CN102413692A - 雌激素受体配体及其使用方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用于降低雄性个体中睾酮水平的方法，所述方法通过降低黄体生成素(LH)进行或与LH水平无关，以及涉及治疗晚期前列腺癌、压制晚期前列腺癌、降低晚期前列腺癌的发病率、降低晚期前列腺癌的严重性、或抑制晚期前列腺癌的方法以及晚期前列腺癌的姑息治疗。

Description

雌激素受体配体及其使用方法
发明领域
本发明涉及用于降低雄性个体的睾酮水平的方法，所述方法通过降低黄体生成素(LH)进行或与LH水平无关，以及涉及治疗晚期前列腺癌、压制晚期前列腺癌、降低晚期前列腺癌的发病率、降低晚期前列腺癌的严重性、或抑制晚期前列腺癌的方法以及晚期前列腺癌的姑息治疗。
发明背景
雌激素指对组织和骨维持重要和有用的一组内源性激素和合成激素。雌激素是参与生殖系统的发育和维持的细胞过程的内分泌调节剂。已经充分确定了雌激素在生殖生物学中的作用——预防绝经后热潮红和预防绝经后骨质疏松。雌二醇是主要的内源性人雌激素，且在女性和男性中均存在。
雌激素和抗雌激素的生物作用通过两种不同的细胞内受体——雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)表现出来。一般地，内源性雌激素是这两种受体亚型的有效激活剂。例如，在许多组织包括乳房、骨、心血管系统和中枢神经系统组织中，雌二醇作为ERα激动剂。通常，选择性雌激素受体调节剂在不同组织中起不同作用。例如，SERM在乳房中可以是ERα拮抗剂，但在子宫、骨和心血管系统中可以是ERα部分激动剂。因此，作为雌激素受体配体的化合物可用于治疗各种病患和病症。
前列腺癌是在美国男性中最经常诊断出的非皮肤癌症之一，并且是癌症死亡第二常见原因，预期今年有超过180000个新病例和差不多29000例死亡。患有晚期前列腺癌的患者接受雄激素剥夺治疗(ADT)，一般通过促黄体激素释放激素(LHRH)激动剂或通过双侧睾丸切除术。雄激素剥夺治疗不仅降低睾酮，还降低雌激素水平，因为雌激素来自睾酮的芳构化，而睾酮水平被ADT降低。雄激素剥夺治疗引起的雌激素缺乏导致明显的副作用，所述副作用包括热潮红、男性乳腺发育和乳腺痛、骨丢失、骨质量和强度降低、骨质疏松和威胁生命的骨折、不利的脂质改变、较高的心血管疾病和心肌梗塞、抑郁和其他情绪改变。据信，ADT的雌激素缺乏副作用中有许多是由ERα介导的。
醋酸亮丙瑞林(Lupron)是天然存在的促性腺激素释放激素(GnRH或LH-RH)的合成九肽类似物。醋酸亮丙瑞林是LH-RH超激动剂(super-agonist)，其最终抑制脑垂体的LH分泌。醋酸亮丙瑞林作为促性腺素分泌的有效抑制剂，导致卵巢和睾丸类固醇合成的抑制。在人类中，给药醋酸亮丙瑞林导致黄体生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)的循环水平的初始增加，导致性腺类固醇(雄性的睾酮和二氢睾酮，以及绝经前雌性的雌酮和雌二醇)水平的短暂增加。然而，连续给药醋酸亮丙瑞林导致LH和FSH的水平下降。在雄性中，睾酮被降低到去势水平(低于50ng/dL)。在绝经前雌性中，雌激素被降低至绝经后水平。睾酮是已知的前列腺癌细胞的刺激物。因此，抑制睾酮分泌或抑制睾酮的作用是前列腺癌治疗的必要组成部分。醋酸亮丙瑞林可用于LH抑制，所述LH抑制是血清睾酮减少和降低至去势水平以治疗强烈腺癌。
在引入LHRH激动剂之前，通过利用雌激素(主要是二乙基己烯雌酚(DES))提高脑垂体中的雌激素活性达到去势睾酮水平。在抑制睾酮至去势水平方面，DES与LHRH激动剂同样有效。用DES治疗的患者不患有热潮红或骨丢失，但患有男性乳腺发育的几率高于用LHRH激动剂的ADT。不幸的是，非常有效的纯雌激素如DES和雌二醇常常与严重的心血管和血栓栓塞性并发症的高风险有关，这限制了它们的临床使用。
本发明的化合物抑制睾酮水平至去势水平，其可用于治疗前列腺癌，同时预防血栓形成事件的风险增加，而且不会导致骨丢失、热潮红和/或男性乳腺发育。
发明概述
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的下文所述的式I-XII的化合物。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的下文所述的式I-XII的化合物，其中所述总血清睾酮的降低通过降低血清黄体生成素水平发生。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的下文所述的式I-XII的化合物，其中所述总血清睾酮的降低与血清黄体生成素水平的降低无关。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的下文所述的式I-XII的化合物，其中所述给药所述式I-XII的化合物预防与雄激素剥夺治疗(ADT)有关的副作用的发生、或治疗与雄激素剥夺治疗有关的副作用，其中所述个体患有前列腺癌。
在一个实施方案中，本发明提供个体的雄激素剥夺治疗的方法，所述方法包括给药治疗有效量的下文所述的式I-XII的化合物。在另一个实施方案中，所述个体患有前列腺癌。
在一个实施方案中，本发明提供治疗晚期前列腺癌、压制晚期前列腺癌、降低晚期前列腺癌的发病率、降低晚期前列腺癌的严重性、或抑制晚期前列腺癌的方法，所述方法包括给药治疗有效量的下文所述的式I-XII的化合物。
在一个实施方案中，本发明提供姑息治疗晚期前列腺癌的方法，所述方法包括给药治疗有效量的下文所述的式I-XII的化合物。
附图简要说明
在本说明书的结论部分特别指出并清楚地要求保护作为本发明的主题。但是，通过在阅读附图时参照以下的具体描述可以最好地理解关于本发明的组织和操作方法及其目标、特征和优点，其中：
图1描述每日30mg/kg口服给药化合物IV(首次给药在第0天)后完整雄猴的血清睾酮水平(实线)和总雄激素水平(虚线)。(参见实施例8.)
图2描述用化合物IV(0.3，1、10、30mg/kg)治疗的完整大鼠的睾酮水平。I表示与完整的载体对照比较，P＜0.05。用图解表示在定量限0.08ng/mL处的BLOQ值。(参见实施例9.)
图3描述化合物IV对17β-HSD5酶活性的抑制效力。(参见实施例12.)
图4描述在DES、17β-雌二醇(E2)和化合物IV的存在下人类血小板的体外聚集。富血小板血浆(PRP)与载体、E2、DES或化合物IV一起温育30秒，然后用0.3单位凝血酶诱导聚集。监测聚集5分钟并用载体对照的百分比表示。(参见实施例13.)
图5是制备化合物II-XII的通用合成路线。(参见实施例1.)
图6是制备化合物IV的合成路线。(参见实施例2.)
图7是制备化合物VI的合成路线。(参见实施例3.)
图8是制备化合物IX和X的合成路线。(参见实施例5.)
图9描述用剂量为3mg/kg、10mg/kg和300mg/kg的化合物IV治疗的完整大鼠在24h、72h和168h后的睾酮水平。(参见实施例9)
图10描述用剂量为0.3mg/kg、1mg/kg、3mg/kg、10mg/kg和30mg/kg的化合物IV治疗的完整大鼠和切除睾丸的(ORX)大鼠的LH水平(图10A)、FSH水平(图10B)、睾酮水平(图10C)、前列腺重量水平(图10D)、精囊重量水平(图10E)和肛提肌重量(图10F)。I表示与完整的载体对照比较，P＜0.05。O表示与ORX载体对照比较，P＜0.05。用图解表示在定量限0.08ng/mL处的BLOQ值。(参见实施例9.)
图11描述通过以不同剂量给药化合物IV(图11A)和DES(图11B)引起的完整大鼠和ORX大鼠的前列腺大小。(参见实施例15.)
图12描述DES和化合物IV之间的区别；DES与糖皮质激素受体(GR)交叉反应，而化合物IV则不然(图12A)；DES与雄激素受体(AR)交叉反应。它温和地刺激AR作用并且温和地抑制(即，它是部分激动剂/拮抗剂)，而化合物IV则不然(图12B)；DES消除雌激素相关受体(ERR)转活，而化合物IV则不然(图12C)。(参见实施例15.)
图13描述5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和30mg/kg剂量的化合物IV在减轻吗啡戒断模型的热潮红方面的效力。N＝7只动物/组。17β-E2在100％DMSO中以5mg/kg使用。(参见实施例14.)
图14描述持续91天给药化合物IV的猴的剂量依赖性体重(kg)减少(～20％，以100mg/kg)。未观察到雄性乳腺发育或雌激素过多的体征。(参见实施例16.)
图15描述与阳性对照(LHRH激动剂)比较，每日口服给药化合物IV后猴的剂量依赖性血清睾酮水平降低(ng/mL)。虚线表示化学去势的患者的睾酮水平，粗虚线表示手术去势猴的睾酮水平。(参见实施例16.)
图16描述在基线和第28天时给药化合物IV的猴的剂量依赖性前列腺特异性抗原(PSA)水平。化合物IV治疗显著降低了PSA水平。(参见实施例16.)
图17描述与阳性对照(LHRH激动剂)相比，使用经直肠超声(TRUS)测量的通过在第6周给药化合物IV引起的剂量依赖性前列腺体积。(参见实施例16.)
图18描述通过给药化合物IV引起的在第90天时猴的剂量依赖性器官重量(前列腺、精囊和睾丸)，作为对照的百分比(图18A)。每日口服给药化合物IV后在第13周尸检时称重猴的前列腺(图18B)。(参见实施例16.)
图19描述通过给药化合物IV(100mg、300mg、600mg和1000mg)，1-11天的时间段内人的剂量依赖性平均总睾酮水平(nmol/L)。(参见实施例17.)
图20描述通过给药化合物IV(100mg、300mg、600mg和1000mg)，1-10天的时间段内人的剂量依赖性平均LH水平(IU/L)。(参见实施例17.)
图21描述通过给药化合物IV(100mg、300mg、600mg和1000mg)，1-10天的时间段内人的剂量依赖性平均游离睾酮水平(pg/L)。(参见实施例17.)
图22描述通过给药化合物IV(100mg、300mg、600mg和1000mg)，1-10天的时间段内人的剂量依赖性平均PSA水平(μg/L)。(参见实施例17.)
图23描述给药化合物IV的14天恢复后完整大鼠的剂量依赖性血清睾酮水平(ng/mL)。I表示与完整对照相比，P＜0.05。(参见实施例10.)
应理解，为了说明的简单清楚，所述图中所示的元件不一定是按比例绘制的。例如，为了清楚，一些元件的尺寸可能相对于其它元件放大。而且，在认为合适的地方，在所述图中可能重复参考数字以指示相应或类似的元件。
发明详述
在以下的详细描述中，叙述了大量的具体细节以提供透彻地理解本发明。然而，本领域技术人员会理解，没有这些具体细节也可以实施本发明。在其它情况下，对公知的方法、过程和组分不作详细描述以便不致使本发明变得含混不清。
在一个实施方案中，本文所述的化合物和/或包含所述化合物的组合物可用于降低雄性个体中总血清睾酮水平。
在一个实施方案中，本文所述的化合物和/或包含所述化合物的组合物可用于降低雄性个体中总血清睾酮水平，其中所述总血清睾酮的降低通过降低血清黄体生成素(LH)水平发生。
在一个实施方案中，本文所述的化合物和/或包含所述化合物的组合物可用于降低雄性个体中总血清睾酮水平，其中所述总血清睾酮的降低与血清黄体生成素水平的降低无关。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式I的结构表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品(pharmaceutical product)、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure BPA00001447795400061
其中
Y是C(O)或CH2；
R1、R2独立地是氢、卤素、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、卤代烷基、芳基、O-Alk-NR5R6或O-Alk-杂环，其中所述杂环是3-7元取代的或未取代的杂环，任选地为芳香性的；
R3、R4独立地是氢、卤素、羟基烷基、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3、NHCOR、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、卤代烷基、芳基或受保护的羟基；
R是烷基、氢、卤代烷基、二卤代烷基、三卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CF2CF3、芳基、苯基、卤素、烯基、CN、NO2或OH；
R5和R6独立地是氢、苯基、具有1-6个碳原子的烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环、5-7元芳基；或者R5和R6与氮原子一起形成3-7元环；
j和k独立地是1-4；
Alk是具有1-7个碳的直链烷基、具有1-7个碳的支链烷基或具有3-8个碳的环烷基。
在本文所述的方法的其他实施方案中，式I的化合物由式IA表示：
Figure BPA00001447795400071
其中R1、R2、R3、R4、j和k如关于式I所定义。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式II的化合物表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure BPA00001447795400081
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式III的化合物表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式IV的化合物表示的化合物、其异构体、药品、药学可接受的盐、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure BPA00001447795400083
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式V的化合物表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure BPA00001447795400091
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式VI的化合物表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式VII的化合物表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式VIII的化合物表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure BPA00001447795400101
在一个实施方案中，本发明提供通过降低患有前列腺癌的雄性个体中黄体生成素(LH)水平来降低总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式IX的化合物表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure BPA00001447795400102
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式X的化合物表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure BPA00001447795400103
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式XI的化合物表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure BPA00001447795400111
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的由式XII的化合物表示的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure BPA00001447795400112
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式IA、I-XII的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，所述雄性个体患有前列腺癌。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于约100ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于约50ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮浓度降至低于约25ng/dL。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式IA、I-XII的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合，其中所述总血清睾酮的降低通过降低血清黄体生成素(LH)水平发生。在另一个实施方案中，所述雄性个体患有前列腺癌。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于约100ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于约50ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮浓度降至低于约25ng/dL。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中游离血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式IA、I-XII的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合，其中所述游离血清睾酮的降低通过降低血清黄体生成素(LH)水平发生。在另一个实施方案中，所述雄性个体患有前列腺癌。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式IA、I-XII的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合，其中所述总血清睾酮的降低与血清黄体生成素(LH)水平的降低无关。在另一个实施方案中，所述雄性个体患有前列腺癌。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于约100ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于约50ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮浓度降至低于约25ng/dL。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中游离血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式IA、I-XII的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合，其中所述游离血清睾酮水平的降低与血清黄体生成素水平的降低无关。在另一个实施方案中，所述雄性个体患有前列腺癌。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平或游离血清睾酮水平的方法，其中所述雄性个体患有前列腺癌。在另一个实施方案中，所述个体患有晚期前列腺癌。
