CN102387717A - 通过使用脉冲电场进行生物细胞的膜透化的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于包含在产品中的生物细胞的膜透化的方法，所述方法被应用在包括发射脉冲电场的至少一个处理室的处理装置中，所述方法包括以下步骤：以预定的供给流速向处理装置供应包括所述生物细胞的产品的步骤；以对应于向上述供给流速加上在下面的抽出步骤中所提及的抽出流速的引入流速，将包括所述生物细胞的产品引入到所述处理室中的步骤；用脉冲电场处理引入所述室中的所述产品的步骤；以预定的抽出流速，在所述室的出口处的抽出步骤，以便将所述产品运回所述室上游的步骤。

Description

通过使用脉冲电场进行生物细胞的膜透化的方法
技术领域
本发明涉及一种通过使用脉冲电场进行生物细胞的膜透化的方法。
该方法最特别地发现其在巴氏灭菌领域中的应用，即用于处理食品(如牛奶、奶油、啤酒、果汁)的领域，包括破坏微生物，特别是最初在这些产品中存在的病原体。
因此本发明的领域是生物细胞的膜透化，尤其是通过巴氏灭菌破坏生物细胞。
背景技术
巴氏灭菌技术已成为现有技术中许多研究的对象，尤其是对于长保质期产品的开发，其要求微生物的存在非常低，以能够长期使用。
通常，巴氏灭菌包括在规定的时间将食品加热到规定的温度，以便超过在食品变质开始时病原菌的耐热阈值，然后在温度(3℃至4℃)下迅速冷却所述加热的食品，以便防止未破坏的细菌的繁殖。
这种传统原理已成为属于该处理(所谓的“热处理”)种类的许多替代物的主题。
用于巴氏灭菌的热处理可以包括使用以下媒介(means)作为热载体：
-电磁辐射，如红外辐射、微波辐射；
-来自在管内产生的焦耳效应现象的热量，其中待进行巴氏灭菌的产品在所述管内流动；
-由流过待进行巴氏灭菌的产品的电流产生的欧姆热量。
通过热途径实现的巴氏灭菌温度通常在70℃至85℃的范围内。然而，在这些温度范围内处理后，某些病原形式如孢子可能生存，不适合旨在用于食品的产品。
为了破坏这些病原形式，一种解决方案可以包括将食品加热至比上述范围更高的温度(例如在高于90℃的温度)。然而，更高温度的使用不可避免地伴随所处理产品的变性，如产品中存在的蛋白质的变性，其在不损失产品的味觉特性的情况下，通常并不发生。
为了寻找对这些缺点的补救措施，建议采取所谓的“低温”法，以便保持产品的原始味道。这些方法包括采取用于将病原菌除去而不是使用加热，允许在不超过60℃的温度下处理食品的媒介(手段)。这些媒介可以包括电离辐射，使用高压、脉冲光，使用气体如二氧化碳。
考虑到已提议过关于膜透化的方法，尤其是巴氏灭菌法，作者建议开发一种用于膜透化的新方法，当用于对食品进行巴氏灭菌时，该方法可明显提高不期望的细胞的死亡率。
发明内容
因此根据第一个目的，本发明涉及一种用于包含在产品中的生物细胞的膜透化方法，所述方法在包括发射脉冲电场的至少一个处理室的处理装置中应用，所述方法包括以下步骤：
-以预定的供给速率，从包括所述产品的供给单元中向处理装置提供包括所述生物细胞的产品的步骤；
-以相应于向上述供给速率加上在下面的抽出步骤中所提及的抽出速率(drawing-off rate)的引入速率，将包括所述生物细胞的产品引入到所述处理室中的步骤；
-用脉冲电场来处理引入所述室中的所述产品的步骤；
-以预定的抽出速率用于所述室出口处的产品的抽出步骤，以便将所述产品再次转运至所述室的上游以及所述供给单元的下游。
应当理解，本发明的方法是用于生物细胞的膜透化的体外方法，即，施加有位于动物有机体外的产品。
发明人惊奇地注意到，与在上述室中包括一个或多个产品通道而未使用如上所述的抽出步骤的方法相比，本发明的方法提供了获得细胞的膜透化的显著增加的可能性，并且其具有至少一个处理室(根据细胞的死亡率来量化所述增加)，并且其使用相同的比能量。
根据本发明，在本方法范围内处理的细胞可以为原核细胞、真核细胞，这些细胞可以是活的或死亡的，整体的或部分的，以及动物或植物来源的细胞。
特别地，这些细胞可以来自单细胞或多细胞有机体，如细菌(特别是真细菌)、真菌(特别是霉菌、酵母菌(如酿酒酵母)、霉菌、藻类(特别是微藻)、病毒和朊病毒。
