CN102600471A - 一种败血症治疗的靶点 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了属于败血病治疗技术领域的一种败血症治疗的靶点。该靶点为Factor XI或Factor XII，通过阻断败血症人体内Factro XI或Factor XII的表达治疗败血症。本发明阻断Factor XI表达的抗体-14E11可为继APC之后治疗败血症的新药，而且因为Factor XI在凝血瀑布链上的特殊位置，其副反应发生率应该明显低于APC。
Description
技术领域
本发明属于败血病治疗技术领域，具体涉及一种败血症治疗的靶点。
背景技术
败血症(sepsis，septicemia)系指致病菌或条件致病菌侵入血循环，并在血中生长繁殖，产生毒素而发生的急性全身性感染。若侵入血流的细菌被人体防御机能所清除，无明显毒血症症状时则称为菌血症(bacteriemia)，败血症伴有多发性脓肿而病程较长者称为脓毒血症(pyemia)。患者临床表现随致病菌的种类、数量、毒力以及年龄、抵抗力的强弱不同而异。轻者仅有一般感染症状，重者可发生感染性休克、DIC(disseminated intravascular coagulation)、MODS(multiple organs dysfunction syndrome)。目前美国败血症的发病率很高，每年在750,000例，那么作为发展中国家的中国，因为相应的医疗条件较差，其发病率远远高于美国，每年超过3000,000。根据败血症发病机制，败血症治疗靶点涉及到抑制炎症反应、抗凝血、抗凋亡等方面，因此对治疗靶点的研究是治疗败血症的关键。
败血症的发病机制是非常复杂的，因此相应的治疗药物、治疗方法、治疗靶点的研究相应滞后。开发新的、有效的败血症治疗药物，首先需要对败血症的发生机制，以及由此导致的器官、系统、组织反应及病理改变有个深入的了解。普遍的发病机制研究认为，细菌进入人体后能否形成感染状态及侵入血循后能否发展成为败血症，与侵入细菌数量的多少和(或)其毒力大小、人体的防御功能与免疫应答强弱等诸多因素均有密切关系。比如皮肤粘膜屏障功能差、胃酸少、肠道通透性高、单核吞噬细胞作用弱、抗体(IgM、血清型和分泌型IgA)及补体浓度低等因素是导致败血症发生的主要因素。但现代科技的发展，对败血症的发病机制及病理反应进行了系统性细化研究。
天然免疫、炎症反应在败血症的早期：天然免疫作为机体防御系统的第一道防线，表现特点为非特异性、反应迅速、有效。病原微生物及相应的毒性成分与TLRs(Toll-like receptors)结合后，激发了细胞内信号传导通路，引发前炎因子，诸如TNF-α、IL-1β和抗炎因子，如IL-10的释放。前炎因子的释放引起中性粒细胞、内皮细胞粘附分子的表达，激活的中性粒细胞发挥清除病原微生物的同时，也损伤了血管内皮细胞，增加了血管的渗透性，使得高渗液体流入到肺或者其他组织中。同时，激活的内皮细胞释放一氧化氮，可以导致血管扩张而引发败血症休克。
获得性免疫扩大天然免疫所带来败血症损伤：某种程度上，获得性免疫是扩大的天然免疫。其中T细胞反应在败血症过程中被修饰。辅助性CD4+T细胞可分为Th1和Th2，而Th1细胞释放TNF-α、IL-1β等前炎因子，Th2细胞则释放IL-4、IL-10等抗炎因子。这种扩大化的天然免疫也是导致败血症发生的一个重要介导因素。从表1中看到，针对免疫分子、炎症分子进行的败血症治疗靶点的研究基本无效。
凝血和抗凝血的平衡：在败血症发生过程中，凝血和抗凝血的平衡某种程度上决定了疾病的最终转归。那么，针对凝血系统开发的各类治疗败血症的药物无不围绕着降低凝血因子的表达，或者提高抗凝血因子的表达来展开。格兰氏染色阴性细菌主要毒力成分LPS，通过上皮细胞上调TF(tissue factor)的表达，从而激活凝血系统瀑布链反应。纤维蛋白(fibrin)的最终形成，可造成血管微血栓的产生，甚至导致进一步的组织损伤。在这个凝血系统的瀑布链反应过程中，各种抗凝血因子也参与其中，包括蛋白C(protein C)、蛋白S(proteinS)、抗凝血酶III(antithrombin III)、TFPI(tissue factor-pathway inhibitor)等来保持凝血系统的一种平衡状态。针对于这些抗凝因子的药物，正在积极研究开发之中。