在一个实施方案中，所述睾酮血清浓度的降低是可逆的，并在用本发明的化合物治疗后恢复到基线水平。
在另一个实施方案中，按照图23和实施例10用化合物IV治疗后，睾酮血清浓度是可逆的。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式IA、I-XII的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于约100ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于约50ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于约25ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于约75ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至约75ng/dL-100ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至约50ng/dL-75ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至约40ng/dL-50ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮浓度降至约25ng/dL-50ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至约40ng/dL-60ng/dL。
睾酮可测定表示为“游离”(即，生物可利用的和未结合的)或“总”(包括结合蛋白质的和不可利用的部分)血清水平。没有前列腺癌、年龄大于40岁的男性表现出低睾酮水平，具有小于250ng/dL(＜8.7nmol/L)的总睾酮水平或小于0.75ng/dL(＜0.03nmol/L)的游离睾酮水平。
在一个实施方案中，本发明的方法提供降低患有前列腺癌的雄性个体中总血清睾酮水平和/或游离睾酮水平的方法，所述方法与黄体生成素(LH)水平的降低无关或者通过降低LH水平进行。在另一个实施方案中，睾酮水平的改变应该是自治疗前的水平的降低。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮水平降至低于100ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于50ng/dL。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮降至低于25ng/dL。在另一个实施方案中，所述游离睾酮水平降至低于2ng/dL。在另一个实施方案中，所述游离睾酮水平降至低于1ng/dL。在另一个实施方案中，所述游离睾酮水平降至低于0.5ng/dL。在另一个实施方案中，所述游离睾酮水平降至低于0.25ng/dL。
测定所述游离血清睾酮水平和总血清睾酮水平的方法包括在治疗期的过程中通过血液试验监测睾酮水平。总睾酮是结合载体蛋白(白蛋白、SHBG、运皮质激素蛋白、转铁蛋白)的循环睾酮和游离/未结合激素的组合。总睾酮水平可以受几种因素的影响，包括在体内运载激素的蛋白的血液水平、年龄、肥胖症以及与常用试验方法有关的干扰。
可用于测定游离睾酮(FT)的方法可以是复杂的(平衡透析和计算的游离睾酮(CFT))，或是简单的(商业FT试剂盒″Coat-A-Count″)(使用类似物示踪剂)。在另一个实施方案中，所述总睾酮血清水平和游离睾酮血清水平的测定可以通过同时测定总睾酮和SHBG(例如Irma-Count、DPC)，然后通过计算的游离睾酮(CFT)来实现。在另一个实施方案中，所述总睾酮和游离睾酮的测定是按照本领域技术人员的知识进行的。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平或游离血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的组合，所述组合为一种或多种其他形式的ADT和式IA、I-XII的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合的组合。在另一个实施方案中，总血清睾酮或游离血清睾酮的降低通过降低血清黄体生成素(LH)水平发生。在另一个实施方案中，总血清睾酮水平或游离血清睾酮水平的降低与血清黄体生成素水平的降低无关。
本发明的方法包括给药其他形式的ADT和本发明的化合物的组合。在一个实施方案中，其他形式的ADT包括LHRH激动剂。在另一个实施方案中，所述LHRH激动剂包括醋酸亮丙瑞林(Lupron
Figure BPA00001447795400141
)(US 5,480,656；US 5,575,987；5,631,020；5,643,607；5,716,640；5,814,342；6,036,976，它们全部援引加入本文)或醋酸戈舍瑞林(Zoladex
Figure BPA00001447795400142
)(US 7,118,552；7,220,247；7,500,964，它们全部援引加入本文)。在一个实施方案中，其他形式的ADT包括LHRH拮抗剂。在另一个实施方案中，所述LHRH拮抗剂包括地加瑞克(degarelix)。在一个实施方案中，其他形式的ADT包括抗雄激素。在另一个实施方案中，所述抗雄激素包括比卡鲁胺、氟他胺、非那雄胺、度他雄胺、MDV3100、尼鲁米特、氯地孕酮或它们的任意组合。
在一个实施方案中，本发明的方法包括给药治疗有效量的抗雄激素和本发明的化合物。在一个实施方案中，本发明的方法包括给药治疗有效量的LHRH激动剂和本发明的化合物。在一个实施方案中，本发明的方法包括给药治疗有效量的抗雄激素、LHRH激动剂和本发明的化合物。
在一个实施方案中，本发明提供降低患有前列腺癌的雄性个体中总血清睾酮水平和/或游离睾酮水平以产生雄激素剥夺治疗(ADT)的方法，所述方法通过降低黄体生成素(LH)水平进行或者与黄体生成素水平的降低无关，包括病、病症或症状的方法。每种疾病、病症或症状代表本发明独立的实施方案。
在一个实施方案中，本发明提供降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式IA、I-XII的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合，其中所述给药所述式IA、I-XII的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合预防与雄激素剥夺治疗(ADT)有关的副作用的发生、压制与雄激素剥夺治疗有关的副作用的发生、降低与雄激素剥夺治疗有关的副作用的发生率、抑制与雄激素剥夺治疗有关的副作用的发生、或治疗与雄激素剥夺治疗有关的副作用，其中所述个体患有前列腺癌。在另一个实施方案中，所述总血清睾酮水平或游离血清睾酮水平的降低通过降低LH水平发生或与LH水平的降低无关。
在一个实施方案中，给药本发明的化合物压制与常规雄激素剥夺治疗(ADT)有关的典型副作用的发生、降低与常规雄激素剥夺治疗有关的典型副作用的发生率、抑制与常规雄激素剥夺治疗有关的典型副作用的发生、或治疗与常规雄激素剥夺治疗有关的典型副作用。在另一个实施方案中，所述个体患有前列腺癌。此类预防和/或减少副作用是与安慰剂或对照组比较的。在一个实施方案中，所述与常规雄激素剥夺治疗(ADT)有关的典型副作用包括热潮红、男性乳腺发育、骨矿物质密度降低和骨折增加。在另一个实施方案中，给药本发明的化合物预防热潮红的发生，所述热潮红在使用常规形式的雄激素剥夺治疗(ADT)时会出现。在另一个实施方案中，给药本发明的化合物预防男性乳腺发育的发生，所述男性乳腺发育在使用常规形式的雄激素剥夺治疗(ADT)时会出现。在另一个实施方案中，给药本发明的化合物预防骨矿物质密度降低(BMD)的发生，所述骨矿物质密度降低(BMD)在使用常规形式的雄激素剥夺治疗(ADT)时会出现。在另一个实施方案中，给药本发明的化合物预防骨折增加的发生，所述骨折增加在使用常规形式的雄激素剥夺治疗(ADT)时会出现。在另一个实施方案中，骨折增加是病理性骨折、非创伤性骨折、椎骨骨折、非椎骨骨折、新形态测定骨折(new morphometric fracture)、临床骨折或它们的组合。
在一个实施方案中，术语“常规雄激素剥夺治疗”是指睾丸切除术(手术去势)，其中所述手术去除睾丸。在另一个实施方案中，术语“常规雄激素剥夺治疗”是指给药促黄体激素释放激素(LHRH)类似物：这些药物降低睾丸产生的睾酮的量。在美国可以利用的LHRH类似物的实例包括亮丙瑞林(Lupron、Viadur、Eligard)、戈舍瑞林(Zoladex)、曲普瑞林(Trelstar)和组氨瑞林(Vantas)。在另一个实施方案中，术语“常规雄激素剥夺治疗”是指给药抗雄激素：抗雄激素阻断身体利用任何雄激素的能力。即使在睾丸切除术后或在用LHRH类似物治疗期间，肾上腺仍然产生少量雄激素。抗雄激素药物的实例包括氟他胺(Eulexin)、比卡鲁胺(Casodex)和尼鲁米特(Nilandron)。在另一个实施方案中，术语“常规雄激素剥夺治疗”是指给药促黄体激素释放激素(LHRH)拮抗剂，如阿巴瑞克(Plenaxis)；地加瑞克(Firmagon)是新型LHRH拮抗剂，其于2008年被FDA批准用于治疗晚期前列腺癌。在另一个实施方案中，术语“常规雄激素剥夺治疗”是指给药5α-还原酶抑制剂，如非那雄胺(Proscar)和度他雄胺(Avodart)：5α-还原酶抑制剂阻断身体将睾酮转化为活性更高的雄激素5α-二氢睾酮(DHT)。在另一实施方案中，术语“常规雄激素剥夺治疗”是指给药睾酮生物合成的抑制剂，如酮康唑(Nizoral)：在另一实施方案中，术语“常规雄激素剥夺治疗”是指给药雌激素如二乙基己烯雌酚或17β-雌二醇。
在一个实施方案中，术语“热潮红”指身体上部或全身的突然热感、面和颈部潮红、出现在胸部、背部和手臂上的红斑、大汗、寒颤等。
在一个实施方案中，术语“男性乳腺发育”指由乳房的腺体成分增生导致的男性乳房的良性增大，其可伴有或可不伴有疼痛。男性乳腺发育在临床上由存在自乳头同心圆状扩展的橡胶样块或坚硬块来定义。已知作为假性男子女性型乳房或脂肪性乳房发育症(lipomastia)的病症的特征在于脂肪沉积而无腺体增生。虽然男性乳腺发育通常是双侧的，但它也可以是单侧的。
在一个实施方案中，本发明的方法涉及通过减少睾酮而又不会造成骨丢失和热潮红来治疗患有前列腺癌或晚期前列腺癌的男性。在另一个实施方案中，本发明的方法利用化合物IA、I-XII，其中所述化合物具有减少睾酮(前列腺癌的主要刺激物)而又不会造成现有前列腺癌的雄激素剥夺治疗(ADT)常见的某些副作用例如骨丢失和热潮红的能力。
在另一个实施方案中，下文的表8(实施例11)表明通过给药化合物IV减少了睾酮而又不会造成骨丢失。
在一个实施方案中，本发明的方法涉及通过给药式IA、I-XII的化合物降低睾酮水平，这进一步地治疗晚期前列腺癌。在一个实施方案中，本发明的方法涉及通过给药式IA、I-XII的化合物降低睾酮水平，这进一步地压制晚期前列腺癌、降低晚期前列腺癌的发病率、降低晚期前列腺癌的严重性、或抑制晚期前列腺癌。在一个实施方案中，本发明的方法涉及通过给药式IA、I-XII的化合物降低睾酮水平，这进一步提供晚期前列腺癌的姑息治疗。
在一个实施方案中，本发明的方法涉及治疗晚期前列腺癌。在一个实施方案中，本发明的方法涉及压制晚期前列腺癌、降低晚期前列腺癌的发病率、降低晚期前列腺癌的严重性、或抑制晚期前列腺癌。在一个实施方案中，本发明的方法涉及晚期前列腺癌的姑息治疗。在另一个实施方案中，本发明的方法利用化合物IA、I-XII。在另一个实施方案中，本发明涉及治疗晚期前列腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及压制晚期前列腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及降低晚期前列腺癌的发病率。在另一个实施方案中，本发明涉及降低晚期前列腺癌的严重性。在另一个实施方案中，本发明涉及抑制晚期前列腺癌。
术语“晚期前列腺癌”指转移癌，其起始于前列腺并广泛转移到的前列腺以外如周围组织包括精囊、盆腔淋巴结或骨、或者身体的其它部分。用Gleason分级按照恶性增加的顺序将前列腺癌的病理分为1-5级。在另一个实施方案中，具有进展性疾病和/或因前列腺癌死亡的严重风险的患者应该包括在该定义中，并且，所患癌症位于前列腺被膜之外、疾病阶段低至IIB的患者明显患有“晚期”疾病。
在一个实施方案中，本文提供的方法和/或利用本文提供的化合物的方法有效提供对下丘脑-垂体-睾丸轴(HPT轴)的反馈。反馈指一种器官或组织中给药治疗有效量的式IA、I-XII的化合物。在另一个实施方案中，所述化合物是化合物IV。
在另一个实施方案中，本发明提供在个体中进行雄激素剥夺治疗(ADT)的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式IA、I-XII的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，所述个体患有前列腺癌。在另一个实施方案中，所述化合物是化合物IV。
在另一个实施方案中，ADT用于治疗前列腺癌、延迟前列腺癌的进展、或者预防和/或治疗前列腺癌的复发。
在一个实施方案中，本发明提供治疗前列腺癌、延迟前列腺癌的进展、预防和/或治疗前列腺癌的复发的方法，所述方法包括给药本发明的化合物。在另一个实施方案中，与LHRH类似物、可逆性抗雄激素(如比卡鲁胺或氟他胺)、抗雌激素、抗癌药、5-α还原酶抑制剂、芳香酶抑制剂、孕激素、选择性雄激素受体调节剂(SARM)、或通过其他细胞核激素受体起作用的药剂联合给药本发明的化合物。
在一个实施方案中，本发明提供治疗前列腺癌并降低总血清睾酮水平和/或游离血清睾酮水平的方法，所述方法通过降低LH水平进行或与LH水平的降低无关，包括给药式IA、I-XII的化合物。在另一个实施方案中，给药化合物IV。
雄激素剥夺治疗不仅降低睾酮，还降低雌激素水平，因为雌激素来自睾酮的芳构化。雄激素剥夺治疗引起的雌激素缺乏导致明显的副作用，所述副作用包括热潮红、男性乳腺发育和乳腺痛、骨丢失、骨质量和强度降低、骨质疏松、骨质减少和威胁生命的骨折、不利的脂质改变、较高的心血管疾病和心肌梗塞、性欲降低、阳痿、肌肉量损失(少肌症)、疲劳、认知功能障碍、抑郁和其他情绪改变。
在其他实施方案中，本发明提供治疗与ADT有关的任何疾病、病症或症状的方法。在其他实施方案中，本发明提供治疗与睾酮剥夺有关的任何疾产生的物质调节影响其自身的活动的另一种器官或组织的活动的能力。在一个实施方案中，对下丘脑-垂体-睾丸轴(HPT轴)的反馈引起LH水平降低。在一个实施方案中，对下丘脑-垂体-睾丸轴(HPT轴)的反馈引起总血清睾酮水平降低。在一个实施方案中，对下丘脑-垂体-睾丸轴(HPT轴)的反馈引起游离血清睾酮水平降低。在一个实施方案中，对下丘脑-垂体-睾丸轴(HPT轴)的反馈引起雄激素的血清、组织或肿瘤水平降低。
所述下丘脑-垂体-睾丸(HPT)轴指调节下丘脑、垂体和睾丸中的激素水平的内分泌生理系统。LHRH(促黄体激素释放激素)由下丘脑释放并刺激垂体合成和分泌LH和FSH(促性腺素)。然后，LH和FSH作用于睾丸以刺激睾酮和精子产生。然后，睾酮对下丘脑LHRH分泌具有直接的负反馈作用，并对垂体的LH和FSH产生具有间接的负反馈作用。雌激素、雄激素和血清蛋白质(例如抑制素)对LHRH分泌以及LH和FSH的分泌也具有负性作用。
垂体是控制体内睾酮水平的一种腺体。当睾酮水平低时，垂体释放黄体生成素(LH)。该激素诱导睾丸产生更多睾酮。睾酮水平在青春期增加。睾酮水平在约20-40岁最高，然后在老年男性中逐渐变少。与男性相比，女性体内的睾酮的量小得多。但是，睾酮在男性和女性全身中均起到重要作用。它影响脑、骨和肌肉量、脂肪分布、血管系统、能量水平、生殖组织和性功能。血液中的睾酮大部分与称作性激素结合球蛋白(SHBG)的蛋白质结合或与称作白蛋白的另一种血清蛋白质结合。临床上也可以测定未结合的(或“游离的”)睾酮。
在另一个实施方案中，与血清黄体生成素水平的降低无关的总血清睾酮水平或游离血清睾酮水平降低是由性激素结合球蛋白(SHBG)的增加引起的。在另一个实施方案中，与血清黄体生成素水平的降低无关的游离睾酮水平降低是由性激素结合球蛋白(SHBG)的增加引起的。在另一个实施方案中，与血清黄体生成素(LH)水平的降低无关的总血清睾酮水平或游离血清睾酮水平降低是由睾丸Leydig细胞产生或分泌睾酮的抑制引起的。在另一个实施方案中，与血清黄体生成素(LH)水平的降低无关的总血清睾酮水平或游离血清睾酮水平降低是由肾上腺类固醇合成的减少引起的。
在一个实施方案中，本文所述的化合物和/或包含所述化合物的组合物可用于降低黄体生成素(LH)水平。在另一个实施方案中，本发明的化合物和/或组合物可用于减少内源性性激素。
羟化类固醇脱氢酶(HSD)家族成员参与循环类固醇的转化。17β-HSD5将雄烯二酮转化为睾酮，将雌酮转化为雌二醇。此外，它还参与前列腺素合成。在一个实施方案中，本发明的化合物抑制HSD，特别是17β-羟化类固醇脱氢酶5(17β-HSD5)。此类抑制可通过预防外周/或性腺外睾酮合成而用于ADT，所述外周/或性腺外睾酮合成可能会逃避HPT轴的控制，并导致总血清睾酮或游离血清睾酮的不完全减少或者局部地使细胞内睾酮水平升高，这两种情况中的任一种在ADT中都可能是有害的。
通过LHRH激动剂治疗，即，给药促黄体激素释放激素激动剂(LHRH)或其类似物而实现的雄激素剥夺治疗(ADT)产生从垂体释放促性腺素和从睾丸产生睾酮的初始刺激(称为“突发反应(flare reaction)”)，然后引起促性腺素释放减少以及睾酮和雌激素水平降低。由于雄激素/睾酮水平的增加，LHRH激动剂治疗引起的“突发反应”对前列腺癌的治疗具有负面影响。此外，已将LHRH治疗与糖尿病和心血管疾病的风险增加相关联起来(Smith(2008)CurrentProstate Reports.6：149-154)。
在克服LHRH治疗的突发效应的努力中，已建议抗雄激素单一治疗(比卡鲁胺、氟他胺、氯地孕酮)、联合LHRH/抗雄激素治疗方法、以及LHRH拮抗剂(地加瑞克)(Suzuki等人，(2008)Int.J.Clin.Oncol.13：401-410；Sharifi，N.等人，(2005)JAMA.294(2)：238-244))。抗雄激素单一治疗不降低个体中雄激素水平。已表明，在具有骨转移灶的前列腺癌患者中，比卡鲁胺抗雄激素单一治疗的效力小于ADT。另外，观察到的比卡鲁胺治疗的副作用包括乳房压痛和乳房增大(男性乳腺发育和乳痛症)。(Suzuki等人，同上)。抗雄激素治疗的其他风险包括肝转氨酶升高。(Sharifi等人，同上)。