它们也可以是细胞内的细胞器或细胞内部的化合物，如线粒体、病毒、蛋白质、朊病毒。
细胞可以处于生长期或休眠期(因为其可以是针对孢子的情况，如细菌孢子)。
待处理的细胞包括在产品中，所述产品可以为液态食品，如果汁、蔬菜汁、牛奶、水。
此外，包括所述细胞的产品可以包含组织，大分子，如生物高分子、有机或无机分子。
对包括细胞的产品实施的脉冲电场具有透化所述细胞的效果。
不希望受理论的约束，将细胞暴露于外部电场能诱导细胞的构成性膜的任一侧上的电位差。当该电场非常强烈时(特别是当其高于10,000V/cm时)，可以诱导比细胞的自然电位更高值的跨膜电位。当跨膜电位达到临界值时，膜的任一侧上的带电分子之间的静电现象导致细胞膜中孔的形成，从而增加其通透性。当细胞膜中孔的形成不可逆时，可以导致细胞内容物向外迁移，从而导致细胞死亡。
根据本发明，取决于期望的透化水平，脉冲电场将具有用于获得该透化所需的关于电压值、脉冲数量、信号形状、由所述电场递送的特定能量的特征。
脉冲电场通常以电脉冲的形式实现，所述电脉冲通常导致一时间段内放电，所述时间段可以在50纳秒至1毫秒，例如1μs的范围内，并递送可产生在5kV/cm至200kV/cm范围内的脉冲电场的峰值的电压。电压可以在100V至100,000V的范围内。
通过使用电脉冲，可以使得由焦耳效应加热产品的现象最小，因此使得后者的温度(通常低于50℃)最低。这样可以避免产品中存在的成分变性，所述变性通常在应用涉及高温的方法期间遇到。
电脉冲在可能具有外壳形式的处理室内递送，所述外壳包括允许电流作为电脉冲通过的电极。这些电极可以是平面的、圆形的、共轴的、共线的、旋转式的或具有任何其它合适的几何形状。
如先前所公开的，该方法包括以预定的供给流速，从包括所述产品的供给单元中向处理装置供应待处理的包括所述细胞的产品的步骤。
该步骤通常包括在运输中使待处理的产品从包含其的供给单元如槽中穿过，朝向连接至处理室的供给管道。
从实际观点来看，以预定的供给速率，诸如在0.01L/h至10,000L/h范围内的速率，例如20L/h的流速，通过可选地设置有供给泵的供给管道从供给单元向处理装置供应待处理的产品。
接着，本发明的方法包括以对应于向上述供给速率加上在下面的抽出步骤中提及的抽出速率的引入速率，将包括所述生物细胞的产品引入所述处理室的步骤。
一旦将产品引入处理室中，便使其经受由电脉冲实现的脉冲电场，其将引起包含在液体中的细胞透化。
电脉冲为有利的脉冲，其可以在100至100,000V的范围内，例如10,000至50,000V，并递送足够的能量以便获得根据所寻求的生物效应的期望的透化。由每个脉冲所递送的能量通常包括在0.005J到500J之间。
因此，当期望获得导致细胞死亡的细胞透化时，(特别是为了产品的巴氏灭菌或灭菌)，对处理参数，特别是递送至每个体积单元(对应于处理室的体积)的脉冲总数进行选择以便向产品递送大于30MJ/m3的特定能量，优选大于100MJ/m3。
为了获得细胞的死亡，根据每个脉冲递送的能量以及根据处理室的体积，对递送至每个体积单元(对应于处理室的体积)的脉冲总数进行调整，以便达到预期的特定能量(比能量)值。该脉冲总数可以包括在10到1,000之间。
当期望获得细胞的透化以便加速细胞与周围介质之间的交换时，可对由处理室发射的电脉冲进行选择以便在过程的整个持续中向产品递送小于20MJ/m3的特定能量，例如1至20MJ/m3。脉冲总数可以包括在2至100之间。
事实上，本领域技术人员可根据期望透化率选择合适的关于脉冲数量、电压、递送的特定能量的电脉冲特征。
施加于每个体积单元的脉冲数量可以以许多序列进行分配。
作为一个实例，当认为用于处理产品的每个体积单元需要120个脉冲时，待施加的脉冲总数可以分配在例如3个系列，6个序列或10个序列中，每个序列分别允许施加40个、20个或12个脉冲。
在处理室内部，产品，特别是当其作为液体出现时，可以经受湍流液压条件。该液压模式是尤其有利的。事实上，放电过程中细胞的透化优先在位于面向电极的细胞膜的表面上进行。当细胞相对于电极无序运动(其是当产品经受湍流条件时的情况)并经受一系列脉冲时，其将受到弥散性影响，这将有助于提高关于透化的处理效率。相反，相对于电极静止的细胞将受到浓度影响，这将降低处理效率。
