CN102580140A - 一种制备脱细胞生物膜敷料的方法 - Google Patents

一种制备脱细胞生物膜敷料的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，将动物生物膜通过病毒灭活、脱脂、脱细胞、加银、冻干、包装和辐照消毒工艺后得到脱细胞生物膜。本发明的优点：脱脂时间短、效率高、对生物膜组织结构的保护作用强，脱细胞彻底，对生物膜天然结构损害轻，具有抗菌功能的优点。

Description

一种制备脱细胞生物膜敷料的方法
技术领域
本发明涉及一种制备脱细胞生物膜敷料的方法。
背景技术
现代烧伤治疗拯救了大部分严重烧伤患者的生命，由动物生物膜制备而成的生物敷料在烧伤创面得到较广泛的应用。经过脱细胞处理的生物膜去除了生物膜的抗原性成分，覆盖创面后和人体组织相容性好，能促进创面生长，诱导组织再生。已有的脱细胞生物膜材料存在以下不足：操作较复杂，周期较长，效率较低，容易造成生物膜的损坏。因此，需要提供一种新的技术方案来解决上述问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种周期短、效率高、对生物膜天然结构损害轻的制备脱细胞生物膜敷料的方法。
本发明采用的技术方案是：
一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤：
a、制备膜片工艺：将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成网孔状或圆孔状的生物膜，所述生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度0.1%-1.0%的过氧乙酸和质量浓度1.0%-5.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活30-60分钟,生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1: 3-5；
c、脱脂工艺：采用质量浓度1.0%-3.0%纯碱、质量浓度1.0%-3.0%烧碱和质量浓度0.1%-1.0%表面活性剂组成的混合脱脂剂进行脱脂30-60分钟，所述表面活性剂为平平加、十二烷基氨基丙酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚、曲拉酮中的一种,生物膜与混合脱脂剂的质量比为1: 3-5；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.1%-0.3%胰酶、质量浓度0.1%-0.5%激活剂、质量浓度0.2%-0.5%脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞工艺30-60分钟，所述激活剂为质量浓度0.1%-0.3%硫酸铵，所述脱脂剂为质量浓度0.2%-0.5%平平加，质量浓度0.2%-0.5%十二烷基硫酸钠中的一种,生物膜与脱细胞液的质量比为1: 3-5；
    e、含银脱细胞生物膜工艺：将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为：硝酸银 0.3-0.5%、β-环糊精 3.0-5.0%、硝酸钾0.005-0.01% ，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
本发明的有益效果：（1）b步骤采用过氧乙酸和氯化钠溶液组成的病毒灭活溶液进行灭活，既达到了病毒灭活的效果，又避免了过氧乙酸溶液灭活病毒而产生的生物膜肿胀的问题；（2）c步骤中由纯碱、烧碱、表面活性剂组成的混合脱脂剂具有脱脂时间短、效率高、对生物膜组织结构的保护作用强的优点；（3）d步骤中采用酶、激活剂和脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞工艺，具有脱细胞彻底、时间短、效率高，对生物膜天然结构损害轻的优点；（4）e步骤将脱细胞生物膜制备成含银的脱细胞生物膜，具有抗菌功能的优点。
具体实施方式
以下实施例旨在说明本发明而不是对本方明的进一步限定。
实施例1
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤：
a、制备膜片工艺：将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成网孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度0.1%的过氧乙酸和质量浓度1.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活30分钟,生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1: 3；
c、脱脂工艺：采用质量浓度1.0%%纯碱、质量浓度1.0%烧碱和质量浓度0.1%平平加组成的混合脱脂剂进行脱脂30分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1: 3；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.1%胰酶、质量浓度0.1%激活剂硫酸铵、质量浓度0.2%脱脂剂平平加组成的脱细胞液进行脱细胞工艺30分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为1: 3；
    e、含银脱细胞生物膜工艺：将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为：硝酸银 0.3%、β-环糊精 3.0%、硝酸钾0.005% ，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
实施例2
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤：
a、制备膜片工艺：将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成网孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度0.1%的过氧乙酸和质量浓度1.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活30分钟,生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1: 3；
c、脱脂工艺：采用质量浓度1.0%%纯碱、质量浓度1.0%烧碱和质量浓度0.1%平平加组成的混合脱脂剂进行脱脂30分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1: 3；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.1%胰酶、质量浓度0.1%激活剂硫酸铵、质量浓度0.2%脱脂剂十二烷基硫酸钠组成的脱细胞液进行脱细胞工艺30分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为1: 3；
    e、含银脱细胞生物膜工艺：将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为：硝酸银 0.3%、β-环糊精 3.0%、硝酸钾0.005% ，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
实施例3
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤：
a、制备膜片工艺：将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成圆孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度0.5%的过氧乙酸和质量浓度3.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活45分钟,生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1:4；
c、脱脂工艺：采用质量浓度2.0%纯碱、质量浓度2.0%烧碱和质量浓度0.5%十二烷基氨基丙酸钠组成的混合脱脂剂进行脱脂45分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1:4；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.2%胰酶、质量浓度0.3%激活剂硫酸铵、质量浓度0.3%脱脂剂平平加组成的脱细胞液进行脱细胞工艺45分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为1:4；