在一个实施方案中，本发明提供LH水平的降低并由此降低总血清睾酮水平和/或游离血清睾酮水平，但不会产生所述“突发”效应，并且同时克服了与使用常规ADT方法降低睾酮所导致的雌激素缺乏有关的副作用。本发明化合物的方法/用途提供组织选择性的雌激素活性，所述组织选择性的雌激素活性与雌二醇或二乙基己烯雌酚相比，提供骨组织的维持(对骨组织的激动剂效应)、降低血栓形成可能性和/或热潮红、和/或降低或者中和(neutral)对乳房组织的作用。
在一个实施方案中，化合物IV显示激动剂效应但无拮抗效应(实施例6和7)，因此化合物IV不会导致促性腺素和睾酮增加。
在一个实施方案中，化合物IV显示激动剂活性(实施例8-11)，表明减少血清激素睾酮和总雄激素的强大药理学反应。
在一个实施方案中，本文提供的利用本文提供的化合物和/或组合物的方法有效减少或消除由使用常规形式ADT降低LH所引起的骨吸收效应。在一个实施方案中，本文提供的方法和/或利用本文提供的组合物的方法有效减少或消除由使用常规形式ADT减少睾酮水平所引起的骨吸收效应。在一个实施方案中，本文提供的利用本文提供的组合物的方法有效减少或消除LH水平降低导致的雌激素减少所引起的骨吸收效应。在一个实施方案中，本文提供的利用本文提供的化合物和/或组合物的方法预防与使用常规形式ADT降低LH水平有关的骨吸收效应。在一个实施方案中，本文提供的利用本文提供的化合物和/或组合物的方法预防与使用常规形式ADT减少内源性LH、睾酮和/或雌二醇有关的骨丢失。在一个实施方案中，本文提供的利用本文提供的化合物和/或组合物的方法增加骨量密度(BMD)，同时提供LH水平降低。在一个实施方案中，本文提供的利用本文提供的化合物和/或组合物的方法增加百分比骨体积(percent bone volume)，同时提供内源性LH、睾酮和/或雌二醇水平降低。
在一些实施方案中，本发明提供通过给药本发明的化合物、其异构体、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合来避免和/或减少血栓栓塞的方法。
在一个实施方案中，本文提供的利用本文提供的化合物和/或组合物的方法在乳房组织中有效。在一个实施方案中，本文提供的利用本文提供的化合物和/或组合物的方法提供LH水平降低，同时预防与常规ADT所实现的LH水平降低有关的男性乳腺发育。
在一个实施方案中，实施例13公开了特别的毒性研究，其中利用人血小板的体外研究表明化合物IV具有远低于DES的促凝血活性(procoagulatoryactivity)。因此，ER选择性激动剂化合物IV应会向前列腺癌提供DES的益处且发生血栓性事件的风险小于DES，而且还递送LHRH激动剂或拮抗剂的益处而不会引起骨丢失、热潮红或不利的脂质谱(profile)。
单独的或其与其他ADT联合的二乙基己烯雌酚(DES)治疗表明DES预防患有前列腺癌的患者的骨吸收。尽管已经提倡使用DES作为前列腺癌的治疗，但人们仍认为DES对血管发生和恶性肿瘤的效力是由DES代谢物介导的，并且人们不认为是通过雌激素受体起作用。此外，为治疗用途所给药的DES的剂量水平预防很多有害副作用，包括血管疾病、心血管病、血栓性毒性、男性乳腺发育、勃起功能障碍和性欲下降(Scherr和Pitts，同上，以及Presti，J.C.Jr.(1996)JAMA.275(15)：1153-6)。
在一个实施方案中，本发明单独地或者与抗雄激素或DES联合克服了LHRH激动剂或拮抗剂治疗的消极副作用。在另一个实施方案中，本发明的方法提供雄激素剥夺治疗，而没有不利的雌激素剥夺副作用例如不利的骨相关病症，并且没有不利的雌激素刺激副作用例如男性乳腺发育。在另一个实施方案中，本发明的方法提供LH水平的降低并由此降低总血清睾酮水平和/或游离血清睾酮水平，但不会产生所述“突发”效应，同时克服了与LH减少导致的雌激素缺乏有关的副作用，并克服了与观察到的DES治疗的总雌激素激动剂增加(general estrogen agonist increase)有关的副作用。本发明化合物的方法/用途提供组织选择性的雌激素活性，从而提供骨组织的维持(对骨组织的激动剂效应)、降低血栓形成可能性以及中和对乳房组织的作用。
常规的选择性雌激素受体调节剂(SERM)(例如他莫昔芬、托瑞米芬和雷洛昔芬)在下丘脑水平的抗雌激素效应导致男性中促性腺素水平升高或LH水平升高，并从而可能导致睾酮血清水平升高。(Tsouri等人，2008，Fertility andSterility doi：10.1016)。相反，本发明的方法提供男性个体中LH的降低，所述方法包括给药式IA、I-XII的化合物。
式I的化合物的其他实施方案：
在本发明的方法的一个实施方案中，式I的化合物的Y是C(O)。在另一个实施方案中，Y是CH2。在另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R1和R2独立地是O-Alk-NR5R6或O-Alk-杂环。在另一个实施方案中，所述O-Alk-杂环、O-Alk-NR5R6、上文所述的-Alk-杂环和Alk-NR5R6的Alk是具有1-7个碳的直链烷基、具有1-7个碳的支链烷基或具有3-8个碳的环烷基。在另一个实施方案中，所述烷基是亚乙基(-CH2CH2-)。在另一个实施方案中，所述Alk是亚甲基(-CH2-)。在另一个实施方案中，所述Alk是亚丙基(-CH2CH2CH2-)。在另一个实施方案中，所述Alk是2-甲基亚丙基(-CH2CH(CH3)CH2-)。
在本发明的方法的一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R1在对位。在本发明的方法的一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R1和R2不相同。在本发明的方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R1和R2相同。在本发明的方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R1是
Figure BPA00001447795400231
在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R1是羟基。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R1是烷氧基。在所述方法的另一个实施方案中，R1和R2独立地是氢、卤素、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、卤代烷基、芳基、O-Alk-NR5R6或O-Alk-杂环，所述所述杂环是3-7元取代的或未取代的杂环，任选地为芳香性的。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R1和R2独立地是卤素、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、卤代烷基、芳基、O-Alk-NR5R6或O-Alk-杂环，其中所述杂环是3-7元取代的或未取代的杂环，任选地为芳香性的。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R2是卤素。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R2是F。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I的化合物的R2是Cl。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R2是Br。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R2是I。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R2是羟基。在所述方法的另一个实施方案中，R1和/或R2是CF3。在另一个实施方案中，R1和/或R2是CH3。在另一个实施方案中，R1和/或R2是卤素。在另一个实施方案中，R1和/或R2是F。在另一个实施方案中，R1和/或R2是Cl。在另一个实施方案中，R1和/或R2是Br。在另一个实施方案中，R1和/或R2是I。在另一个实施方案中，式I的化合物的R2在对位。
在本发明的方法的一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R3和R4相同。在本发明的方法的一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R3和R4不相同。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的j和k独立地是1。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R3和R4独立地是卤素、卤代烷基或烷基。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R3和R4独立地是F。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R3和R4独立地是Br。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R3和R4独立地是Cl。在另一个实施方案中，R4在对位。在另一个实施方案中，R3在邻位。在另一个实施方案中，R3在间位。在另一个实施方案中，R3和/或R4是CF3。在另一个实施方案中，R3和/或R4是CH3。
在本发明的方法的一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R5和R6与氮原子一起形成3-7元环。在另一个实施方案中，所述环是饱和环或不饱和环。在另一个实施方案中，所述环是取代的或未取代的环。在本发明的方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R5和R6与所述氮形成哌啶环。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R5和R6与所述氮形成吡嗪环。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R5和R6与所述氮形成哌嗪环。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R5和R6与所述氮形成吗啉环。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R5和R6与所述氮形成吡咯环。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R5和R6形成吡咯烷。在所述方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R5和R6与所述氮形成吡啶环。在另一个实施方案中，所述环被卤素、烷基、烷氧基、亚烷基、羟基、氰基、硝基、氨基、酰胺、COOH或醛取代。
在本发明的方法的另一个实施方案中，所述式I或IA的化合物的R1和所述式I或IA的化合物的R2独立地是O-Alk-杂环或OCH2CH2-杂环。在另一个实施方案中，术语“杂环”基在一个实施方案中指这样的环结构，除碳原子外，所述环结构还包含硫、氧、氮或它们的任意组合作为所述环的部分。在另一个实施方案中，所述杂环是3-12元环。在另一个实施方案中，所述杂环是6元环。在另一个实施方案中，所述杂环是5-7元环。在另一个实施方案中，所述杂环是4-8元环。在另一个实施方案中，所述杂环可以是未取代的，或者被卤素、卤代烷基、羟基、烷氧基、羰基、酰氨基、烷基酰氨基、二烷基酰氨基、氰基、硝基、CO2H、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、硫代(thio)和/或硫烷基取代。在另一个实施方案中，所述杂环可以与另一个饱和的或不饱和的环烷基或杂环3-8元环稠合。在另一个实施方案中，所述杂环是饱和环。在另一个实施方案中，所述杂环是不饱和环。在另一个实施方案中，所述杂环是哌啶。在另一个实施方案中，所述杂环是吡啶。在另一个实施方案中，所述杂环是哌啶、吡啶、呋喃、噻吩、吡咯、吡咯烷、吡嗪、哌嗪或嘧啶。
术语“环烷基”指包含碳和氢原子的非芳香性单环或多环。环烷基在环中可以具有一个或多个碳-碳双键，只要所述环不会因为它们的存在而变为芳香性。环烷基的实例包括但不限于(C3-C7)环烷基(例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基)、饱和环萜和二环萜、(C3-C7)环烯基(例如环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基和环庚烯基)以及不饱和环萜和二环萜。环烷基可以是未取代的或者被1或2个取代基取代。优选地，所述环烷基是单环或二环。
在一个实施方案中，术语“烷基”指饱和脂肪族烃，包括直链、支链和环状烷基。在一个实施方案中，所述烷基具有1-12个碳原子。在另一个实施方案中，所述烷基具有1-7个碳原子。在另一个实施方案中，所述烷基具有1-6个碳原子。在另一个实施方案中，所述烷基具有1-4个碳原子。在另一个实施方案中，所述环状烷基具有3-8个碳原子。在另一个实施方案中，所述环状烷基具有3-12个碳原子。在另一个实施方案中，所述支链烷基是被具有1-5个碳的烷基侧链取代的烷基。在另一个实施方案中，所述支链烷基是被具有1-5个碳的卤代烷基侧链取代的烷基。所述烷基可以是未取代的，或者被卤素、卤代烷基、羟基、烷氧羰基、酰氨基、烷基酰氨基、二烷基酰氨基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、硫代和/或硫烷基取代。
在另一个实施方案中，“烯基”指不饱和的烃，包括具有一个或多个双键的直链、支链和环状基团。所述烯基可以具有一个双键、两个双键、三个双键等。在另一个实施方案中，所述烯基具有2-12个碳原子。在另一个实施方案中，所述烯基具有2-6个碳原子。在另一个实施方案中，所述烯基具有2-4个碳原子。烯基的实例是乙烯基、丙烯基、丁烯基、环己烯基等。所述烯基可以是未取代的，或者被卤素、羟基、烷氧羰基、酰氨基、烷基酰氨基、二烷基酰氨基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、硫代和/或硫烷基取代。
“芳基”指具有至少一个碳环芳香性基团或杂环芳香性基团的芳香性基团，所述芳基可以是未取代的，或者被一个或多个选自以下的基团取代：卤素、卤代烷基、羟基、烷氧羰基、酰氨基、烷基酰氨基、二烷基酰氨基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、硫代或硫烷基。芳环的非限制性实例是苯基、萘基、吡喃基、吡咯基、吡嗪基、嘧啶基、吡唑基、吡啶基、呋喃基、苯硫基、噻唑基、咪唑基、异噁唑基等。在一个实施方案中，所述芳基是4-8元环。在另一个实施方案中，所述芳基是4-12元环。在另一个实施方案中，所述芳基是6元环。在另一个实施方案中，所述芳基是5元环。在另一个实施方案中，所述芳基是2-4个环的稠环体系。
在一个实施方案中，“醛”基指被甲酰基取代的烷基或烯基，其中所述烷基或烯基如上文定义。在另一个实施方案中，所述醛基是被甲酰基取代的芳基或苯基，其中所述芳基如上文定义。醛基的实例是：甲酰基、乙缩醛、丙醛、丁醛、戊醛、苯甲醛。在另一个实施方案中，所述醛基是甲酰基。
在另一个实施方案中，“卤代烷基”指被一个或多个卤素原子如被F、Cl、Br或I取代的如上定义的烷基。
在另一个实施方案中，“羟基”指OH基。本领域技术人员理解，当本发明化合物中的R1、R2或R3是OR时，则R不是OH。
在一个实施方案中，术语“卤素”或“卤代”指卤素，如F、Cl、Br或I。
在另一个实施方案中，短语“苯酚”指苯的醇(OH)衍生物。
在一些实施方案中，提及受保护的羟基包括引入与苯环的氧部分连接的取代基，其中所述取代基可以被容易地除去。在一些实施方案中，苯酚的保护基可以包括：甲基醚(甲氧基)、烷基醚(烷氧基)、苄基醚(Bn)、甲氧基甲基(MOM)醚、苯甲酰氧基甲基(BOM)醚、苄基、苄氧羰基(carbobenzoxy)、甲氧基乙氧基甲基(MEM)醚、2-(三甲代甲硅烷基)乙氧基甲基(SEM)醚、甲基硫甲基(MTM)醚、苯基硫甲基(PTM)醚、叠氮基甲基醚、氰基甲基醚、2，2-二氯-1，1-二氟乙基醚、2-氯乙基醚、2-溴乙基醚、四氢吡喃基(THP)醚、1-乙氧基乙基(EE)醚、苯甲酰甲基醚、4-溴苯甲酰甲基醚、环丙基甲基醚、烯丙基醚、炔丙基醚、异丙基醚、环己基醚、叔丁基醚、2，6-二甲基苄基醚、4-甲氧基苄基醚、邻硝基苄基醚、2，6-二氯苄基醚、3，4-二氯苄基醚、4-(二甲基氨基)羰基苄基醚、4-甲基亚磺酰基苄基醚、4-蒽基甲基醚、4-吡啶甲基醚、七氟对甲苯基、四氟-4-吡啶基醚、三甲代甲硅烷基(TMS)醚、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)醚、叔丁基二苯基甲硅烷基(TBDPS)醚、三异丙基甲硅烷基(TIPS)醚、芳基甲酸酯、芳基乙酸酯、芳基乙酰丙酸酯、芳基特戊酸酯(arylpivaloate)、芳基苯甲酸酯、芳基9-芴羧酸酯、芳基甲基碳酸酯、1-金刚烷基碳酸酯、碳酸叔丁酯、4-甲基亚磺酰基苄基碳酸酯、2，4-二甲基戊-3-基碳酸酯、芳基2，2，2-三氯乙基碳酸酯、芳基苄基碳酸酯、芳基氨基甲酸酯、二甲基氧膦基酯(Dmp-OAr)、二甲基膦基亚硫酰基酯(Mpt-OAr)、二苯基膦基亚硫酰基酯(Dpt-OAr)、芳基甲磺酸酯、芳基甲苯磺酸酯或芳基2-甲酰基苯磺酸酯。
在一个实施方案中，本发明的方法利用N，N-二(4-羟基苯基)-4-丙基苯甲酰胺(II)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，本发明的方法利用4，4′-(2，3-二甲基苄基脲二基)联苯酚(4，4′-(2，3-dimethyl-benzylazanediyl)diphenol)(III)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，本发明的方法利用3-氟-N-(4-氟苯基)-4-羟基-N-(4-羟基苯基)苯甲酰胺(IV)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，本发明的方法利用N，N-二(4-羟基苯基)-2，3-二甲基苯甲酰胺(V)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，本发明的方法利用N，N-二(4-羟基苯基)-2-萘基酰胺(VI)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，本发明的方法利用3-氟-4-羟基-N，N-二(4-羟基苯基)-苯甲酰胺(VII)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，本发明的方法利用4-((4-氟苯基)(4-羟基苄基)氨基)苯酚(VIII)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，本发明的方法利用4-氟-N-(4-羟基苯基)-N-[4-(2-哌啶-1-基乙氧基)苯基]-2-三氟甲基苯甲酰胺(IX)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，本发明的方法利用IX的盐酸盐(IX的HCl盐)或4-氟-N-(4-羟基苯基)-N-[4-(2-哌啶-1-基乙氧基)苯基]-2-三氟甲基苯甲酰胺盐酸盐(X)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，本发明的方法利用3-氟-4-羟基-N-(4-羟基苯基)-N-苯基苯甲酰胺(XI)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。在另一个实施方案中，本发明的方法利用3-氟-N，N-二(4-羟基苯基)-2-甲基苯甲酰胺(XII)、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合。