根据本发明的方法，一旦完成了处理步骤，就在处理室的下游以预定的抽出速率向处理室中的已处理产品提供抽出步骤，以便将该抽出产品再次转运至处理室的上游以及所述供给单元的下游，由此将抽出的产品再次引入处理室中，并再次使其经受脉冲电场。
根据本发明的具体实施方式，借助于至少一个将处理室的下游部分连接至处理室的上游部分的循环回路来实现抽出步骤。在处理室的出口处，通过位于室下游的循环回路的入口将已处理的产品抽出，并通过循环回路的出口注入室的上游，该循环回路可以作为循环管道出现。
抽出速率可以大于或等于上述供给速率。
有利地，抽出速率大于供给速率，例如高2至100倍，优选高2至20倍。这使得每个产物部分至少通过处理室两次。
根据本发明的抽出步骤的应用具有以下优点。
这样，可以减少液压短路现象，即，整个所处理的细胞群体中采用的一个细胞比该群体其余的细胞更快地通过处理室的可能性。
对于给定的特定能量，通过应用根据本发明的抽出步骤，与以下方法相比可获得更好的关于细胞透化的结果，该方法具有通过使液体进入处理室的第一次处理，接着是在第一次处理和第二次处理之间储存在槽中之后在相同处理室中的第二次处理。
有利地，该方法在抽出步骤前，不包括对于已处理的产品的停滞储存的任何步骤，即，在通过抽出步骤将已处理的产品再引入处理室之前。
另一优势来自预料不到的效果，其涉及由于存在循环回路，递送至每个体积单元的脉冲数量被递送多次的效果。令人惊奇地观察到，对于处理室中给定的液压条件和给定的脉冲总数，与不使用任何循环回路而使待处理的产品单次经受脉冲总数相比，将该数量数次分配是更有利的。
根据本发明的另一个实施方式，可通过多个循环回路来实施抽出步骤，该循环回路的入口位于处理室的下游，而其出口位于处理室的上游。
建立许多循环回路的事实可降低细胞进入如上所限定的液压短路状态的可能性。
本发明的方法还有利地包括以有利地与上述供给速率相对应的提取速率，从处理装置中提取已处理的产品的步骤。
提取步骤是指存在于用于处理产品的室下游的装置出口处的提取的步骤，以便避免产品在装置中的积累。提取和处理的产品可在收集槽中回收。
如上所述，处理装置包括至少一个处理室，指的是其可包括几个处理室。
在这种情况下，处理室可并排设置，如上所述的循环步骤，即引入步骤、处理步骤和抽出步骤分别在每个所述处理室中发生。
本发明的方法可通过处理装置实施，该处理装置分别包括：
-用于供给待处理产品的单元，显示为例如槽，其中容纳有待处理的产品；
-至少一个发射脉冲电场的处理室，其通过供给管道连接至供给单元；
-位于处理室下游的出口管道；
-至少一个循环回路，该循环回路的入口位于处理室的下游，并连接于出口管道，并且该出口位于处理室的上游并连接至供给单元。
可以在供给管道和循环回路上设置泵。
当抽出步骤通过单一循环回路进行时，本发明的方法可通过如图1所示的处理装置1进行，所述处理装置1分别包括：
-包括待处理产品的供给单元2；
-将供给单元连接至处理室5的供给管道3，在其路径上可以插入泵，如主泵7和副泵9；
-处理室5，脉冲电场递送至其内部；
-出口管道10，其将处理室5连接至用于接收已处理液体的槽11；
-具体化为管道的循环回路13，其入口15位于处理室下游的出口管道10上，而出口17位于处理室5上游的供给管道3上，该回路允许运送至少一部分处理室下游的已处理的产品，以便使该部分再次经受脉冲电场。
当抽出步骤通过许多循环回路进行时，本发明的方法可通过如图2所示的处理装置1进行，所述处理装置1分别包括：
-包括待处理产品的供给单元2；
-将供给单元3连接至处理室5的供给管道3，在其路径上可以插入泵，如主泵7和副泵9；
-处理室5，脉冲电场传送到其内部；
-出口管道10，其将处理室5连接至用于接收已处理液体的槽11；
-分别具体化为管道的循环回路15、17和19，其入口21、23和25位于处理室5下游的出口管道10上，而出口27、29和31位于处理室5上游的供给管道3上，这些回路允许可选地通过整个循环回路共用的或每个回路独立的泵，运送至少一部分处理室下游的已处理的产品，以便使该部分再次经受脉冲电场。