但目前只有APC通过了美国FDA的认证，并真正用到了临床，且有一定的治愈效果。当前对APC治疗机制的研究非常深入，且非常复杂。普遍观点认为：凝血酶α(thrombin-α)首先与内皮细胞上蛋白C受体结合后激活了蛋白C为APC，APC抑制了凝血因子Va和VIIIa的活性，同时抑制了PAI-1(plasminogen-activator inhibitor 1)的表达，而PAI-1是纤溶系统的主要抑制因子。研究还发现，APC具有降低凋亡、吞噬细胞粘附以及细胞因子释放的功能。机体处于败血症状态时，可以检测到低水平的蛋白C、蛋白S、抗凝血酶III和TFPI。LPS和TNF-α可以降低血栓调节蛋白(thrombomodulin)和内皮细胞蛋白C受体表达，从而影响蛋白C的激活；同时也增加了PAI-1的合成，影响纤溶系统的功能。理解败血症病人凝血系统功能改变，为治疗败血症、挽救生命的研究提供帮助。但因为机体凝血系统非常复杂，对该系统所进行的药物开发并不顺利。
败血症后期的免疫抑制和凋亡：造成败血症死亡最重要原因，长期以来被认为是免疫抑制。用LPS刺激败血症的病人，会发现单核细胞的前炎因子和细胞因子的释放量明显降低，就表明了一种抑制状态。多器官功能衰竭原因部分是因为免疫细胞、上皮和内皮细胞的一种抗炎和凋亡的状态。在败血症病人体内，组织免疫细胞的凋亡加快。我们知道凋亡是由前炎细胞因子、激活B/T淋巴细胞和循环中的糖皮质激素细胞启动，而凋亡所有的启动因素，在败血症病人体内是升高的。当然，高表达的TNF-α和LPS是促进败血症病人肺和肠上皮细胞凋亡的重要原因。那么，针对免疫抑制和凋亡进行的败血症治疗靶点的研究，目前并无任何进展。
败血症的治疗国际上已经出台了相应的指南，根据这部指南的要求，针对败血症治疗的研究根据不同发病机制阶段展开。败血症是病原微生物和机体的一种复杂的交互作用产生的一种严重症状，正如刚才所描述的机制研究中提到，在这个过程中，包括了机体免疫反应、炎症反应、凝血系统功能改变、免疫抑制和凋亡等。因此，对于败血症治疗药物的开发也同时涉及了调节机体免疫反应、抗炎症治疗、抗凝血治疗、抗凋亡等多个方面，但真正有效的治疗仅有几种，大部属于抗凝阶段的治疗。在败血症早期中，除了指南里规定的金指标护理外，还包括肺保护的通气措施、广谱抗生素的使用、APC。一旦败血症治疗的金指标护理、肺保护的通气措施、广谱抗生素的使用等措施启动后，就应该考虑APC的使用，APC(active protein C)的使用经APACHE衡量，可显著减少严重败血症病人死亡率达13％，但APC似乎对低危患者无效。APC治疗是广谱的，与导致疾病的微生物种类无关。治疗过程因用药指症掌握不好，很容易导致严重并发症，其中组织严重出血可以导致病人死亡。在一项世界性的APC临床研究中，APC治疗组(2.4-3.5％)发生颅内出血的几率高明显高于安慰剂组(1-2％)。还有一点，APC的治疗非常昂贵，在病人使用APC得到有效治疗后，其花费一般在$20,000-27,000，相当于器官移植的费用。APC治疗有效的机制还不清楚，有涉及到抗炎、抗凝、抗凋亡等诸多报道，因此在其它开发的抗凝药，如抗凝血酶III、TFPI等无效的情况下，有专家预言，对于败血症的治疗，APC只是一个特例。
Factor XI，一种由肝脏和内皮细胞合成的凝血系统因子，主要参与内源性凝血。内源性凝血的启动来源于Factor XII激活为XIIa，XIIa激活Factor XI为Factor XIa，XIa激活Factor IX为Factor IXa。Factor IXa与辅助因子FactorVlla结合成复合体共同激活Factor X为Factor Xa。同时，Factor Xa又和因子Va结合将凝血酶原转变为凝血酶，以此完成内源性凝血的关键部分。Factor XI缺陷(又名plasma thromboplastin antecedent(PTA)deficiency，Rosenthalsyndrome and hemophilia C)是一种常染色体隐性遗传疾病，伴随着出血倾向。大部分Factor XI缺陷病人并没有自动出血倾向，但是在外伤后却会发生严重出血。低血浆水平的Factor XI也发生在其它疾病过中，例如Noonansyndrome。