在一个实施方案中，本发明的方法利用所述化合物的“药学可接受的盐”，其可以通过本发明的化合物与酸或碱的反应来制备。
本发明的方法的化合物的胺的合适的药学可接受的盐可以由无机酸或有机酸制备。在一个实施方案中，胺的无机盐的实例是硫酸氢盐、硼酸盐、溴化物、氯化物、半硫酸盐(hemisulfates)、氢溴酸盐、盐酸盐、2-羟乙基磺酸盐(羟乙基磺酸盐(hydroxyethanesulfonates))、碘酸盐、碘化物、异硫代硫酸盐(isothionates)、硝酸盐、过硫酸盐、磷酸盐、硫酸盐、氨基磺酸盐、磺胺酸盐、磺酸(烷基磺酸盐、芳基磺酸盐、卤代烷基磺酸盐、卤代芳基磺酸盐)、磺酸盐和硫氰酸盐。
在一个实施方案中，胺的有机盐的实例可以选自脂肪族类、脂环族类、芳香族类、芳香脂肪族(araliphatic)类、杂环族类、羧酸类和磺酸类有机酸，它们的实例是乙酸盐、精氨酸、天冬氨酸盐、抗坏血酸盐、己二酸盐、邻氨基苯甲酸盐、藻酸盐、链烷羧酸盐、取代链烷羧酸盐、藻酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐，碳酸氢盐、酒石酸氢盐、羧酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐(camphorates)、樟脑磺酸盐、环己基氨基磺酸盐、环戊烷丙酸盐、依地酸钙盐、右旋樟脑磺酸(camsylates)、碳酸盐、克拉微酸钾、肉桂酸盐、二羧酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基磺酸盐、二氢氯化物、癸酸盐、庚酸盐(enanthuates)、乙磺酸盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯十二烷基硫酸盐(estolates)、乙磺酸盐、富马酸盐、甲酸盐、氟化物、半乳糖醛酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐(glycolates)、葡糖酸盐、葡糖庚酸盐(glucoheptanoates)、甘油磷酸盐、葡庚糖酸盐、对羟乙酰氨基苯砷酸盐(glycollylarsanilates)、戊二酸盐、谷氨酸盐、庚酸盐、己酸盐、羟基马来酸盐、羟基羧酸、己基间苯二酚盐(hexylresorcinates)、羟苯酸盐、羟基萘甲酸盐、氢氟酸盐(hydrofluorate)、乳酸盐、乳糖酸盐(lactobionates)、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、亚甲基双(β-萘酚酸盐)(methylenebis(beta-oxynaphthoate))、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐(mesylates)、甲磺酸盐(methane sulfonates)、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基磺酸盐、马来酸单钾盐、粘酸盐、单羧酸盐、硝酸盐、萘磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、萘磺酸盐、N-甲基葡糖胺、草酸酯、辛酸盐、油酸盐、双羟萘酸盐、苯乙酸盐、苦味酸盐、苯基苯甲酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、邻苯二甲酸盐、果胶酸盐(pectinates)、苯丙酸盐、棕榈酸盐、泛酸盐、多半乳糖醛酸盐(polygalacturates)、丙酮酸盐、奎尼酸盐、水杨酸、琥珀酸盐、硬脂酸盐、磺胺酸盐、碱式醋酸盐、酒石酸、茶碱乙酸盐(theophyllineacetates)、对甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐、对苯二酸盐、单宁酸盐、8-氯茶碱盐、三卤代乙酸盐、三乙基碘、三羧酸盐、十一酸盐和戊酸盐。
在一个实施方案中，羧酸或酚的无机盐的实例可以选自铵、碱金属(包括锂、钠、钾、铯)、碱土金属(包括钙、镁、铝)、锌、钡、胆碱、季铵。
在另一个实施方案中，羧酸或苯酚的有机盐的实例可以选自精氨酸，有机胺，包括脂族有机胺、脂环族有机胺、芳族有机胺、苄星青霉素、叔丁胺、苯乙苄胺(N-苄基苯乙胺)、二环己胺、二甲胺、二乙醇胺、乙醇胺、乙二胺、海巴胺(hydrabamine)、咪唑、赖氨酸、甲胺、三聚氰胺(meglamines)、N-甲基-D-葡糖胺、N，N’-二苄基乙二胺、烟酰胺、有机胺、鸟氨酸、吡啶、甲基吡啶、哌嗪、普鲁卡因、三(羟甲基)甲胺、三乙胺、三乙醇胺、三甲胺、氨基丁三醇和脲。
在一个实施方案中，所述盐可以通过常规方法形成，例如在其中所述盐不溶解的溶剂或介质或者例如水的溶剂中，使产物的游离碱或游离酸形式与一或多当量的合适酸或碱反应来形成，在真空中、通过冷冻干燥或通过将存在的盐的离子交换为另一种离子或合适的离子交换树脂来除去所述盐。
在一个实施方案中，本发明的方法利用本发明的化合物的药学可接受的盐。在一个实施方案中，本发明的方法利用式IA、I-XII的化合物的药学可接受的盐。在一个实施方案中，本发明的方法利用本发明的式IA、I-XII的化合物的胺的盐。在一个实施方案中，本发明的方法利用本发明的式IA、I-XII的化合物的苯酚的盐。
在一个实施方案中，本发明的方法利用式IA、I-XII的游离碱、游离酸、不荷电或非络合的化合物和/或其异构体、药品、水合物、多晶型物或它们的组合。
在本发明的一些实施方案中，本发明的化合物包含通过酰胺键结合的三个苯基。在一个实施方案中，本发明的化合物是不荷电的结构。在另一个实施方案中，本发明的化合物是游离碱结构。在另一个实施方案中，本发明的化合物是游离酸结构。在另一个实施方案中，本发明的化合物是非络合的结构。在另一个实施方案中，本发明的化合物是非离子化的结构。在另一个实施方案中，本发明的化合物是药学可接受的盐。在另一个实施方案中，本发明的一些化合物包括盐酸(HCl)盐。
在一个实施方案中，本发明的方法利用式IA、I-XII的化合物的异构体。在一个实施方案中，本发明的方法利用式IA、I-XII的化合物的药品。在一个实施方案中，本发明的方法利用式IA、I-XII的化合物的水合物。在一个实施方案中，本发明的方法利用式IA、I-XII的化合物的多晶型物。在一个实施方案中，本发明的方法利用式IA、I-XII的化合物的代谢物。在另一个实施方案中，本发明的方法利用包含本文所述的式IA、I-XII的化合物的组合物，或者，在另一个实施方案中利用式IA、I-XII的化合物的异构体、代谢物、药品、水合物、多晶型物的组合。
在一个实施方案中，术语“异构体”包括但不限于旋光异构体和类似物、结构异构体和类似物、构象异构体和类似物等。
在一个实施方案中，术语“异构体”是指包括所述化合物的旋光异构体。在一个实施方案中，术语“异构体”是指包括所述化合物的立体异构体。本发明的化合物具有酰胺键，所述酰氨基可以处于其顺式或反式异构化。应理解的是，本发明包括任何旋光或立体异构形式、或者它们的混合物，并且应该认为这些物质用于任何应用的用途在本发明的范围内。
在另一个实施方案中，本发明还包括所述化合物的水合物。在一个实施方案中，术语“水合物”指本领域已知的半水化合物、一水合物、二水合物、三水合物等。
合成方法
例如，通过使取代的二苯基胺与苯甲酸或苯甲酰卤在碱的存在下反应以得到苯甲酰胺，可以容易地制备式I或IA的化合物。在一个实施方案中，所述碱是吡啶。在另一个实施方案中，所述苯甲酰卤是苯甲酰氯。在另一个实施方案中，在所述二苯基胺和所述苯甲酸或苯甲酰卤的反应过程中，羟基取代基是受保护的。在另一个实施方案中，任选地，所述羟基的保护基在最后的步骤中被除去。还参见美国公布2009/00624231，该公布以其整体援引加入本文。
例如，式IA的化合物：
Figure BPA00001447795400321
其中R1、R2、R3和R4、j和k如上所述；
可以通过这样的方法制备，所述方法包括使
Figure BPA00001447795400322
反应以得到
Figure BPA00001447795400323
在碱的存在下，使二苯基胺(3)与
反应以得到
Figure BPA00001447795400331
其中，如果R1、R2、R3和R4独立地是OH、O-Alk-R5R6或O-Alk-杂环，则R1’、R2’、R3’、R4’是受保护的羟基，其中保护基被除去以得到游离羟基，或者任选地然后与Cl-Alk-杂环或Cl-Alk-NR5R6反应以得到式IA的化合物：
其中，如果R1、R2、R3和R4独立地是OH、O-Alk-R5R6或O-Alk-杂环，则R1’、R2’、R3’和R4’分别是R1、R2、R3和R4。
作为另一个实例，式IA的化合物的制备方法：
Figure BPA00001447795400333
其中R1、R2、R3和R4如上所述，
包括使
Figure BPA00001447795400334
Figure BPA00001447795400341
在碱的存在下反应以得到
Figure BPA00001447795400342
其中，如果R1、R2、R3和R4独立地是OH、O-Alk-R5R6或O-Alk-杂环，则R1’、R2’、R3’、R4’是受保护的羟基，其中保护基被除去以得到游离羟基，或者任选地然后与Cl-Alk-杂环或Cl-Alk-NR5R6反应以得到式IA的化合物：
Figure BPA00001447795400343
其中，如果R1、R2、R3和R4独立地是OH、O-Alk-R5R6或O-Alk-杂环，则R1’、R2’、R3’和R4’分别是R1、R2、R3和R4。
在一个实例中，按照实施例1和图5制备化合物II。
在另一个实例中，按照实施例1和图5制备化合物III。
在另一个实例中，式IV的化合物：
可以如下制备：使
在碱的存在下反应以得到
Figure BPA00001447795400352
然后使保护基脱保护以得到化合物IV：
Figure BPA00001447795400353
其中P和P’是相同或不同的保护基。在一个实例中，按照实施例2和图6制备化合物IV。
在另一个实例中，按照实施例1和图5制备化合物V。
在另一个实例中，按照实施例3和图7制备化合物VI。
在另一个实例中，按照实施例1和图5制备化合物VII。
在另一个实例中，按照实施例4和图5制备化合物VIII。
在另一个实例中，按照实施例5和图8制备化合物IX。
在另一个实例中，按照实施例5和图8制备化合物X盐酸盐。
在另一个实例中，按照实施例1和图5制备化合物XI。
在另一个实例中，按照实施例1和图5制备化合物XII。
适合的羟基保护剂包括例如甲基醚(甲氧基)、苄基醚(苯氧基)、甲氧基甲基(MOM)醚、苯甲酰氧基甲基(BOM)醚、苄基、苄氧羰基、甲氧基乙氧基甲基(MEM)醚、2-(三甲代甲硅烷基)乙氧基甲基(SEM)醚、甲基硫甲基(MTM)醚、苯基硫甲基(PTM)醚、叠氮甲基醚、氰基甲基醚、2，2-二氯-1，1-二氟乙基醚、2-氯乙基醚、2-溴乙基醚、四氢吡喃基(THP)醚、1-乙氧基乙基(EE)醚、苯甲酰甲基醚、4-溴苯甲酰甲基醚、环丙基甲基醚、烯丙基醚、炔丙基醚、异丙基醚、环己基醚、叔丁基醚、苄基醚、2，6-二甲基苄基醚、4-甲氧基苄基醚、邻硝基苄基醚、2，6-二氯苄基醚、3，4-二氯苄基醚、4-(二甲基氨基)羰基苄基醚、4-甲基亚磺酰基苄基醚、4-蒽基甲基醚、4-吡啶甲基醚、七氟对甲苯基、四氟-4-吡啶基醚、三甲代甲硅烷基(TMS)醚、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)醚、叔丁基二苯基甲硅烷基(TBDPS)醚、三异丙基甲硅烷基(TIPS)醚、芳基甲酸酯、芳基乙酸酯、芳基乙酰丙酸酯、芳基特戊酸酯、芳基苯甲酸酯、芳基9-芴羧酸酯、芳基甲基碳酸酯、1-金刚烷基碳酸酯、碳酸叔丁酯、4-甲基亚磺酰基苄基碳酸酯、2，4-二甲基戊-3-基碳酸酯、芳基2，2，2-三氯乙基碳酸酯、芳基苄基碳酸酯、芳基氨基甲酸酯、二甲基氧膦基酯(Dmp-OAr)、二甲基膦基亚硫酰基酯(Mpt-OAr)、二苯基膦基亚硫酰基酯(Dpt-OAr)、芳基甲磺酸酯、芳基甲苯磺酸酯或芳基2-甲酰基苯磺酸酯。
本发明的方法包括使用式IA、I-XII的化合物，其中本发明的化合物的制备方法包括二苯基胺与苯甲酰氯在碱的存在下的反应。适合的碱包括例如吡啶、三乙胺、K2CO3、Cs2CO3、Na2CO3、甲胺、咪唑、苯并咪唑、组氨酸、三丁胺或它们的任意组合。在一个实施方案中，所述碱是吡啶。
本发明的方法包括使用式IA、I-XII的化合物，其中本发明的化合物的制备方法包括受保护的羟基的脱保护。在另一个实施方案中，脱保护条件取决于保护基。在一些实施方案中，脱保护步骤包括在Pd/C的存在下氢化。在另一个实施方案中，所述脱保护包括与BBr3反应。在另一个实施方案中，所述脱保护步骤包括与酸反应。
在其他实例中，按照图5-8和实施例1-5制备化合物IA、I-XII。
药物组合物
在一些实施方案中，本发明提供使用方法，所述方法包括给药含有所述化合物的组合物。如本文使用的，“药物组合物”指“治疗有效量”的活性成分(即本发明的化合物)与药学上可接受的载体或稀释剂。如本文使用的，“治疗有效量”指对于给定的病症和给药方案提供疗效的量。
如本文使用的，术语“给药”指使个体与本发明的化合物接触。如本文使用的，给药可以在体外(即试管内)或体内(即活的有机体例如人类的细胞或组织)中进行。在一个实施方案中，本发明包括向雄性个体给药本发明的化合物。
在其他实施方案中，本发明提供本文所述的化合物的药品。在其他实施方案中，术语“药品”指例如如本文所述的适合制药用途的组合物(药物组合物)。
本发明的化合物可以单独或作为制剂的活性成分给药。因此，本发明还包括式I的化合物的药物组合物，其包含例如一种或多种药学可接受的载体。
描述用于制备适于给药本发明的化合物的各种制剂的方法的很多标准参考文献是可以得到的。可能的制剂和制备物的实例包含在例如Handbook ofPharmaceutical Excipients，American Pharmaceutical Association(现行版)；Pharmaceutical Dosage Forms：Tablets(著者Lieberman、Lachman和Schwartz)现行版，Marcel Dekker，Inc.出版，以及Remington′s Pharmaceutical Sciences(著者Arthur Osol)，1553-1593(现行版)。
给药方式和剂型与所述化合物或组合物的合乎给定治疗应用的需要且有效的治疗量密切相关。
适合的剂型包括但不限于口服、直肠、舌下、粘膜、鼻腔、眼、皮下、肌内、静脉内、经皮、脊柱、鞘内、关节内、动脉内、蛛网膜下、支气管、淋巴和子宫内给药，以及用于活性成分的全身递送的其他剂型。优选适于口服给药的制剂。
为了制备此类药物剂型，可以按照常规药物配制技术将活性成分与药用载体混合。根据给药所需的制剂形式，所述载体可以采用各种各样的形式。
在制备口服剂型形式的组合物的过程中，可采用任何常规药用介质。因此，对于液体口服制剂例如混悬剂、酏剂和溶液剂，适合的载体和添加剂包括水、二醇类、油类、醇类、调味剂、防腐剂、着色剂等。对于固体口服制剂例如散剂、胶囊剂和片剂，适合的载体和添加剂包括淀粉、糖类、稀释剂、粒化剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。由于它们易于给药，片剂和胶囊剂代表最有利的口服剂量单位形式。如果需要，可以通过标准技术将片剂包糖衣或肠溶衣。
对于肠胃外制剂，所述载体一般包括无菌水，然而也可以包含其他成分，例如辅助溶解性或用于防腐的成分。还可以制备注射液，在这种情况下可以使用适合的稳定剂。
在一些应用中，使用“载体化的(vectorized)”形式的活性成分可能是有利的，例如将所述活性成分包囊在脂质体或其他包囊介质中，或者通过例如共价键、螯合或缔合配位(associative coordination)将所述活性成分固定在适合的生物分子(例如选自蛋白质、脂蛋白、糖蛋白和多糖的那些)上。
使用适于口服给药的制剂的本发明的治疗方法可以表现为离散单位(例如胶囊剂、扁囊剂、片剂或锭剂)，其各自包含预定量的所述活性成分，所述活性成分为例如粉末或颗粒形式。任选地，可以使用含水液体或不含水液体形式的混悬剂，例如糖浆剂、酏剂、乳剂或顿服水剂(draught)。
片剂可以通过(任选地与一种或多种辅助成分)压缩或模压或者湿法造粒制备。压缩片剂可通过在适当的机器中压缩活性化合物来制备，所述活性化合物为自由流动的形式(例如粉末或颗粒)，其任选地与例如粘合剂、崩解剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂或脱模剂(discharging agent)混合。包含粉末化的活性化合物和适合的载体的混合物的模压片剂可以通过在适合的机器中模压来制备。
糖浆剂可以通过将所述活性化合物添加到糖例如蔗糖的浓水溶液中来制备，也可以向所述浓水溶液中添加任意辅助成分。此类辅助成分可以包括调味剂、适合的防腐剂、延迟所述糖结晶的试剂、和增加任何其他成分的溶解性的试剂例如多羟基醇如乙二醇或山梨醇。
适于肠胃外给药的制剂可以包含所述活性化合物的无菌含水制剂，所述无菌含水制剂优选与受者的血液等渗(例如生理盐水)。此类制剂可以包含助悬剂和增稠剂，以及被设计成使所述化合物靶向血液成分或者一个或多个器官的脂质体或其他微粒系统。所述制剂可以单位剂量或多剂量形式提供。
肠胃外给药可以包括任何适合形式的全身给药。给药可以是例如静脉内、动脉内、鞘内、肌内、皮下、肌内、腹内(例如腹膜内)等，并且可以通过输液泵(外部的或可植入的)或者适于期望的给药方式的任何其他的合适装置来实现。
鼻粘膜和其他粘膜喷雾制剂(例如吸入形式)可以包含所述活性化合物与防腐剂和等渗剂的净化水溶液。优选地，将此类制剂调节到与鼻粘膜或其他粘膜相容的pH和等渗状态。或者，它们可以是悬浮在气体载体中的精细分散的固体粉末的形式。此类制剂可以通过任何合适的装置或方法，例如通过雾化器、喷雾器、定量吸入器(metered dose inhaler)等给药。
用于直肠给药的制剂可以作为具有适合的载体例如可可脂、氢化脂肪或氢化脂肪羧酸的栓剂的形式提供。
经皮制剂可以通过将活性剂掺入触变性的或凝胶状的载体例如纤维素基质如甲基纤维素或羟乙基纤维素中，然后将所得制剂包装在经皮装置中来制备，所述经皮装置适于被固定与佩戴者的皮肤进行真皮接触。