可在循环回路中插入一个或多个装置，如热交换器、物质交换器(例如，相位分离器)、动量交换器(即，允许流体循环的改良和改善的装置，如泵、动态搅拌器、静态搅拌器)。
根据本发明的方法待处理的产品可以视为包括待透化的生物细胞的液体，以泥浆或多细胞有机体形式，如水果。
当其为液体时，其特别可以为水，液体流出物，来自污水处理厂的液体泥浆，果汁，牛奶，液态蛋，调味料，汤，炖过的水果和浓汤。
其特别可以为液体，所述液体包括来自生物细胞的细胞器或分子，如线粒体、DNA或RNA。
当其为泥浆时，其特别可以为来自污水处理厂的泥浆。
本发明的方法可用于不同用途，如：
-液体如水，液体流出物，果汁，牛奶，液态蛋，调味料，汤，浓汤，炖过的水果和浓汤的巴氏灭菌或灭菌；
-处理来自污水处理厂的泥浆，以便在散布这些泥浆之前或在干燥脱水之前，除去某些多细胞有机物及微生物；
-在基因工程领域处理生物细胞，使其对外源性分子(如DNA、RNA、蛋白、病毒)是可透过的；
-破裂多细胞有机体，如水果，藻类的细胞，以便有助于它们随后的榨取，从而获得果汁或脂类提取物。
本发明的方法尤其最适于液体的巴氏灭菌或灭菌。
因此，本发明还涉及一种对产品进行巴氏灭菌或灭菌的方法，其包括应用如下所述的方法，设置脉冲电场的参数以便获得在液体中存在的生物细胞的膜透化，并导致后者死亡。
这特别可以对包括作为生物细胞的酵母菌如酿酒酵母的果汁进行巴氏灭菌或灭菌。
现在参照作为说明且不作为限制给出的以下实施例对本发明进行描述。
附图说明
图1示出了处理装置的一个实例，所述处理装置包括允许应用本发明方法的循环回路。
图2示出了处理装置的一个实例，所述处理装置包括允许应用本发明方法的三个循环回路。
图3是示出了针对比较例(曲线a)和本发明的实施例(曲线b)的Log(N/N0)对传输的特定能量(以MJ/m3为单位)的曲线。
具体实施方式
以下实例说明了一方面未落入本发明范围的方法(所谓的比较例)以及根据本发明的方法(所谓的本发明的实施例)的应用。
为此，使用被酿酒酵母菌污染的橙汁。这些酵母菌特征为富含糖和酸的水溶液，并且倾向于增殖，通过糖的氧化代谢导致CO2的释放，该现象使得产品不适合于消费。
在第一阶段，对巴氏灭菌的橙汁(即，最初无酵母菌)进行接种，同时将浓缩的接种物加入到该橙汁中，以便对于以下实施例，具有富含酿酒酵母菌的橙汁，其量为每毫升107个微生物(通过在琼脂糖型的特定介质上生长的标准方法计算)。
比较例
以25L/h的流速使用处理装置对相同体积的橙汁(20L)进行第一次处理，该处理装置包括体积为5.5cm3的含有平面并联不锈钢电极的处理室。
在电极之间传递的电信号是具有指数递减特征的电容器向由室内存在的液体容器形成的电阻放电的信号。电场的峰值最初调节至接近47kV/cm的值，每个脉冲产生的能量接近5.5J/脉冲。由τ＝RC定义的脉冲时间常数τ接近700ns，其中R为电极之间的电阻，而C为放电电容的电容值。
将第一次处理后的果汁(nr＝1次处理)回收在大玻璃瓶中，并以中间产物方式储存，随后在与第一次处理过程中相同的操作条件下(nr＝2次处理)，通过使其再次通过处理系统进行第二次处理。
不考虑中间产物停滞储存所需的延迟，总处理时间为1小时36分。
每个液体单元元件(每个元件相当于处理室的体积)经受的脉冲的总数(n总)(每个相当于电容的单次放电)在第一次处理期间等于120，而在第二次处理期间也是120，使得最终的脉冲数为240。将脉冲的特征转移到下表中，即峰场值为46.6kV/cm时，并且传递到每个液体单元元件的比能量基于1立方米(1m3)为120MJ/m3，即对于两次处理为240MJ/m3。
每次处理的特征显示在下表1。
Figure BDA0000096293880000121
nr相当于待处理液体的处理次数；
n总相当于每个液体单元元件(每个元件相当于处理室的体积)经受的脉冲的总数；
Q(以L/h为单位)相当于液体的供给速率；
E(以kV/cm为单位)相当于由每个电脉冲所释放的电场的峰值；
W比(以MJ/m3为单位)相当于换算成1m3的传输至每个液体单元元件的比能量。
Log N/N0相当于处理后微生物数量(N)与处理前微生物数量(N0)的比率的十进制对数。
