03-09 | 2016-10-19 | 中国科学院南京土壤研究所 | 一种土壤共代谢作用的测定方法 |
| CN106093110A (zh) * | 2016-06-08 | 2016-11-09 | 大连理工大学 | 一种用于测定微藻类生长曲线的自动量热装置 |
| CN107576622A (zh) * | 2017-01-09 | 2018-01-12 | 广西民族大学 | 一种单色光‑微量热系统 |
| CN113465789A (zh) * | 2021-07-01 | 2021-10-01 | 东北大学秦皇岛分校 | 一种用于细胞代谢热检测的开放式微纳量热计系统 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1785723A1 (en) * | 2005-11-11 | 2007-05-16 | Stratos Bio Ltd. | Micro calorimetric analysis of mammalian cell susceptibility to agents that affect cell growth, metabolism and immune response, and use of micro calorimetric analysis in a transplantation test |
| CN101805780A (zh) * | 2010-03-18 | 2010-08-18 | 曲阜师范大学 | 一种二氧化钛纳米管抗菌性的定量测定方法 |
-
2012
- 2012-04-10 CN CN2012101035704A patent/CN102645448A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1785723A1 (en) * | 2005-11-11 | 2007-05-16 | Stratos Bio Ltd. | Micro calorimetric analysis of mammalian cell susceptibility to agents that affect cell growth, metabolism and immune response, and use of micro calorimetric analysis in a transplantation test |
| CN101805780A (zh) * | 2010-03-18 | 2010-08-18 | 曲阜师范大学 | 一种二氧化钛纳米管抗菌性的定量测定方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 杨黎妮等: "微量热法研究头孢菌素对大肠杆菌微生物活性的影响", 《高等学校化学学报》 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104034676A (zh) * | 2014-05-26 | 2014-09-10 | 中国科学院南京土壤研究所 | 基于Biolog微平板及微量热法判断可提高土壤微生物活性碳源因子的方法 |
| CN106033067A (zh) * | 2015-03-09 | 2016-10-19 | 中国科学院南京土壤研究所 | 一种土壤共代谢作用的测定方法 |
| CN106033067B (zh) * | 2015-03-09 | 2019-01-11 | 中国科学院南京土壤研究所 | 一种土壤共代谢作用的测定方法 |
| CN106093110A (zh) * | 2016-06-08 | 2016-11-09 | 大连理工大学 | 一种用于测定微藻类生长曲线的自动量热装置 |
| CN107576622A (zh) * | 2017-01-09 | 2018-01-12 | 广西民族大学 | 一种单色光‑微量热系统 |
| CN113465789A (zh) * | 2021-07-01 | 2021-10-01 | 东北大学秦皇岛分校 | 一种用于细胞代谢热检测的开放式微纳量热计系统 |
| CN113465789B (zh) * | 2021-07-01 | 2022-05-24 | 东北大学秦皇岛分校 | 一种用于细胞代谢热检测的开放式微纳量热计系统 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102645448A (zh) | 利用微量热法测定小麦条锈病菌生长周期的方法 | |
| CN107271590A (zh) | 一种顶空气相色谱快速检测抗菌纸抑菌性的方法 | |
| CN102507889A (zh) | 一种利用浮萍对重金属进行生物毒性评价的方法 | |
| CN102323261B (zh) | 一种海洋微藻细胞内淀粉含量的测定方法 | |
| CN106854620A (zh) | 一种快速高效检测菌落总数的测试片及其制备方法 | |
| CN106645325B (zh) | 检测食品中日落黄的电化学方法 | |
| CN103074411A (zh) | 一种微藻利用碳酸钙碳源的检测与定量方法 | |
| CN101584291A (zh) | 一种对水稻光合能力高温稳定性的检测方法 | |
| CN205374443U (zh) | 土壤样品检测装置 | |
| CN114994284A (zh) | 不同植被类型土壤基础呼吸速率的间接测定方法 | |
| CN105974055B (zh) | 无土栽培营养液磷浓度在线检测系统及检测方法 | |
| CN105210750B (zh) | 一种基于叶绿素荧光动力筛选广适性水稻的方法 | |
| CN112695075A (zh) | 一种基于数字pcr技术检测椰毒假单胞菌的试剂盒及其应用 | |
| CN104593289B (zh) | 几株可用于水中可生物降解有机物和微生物污染监测的细菌 | |
| CN102242181A (zh) | 基于细胞电子传感器的烟气冷凝物细胞毒性测定方法 | |
| CN102914507B (zh) | 一种利用大肠杆菌检测水体中氟含量的方法 | |
| CN111024670B (zh) | 一种基于pea荧光曲线测定水体初级生产力的方法 | |
| CN105759003B (zh) | 一种测量Fo来估算水体的初级生产力的方法 | |
| CN1970787B (zh) | 一种芽孢杆菌数量的检测方法 | |
| CN102410983B (zh) | 一种组培苗氮素利用率的无菌动态检测方法 | |
| CN102640680B (zh) | 连续测定根际激发效应模拟系统装置 | |
| CN106834139A (zh) | 一种半生红树林植物阔苞菊内生真菌及其用途、硒富集的方法 | |
| CN113777237B (zh) | 一种定量检测菌核病侵染能力的方法 | |
| CN102779222B (zh) | 一种检测浅水湖泊中可被生物利用颗粒态磷的方法 | |
| CN104232733B (zh) | 肌醇检验接种菌悬液制备改良方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20120822 |