除了前述成分外，本发明的制剂还可以包含一种或多种选自例如稀释剂、缓冲剂、调味剂、粘合剂、崩解剂、表面活性剂、增稠剂、润滑剂、防腐剂(包括抗氧化剂)等的辅助成分。
本发明的制剂可以具有本领域技术人员已知的速释、缓释、迟释(delayed-onset release)或任何其他释放特征。
在一个实施方案中，本发明提供a)降低患有前列腺癌的雄性个体中总血清睾酮水平的方法；b)降低患有前列腺癌的雄性个体中游离血清睾酮水平的方法，所述方法通过降低黄体生成素(LH)进行或者与LH激素的降低无关，包括给药包含式IA、I-XII的化合物的口服组合物。在其他实施方案中，本发明的方法利用包含式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII、式VIII、式IX、式X、式XI或式XII的化合物的组合物。
在一个实施方案中，本发明提供治疗患有前列腺癌的雄性个体的前列腺癌的方法，所述方法通过降低LH水平进行或者与LH水平的降低无关，包括给药包含式IA、I-XII的化合物的口服组合物。在其他实施方案中，本发明提供治疗患有前列腺癌的雄性个体的前列腺癌的方法，所述方法通过降低LH水平进行或者与LH水平的降低无关，包括给药包含式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII、式VIII、式IX、式X、式XI或式XII的化合物的口服组合物。
应该理解，本发明包括本文所述的化合物(在一些实施方案中其被称为“本发明的化合物”)的任何实施方案。
在一个实施方案中，本发明的方法可以包括以各种剂量给药本发明的化合物。在一个实施方案中，以1-1500mg/天的剂量给药本发明的化合物。在其他实施方案中，以1-10mg/天、3-26mg/天、3-60mg/天、3-16mg/天、3-30mg/天、10-26mg/天、15-60mg、50-100mg/天、50-200mg/天、150-300mg/天、20-50mg/天、5-50mg/天、200-500mg/天、150-500mg/天、200-1000mg/天、300-1500mg/天或100-1000mg/天的剂量给药本发明的化合物。
在一个实施方案中，本发明的方法可以包括以各种剂量给药本发明的化合物。在一个实施方案中，以3mg的剂量给药本发明的化合物。在其他实施方案中，以10mg、30mg、50mg、100mg、200mg、300mg、450mg、500mg、600mg、900mg、1000mg或1500mg的剂量给药本发明的化合物。
在一个实施方案中，本发明的方法可以包括以各种剂量给药本发明的化合物。在一个实施方案中，以0.1mg/kg/天的剂量给药本发明的化合物。在其他实施方案中，以0.2-30mg/kg/天或者0.2mg/kg/天、0.3mg/kg/天、1mg/kg/天、3mg/kg/天、5mg/kg/天、10mg/kg/天、20mg/kg/天或30mg/kg/天的剂量给药本发明的化合物。
在一个实施方案中，提供本发明的方法以使用包含式IA、I-XII的化合物的药物组合物。在其他实施方案中，提供本发明的方法以使用包含式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII、式VIII、式IX、式X、式XI或式XII的化合物的药物组合物。
在某些实施方案中，所述药物组合物是固体剂型。在另一个实施方案中，所述药物组合物是片剂。在另一个实施方案中，所述药物组合物是胶囊剂。在另一个实施方案中，所述药物组合物是溶液剂。在另一个实施方案中，所述药物组合物是透皮贴剂。
在一个实施方案中，使用本发明的化合物或包含它的组合物会有利于抑制、压制、增强或促进个体体内所期望的应答，这一点本领域的技术人员会理解。在另一个实施方案中，所述组合物还可以包含其它活性成分，其活性对给药本发明的化合物所针对的具体应用是有用的。
当给药于哺乳动物，特别是人时，预计医师会确定最适合个体的实际剂量和治疗时间，并且可以根据具体个体的年龄、体重、遗传和/或应答而变化。
在一些实施方案中，本发明的任意组合物包含任意形式的或本文所述的任意实施方案中的化合物。在一些实施方案中，本发明的任意组合物由任意形式的或本文所述的任意实施方案中的本发明化合物组成。在一些实施方案中，本发明的任意组合物主要由任意形式的或本文所述的任意实施方案中的本发明化合物组成。在一些实施方案中，术语“包含”指包含所指的活性剂(例如本发明的化合物)以及包含制药产业中已知的其它活性剂和药学上可接受的载体、赋形剂、润滑剂、稳定剂等。在一些实施方案中，术语“主要由…组成”指这样的组合物，其唯一的活性成分是所指的活性成分，然而还可以包含用于制剂的稳定、保存等的其它化合物，但是所述其它化合物不直接参与所指的活性成分的疗效。在一些实施方案中，术语“主要由…组成”可以指促进所述活性成分的释放的组分。在一些实施方案中，术语“由…组成”指含有所述活性成分和药学上可接受的载体或赋形剂的组合物。
应理解，任何本文所述的化合物的任何用途都可以用于治疗本文所述任何疾病、病患或病症，而且代表本发明的实施方案。在一个实施方案中，所述化合物是游离碱、游离酸、不荷电或非络合的化合物。
给出下列实施例是为了更充分地说明本发明的优选实施方案。然而，它们绝不应该被解释为限制本发明的广阔范围。
实施例
实施例1
式II-XII的化合物和合成中间体的通用合成方法
可用于本位所述的组合物的有机溶剂、表面活性剂和抗氧化剂等一般可容易地从商业来源获得。例如，PEG-300、聚山梨酯80、CaptexTM 200、CapmulTM MCM C8可以购自例如Dow Chemical Company(Midland，MI)、ICIAmericas，Inc(Wilmington，DE)或Abitec Corporation(Janesville，WI)。
本文所述的雌激素受体配体可以本领域技术人员公知的多种方法来制备。例如，本文所述的雌激素受体配体可以通过美国专利申请公布2009/0062341(其各自的公开以其整体援引加入本文)所述的合成方法来制备。
N，N-二芳基苯甲酰胺衍生物的通用合成
二芳基苯胺的通用合成(图5)。在室温下将芳基胺(1.5当量)、芳基碘化物(1当量)、K2CO3(2当量)、CuI(0.1当量)和L-脯氨酸(0.2当量)的混合物一起搅拌并溶于无水DMSO中。然后，搅拌反应混合物，并加热到90℃持续28小时。将混合物冷却至室温并用水水解。加入EtOAc以分配溶液。分离EtOAc层，用盐水洗涤，经无水MgSO4干燥。减压除去溶剂。使用5％EtOAc/己烷作为洗脱剂，通过快速柱色谱(硅胶)纯化固体残余物，以得到相应的二芳基苯胺。
二(4-甲氧基苯基)胺(1a)：浅黄色固体，73％收率。M.p.98.6-99.0℃。1HNMR(CDCl3，300MHz)δ6.93-6.81(m，8H)，5.37(s，br，1H)，3.78(s，6H)。MS m/z228.4(M-H)+
N-(4-甲氧基苯基)苯基胺(1b)：浅黄色固体，70％收率。M.p.106.3-106.5℃。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.24-7.18(m，3H)，7.08-7.06(m，2H)，6.92-6.84(m，4H)，5.61(s，br，1H)，3.79(s，3H)。MS m/z 200.1(M+H)+。
N-(4-氟苯基)-N-4-甲氧基苯基胺(1c)：浅黄色固体，54％收率。M.p.60.6-61.0℃。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.01-6.83(m，8H)，3.78(s，3H)。MS m/z217(M)+。
N-(4-苄氧基苯基)-N-4-甲氧基苯基胺(1d)：浅黄色固体，54％收率。M.p.108.0-108.4℃。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.34-7.08(m，5H)，6.90-6.81(s，3H)，3.78(s，3H)。MS m/z 306(M+H)+。
苯甲酰胺的通用合成。在室温下将芳基苯胺(1当量)、苯甲酰氯(1.3当量)和吡啶(6当量)的混合物一起搅拌并溶于无水THF中。将反应混合物搅拌并回流24小时。将反应溶液冷却至室温，并通过加入2N HCl溶液水解。用乙酸乙酯萃取溶液。用饱和NaHCO3水溶液洗涤有机层，以除去过量酸，用无水MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。使用EtOAc/己烷(3/7v/v)，通过快速柱色谱纯化残余物，以得到相应的苯甲酰胺化合物。
3-氟-N-(4-氟苯基)-4-甲氧基-N-(4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(2a)：黄色固体，M.p.54-56℃，1H NMR(CDCl3/TMS)
Figure BPA00001447795400431
7.24-7.11(m，4H)，7.05-6.97(m，4H)，6.85-6.78(m，3H)，3.86(s，3H)，3.79(s，3H)。MS(ESI)m/z 370.1[M+H]+
4-氟-N，N-二(4-甲氧基苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(2b)：无色油，84.2％收率。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.34-7.26(m，4H)，7.09-7.01(m，3H)，6.91(d，2H，J＝8.7Hz)，6.87(d，2H，J＝8.7Hz)，3.80(s，3H)，3.71(s，3H)。MS m/z442.1(M+Na)+。
4-甲氧基-N-(4-甲氧基苯基)-N-(4-氟苯基)苯甲酰胺(2c)：白色固体，97％收率，M.p.133.5.0-134.5℃。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.11-6.66(m，15H)，3.74(s，3H)，3.73(s，3H)。MS m/z 384(M+H)+。
N-(4-甲氧基苯基)-N-(4-苄氧基苯基)-2-萘基胺(2d)：白色固体，58％收率。M.p.174.9-175.5℃。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.04(s，1H)，7.77-7.74(m，2H)，7.64-7.61(m，1H)，7.51-7.43(m，4H)，7.40-7.31(m，4H)，7.13-7.10m，4H)，6.88-6.78(m，4H)，4.99(s，2H)，3.74(s，3H)。MS m/z 460(M+H)+。
4-氟-N，N-二(4-甲氧基苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(2e)：无色油，84.2％收率。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.34-7.26(m，4H)，7.09-7.01(m，3H)，6.91(d，2H，J＝8.7Hz)，6.87(d，2H，J＝8.7Hz)，3.80(s，3H)，3.71(s，3H)。MS m/z442.1(M+Na)+。
使用BBr3使苯甲酰胺衍生物脱甲基化的通用方法。将甲氧基苯甲酰胺化合物溶于无水CH2Cl2。在0℃滴加BBr3(1.0M CH2Cl2溶液)。缓慢地将反应溶液温热至室温并在室温下搅拌过夜。在冰浴中将混合物冷却至0℃并通过加入水进行水解。加入EtOAc以分配溶液。分离有机层，并用EtOAc萃取水层。用盐水洗涤有机层，并经无水MgSO4干燥。减压除去溶剂。使用CH3OH/CH2Cl2(1/9 v/v)，通过快速柱色谱纯化残余物，以得到相应的酚化合物。
4-氟-N，N-二(4-羟基苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(3a)：白色固体，92.5％收率。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ9.55(s，1H)，9.53(s，1H)，7.69-7.58(m，2H)，7.46-7.39(m，1H)，7.18(d，2H，J＝8.7Hz)，6.93(d，4H，J＝8.7Hz)，7.03(d，2H，J＝8.4Hz)，6.78(d，2H，J＝8.7Hz)，6.57(d，2H，J＝8.7Hz)。MS m/z 392.1(M+H)+。
如上文所述合成以下化合物，并进行表征和总结于表1中：N，N-二(4-羟基苯基)-4-丙基苯甲酰胺(II)；3-氟-N-(4-氟苯基)-4-羟基-N-(4-羟基苯基)苯甲酰胺(IV)；N，N-二(4-羟基苯基)-2，3-二甲基苯甲酰胺(V)；3-氟-4-羟基-N，N-二(4-羟基苯基)苯甲酰胺(VII)；3-氟-4-羟基-N-(4-羟基苯基)-N-苯基苯甲酰胺(XI)；和3-氟-N，N-二(4-羟基苯基)-2-甲基苯甲酰胺(XII)。
使苄氧基苯基苯甲酰胺脱苄基化的通用方法。将化合物溶于在250mL氢化瓶中的EtOH中。向溶液中添加Pd/C粉(5％mol)。在压力20psi的氢气下将反应器固定在氢化设备上。通过TLC监控反应，直至原料消失。然后，减压除去溶剂。使用己烷/EtOAc＝3/2v/v，通过快速柱色谱纯化残余物，以得到期望的产物。
如上文所述合成以下化合物，并进行表征和总结于表1中：N，N-二(4-羟基苯基)-2-萘基酰胺(VI)。
还原脱保护的苯甲酰胺的通用方法。在室温下将苯甲酰胺化合物溶于20mL无水THF中。在氩气下，在室温下通过注射器加入H3B(SMe2)。搅拌反应溶液，并加热至回流保持6小时。然后，在0℃下通过加入10mL MeOH终止反应。减压除去溶剂。残余物进行快速柱色谱(硅胶，CH2Cl2/MeOH＝9/1v/v)，以得到期望的产物。
如上文所述合成以下化合物，并进行表征和总结于表1中：4，4′-(2，3-二甲基苄基脲二基)联苯酚(III)；4-((4-氟苯基)(4-羟基苄基)氨基)苯酚(VIII)。
邻(2-哌啶-1-基乙氧基)苯甲酰胺和类似物的通用合成。向含羟基苯基的苯甲酰胺类似物(1当量)在丙酮中的溶液加入K2CO3(3当量)和N-氯乙基哌啶盐酸盐(1.2当量)。将溶液加热至回流保持6小时。蒸发溶液至干燥。通过加入水使残余物水解，然后用乙酸乙酯萃取。分离有机层，并经无水MgSO4干燥。减压除去溶剂。使用二氯甲烷/甲醇＝9/1 v/v，通过快速色谱纯化残余物，以得到期望的化合物。通过将在Et2O中的HCl加入所述化合物的甲醇溶液中，然后蒸发溶剂制备盐酸盐。
如上文所述合成以下化合物，并进行表征和总结于表1中：4-氟-N-(4-羟基苯基)-N-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(IX)；4-氟-N-(4-羟基苯基)-N-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺盐酸盐(X)，其为IX的HCl盐。
表1.式II-XII的化合物的物理学表征。
Figure BPA00001447795400461
Figure BPA00001447795400471
实施例2
式IV的化合物的合成(图6)。
Figure BPA00001447795400472
步骤1：4-氟-N-(4-甲氧基苯基)苯胺(1c)的合成。
在配有搅拌棒、回流冷凝器和氩气进气孔的干燥的1L三颈圆底烧瓶中，将4-氟苯胺(78.63g，0.708mol)、4-碘茴香醚(138.00g，0.590mol)、无水K2CO3(122.23g，0.884mol)、CuI(11.23g，58.96mmol)和L-脯氨酸(13.58g，0.118mol)的混合物一起搅拌。在室温下添加无水DMSO(300mL)。在氩气下搅拌反应混合物并加热到90℃持续20小时。然后，将混合物冷却至室温并用水(300mL)水解。加入EtOAc(200mL)以分配溶液。分离EtOAc层。用100mLEtOAc萃取水层。合并EtOAc层，用盐水(2x100mL)洗涤，经无水MgSO4(50g)干燥。减压除去溶剂。通过快速柱色谱(硅胶，己烷/EtOAc＝9/1 v/v)纯化棕色油状残余物，得到4-氟-N-(4-甲氧基苯基)苯胺(1c)，为黄色固体产物，99.70g，77.8％收率。M.p.46-48℃。MS(ESI)m/z 218.1[M+H]+，1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ7.77(bs，1H)，7.03-6.98(m，4H)，6.93-6.82(m，4H)，3.70(s，3H)。
步骤2：3-氟-N-(4-氟苯基)-4-甲氧基-N-(4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(2a)的合成。
在配有搅拌棒、回流冷凝器和氩气进气孔的干燥的1L三颈圆底烧瓶中，将4-氟-N-(4-甲氧基苯基)苯胺(1c)(90.78g，0.418mol)和3-氟-4-甲氧基苯甲酰氯(94.55g，0.501mol)一起搅拌并溶于无水THF(200mL)中。在氩气下，在室温下通过注射器加入无水吡啶(132.22g，1.672mol)。搅拌反应混合物并加热至回流过夜。然后，将反应混合物冷却至室温，并过滤以除去吡啶盐。浓缩溶液以除去THF溶剂。用200mL 2N HCl溶液洗涤残余油并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。用饱和Na2CO3水溶液(150mL)洗涤合并的有机层，以除去过量的苯甲酰氯和酸，用无水MgSO4(50g)干燥，过滤并减压浓缩，得到油。使用CH2Cl2/丙酮(50/1 v/v)，通过使用硅胶的快速柱色谱纯化残余物，得到相应的纯苯甲酰胺化合物，为黄色固体。M.p.54-56℃。MS(ESI)m/z 370.1[M+H]+，1H NMR(CDCl3/TMS)
Figure BPA00001447795400491
7.24-7.11(m，4H)，7.05-6.97(m，4H)，6.85-6.78(m，3H)，3.86(s，3H)，3.79(s，3H)。
Figure BPA00001447795400492
步骤3：3-氟-N-(4-氟苯基)-4-羟基-N-(4-羟基苯基)苯甲酰胺(IV)的合成。
在氩气下，在室温下将化合物3-氟-N-(4-氟苯基)-4-甲氧基-N-(4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(2a)(138.0g，0.374mol)溶于无水CH2Cl2(600mL)中。在氩气下，于冰浴中在0℃通过注射器在搅拌下滴加BBr3(374.75g，1.496mol)。使反应溶液在室温下搅拌过夜。然后，在搅拌下将溶液倒入1L冰水中。在室温下搅拌此浆状混合物2小时。过滤白色沉淀，用水(2x100mL)洗涤，并真空干燥。分离CH2Cl2层，用无水MgSO4(50g)干燥，过滤，并减压浓缩至干燥。合并所述白色沉淀和来自CH2Cl2溶液的残余物，并通过快速柱色谱(硅胶，CH2Cl2/丙酮/MeOH＝90/7/3 v/v/v)纯化，得到浅褐色固体，将其从热EtOAc/己烷溶液中重结晶两次，得到白色结晶固体，104.0g，81.6％收率。M.p.110-112℃。MS(ESI)m/z 364.1[M+Na]+，1H NMR(DMSO-d6)δ10.14(bs，1H)，9.71(bs，1H)，7.25-7.11(m，5H)，7.05-6.99(m，3H)，6.78(t，J＝8.6Hz，1H)，6.68(d，J＝8.7Hz，2H)。