根据该表，就每次处理可将微生物的数量降低约20倍来说，每次处理的效果似乎是可累加的。通过外推法，可认为3次处理可将微生物群体的Log降低6倍，以360MJ/m3的比能量为代价。
本发明的实施例
制备与上述比较例中相同批次的20L橙汁。
以20L/h的量将该橙汁注入处理装置。
处理装置与用于应用上述比较例的处理装置相似，不同之处在于，提供了循环回路，其置于体积为5.5cm3的处理室的出口处。循环回路的特征如下：直径为8mm，且体积为50mL。将该回路的循环速率设置为360L/h，这意味着引入室的流速为380L/h。
进行不同的测试，其中：
-处理相同体积的果汁(20L)；
-将果汁的供给流速设置为20L/h，同时来自循环回路的抽出流速设置为360L/h；
-处理期为1小时；
-与上述比较例的值相比，电场的峰值最初调节至接近48kV/cm的值，每个脉冲产生的能量接近5.8J/脉冲；
传输至每个液体单元元件(其相当于处理室的体积)的脉冲总数针对每个测试具有不同的预定值，其相当于给定的比能量。
所应用的测试的操作参数显示在下表2中。
Figure BDA0000096293880000141
n总相当于传输至每个液体单元元件(其相当于处理室的体积)的脉冲的总数；
W比(以MJ/m3为单位)相当于换算成1m3的传输至每个液体单元元件的比能量；
N0相当于处理前微生物的数量；
N相当于处理后微生物的数量。
根据该表，可以看出，对于80MJ/m3的比能量可获得大于2.4Log的灭活(而在比较例的情况下，需要大于120MJ/m3的比能量来获得这样的灭活)，对于99MJ/m3的比能量可获得大于4Log的灭活，并且对于118MJ/m3的比能量可获得6.34Log的灭活(而对于120MJ/m3的比能量，仅能获得2Log量级的灭活)。
图3表示说明针对比较例(曲线a)和本发明的实施例(曲线b)所获得的值的Log(N/N0)对比能量W(以MJ/m3为单位)的曲线。
作为结论，其显示在本发明实施例范围内可以利用低于2.4倍的能量获得4Log(即，处理后比处理前的存活微生物降低10,000倍)灭活。还显示对于相同值的比能量(在该情况下为120MJ/m3)，在本发明实施例范围内相对于比较例可获得4Log的增益。
通过建立循环回路，由此可获得这样的结果，其优于那些通过如在比较例中所说明的相同体积的待处理果汁的多通道所获得的结果。
因此，本发明的方法提供了预期显著降低投资成本和运行成本，同时降低微生物复活风险的可能性。
与不包括任何循环回路的方法相比，无效空间(死空间)被最小化(即处理液体的停滞体积，如为对于比较例的情况，其中所处理的液体在第二次通过前储存在中间槽中)。
本发明的创造性也来自所述方法的预料不到的效果，其中循环回路不仅充当混合设备或用于增加液压条件。
在下文中，对于可比较的比能量值，比较了细胞死亡率的差异。
与之前类似，所处理的产品包括由酵母菌污染的橙汁。在相同处理室中对产品进行处理，对于48kV/cm的电场峰值，每个脉冲产生的能量等于5.7J。针对100MJ/m3所提供的比能量(即总脉冲数为100)，制作了灭活结果。
在第一种情况下，没有循环回路，其中装载量为20L，而供给流速为25L/h，通过外推图3所示的曲线值，灭活为1.5Log。
在第二种情况下，仍然没有循环回路，其中装载量为500L，供给流速为500L/h，通过与更好地搅拌等同的更好的液压条件，获得了实验值LogN/N0＝2。
如果参照图3，其中装载量为20L，且供给流速为20L/h，当应用循环回路时，通过处理室的总流速为380L/h(回路中为360L/h，且供给为20L/h)，即液压条件比500L/h时稍差，获得了Log N/N0为5的灭活。因此，对细胞死亡率的有利效果基本上来自通过循环回路的次数而不是来自液压条件。
结果显示在下面的表3中。
Figure BDA0000096293880000161
可提供多个循环回路，例如2个或3个循环回路。
在上表2中，可观察到对于118MJ/m3的比能量，在单一循环回路的情况下，微生物部分穿过，而没有通过液压短路的任何风险，即，在这种情况下，通过概率接近1比2*106。如果增加第二个循环回路，此外一切等同，微生物的直接通过概率将接近1比(2*106)2，即1比4*1012。如果增加第三个循环回路，微生物的直接通过概率将接近1比(2*106)3，即1比8*1018。