Gruber A和他的工作人员第一次发现，在CLP(cecal ligation and puncture)的模型中，Factor XI的缺失可以提高小鼠生存率，在其研究中，并没有将其发生的机制进行进一步研究，建议可能与Factor XI缺失可以起到抗凝、抗炎的作用有关。这一建议似乎与APC的发病机制类似，那么Factor XI是否可以用做治疗败血症的研究靶点呢？截至今天，并没有相关报道。发明人前期的研究结果表明，Factor XI很可能是一个新型、安全的败血症治疗靶点。观察凝血系统瀑布链，我们可以发现，APC位于瀑布链中下游，更接近于凝血酶的形成。在对APC临床实验研究表明，APC的治疗剂量及用药方法对结果影响很大，很容易导致组织出血严重并发症的出现，也就是说APC剂量的微调，很可能对凝血酶的形成造成很大影响。而我们选取的Factor XI却位于整个瀑布链的最上游，而且是启动“内源性”凝血的分子。传统观念认为，由感染所导致的凝血系统的启动是由“外源性”凝血系统介入，感染引起组织因子(TF)的释放，进而引起该系统各级酶次第激活，最终引发纤维蛋白的沉积。但最新的研究表明，实际上在严重感染过程中，内源性凝血系统也参与其中。Smiley T S等研究发现，一直以来作为负面报道的纤维蛋白(fibrin)，实际上通过很复杂的机制发挥着止血、免疫保护等双层功能。也就是说，在机体遭受感染过程中，纤维蛋白是机体产生的一种保护性因子。在感染程度较轻时，只有“外源性”凝血系统参与其中，合成必要量的纤维蛋白来发挥免疫保护功能。在这个过程中，合成的纤维蛋白量适中，感染清除，当然感染的清除还依赖其它传统免疫分子的参与。当感染加重时，机体会得到相应的反馈信息--需要更多的纤维蛋白，启动“内源性”凝血系统也许是一种机体的应激状态。我们知道，机体的应激状态是一种在危急状态下各系统的一种“过”反应，可以暂时保护机体免受当前的伤害，但以此导致的副作用也是显而易见的，甚至是更严重的。那么凝血系统的这种应激反应，直接导致的副作用便是纤维蛋白的过度沉积，引发血液系统的高凝状态，在败血症病人体内就是DIC。
Factor XI很可能成为一个重要的治疗靶点是因为一下几点考虑。一，小鼠组织病理实验表明，在Factor XI完全缺失的情况下，即便是高剂量感染，也检测不到明显的出血症状，也就是说“外源性”凝血在严重感染，所沉积的纤维蛋白可以有效的发挥止血、免疫保护作用。这种安全性也许来源于Factor XI在凝血瀑布链上的位置，以及其属于“内源性”凝血系统的特殊性。因此推测Factor XII也可能称为败血症的治疗靶点。二，小动物的实验结果似乎提示我们，和14E11联合使用，可以降低抗生素的用药次数，是一种避免耐药菌株的出现的新方法。基于以上两点，将Factor XI作为败血症的治疗靶点是现实可行的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种败血症治疗的靶点。
一种败血症治疗的靶点，该靶点为Factor XI或Factor XII，通过阻断败血症人体内Factro XI或Factor XII的表达治疗败血症。
所述Factor XI是指位于凝血系统瀑布链中参与外源性凝血系统启动的分子，由激活的Factor XII和钙离子激活。
所述阻断败血症人体内Factro XI或Factor XII的表达通过抗体-14E11或microRNA干扰的方法来实现。
上述败血症治疗靶点是通过以下实验发现：
1)在李斯特菌(L.monocytogenes)感染野生型C57BL/6小鼠模型中，致死剂量组组织中CFU、纤维蛋白沉积、Factor XI呈线性相关，但低剂量组无任何相关性；
2)在李斯特菌(L.monocytogenes)感染的Factor XI基因缺陷型小鼠和其严格对照组中，致死剂量组中，Factor XI基因缺陷可以显著提高小鼠生存率；但低剂量感染组Factor XI对小鼠体重无任何影响；
3)在李斯特菌(L.monocytogenes)感染野生型C57BL/6小鼠模型中，致死剂量组中，Factor XI抗体14E11联合氨卞青霉素可以显著提高小鼠生存率；
4)在流感病毒(PR8)和链球菌(Streptococcus)双重感染的Factor XI基因缺陷型小鼠和其严格对照组中，Factor XI基因缺陷可以显著降低肺组织中的细菌载量(CFU)。