实施例3
式VI的化合物的合成(图7)。
4-(苄氧基)-N-(4-甲氧基苯基)苯胺(1d)的合成。
在室温下将4-苄氧基苯胺(16.6g，83.31mmol)、4-碘茴香醚(15.0g，64.09mmol)、K2CO3(17.72g，128.18mmol)、CuI(1.22g，6.41mmol)和L-脯氨酸(1.48g，12.82mmol)的混合物一起搅拌并溶于无水DMSO(120mL)中。然后，搅拌反应混合物，并加热到90℃持续48小时。将混合物冷却至室温并用水水解。加入EtOAc以分配溶液。分离EtOAc层，用盐水洗涤，并用无水MgSO4干燥。减压除去溶剂。使用EtOAc/己烷(1/9 v/v)，通过快速柱色谱(硅胶)纯化固体残余物，得到相应的二芳基苯胺，为黄色固体，9.8g，50％收率。M.p.108.0-108.4℃。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.34-7.25(m，5H)，6.90-6.81(m，8H)，5.02(s，2H)，3.78(s，3H)。MS m/z 306(M+H)+。
N-(4-苄氧基苯基)-N-(4-甲氧基苯基)-2-萘甲酰胺(2d)的合成。
在配有磁性搅拌棒和回流冷凝器的干燥三颈圆底烧瓶中，将1当量的4-(苄氧基)-N-(4-甲氧基苯基)苯胺(0.80g，2.62mmol)与1.5当量的2-萘甲酰氯(0.75g，3.93mmol)和4当量的吡啶(0.83g，10.48mmol)一起搅拌。将混合物溶于无水THF(30mL)中，并加热至回流保持20小时。将反应溶液冷却至室温并过滤。减压除去溶剂。使用EtOAc/己烷(3/7 v/v)，通过使用硅胶的快速柱色谱纯化残余物，得到相应的纯萘甲酰胺化合物，为白色固体，0.70g，58％收率。M.p.174.9-175.5℃。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.04(s，1H)，7.77-7.74(m，2H)，7.64-7.61(m，1H)，7.51-7.43(m，4H)，7.40-7.31(m，4H)，7.13-7.10(m，4H)，6.88-6.78(m，4H)，4.99(s，2H)，3.74(s，3H)。MS m/z 460(M+H)+。
N，N-二(4-羟基苯基)-2-萘基酰胺(VI)的合成。
在室温下将化合物N-(4-苄氧基苯基)-N-(4-甲氧基苯基)-2-萘甲酰胺(2d)(0.50g，1.09mmol)溶于无水CH2Cl2(30mL)中。在室温下，通过注射器在搅拌下滴加BBr3(3.26mL 1.0M CH2Cl2溶液，3.26mmol)。使反应溶液在室温下搅拌过夜。在冰浴中将混合物冷却至0℃并通过加入水进行水解。加入EtOAc以分配溶液。分离有机层，并用EtOAc萃取水层两次。合并有机层，用盐水洗涤并经无水MgSO4干燥。真空除去溶剂。使用CH3OH/CH2Cl2(1/9 v/v)，通过使用硅胶的快速柱色谱纯化残余物，得到期望的纯酚化合物，为白色固体，0.27g，70％收率。M.p.264.3-265.2℃(分解的)。1H NMR(DMSO-d6，500MHz)δ9.46(s，2H)，7.98(s，1H)，7.85-7.75(m，2H)，7.75-7.73(m，2H)，7.54-7.48(m，2H)，7.45-7.43(m，1H)，7.05(s，4H)，6.66(s，4H)。MS m/z 356(M+H)+。
实施例4
式VIII的化合物的合成。
Figure BPA00001447795400511
4-((4-氟苯基)(4-羟基苄基)氨基)苯酚(VIII)的合成。
在室温下将化合物N-(4-氟苯基)-4-羟基-N-(羟基苯基)苯甲酰胺(0.30g，0.93mmol)溶于20mL无水THF中。在氩气下，在室温下通过注射器加入H3B(SMe2)(1.86mL 2M THF溶液，3.71mmol)。搅拌反应混合物，并加热至回流保持6小时。然后，在0℃下通过加入10mL MeOH终止反应。减压除去溶剂。残余物进行快速柱色谱(硅胶，CH2Cl2/MeOH＝9/1 v/v)，得到黄色油，0.26g，92％收率。1H NMR(DMSO-d6，500MHz)δ9.29(s，1H)，9.24(s，1H)，7.09(d，2H，J＝8.3Hz)，6.98(d，2H，J＝9.0Hz)，6.94-6.91(m，2H)，6.73(d，2H，J＝9.0Hz)，6.68-6.64(m，4H)，4.70(s，2H)。MS m/z 307.8(M-H)-。
实施例5
式IX和X的化合物的合成(图8)。
二芳基苯胺的合成。在室温下将芳基胺(1.5当量)、芳基碘化物(1当量)、K2CO3(2当量)、CuI(0.1当量)和L-脯氨酸(0.2当量)的混合物一起搅拌并溶于无水DMSO中。然后，搅拌反应混合物，并加热到90℃持续28小时。将混合物冷却至室温并用水水解。加入EtOAc以分配溶液。分离EtOAc层，用盐水洗涤，并用无水MgSO4干燥。减压除去溶剂。使用EtOAc/己烷(3/7 v/v)，通过快速柱色谱(硅胶)纯化固体残余物，得到相应的二芳基苯胺。二(4-甲氧基苯基)胺(1a)：浅黄色固体，73％收率。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ6.93-6.81(m，8H)，5.37(s，br，1H)，3.78(s，6H)。MS m/z 228.4(M-H)+。
4-氟-N，N-二(4-甲氧基苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(2e)的合成。
在配有磁性搅拌棒和回流冷凝器的干燥三颈圆底烧瓶中，将1当量的二(4-甲氧基苯基)胺(1a)(0.73g，3.18mmol)与1.2当量的4-氟-2-三氟甲基苯甲酰氯(0.87g，3.82mmol)和6当量的吡啶(1.51g，19.08mmol)一起搅拌。将混合物溶于无水THF(20mL)中，并加热至90℃保持20小时。将反应溶液冷却至室温并过滤。减压除去溶剂。使用EtOAc/己烷(3/7 v/v)，通过使用硅胶的快速柱色谱纯化残余物，得到相应的纯苯甲酰胺化合物，为无色油，1.12g，84.2％收率。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.34-7.26(m，4H)，7.09-7.01(m，3H)，6.91(d，2H，J＝8.7Hz)，6.87(d，2H，J＝8.7Hz)，3.80(s，3H)，3.71(s，3H)。MS m/z442.1(M+Na)+。
4-氟-N，N-二(4-羟基苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(3a)的合成。
在室温下将化合物4-氟-N，N-二(4-甲氧基苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(2e)(1.00g，2.38mmol)溶于无水CH2Cl2(30mL)中。在室温下，通过注射器在搅拌下滴加BBr3(10mL 1.0M CH2Cl2溶液，10.0mmol)。使反应溶液在室温下搅拌过夜。在冰浴中将混合物冷却至0℃并通过加入水进行水解。加入EtOAc以分配溶液。分离有机层，并用EtOAc萃取水层两次。合并有机层，用盐水洗涤并经无水MgSO4干燥。真空除去溶剂。使用CH3OH/CH2Cl2(1/9 v/v)，通过使用硅胶的快速柱色谱纯化残余物，得到期望的纯酚化合物，为白色固体，0.86g，92.5％收率。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ9.55(s，1H)，9.53(s，1H)，7.69-7.58(m，2H)，7.46-7.39(m，1H)，7.18(d，2H，J＝8.7Hz)，6.93(d，4H，J＝8.7Hz)，7.03(d，2H，J＝8.4Hz)，6.78(d，2H，J＝8.7Hz)，6.57(d，2H，J＝8.7Hz)。MS m/z 392.1(M+H)+。
4-氟-N-(4-羟基苯基)-N-[4-(2-哌啶-1-基)乙氧基)苯基]-2-(三氟甲基)苯甲酰胺的合成。(IX)
向4-氟-N，N-二(4-羟基苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(3a)(0.61g，1.56mmol)在丙酮中的溶液添加K2CO3(1.29g，9.36mmol)和N-氯乙基哌啶盐酸盐(0.34g，1.87mmol)。将溶液加热至回流保持20小时。蒸发溶液至干燥。通过快速色谱(硅胶；二氯甲烷/甲醇＝9/1 v/v)纯化残余物，得到期望的化合物，为白色固体，0.45g，57.7％收率。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ9.57(s，1H)，7.71-7.68(m，2H)，7.47-7.44(m，1H)，7.28(d，1H，J＝9.0Hz)，7.18(d，1H，J＝8.7Hz)，7.13(d，1H，J＝8.7Hz)，7.05(d，1H，J＝8.4Hz)，6.97(d，1H，J＝9.0Hz)，6.80-6.76(m，2H)，6.57(d，1H，J＝87.Hz)，4.06(t，1H，J＝6.0Hz)，3.93(t，1H，J＝6.0Hz)，2.66(t，1H，J＝5.7Hz)，2.55(t，1H，J＝5.4Hz)，2.44(s，2H)，2.36(s，2H)，1.49-1.37(m，6H)。MS m/z 501.0(M-H)-。
通过将在Et2O中的HCl加入所述化合物的甲醇溶液中，然后蒸发溶剂制备盐酸盐(X)。
实施例6
雌激素受体亲合性、激动剂和拮抗剂活性
利用[2，4，6，7-3H(N)]雌二醇([3H]E2)(天然的高亲合性ER配体)和细菌表达的GST融合ER-α或ER-β配体结合域(LBD)蛋白，使用体外竞争放射性配体结合测定，测定了所述化合物的ER亲合性。
方法
将重组ER-α或ER-β与[3H]E2组合以测定[3H]E2的平衡解离常数(Kd)。在4℃，在有和无高浓度的未标记E2的条件下，将蛋白质与浓度渐增的[3H]E2一起温育18h，以测定总结合和非特异性结合。减去非特异性结合，并使用非线性回归测定E2的Kd(ERα：0.71nM；ERβ：1.13nM)。另外，测得使ER-α和ER-βLBD饱和所需的[3H]E2的浓度为4-6nM。
利用上述条件，将浓度渐增的所述化合物(范围：10-11-10-6M)与[3H]E2(5.7nM)和ER LBD一起温育。温育之后，在Unifilter-96 Harvester(PerkinElmer)上用GF/B过滤器收获平板，并用冰冷的缓冲液B(50mM Tris，pH 7.2)洗涤3次。在室温下干燥滤板，然后向各个孔添加35μl Microscint-O鸡尾酒(cocktail)并用TopSeal-A将滤板密封。在TopCount
Figure BPA00001447795400541
NXT MicroplateScintillation Counter上，使用在Microscint鸡尾酒(PerkinElmer)中对3H的设置来计数放射活性。
通过减去[3H]E2的非特异性结合(通过与10-6M未标记的E2一起温育测得)测定在化合物的各个浓度下[3H]E2的特异性结合，并将它表示为不存在试验化合物时的特异性结合的百分比。测定使[3H]E2的特异性结合降低50％的化合物浓度(IC50)。然后通过以下计算化合物的平衡结合常数(Ki)：Ki＝Kd×IC50/(Kd+L)，其中Kd为[3H]E2的平衡解离常数(ER-α＝0.71nM；ER-β＝1.13nM)，且L是[3H]E2的浓度(ER-α：5.7nM；ER-β：5.7nM)。
结果
结合测定揭示配体与范围为3.75nM至大于1000nM的各种浓度的ER-α和ER-β结合，选择性范围为从亚型选择性化合物至非亚型选择性化合物。来自代表性化合物的结果列于表2中。
表2.所选化合物的结合结果
Figure BPA00001447795400542
Figure BPA00001447795400551
化合物IV与ER-α和ER-β结合。利用[2，4，6，7-3H(N)]雌二醇([3H]E2)(天然的高亲合性ER配体)和细菌表达的GST融合ER-α或ER-β配体结合域(LBD)蛋白，使用体外竞争放射性配体结合测定，测定了化合物IV的ER亲合性。在该测定中，化合物IV的ERα和ERβ亲合性(Ki值)分别为21.7±1.7nM(n＝3)和15.2±4.1nM(n＝3)。与ER结合后，化合物IV启动一系列复杂的分子事件，所述分子事件以组织选择性的方式引起与药理学反应有关的靶基因的表达或阻抑。在瞬时转染测定中，化合物IV为ERα和ERβ激动剂，并表明其刺激ERα介导的转录激活的效力高于刺激ERβ介导的转录激活的效力。雌二醇激活ERα和ERβ，其中对ERα的选择性为5.1倍，而化合物IV显示对ERα的选择性为49.0倍。因此，化合物IV在ERα与ERβ相比的相对反式激活效力(归一化为雌二醇的值)方面具有9.7倍的相对选择性。另外，在↑雌二醇(1nM)刺激的雌二醇(1nM)转录激活中，未观察到浓度高至10μM的化合物IV的拮抗效应。虽然许多类固醇配体与其他细胞核激素受体交叉反应，但化合物IV对ERα与ERβ的作用是特异性的。在转录激活测定的激动剂模型和拮抗剂模型中筛选了化合物IV对糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)、孕酮受体(PR)、雄激素受体(AR)的大鼠亚型以及法尼醇X受体(FXR)、肝X受体(LXR)、过氧化物酶体增殖物激活性受体(PPAR-α和PPAR-γ)和类视黄醇X受体(RXR-α)的人类亚型的交叉反应性。在这些测定中的任一个中，化合物IV均未显示任何激动剂或拮抗剂活性，这支持了化合物IV不与这些细胞核激素受体超家族成员进行功能性交叉反应的结论。
实施例7
所选化合物的反式激活
进行激动剂和拮抗剂模式的反式激活测定，以鉴别所述化合物是激动剂、拮抗剂或是部分的。
方法
由大鼠卵巢cDNA将大鼠雌激素受体(ER-α和ER-β)克隆进pCR3.1质粒载体骨架中。进行测序以确定不存在任何突变。以24孔板的每孔100,000细胞，将HEK-293细胞接种在达尔伯克必需基本培养基(DMEM)+5％活性炭处理胎牛血清(charcoal-stripped fetal bovine serum)(csFBS)中。使用具有0.25μgERE-LUC、0.02μg CMV-LUC(海肾荧光素酶(renilla luciferase))和12.5ng大鼠ER-α或25ng大鼠ER-β的Lipofectamine(Invitrogen，Carlsbad，CA)转染细胞。转染后，用各种浓度的化合物或化合物与雌二醇的组合处理细胞24小时，以测定拮抗活性。转染后，进行荧光素酶测定，持续48小时。
结果
在反式激活体系中对本发明化合物的筛选揭示，所述化合物属于全部所述三个种类，即激动剂、拮抗剂和部分激动剂。表3提供激动剂和拮抗剂的实例。反式激活的结果与亚型选择性的结合结果匹配得极好。
表3提供一些所选的本发明化合物的EC50和IC50反式激活值。
表3.所选的本发明化合物的反式激活(激动剂和拮抗剂)。
Figure BPA00001447795400581
实施例8
在食蟹猴中的睾酮抑制
在该研究期间，按照USDA Guidelines饲养2年龄的性腺完整的雄性食蟹猴(n＝2)，自由获取灵长类动物食物和水(除在口服剂量给药前禁食以外)。每天一次灌胃给予动物30mg/kg剂量的式IV的化合物，连续7天，所述化合物在Tween 80/去离子水的微乳载体中。在口服剂量给药前、第1天(基线)、第3、4、5、6和7天通过静脉穿刺取血样。使用酶免疫测定(EIA)法，在与或不与HPLC方法结合的条件下，分别定量睾酮和总雄激素。用式IV的化合物治疗6天后，睾酮和总雄激素(睾酮/二氢睾酮)出现明显的时间依赖性减少。相对于基线值(见图1的实线；表4)，式IV的化合物分别将动物#1和动物#3中的睾酮水平抑制了58％和64％。类似地，与基线值相比，在动物#1和动物#3中，总雄激素水平均被抑制了56％(见图1中的虚线；表4)。
与雄性中垂体-睾丸轴的雌激素反馈相一致，这些结果表明，在重复口服给药(30mg/kg)式IV的化合物后，在完整非人类灵长类动物(食蟹猴)中出现强大的抑制血清激素(睾酮和总雄激素)的药理学反应。
表4.每天口服给药30mg/kg式IV的化合物(在第0天第一次给药)的完整雄猴的血清中的睾酮和总雄激素水平。
Figure BPA00001447795400591
实施例9
大鼠LH和睾酮激素水平的抑制
在完整的和切除睾丸的(ORX)雄性大鼠中进行体内剂量-反应研究，以评价化合物IV对LH抑制的效力。在完整的和ORX动物中，当与相应的对照比较时，剂量≥10mg/kg/天的化合物IV显著地抑制LH水平。(在FSH水平方面观察到相同的抑制模式。)LH抑制引起睾酮水平剧烈地降低到低于定量限(BLOQ)(所述定量限为0.08ng/mL)，并引起前列腺、精囊和肛提肌的重量减少，因为这些是高度依赖雄激素的器官。在完整动物中，观察到这些靶器官重量的剂量依赖性减少，其中精囊和肛提肌重量达到去势对照的水平。虽然完整动物中的前列腺重量显著减少，但是这些值没有达到去势对照的水平。结果概述于下表6中。
材料和方法：
将重量约200g的雄性Sprague-Dawley大鼠维持在12-h明/暗循环中，食物(2016 Teklad Global 16％ Protein Rodent Diet，Harlan，Madison，WI)和水可自由获取。动物实验方案经Institutional Animal Care and Use Committee of theUniversity of Tennessee审阅并批准。
称量用于该研究的试样并溶于10％的用PEG 300(Acros Organics，NJ)稀释的DMSO(Fisher)，以制备合适剂量的制剂。对于此研究，通过体重随机选取六十(60)只雄性Sprague-Dawley大鼠，并分入12个治疗组(n＝5只动物/组)之一。治疗组列于表5。以每笼2-3只动物分组饲养这些动物。对照组(完整的和切除睾丸的(ORX))每天给药载体。在完整的和ORX组中，通过皮下注射(200μL)以0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量给药化合物IV。
在14天的给药方案之后，麻醉(氯胺酮/赛拉嗪，87∶13mg/kg)下处死动物，并记录体重。
另外，取出前列腺腹叶、精囊和肛提肌，清理外部组织，并分别称重。将器官重量归一化成体重并表示为完整对照的百分比。在异氟烷麻醉下从腹主动脉采集血液并使其凝固。通过离心分离血清，并且在测定血清激素水平之前储存在-80℃。利用Rat Pituitary Luminex Assay(Millipore，Billerica，MA)，按照生产商的说明书测定血清黄体生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)的浓度。该测定的定量下限对于LH为3.2pg/mL和对于FSH为32pg/mL。通过Testosterone EIA(Alpco Diagnostics，Salem，NH)，用0.08ng/mL LLOQ测定睾酮。从组平均值的分析中删除低于定量下限(BLOQ)的血清激素值。因此，具有样品BLOQ的组的LH和T的报告值高于实际值。该分析方法提供LH和T抑制的最保守估计。使用费雪最小显著差异检验将各剂量组与完整载体对照组和ORX载体对照组进行比较。显著性先验(a priori)定义为P值＜0.05。