因此，利用根据本发明的方法，对于通常用每毫升106至107个微生物污染的供给液体，由此几乎可能消除微生物通过并进入液压短路的任何可能性，因此可以通过脉冲电场保护巴氏灭菌的液体免受复活的任何风险。

Claims (16)

1.一种用于包含在产品中的生物细胞的膜透化的方法，所述方法被应用在包括发射脉冲电场的至少一个处理室的处理装置中，所述方法包括以下步骤：
-以预定的供给流速，从包括所述产品的供给单元中向所述处理装置供给包括所述生物细胞的产品的步骤；
-以对应于向上述供给流速加上在下面的抽出步骤中所提及的抽出流速的引入流速，将包括所述生物细胞的所述产品引入到所述处理室中的步骤；
-用脉冲电场来处理引入到所述室中的所述产品的步骤；
-以预定的抽出流速针对所述室出口处的产品的抽出步骤，以便将所述产品运回所述室的上游以及所述供给单元的下游。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物细胞选自原核细胞、真核细胞，这些细胞可以是活的或死亡的、整体的或部分的或者动物或植物起源的细胞。
3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述生物细胞来自选自细菌、真菌、酵母菌、霉菌、藻类的单细胞或多细胞有机体。
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述脉冲电场被具体化为电脉冲，所述电脉冲由持续范围可以为50纳秒至1毫秒的放电引起并且递送产生范围为5kV/cm至200kV/cm的脉冲电场峰值的电压。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述产品，尤其当其作为液体出现时，经受湍流液压条件。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，借助于至少一个将所述处理室的下游部分连接至所述处理室的上游部分的循环回路进行所述抽出步骤。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述抽出流速大于所述供给流速。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述抽出流速比所述供给流速大2至100倍。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其中，所述抽出流速比所述供给流速大2至20倍。
10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，在所述抽出步骤之前，对于已处理的产品不包括任何停滞储存步骤。
11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，还有利地包括以优选与上述供给流速相对应的提取流速，从所述处理装置中提取已处理的产品的步骤。
12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述待处理的产品为包括生物细胞的液体，含有生物细胞的泥浆或多细胞有机体如水果。
13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述待处理的产品为液体，所述液体包括来自生物细胞的细胞器或分子，如线粒体、DNA、RNA。
14.根据权利要求12或13所述的方法，其中，所述液体选自水、液体流出物、来自污水处理厂的液体泥浆、果汁、牛奶、液态蛋、调味料、汤、炖过的水果和浓汤。
15.一种用于对包括待除去的生物细胞的产品进行巴氏灭菌或灭菌的方法，所述方法包括应用根据权利要求1至14中任一项所定义的方法的步骤。
16.根据权利要求15所述的方法，其中，所述产品是包括作为生物细胞的酵母菌如酿酒酵母的果汁。
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