Factor XI基因缺陷在败血症状态下，可以阻断外源性凝血系统的启动，导致纤维蛋白沉积减少，从而改变机体高凝血状态，从而达到挽救生命的目的；抗体14E11的使用不仅可以改善机体的败血症状态，而且可以显著减少抗生素的使用次数、用量，提示可减少抗生素耐药菌株的出现几率。
本发明的有益效果：本发明所述的败血症治疗靶点Factor XI可以显著改善小鼠的生存状态，阻断Factor XI表达的抗体-14E11可为继APC之后治疗败血症的新药，而且因为Factor XI在凝血瀑布链上的特殊位置，其副反应发生率应该明显低于APC。
附图说明
图1低、高剂量李斯特菌感染后CFU、Factor XI、Fibrin表达相关性。
图2低剂量李斯特菌感染正常小鼠、Factor XI基因缺陷、Fibrin基因缺陷小鼠生存状况。
图3高剂量李斯菌菌感染正常小鼠、Factor XI基因缺陷小鼠生存状况。
图4抗体14E11阻断Factor XI表达、李斯特菌感染小鼠生存状况。
图5低、高剂量李斯特菌感染Factor XI基因缺陷小鼠体内凝血因子、细胞因子表达。
图6链球菌感染Factor XI基因缺陷小鼠肺组织细菌载量。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步说明。
下述实施例中，李斯特菌使用腹腔注射，抗体-14E11和抗生素为皮下注射，流感病毒和链球菌为鼻腔感染。
抗体-14E11由特鲁多研究所Stephen Smiley教授长期提供。
Factor XI基因敲除小鼠由美国特鲁多研究所Stephen Smiley教授提供，Factor XI基因敲除小鼠和C57BL/6小鼠(购买于Jackson实验室)交配得到Factor XI HET小鼠。而Factor XI HET与Factor XI HET交配即可筛选到FactorXI WT、Factor XI HET、Factor XI KO三种小鼠类型用于本发明研究。
实施例1、Factor XI作为败血症治疗靶点的确认及验证
1、低剂量(sublethal)和高剂量(lethal)李斯特菌感染后mRNA基因芯片的检测：
(1)腹腔注射李斯特菌(L.monocytogenes，EGD株)于C57BL/6小鼠体内，传代，分离脾脏研磨TSA培养，挑取单克隆TSB培养、计数、-70℃冰箱保存备用。该菌株的LD50为2×106CFU。使用PBS稀释冻存的细菌到所需要的感染剂量，低剂量为0.6-1.0×105CFU，高剂量为2.5-2.7×106CFU，最终的注射体积为200μl。
(2)6-8周C57BL/6小鼠饲养于SPF(specific pathogen free)实验室，定期更换食物、水和辅料。15只小鼠分成三组，分别注射200μl低、高剂量李斯特菌，设立200μlPBS空白对照组，感染后的第三天收获小鼠肝脏，提取mRNA并使用基因芯片(Affymetrix mu 430.2)对样品进行分析。同样的实验至少重复两次。
基因芯片分析结果表明：与PBS空白对照组比较，低剂量李斯特菌感染组小鼠肝脏内可以发现1537个探针表达上调，而高剂量感染组则有2395个探针表达上调。低、高计量组比较发现有795个是重复的，即不管感染剂量如何，这795个探针都是表达上调，因此可以排除不予考虑。510个探针在高剂量感染组中表达上调，而在低剂量感染组中无反应，这510个探针代表了422个基因，其中就包括Factor XI。
2、野生型C56BL/6小鼠感染低、高剂量李斯特菌Factor XI、CFU、纤维蛋白相关性
(1)腹腔注射李斯特菌(L.monocytogenes，EGD株)于C57BL/6小鼠体内，传代，分离脾脏研磨TSA培养，挑取单克隆TSB培养、计数、-70℃冰箱保存备用。该菌株的LD50为2×106CFU。使用PBS稀释冻存的细菌到所需要的感染剂量，低剂量为0.6-1.0×105CFU，高剂量为2.5-2.7×106CFU最终的注射体积为200μl。
(2)6-8周C57BL/6小鼠饲养于SPF(specific pathogen free)实验室，定期更换食物、水和辅料。15只小鼠分成三组，分别注射200μl低、高剂量李斯特菌，设立200μlPBS空白对照组，感染后的第三天收获小鼠肝脏，提取mRNA进行RT-PCR检测Factor XI表达，同时将剩余肝脏组织研磨，于TSA上、37℃培养进行CFU计数。常规Western-blot方法检测肝组织纤维蛋白，纤维蛋白的提取参考文献(Fibrin-mediated Protection Against Infection-stimulatedImmunopathology，JEM，2003)。