表5.治疗组。
  组   性腺状态   剂量(mg/kg/天)   试样
  1   完整的   --   载体
  2   ORX   --   载体
  3   完整的   0.3   化合物IV
  4   完整的   1   化合物IV
  5   完整的   3   化合物IV
  6   完整的   10   化合物IV
  7   完整的   30   化合物IV
  8   ORX   0.3   化合物IV
  9   ORX   1   化合物IV
  10   ORX   3   化合物IV
  11   ORX   10   化合物IV
  12   ORX   30   化合物IV
完整大鼠和ORX大鼠中的黄体生成素水平(表6)
完整载体对照组和ORX载体对照组的LH水平(平均值±SD)分别为1.46±0.64和11.1±3.9ng/mL。化合物IV剂量依赖性地降低完整动物的LH水平，日剂量≥3mg/kg时达到统计学显著的降低。按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，化合物IV治疗的完整动物的LH水平分别为0.863±0.384、0.704±0.530、0.395±0.302、0.226±0.165和0.236±0.176ng/mL。通过化合物IV治疗，ORX雄鼠的LH水平也显著降低了。在ORX动物中，按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，LH水平分别为15.4±2.9、13.5±2.2、6.5±5.6、0.425±0.135和0.368±0.119ng/mL。结果图示于图10A。
完整大鼠和ORX大鼠中的促卵泡激素水平(表6)
完整载体对照组和ORX载体对照组的血清FSH水平分别为20.9±8.5和93.5±13.8ng/mL。在完整动物中，化合物IV剂量依赖性地降低FSH水平，在剂量≥10mg/kg/天时观察到显著的降低。按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，化合物IV治疗的完整动物的FSH水平分别为17.3±6.4、15.7±7.3、18.4±7.7、9.2±4.0和6.3±1.8ng/mL。在ORX动物中，按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，LH水平分别为115±17、114±22、65.2±31.9、27.6±8.2和15.1±4.1ng/mL。结果图示于图10B。
完整大鼠和ORX大鼠中的睾酮水平
完整载体对照组中的血清睾酮水平为2.4±1.1ng/mL。T的定量下限为0.08ng/mL。将小于0.08ng/mL的值定为低于定量限(BLOQ)。在完整动物中，式IV的化合物剂量依赖性地降低T水平，在剂量≥3mg/kg/天时观察到显著的降低。按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，用式IV的化合物治疗的完整动物的睾酮水平分别为2.6±1.7、1.6±1.0、0.7±0.4、BLOQ和BLOQ ng/mL。在ORX动物中，用化合物IV治疗的所有组和载体治疗组的T水平为BLOQ。完整动物的结果图示于图10C(和图2)中(为了绘图，将BLOQ值表示在定量限处)。
通过给药剂量为3mg/kg、10mg/kg和300mg/kg的化合物IV，在24h、72h和168h后测定完整雄性大鼠中的血清睾酮的快速和有效抑制，如图9所示。
器官重量(表6)
测定前列腺、精囊和肛提肌的重量以证实T的抑制。器官重量(平均值±SD)分别示于图10D、10E和10F。在用化合物IV治疗的完整动物中观察到前列腺、精囊和肛提肌重量的剂量依赖性降低。按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，完整动物的前列腺重量分别为84.0±19.2、75.2±20.7、68.2±8.1、45.1±20.0和43.6±8.8。按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，ORX动物的前列腺重量分别为19.0±4.2、17.4±3.4、19.6±6.7、22.9±5.4和20.6±2.1。按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，完整动物的精囊重量分别为76.2±7.8、66.3±27.2、51.8±28.5、19.1±7.0和17.9±3.3。按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，ORX动物的精囊重量分别为12.2±1.3、16.6±5.4、16.5±4.8、13.3±1.9和12.9±2.1。按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，完整动物的肛提肌重量分别为86.9±10.0、82.1±12.1、65.2±4.4、57.8±11.2和58.1±4.7。按照0.3、1、3、10和30mg/kg/天的剂量，ORX动物的肛提肌重量分别为54.5±6.6、49.6±7.0、53.6±10.0、51.1±4.9和49.2±4.2。
LH抑制和器官重量数据总结于表6中。
表6.式IV的化合物对血清激素和器官重量的体内效力
Figure BPA00001447795400631
Figure BPA00001447795400641
a P＜0.05对比完整载体。b P＜0.05对比ORX载体。
实施例10
用化合物IV抑制后大鼠和猴的睾酮水平的恢复
研究了使用化合物IV的化学去势的可逆性。
材料和方法：
将重量约200g的三十五(35)只雄性Sprague-Dawley大鼠维持在12-h明/暗循环中，食物(2016 Teklad Global 16％ Protein Rodent Diet，Harlan，Madison，WI)和水可自由获取。动物实验方案经Institutional Animal Care and Use Committeeof the University of Tennessee审阅并批准。
称量用于该研究的试样并溶于PEG 300(100％)(Acros Organics，NJ)中，以制备合适剂量的制剂。动物随机分配入十个治疗组之一中(n＝5只动物/组)。治疗组列于表7。以每笼2-3只动物分组饲养这些动物。在该研究开始时(第1天)处死组1，以测定完整动物的基线睾酮水平。组2-7通过灌胃(～200uL)接受1、3或30mg/kg的日剂量，持续3天。在第4天处死组2、3和4，以测定最大睾酮抑制。通过停药冲洗期(drug free washout period)，使组5、6和7恢复14天。
表7.治疗组。
结果：
在基线时，完整大鼠的血清睾酮水平为6.4±3.1ng/mL(平均值±S.D)。化合物IV以3和30mg/kg的剂量持续3天给药分别显著地将血清睾酮水平抑制到1.47±0.26和1.62±0.49ng/mL。在持续3天接受1mg/kg的化合物IV的动物中未观察到显著的抑制。最重要的是，在14天的恢复期之后进行测定时，持续3天接受1、3或30mg/kg化合物IV的动物的血清睾酮水平分别为3.3±1.92、3.00±1.06和3.8±1.72，并与完整大鼠的基线血清睾酮浓度没有统计学显著的差异，如图23所示。
该研究证实了之前的结果，表明化合物IV迅速抑制完整雄性大鼠的血清睾酮水平。我们观察到持续3天接受≥3mg/kg/天的剂量组的血清睾酮水平的抑制。在1mg/kg的剂量组中未观察到血清睾酮的显著降低。然而，在14天的恢复中，血清睾酮水平恢复至完整对照的水平。该研究表明，在大鼠中，化合物IV的药理学去势是可逆的。
与口服药代动力学研究相结合，评估了化合物IV对完整雄猴的睾酮水平的抑制和恢复的效力。三只治疗的幼年雄性食蟹猴(2-3年龄)通过灌胃以每天30mg/kg给药化合物IV，连续7天。采集血样并分成血清和血浆，分别用于睾酮和化合物IV定量测定。结果表明，与基线水平相比，在全部三只雄猴中，每日口服剂量的化合物IV使循环雄激素(主要是睾酮和二氢睾酮)水平显著降低了高达47％(基线、治疗的第2天和第6天的水平分别为1591±72.5、997±104和852±136ng/mL[平均值±SEM])。18天的停药恢复期后，雄激素水平恢复到正常，而且与治疗前的基线水平无显著差异(恢复后为1757.7±369.5ng/mL)。
实施例11
大鼠中的骨保护，尽管LH和睾酮减少
研究了式IV的化合物治疗对骨影响。在完整雄性大鼠中，口服给药的式IV的化合物完全预防了与LH抑制有关的骨丢失。在完整动物中，剂量水平≥10mg/kg/天的式IV的化合物引起LH的显著减少。虽然1mg/kg/天的式IV的化合物未显著地减少LH，但是，明显的是：在该剂量下前列腺、精囊和肛提肌的显著减小，表明循环睾酮的减少与这些雄激素应答器官在生理学上相关。然而，1mg/kg/天的式IV的化合物将松质骨体积(trabecular bonevolume)(在股骨远端测定)维持在完整对照的水平上。当以10和30mg/kg/天的剂量给药时，式IV的化合物增加股骨远端的骨体积，其显著高于完整对照的股骨远端的骨体积。这些数据表明，在降低完整大鼠的LH水平的剂量水平下，化合物IV增加松质骨矿物质密度(BMD)和百分比骨体积。得自该研究的数据示于表8。
表8.化合物IV对大鼠骨、器官重量和血清激素参数的体内效力。
aP＜0.05对比完整载体。bP＜0.05对比ORX载体
实施例12
对17β羟化类固醇脱氢酶5(17β-HSD5)酶活性的效力
HSD家族成员参与循环类固醇的转化。17β-HSD5将雄烯二酮转化为睾酮，将雌酮转化为雌二醇。另外，它也参与前列腺素的合成。本文证明了所选的本发明的一些化合物抑制17β-HSD5活性的能力。
方法
将人17β-HSD5克隆在pGEX 4t1载体中，并制备纯化的蛋白质。将该纯化的蛋白质与代表性的本发明化合物一起温育，14C雄烯二酮和NADPH于适合的缓冲液中。用乙酸乙酯萃取合成的睾酮，风干，在薄层色谱(TLC)板上点样并展开。将TLC暴露于感光成像仪并定量睾酮的强度。使用吲哚美辛作为阳性对照(LHRH激动剂)。
结果
试验了化合物IV，其对17β-HSD5酶活性具有部分抑制效力。如所预期的，阳性对照(LHRH激动剂)吲哚美辛表现出对该酶的强烈抑制，如图3所示。
实施例13
毒性研究
使用体外人血小板聚集研究，进行了比较化合物IV和二乙基己烯雌酚(DES，阳性对照)的血栓形成可能性的研究。在该研究中使用了得自健康男性供体的血液，因为男性为化合物IV的预期治疗群(LH抑制)。将富血小板血浆与雌二醇(E2)、DES、化合物IV或载体一起预温育30秒，然后加入凝血酶(0.3单位)以诱导血小板聚集。该研究的结果表明，与DES一起预温育使凝血酶诱导的血小板聚集增加了约9倍。然而，化合物IV和雌二醇降低了富血小板血浆的聚集。这些数据证明，与DES相比，化合物IV体外降低人血小板的反应性，而且表明化合物IV可能具有比DES低的血栓形成可能性(图4)。
实施例14
化合物IV对热潮红的效力
使用吗啡依赖性大鼠模型(MD模型)进行了研究化合物IV对热潮红的效力的研究，该模型由Simpkins等人(1983)开发并被证明与绝经热潮红有一些相似性。除人的条件相似外，该动物实验模型的周转时间(turn around time)短，这使它成为利用尾部皮肤温度(TST)来鉴定可减轻血管舒缩症状的化合物的有用高通量筛选工具。将TST探测器TA-40(Data Sciences International，MN)绑扎在尾根上，持续15分钟获得基线温度。15分钟后，用纳洛酮(1mg/kg，SQ)治疗动物，以逆转吗啡的作用。测量尾部皮肤温度(TST)，持续纳洛酮治疗后的一小时，在整个试验过程中采样频率为5秒。获得数据之后，计算每60秒记录的每只动物的温度的移动平均值，并进一步分析。基线温度计算为纳洛酮给药前15分钟内获得的平均温度。使用线性梯形法，通过从基线减去给药纳洛酮后的所有值计算曲线下面积(AUC)。
化合物IV减轻吗啡戒断模型的热潮红(参见图13)，其中10mg化合物IV结果最好。以5mg/kg使用17βE2(在100％DMSO中)。
实施例15
在大鼠中对比化合物IV和DES
在引入LHRH激动剂之前，通过利用雌激素(主要是二乙基己烯雌酚(DES))增加垂体中的雌激素活性达到去势睾酮水平。在将睾酮抑制至去势水平方面，DES和LHRH激动剂同样有效。用DES治疗的患者不患有热潮红或骨丢失，但是患有男性乳腺发育的几率高于用LHRH激动的ADT。不幸的是，非常有效的纯雌激素如DES和雌二醇常常与严重心血管和血栓栓塞性并发症的高风险有关，这限制了它们的临床使用。人们假设(但未证明)使用DES时静脉血栓栓塞性并发症风险增加是因为其与其他激素受体的交叉反应性。使用人血小板的体外研究表明化合物IV的促凝血活性比DES小得多。因此，ER-α选择性激动剂化合物IV可以递送DES的前列腺癌益处，还递送LHRH激动剂的益处但不引起骨质疏松或不利的脂质谱。
化合物IV在减小大鼠前列腺大小方面与DES效力相同(图11A)，并提供ORX大鼠前列腺大小的适度增加(图11B)。
DES和化合物IV之间的区别示于图12A-12C，其中DES与糖皮质激素受体(GR)(图12A)和雄激素受体(AR)(图12B)交叉反应，而化合物IV则不然。此外，DES拮抗雌激素相关受体(ERR)反式激活，而化合物IV则不然。化合物IV不与三种ERR亚型(ERR-α、ERR-β和ERR-γ)的任一种交叉反应，如图12C所示。
实施例16
猴毒性研究-90天
获得毛里求斯源的群居(colony-bred)食蟹猴。前瞻性研究设计为化合物IV和阳性对照(LHRH激动剂)在雄性食蟹猴中39周的口服药理学和毒理学评价，其中有13周的暂停期。在治疗开始之前，将39只性成熟的雄猴(5-8年龄)随机分入5组。这些组包括：1)载体对照，2)1mg/kg化合物IV，3)10mg/kg化合物IV，4)100mg/kg化合物IV和5)阳性对照(LHRH激动剂)。通过笼侧给药(cage-side administration)口服递送药物，每天1次，持续39天，其中组1和5递送载体对照品(Tween 80/PRANGTM)，组2、3和4递送在载体中的化合物IV。组2、3和4的化合物IV的剂量水平分别为1、10和100mg/kg/天。以10mL/kg的剂量体积(根据最近得到的每只动物的体重(图14)计算)递送口服剂量。组5的动物还接受每天一次皮下注射阳性对照(LHRH激动剂)(0.02mL定容)，持续39周的研究期间。每天观察和记录一般外观和临床体征。按照研究方案的指示进行例行评价和选择其他研究调查。选择的参数包括但不限于睾酮、前列腺特异性抗原(PSA)以及前列腺体积和重量。
使用酶免疫测定(EIA)法和化学发光免疫测定(LIA，ALPCO Diagnostics，Salem NH)分别定量血清样品中的睾酮和总PSA水平。在基线(即治疗开始前)和第1、3、7、14、28、64和90天时从所有动物(禁食状态)采集血样用于睾酮评价。在基线时以及在第6周期间从所有动物(禁食状态)采集血样用于PSA测定。为了讨论，浓度低于睾酮和PSA测定的定量限(BLQ)的样品的结果计算为测定的定量下限(LLOQ)的1/2，并将该结果认作“估计的终浓度”。除“估计的终浓度”(即具有BLQ结果的样品，所述BLQ结果作为测定的LLOQ的1/2包括进来)之外，表9-16中所示的数据表示为“仅为可定量的浓度”(即排除BLQ值)。在基线和第6周时，在麻醉下使用经直肠超声(TRUS)方法测量活体动物的前列腺体积。记录前列腺的宽度和高度。前列腺体积计算为宽度×宽度×高度×pi/6，并归一化为体重。在尸检时，于修剪组织除去脂肪和外部组织后记录前列腺的湿重。
结果和讨论：
血清睾酮水平表示于图5和表9-12中。在基线时，该研究的所有猴的睾酮水平均在性成熟成体雄性食蟹猴的正常范围内。然而，在接受100mg/kg/天的化合物IV的猴中以及在用阳性对照(LHRH激动剂)治疗的猴中，睾酮水平被显著降低。阳性对照(LHRH激动剂)组的睾酮水平显示双相性改变，其中在第1天和第3天分别显示47.4％和547％(p＜0.01)的初始显著增加(即，突发)，然后在第7、14、28、64和90天显示3.6％、67％、73％、83％和85％的降低(参见15和表9-12)。在用化合物IV治疗(即使以最高剂量水平(即100mg/kg/天))的任何动物中均未观察到类似突发。剂量和治疗持续时间对化合物IV的药理学作用很重要，其中相对于基线值，100mg/kg/天的剂量在第3、7、14、28和64天对血清睾酮的抑制分别为60％、51％、42％、79％和92％(参见图15以及表9和10)。用100mg/kg/天的化合物IV治疗90天后，组4的10只猴中的6只的睾酮水平降至低于测定的定量限的浓度(参见表11)。与相应的基线值(“估计的终浓度”，即，具有BLQ的6/10的猴的睾酮水平计算为LLOQ浓度的50％，参见表10)相比，组4的猴的平均血清睾酮水平降低了96％。重要的是要注意在第90天，100mg/kg/天的化合物IV将血清睾酮降低至显著低于阳性对照(LHRH激动剂)的水平(p＝0.013)。
表9.每日口服给药化合物IV后完整雄猴的平均血清睾酮水平(ng/mL)；估计的终浓度。
Figure BPA00001447795400721
睾酮测定的LLOQ＝0.246ng/mL；BLOQ值计算为0.123ng/mL，LLOQ的一半。
*：统计学上显著的(p＜0.05)化合物IV 100mg/kg vs.载体对照
#：统计学上显著的(p＜0.05)阳性对照(LHRH激动剂)vs.载体对照
$：统计学上显著的(p＜0.05)阳性对照(LHRH激动剂)vs.化合物IV 100mg/kg
表10.与基线相比平均血清睾酮水平的百分比改变(％)；估计的终浓度。
Figure BPA00001447795400722
睾酮测定的LLOQ＝0.246ng/mL；BLQ值计算为0.123ng/mL，LLOQ的一半。
表11.每日口服给药化合物IV后完整雄猴的平均血清睾酮水平(ng/mL)；λ仅为可定量的浓度
Figure BPA00001447795400731
睾酮测定的LLOQ＝0.246ng/mL；λ排除BLQ值。
表12.与基线相比平均睾酮水平的百分比改变(％)；λ仅为可定量的浓度。
睾酮测定的LLOQ＝0.246ng/mL；λ排除BLQ值。
在治疗开始的四周内，血清PSA水平也被化合物IV显著抑制。观察到持续4周接受10mg/kg和100mg/kg的化合物IV的猴的PSA降低了69％和87％(平均值)，而阳性对照(LHRH激动剂)组的PSA水平降低了60％(图16和表13-16)。
表13.每日口服给药化合物IV后完整雄猴的平均血清PSA水平(ng/mL)；估计的终浓度。
Figure BPA00001447795400741
PSA测定的LLOQ＝0.0575ng/mL；BLQ值计算为0.02875ng/mL，LLOQ的一半。