    e、含银脱细胞生物膜工艺：将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为：硝酸银0.4%、β-环糊精 4.0%、硝酸钾0.008% ，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
实施例4
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤：
a、制备膜片工艺：将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成网孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度0.5%的过氧乙酸和质量浓度3.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活45分钟,生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1:4；
c、脱脂工艺：采用质量浓度2.0%纯碱、质量浓度2.0%烧碱和质量浓度0.5%十二烷基氨基丙酸钠组成的混合脱脂剂进行脱脂45分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1:4；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.2%胰酶、质量浓度0.3%激活剂硫酸铵、质量浓度0.3%脱脂剂十二烷基硫酸钠组成的脱细胞液进行脱细胞工艺45分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为1:4；
    e、含银脱细胞生物膜工艺：将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为：硝酸银0.4%、β-环糊精 4.0%、硝酸钾0.008% ，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
实施例5
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤：
a、制备膜片工艺：将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成圆孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度1.0%的过氧乙酸和质量浓度5.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活60分钟,生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1: 5；
c、脱脂工艺：采用质量浓度3.0%纯碱、质量浓度3.0%烧碱和质量浓度1.0%脂肪醇聚氧乙烯醚组成的混合脱脂剂进行脱脂60分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1:5；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.3%胰酶、质量浓度0.5%激活剂硫酸铵、质量浓度0.5%脱脂剂平平加组成的脱细胞液进行脱细胞工艺60分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为1:5；
    e、含银脱细胞生物膜工艺：将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为：硝酸银0.5%、β-环糊精 5.0%、硝酸钾0.01% ，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
实施例6
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤：
a、制备膜片工艺：将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成圆孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度1.0%的过氧乙酸和质量浓度5.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活60分钟,生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1: 5；
c、脱脂工艺：采用质量浓度3.0%纯碱、质量浓度3.0%烧碱和质量浓度1.0%脂肪醇聚氧乙烯醚组成的混合脱脂剂进行脱脂60分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1:5；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.3%胰酶、质量浓度0.5%激活剂硫酸铵、质量浓度0.5%脱脂剂十二烷基硫酸钠组成的脱细胞液进行脱细胞工艺60分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为1:5；
    e、含银脱细胞生物膜工艺：将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为：硝酸银0.5%、β-环糊精 5.0%、硝酸钾0.01% ，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
c步骤脱脂工艺中，表面活性剂还可以为曲拉酮。
该脱细胞生物膜敷料供医疗机构用于因烧伤、外伤、手术、感染等原因引起的各种创面的覆盖治疗。
本发明中（1）b步骤采用过氧乙酸和氯化钠溶液组成的病毒灭活溶液进行灭活，既达到了病毒灭活的效果，又避免了过氧乙酸溶液灭活病毒而产生的生物膜肿胀的问题；（2）c步骤中由纯碱、烧碱、表面活性剂组成的混合脱脂剂具有脱脂时间短、效率高、对生物膜组织结构的保护作用强的优点；（3）d步骤中采用酶、激活剂和脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞工艺，具有脱细胞彻底、时间短、效率高，对生物膜天然结构损害轻的优点；（4）e步骤将脱细胞生物膜制备成含银的脱细胞生物膜，具有抗菌功能的优点。

Claims (1)

1. 一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，其特征在于，包括以下步骤：
a、制备膜片工艺：将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成网孔状或圆孔状的生物膜，所述生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度0.1%-1.0%的过氧乙酸和质量浓度1.0%-5.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活30-60分钟,生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1: 3-5；
c、脱脂工艺：采用质量浓度1.0%-3.0%纯碱、质量浓度1.0%-3.0%烧碱和质量浓度0.1%-1.0%表面活性剂组成的混合脱脂剂进行脱脂30-60分钟，所述表面活性剂为平平加、十二烷基氨基丙酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚、曲拉酮中的一种,生物膜与混合脱脂剂的质量比为1: 3-5；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.1%-0.3%胰酶、质量浓度0.1%-0.5%激活剂、质量浓度0.2%-0.5%脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞工艺30-60分钟，所述激活剂为质量浓度0.1%-0.3%硫酸铵，所述脱脂剂为质量浓度0.2%-0.5%平平加，质量浓度0.2%-0.5%十二烷基硫酸钠中的一种,生物膜与脱细胞液的质量比为1:3-5；
    e、含银脱细胞生物膜工艺：将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为：硝酸银 0.3-0.5%、β-环糊精 3.0-5.0%、硝酸钾0.005-0.01% ，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
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