采用Prism 4.0对得到的数据进行线性相关性分析，分析结果如图1。在低剂量感染组，CFU、Factor XI、Fibrin无任何相关性，而高剂量感染组则呈显著线性相关，其中纤维蛋白沉积与CFU线性相关(p＜0.0001)，Factor XI与CFU线性相关(p＝0.03)，纤维蛋白与Factor XI线性相关(p＝0.004)。
3、重配后的Factor XI WT、Factor XI HET、Factor XI KO小鼠感染低、高剂量李斯特菌小鼠生存率、组织细菌载量的检测
(1)腹腔注射李斯特菌(L.monocytogenes，EGD株)于C57BL/6小鼠体内，传代，分离脾脏研磨TSA培养，挑取单克隆TSB培养、计数、-70℃冰箱保存备用。该菌株的LD50为2×106CFU。使用PBS稀释冻存的细菌到所需要的感染剂量，低剂量为0.6-1.0×105CFU，高剂量为2.5-2.7×106CFU最终的注射体积为200μl。
(2)Factor XI HET小鼠交配筛选到6-8周Factor XI WT、Factor XIHET、Factor XI KO这种严格对照小鼠组各5只，饲养于SPF(specific pathogenfree)实验室，定期更换食物、水和辅料。分别注射200μl低、高剂量李斯特菌，设立200μlPBS空白对照组，每天给小鼠称重，观察小鼠生存状况，此实验最少重复两次。
(3)Factor XI HET小鼠交配筛选到6-8周Factor XI WT、Factor XIHET、Factor XI KO这种严格对照小鼠组各5只，饲养于SPF(specific pathogenfree)实验室，定期更换食物、水和辅料。分别注射200μl低、高剂量李斯特菌，设立200μlPBS空白对照组，感染后的第三天收获小鼠肝脏组织进行研磨，于TSA上、37℃培养进行CFU计数。此实验最少重复两次。
结果如图2-3所示，在低剂量感染组，所有小鼠都存活下来，且体重呈正常上升趋势，说明Factor XI在普通感染状态下没有作用。在高剂量感染组，65％以上的Factor XI基因缺陷小鼠存活下来，而大部分Factor XI WT、Factor XIHET小鼠死亡(p＝0.04)；在高剂量感染小鼠体内，Factor XI WT、Factor XI KO肝脏组织CFU差异显著(p＝0.0006)，如图5所示，机制未明，推测Factor XI基因缺陷还可能对机体免疫系统有影响。
4、抗Factor XI抗体14E11在败血症治疗中的作用
(1)人体治疗不可能使用基因敲除的方式，为了造成Factor XI表达缺失的状态，我们使用了其抗体14E11。当然造成Factor XI表达缺失的状态还有其他方法，比如microRNA干预等。
(2)腹腔注射李斯特菌(L.monocytogenes，EGD株)于C57BL/6小鼠体内，传代，分离脾脏研磨TSA培养，挑取单克隆TSB培养、计数、-70℃冰箱保存备用。该菌株的LD50为2×106CFU。使用PBS稀释冻存的细菌到所需要的高剂量2.5-2.7×106CFU，最终的注射体积为200μl。
(3)6-8周C57BL/6小鼠饲养于SPF(specific pathogen free)实验室，定期更换食物、水和辅料。15只小鼠分成三组，分别腹腔感染200μl高剂量李斯特菌，感染后第二天，分别皮下注射PBS、氨卞青霉素、氨卞青霉素联合抗体-14E11，观察小鼠生存状态。感染后第三天收获小鼠，脾脏、肝脏组织研磨，TSA上、37℃培养进行CFU计数。此实验最少重复两次。
实验结果显示，与单独注射PBS、氨卞青霉素相比较，氨卞青霉素联合抗体-14E11治疗可显著提高生存率(p＝0.008)，如图4所示。
5、Factor XI缺失在病毒细菌双重感染败血症模型的治疗作用：
(1)SPF鸡胚培养PR8流感病毒，纯化病毒并使用PBS调节病毒浓度，-70℃冰箱保存备用，本实施例的使用剂量500EID50。
(2)链球菌(Streptococcus，ATCC6304)TSB 37℃厌氧培养过夜，紫外分光仪检测OD值，TSA铺板菌落计数，PBS稀释细菌到所需要的感染剂量，最终的鼻腔感染体积为50μl。该菌株的LD50为1.5×104CFU。在实施例中使用感染剂量为1×102CFU。