*：统计学上显著的(p＜0.05)化合物IV 10mg/kg vs.载体对照
&：统计学上显著的(p＜0.05)化合物IV 100mg/kg vs.载体对照
#：统计学上显著的(p＜0.05)阳性对照(LHRH激动剂)vs.载体对照
$：统计学上显著的(p＜0.05)阳性对照(LHRH激动剂)vs.化合物IV 100mg/kg
表14.与基线相比平均PSA水平的百分比改变(％)；估计的终浓度。
Figure BPA00001447795400742
PSA测定的LLOQ＝0.0575ng/mL；BLQ值计算为0.02875ng/mL，LLOQ的一半。
表15.每日口服给药化合物IV后完整雄猴的平均血清PSA水平(ng/mL)；λ仅为可定量的浓度。
Figure BPA00001447795400751
PSA测定的LLOQ＝0.0575ng/mL；λ该表排除BLQ值。
表16.与基线相比平均PSA水平的百分比改变(％)；λ仅为可定量的浓度。
Figure BPA00001447795400752
PSA测定的LLOQ＝0.0575ng/mL；λ该表排除BLQ值。
在该研究的整个过程中通过TRUS定期测量前列腺体积。治疗六周后得到的结果表明化合物IV和阳性对照(LHRH激动剂)对猴前列腺的有力效力。10mg/kg和100mg/kg剂量水平的化合物IV对前列腺体积的显著抑制分别为25％和45％，而在阳性对照(LHRH激动剂)组中，前列腺体积减少了28％(图17以及表17和18)。
表17.每日口服给药化合物IV后雄猴的平均前列腺体积(比率)。
Figure BPA00001447795400753
表18.与基线相比平均前列腺体积的百分比改变(％)。
Figure BPA00001447795400761
通过在尸检时评价前列腺重量证实了化合物IV-相关的前列腺体积减少。13周的治疗后，在接受10和100mg/kg/天的动物中，化合物IV使平均前列腺重量分别显著减少了24％和21％(图18B以及表19和20)。
表19.尸检每日口服给药化合物IV的猴时的平均前列腺重量(克)。
Figure BPA00001447795400762
表20.与基线相比平均前列腺重量的百分比改变(％)。
Figure BPA00001447795400763
未观察到对血小板聚集、凝血酶原时间(PT)或活化部分凝血激酶时间(APTT)的明显影响。
实施例17
对人进行的化合物IV研究
对人类男性进行了测定化合物IV的效力的研究。以100、300、600和1000mg剂量的化合物IV研究了12名个体/同期组。表21提供通过给药100、300、600和1000mg剂量的化合物IV引起的LH、血清PSA、游离睾酮水平和总睾酮水平的改变。在第1-11天测定人的剂量依赖性平均总睾酮水平(nmol/L)(图19)。在600和1000mg的剂量下，总睾酮水平分别降低了51.9％和47.9％。
在第1-10天测定人的剂量依赖性平均LH水平(IU/L)(图20)。在100、300、600和1000mg的剂量下，LH水平分别增加了20.7％、46.9％、27.6％和29.2％。
在第1-10天测定人的剂量依赖性平均游离睾酮水平(pg/L)(图21)。在100、300、600和1000mg的剂量下，游离睾酮水平分别降低了17.0％、18.5％、72.7％和53.2％。
在第1-10天测定人的剂量依赖性平均PSA水平(μg/L)(图22)。在100、300、600和1000mg的剂量下，PSA水平分别降低了9.2％、24.4％、27.5％和29.9％。
表21.自基线的平均改变。
  100mg   300mg   600mg   1000mg
  血清PSA   -9.2％   -24.4％   -27.5％   -29.9％
  LH   20.7％   46.9％   27.6％   29.2％
  游离睾酮   -17.0％   -18.5％   -72.7％   -53.2％
  总睾酮   3.9％   7.3％   -51.9％   -47.9％
实施例18
化合物IV的生物利用度
向大鼠、犬和猴口服给药后，化合物IV被迅速吸收。化合物IV在大鼠中的口服生物利用度为6％-25％，取决于给予剂量的制剂。使用聚乙二醇300(PEG300)的制剂产生的暴露一般高于在稀释于去离子水的Tween 80中制备的微乳剂。在犬中，目测血浆浓度-时间曲线表明化合物IV经历了肠肝再循环，这由末期的第二个峰证明。重要的是，在犬中，雄性30mg/kg PEG300口服剂量组的暴露超过了在大鼠LH抑制模型中产生对前列腺减小的最大效力所需的暴露。在猴中，初步的药理学研究表明在该物种中的口服生物利用度接近或超过在犬中的口服生物利用度，这由七天时间内化合物IV的血浆浓度和血清睾酮的抑制证明。总之，这些数据表明，在两种非啮齿类动物物种中可以实现足以产生期望的药理学效力(基于AUC数据)的口服暴露。而且，大鼠和猴的内分泌数据表明化合物IV的药理学效力是可逆的(即，当停止使用化合物IV的治疗时，睾酮的血清浓度恢复到基线或正常水平)。
实施例19
化合物IV的药代动力学
来自体外(小鼠、大鼠、犬、猴和人)和体内(大鼠)代谢研究的初步数据表明，化合物IV的共轭(conjugation)、其羟基化的代谢物及其N-脱烷基化的代谢物形成(contribute to)化合物IV在动物和人中的总体处置(overalldisposition)。这些种间比较的结果(尽管只是定性的)表明这些非临床物种的总体代谢物谱充分反映了在人的肝微粒体中产生的谱。基于这些结果，大鼠和犬分别是适合药理学和毒理学评价的啮齿动物和非啮齿动物物种。体外研究表明，浓度＜30μM的化合物IV不诱导相关的CYP450亚型(CYP1A2、CYP2B6或CYP3A4)且不抑制CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6或CYP3A4/5。化合物IV抑制CYP2C9，但是仅在高浓度下(Ki＝8μM)，而且认为可能的药代动力学药物-药物相互作用非常小(remote)。
实施例20
化合物IV的生物活性
对hERG通道，化合物IV显示很小或没有体外抑制效力(IC50≥300μM)。在分离的犬浦肯野纤维中，该化合物在10-100μM的浓度下在体外剂量依赖性地降低APD50和APD90。然而，化合物IV在任何剂量下(最高300mg/kg)不影响遥测的犬的血液动力学功能或心功能(血压、心率、心电图形态或QT间期)。未观察到神经药理学或肺的影响。在最高30mg/kg化合物IV的单次口服剂量下未观察到对肾功能的显著影响。在试验的最高剂量(100mg/kg)下仅观察到尿量排出增加以及钾和氯的尿排泄增加。在大鼠中以30-300mg/kg的剂量口服给药化合物IV产生蠕动的显著增加，而且在大鼠中以30mg/kg口服给药化合物IV产生胃肠活动和胃液酸度的显著增加(可能不是由于对平滑肌的影响)。
化合物IV是非致诱变性的，并且在体外于最高200μM的浓度下也不引起人外周血淋巴细胞染色体的结构或数目畸变。在单次和重复口服给药(最多28天)后，大鼠和犬很好地耐受化合物IV。在肾、肝、心和其他非靶相关器官中未观察到病理改变。不存在与向雄性或雌性犬口服给药化合物IV最多28天相关的严重体征、体重影响、临床病理改变、眼、心电图或组织病理学改变。
虽然本文已经说明和描述了本发明的某些特征，但是本领域的普通技术人员现在会得出许多修改、替换、改变和等同形式。因此，应该理解，所附的权利要求书意在覆盖所有这些落在本发明的真正精神范围内的修改和变化。

Claims (56)

1.降低雄性个体中总血清睾酮水平的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式I的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure FPA00001447795300011
其中
Y是C(O)或CH2；
R1、R2独立地是氢、卤素、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、卤代烷基、芳基、O-Alk-NR5R6或O-Alk-杂环，其中所述杂环是3-7元取代的或未取代的杂环，任选地为芳香性的；
R3、R4独立地是氢、卤素、羟基烷基、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3、NHCOR、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、卤代烷基、芳基或受保护的羟基；
R是烷基、氢、卤代烷基、二卤代烷基、三卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CF2CF3、芳基、苯基、卤素、烯基、CN、NO2或OH；
R5和R6独立地是氢、苯基、具有1-6个碳原子的烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环、5-7元芳基；或者R5和R6与氮原子一起形成3-7元环；
j和k独立地是1-4；
Alk是具有1-7个碳的直链烷基、具有1-7个碳的支链烷基或具有3-8个碳的环烷基。
2.权利要求1的方法，其中所述式I的化合物选自：
Figure FPA00001447795300021
3.权利要求1的方法，其中所述总血清睾酮的降低通过降低血清黄体生成素水平发生。
4.权利要求2的方法，其中所述总血清睾酮的降低通过降低血清黄体生成素水平发生。
5.权利要求1的方法，其中所述总血清睾酮的降低与血清黄体生成素水平的降低无关。
6.权利要求5的方法，其中所述总血清睾酮的降低是由SHBG的增加、睾丸Leydig细胞产生或分泌睾酮的抑制、或肾上腺类固醇合成的减少引起的。
7.权利要求6的方法，其中所述总血清睾酮包括游离睾酮和结合睾酮，其中与血清黄体生成素水平降低无关的所述游离睾酮水平的降低是由SHBG的增加引起的。
8.权利要求2的方法，其中所述总血清睾酮的降低与血清黄体生成素水平的降低无关。
9.权利要求8的方法，其中所述总血清睾酮的降低是由SHBG的增加、睾丸Leydig细胞产生或分泌睾酮的抑制、或肾上腺类固醇合成的减少引起的。
10.权利要求9的方法，其中所述总血清睾酮包括游离睾酮和结合睾酮，其中与血清黄体生成素水平降低无关的所述游离睾酮水平的降低是由SHBG的增加引起的。
11.权利要求1的方法，其中所述雄性个体患有前列腺癌。
12.权利要求2的方法，其中所述雄性个体患有前列腺癌。
13.权利要求3的方法，其中所述雄性个体患有前列腺癌。
14.权利要求4的方法，其中所述雄性个体患有前列腺癌。
15.权利要求5的方法，其中所述雄性个体患有前列腺癌。
16.权利要求6的方法，其中所述雄性个体患有前列腺癌。
17.权利要求1的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约100ng/dL。
18.权利要求17的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约50ng/dL。
19.权利要求17的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约25ng/dL。
20.权利要求2的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约100ng/dL。
21.权利要求20的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约50ng/dL。
22.权利要求20的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约25ng/dL。
23.权利要求3的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约100ng/dL。
24.权利要求23的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约50ng/dL。
25.权利要求23的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约25ng/dL。
26.权利要求4的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约100ng/dL。
27.权利要求26的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约50ng/dL。
28.权利要求26的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约25ng/dL。
29.权利要求5的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约100ng/dL。
30.权利要求29的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约50ng/dL。
31.权利要求29的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约25ng/dL。
32.权利要求6的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约100ng/dL。
33.权利要求32的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约50ng/dL。
34.权利要求32的方法，其中所述总血清睾酮降至低于约25ng/dL。
35.权利要求1的方法，其中给药所述化合物压制与雄激素剥夺治疗(ADT)有关的副作用的发生、降低与雄激素剥夺治疗有关的副作用的发生率、降低与雄激素剥夺治疗有关的副作用的严重性、抑制与雄激素剥夺治疗有关的副作用的发生、或治疗与雄激素剥夺治疗有关的副作用，其中所述个体患有前列腺癌。
36.权利要求35的方法，其中所述总血清睾酮的降低通过降低血清黄体生成素水平发生。
37.权利要求35的方法，其中所述总血清睾酮的降低与血清黄体生成素水平的降低无关。
38.权利要求35的方法，其中与ADT有关的副作用选自：热潮红、男性乳腺发育、骨矿物质密度降低和骨折增加。
39.权利要求38的方法，其中所述典型副作用是热潮红。
40.权利要求38的方法，其中所述典型副作用是男性乳腺发育。
41.权利要求38的方法，其中所述副作用是骨矿物质密度降低。
42.权利要求38的方法，其中所述骨折增加是病理性骨折、非创伤性骨折、椎骨骨折、非椎骨骨折、新形态测定骨折、临床骨折或它们的组合。
43.权利要求2的方法，其中给药所述化合物预防与雄激素剥夺治疗(ADT)有关的副作用的发生、或治疗与雄激素剥夺治疗有关的副作用，其中所述个体患有前列腺癌。
44.权利要求43的方法，其中所述总血清睾酮的降低通过降低血清黄体生成素水平发生。
45.权利要求43的方法，其中所述总血清睾酮的降低与血清黄体生成素水平的降低无关。
46.权利要求43的方法，其中所述与ADT有关的副作用选自：热潮红、男性乳腺发育、骨矿物质密度降低和骨折增加。
47.权利要求46的方法，其中所述典型副作用是热潮红。
48.权利要求46的方法，其中所述典型副作用是男性乳腺发育。
49.权利要求46的方法，其中所述典型副作用是骨矿物质密度降低。
50.权利要求1的方法，其中所述方法还治疗晚期前列腺癌。
51.权利要求1的方法，其中所述方法还压制晚期前列腺癌、降低晚期前列腺癌的发病率、降低晚期前列腺癌的严重性、或抑制晚期前列腺癌。
52.权利要求1的方法，其中所述方法还提供晚期前列腺癌的姑息治疗。
53.治疗晚期前列腺癌、压制晚期前列腺癌、降低晚期前列腺癌的发病率、降低晚期前列腺癌的严重性、或抑制晚期前列腺癌的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式I的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure FPA00001447795300071
其中
Y是C(O)或CH2；
R1、R2独立地是氢、卤素、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、卤代烷基、芳基、O-Alk-NR5R6或O-Alk-杂环，其中所述杂环是3-7元取代的或未取代的杂环，任选地为芳香性的；
R3、R4独立地是氢、卤素、羟基烷基、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3、NHCOR、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、卤代烷基、芳基或受保护的羟基；
R是烷基、氢、卤代烷基、二卤代烷基、三卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CF2CF3、芳基、苯基、卤素、烯基、CN、NO2或OH；
R5和R6独立地是氢、苯基、具有1-6个碳原子的烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环、5-7元芳基；或者R5和R6与氮原子一起形成3-7元环；
j和k独立地是1-4；
Alk是具有1-7个碳的直链烷基、具有1-7个碳的支链烷基或具有3-8个碳的环烷基。
54.权利要求53的方法，其中所述式I的化合物选自：
Figure FPA00001447795300081
Figure FPA00001447795300091
55.姑息治疗晚期前列腺癌的方法，所述方法包括给药治疗有效量的式I的化合物、其异构体、药学可接受的盐、药品、多晶型物、水合物或它们的任意组合：
Figure FPA00001447795300092
其中
Y是C(O)或CH2；
R1、R2独立地是氢、卤素、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、卤代烷基、芳基、O-Alk-NR5R6或O-Alk-杂环，其中所述杂环是3-7元取代的或未取代的杂环，任选地为芳香性的；
R3、R4独立地是氢、卤素、羟基烷基、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3、NHCOR、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、卤代烷基、芳基或受保护的羟基；
R是烷基、氢、卤代烷基、二卤代烷基、三卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CF2CF3、芳基、苯基、卤素、烯基、CN、NO2或OH；
R5和R6独立地是氢、苯基、具有1-6个碳原子的烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环、5-7元芳基；或者R5和R6与氮原子一起形成3-7元环；
j和k独立地是1-4；
Alk是具有1-7个碳的直链烷基、具有1-7个碳的支链烷基或具有3-8个碳的环烷基。
56.权利要求55的方法，其中所述式I的化合物选自：
Figure FPA00001447795300111
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