(3)Factor XI HET小鼠交配筛选到6-8周Factor XI WT、Factor XIHET、Factor XI KO这种严格对照小鼠组各5只，饲养于SPF(specific pathogenfree)实验室，定期更换食物、水和辅料。鼻腔感染50μl的500EID50 PR8流感病毒，每天称重，在感染后第5天鼻腔感染1×102CFU链球菌，观察小鼠的生存状态。链球菌感染后24小时收获双重感染的小鼠，肺组织研磨，TSA上、37℃培养进行CFU计数。此实验最少重复两次。
实验结果显示，所有的小鼠在链球菌感染后24小时全部死亡，说明双重感染所引发后果非常严重，生存率无差异并不能说明Factor XI基因缺陷对链球菌感染所造成的败血症无效。对组织内细菌载量检测显示，Factor XI基因缺陷可以显著降低肺组织内CFU值(p＝0.03)，如图6所示。
实施例2、Factor XI作为败血症治疗靶点机制的探讨
(1)腹腔注射李斯特菌(L.monocytogenes，EGD株)于C57BL/6小鼠体内，传代，分离脾脏研磨TSA培养，挑取单克隆TSB培养、计数、-70℃冰箱保存备用。该菌株的LD50为2×106CFU。使用PBS稀释冻存的细菌到所需要的感染剂量，最终的注射体积为200μl，在本实施例中所谓的低剂量为0.6-1.0×105CFU，高剂量为2.5-2.7×106CFU；
(2)Factor XI HET小鼠交配筛选到6-8周Factor XI WT、Factor XIHET、Factor XI KO这种严格对照小鼠组各5只，饲养于SPF(specific pathogenfree)实验室，定期更换食物、水和辅料。分别注射200μl低、高剂量李斯特菌，设立200μlPBS空白对照组，感染后的第三天收获小鼠，外周血用于各种细胞、血小板计数；肝脏组织进行研磨，于TSA上、37℃培养进行CFU计数；一部分肝组织用于纤维蛋白的检测；一部分肝组织用于RNA提取，检测各种细胞因子和凝血因子的表达；收集小鼠血浆检测纤维蛋白原、TAT(thrombin-antithrombin complexes)水平。此实验最少重复两次。本实施例中外周血细胞计数采用BECKMAN的coulter counter；RT-PCR检测各种细胞因子和凝血因子使用taqman7500；肝组织纤维蛋白沉积量和血浆中纤维蛋白原含量检测采用Western-blot；TAT检测使用Enzygnost TAT micro immunoassay(Dade Berhring)试剂盒。
实验结果如图5所示，分别对高、低剂量组李斯特菌感染的Factor XI WT、FactorXI HET、Factor XI KO小鼠体内纤维蛋白沉淀、纤维蛋白原、TAT、血小板、血浆中IL-6、肝脏中IL-6、IL-10、IL-1β、肝组织内CFU、脾脏内CFU以及其它细胞因子、凝血因子水平进行分析表明，Factor XI基因缺陷所引起的小鼠生存率升高，可能机制非常复杂，牵扯到抗凝、抗炎等各方面。所以认为与抗凝有关，主要是以下几个指标的改变：在高剂量感染组，与野生型小鼠比较，FactorXI基因缺陷可引起肝脏内纤维蛋白沉积减少、血浆中纤维蛋白原含量升高、血浆中TAT含量降低、血液中血小板含量升高；与抗炎有关，主要是对各种炎症因子的检测发现，与野生型小鼠对照，Factor XI基因缺陷可以引起IL-6、IL-10、IL-1β表达降低。
Claims (3)
1.一种败血症治疗的靶点，其特征在于，该靶点为Factor XI或Factor XII，通过阻断败血症人体内Factro XI或Factor XII的表达治疗败血症。
2.根据权利要求1所述一种败血症治疗的靶点，其特征在于，所述Factor XI是指位于凝血系统瀑布链中参与外源性凝血系统启动的分子，由激活的Factor XII和钙离子激活。
3.根据权利要求1所述一种败血症治疗的靶点，其特征在于，所述阻断败血症人体内Factro XI或Factor XII的表达通过抗体-14E11或microRNA干扰的方法来实现。
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