CN102323306A - 用化学振荡对复合氨基酸中l-色氨酸的直接定性、定量检测 - Google Patents

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杨武
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Abstract

本发明公开了一种利用B-Z化学振荡分析技术对复合氨基酸中L-色氨酸直接定性、定量检测。L-色氨酸扰动的B-Z振荡体系的特征图谱可用于其定性、定量识别。同时，L-色氨酸可使振荡体系的振幅和周期均增大，当L-色氨酸的浓度在一定范围内时，振幅、周期的增大值与L-色氨酸浓度的负对数呈良好的线性关系，最低检出限分别为1.68×10-8mol/L和1.98×10-7mol/L，相关系数分别为0.9934和0.9954(n＝9)。

Description

用化学振荡对复合氨基酸中L-色氨酸的直接定性、定量检测
技术领域
本发明利用一种B-Z化学振荡分析技术对复合氨基酸中L-色氨酸进行了直接定性、定量检测。 
技术背景
氨基酸种类繁多、性质接近，对复合氨基酸分析一直是色谱分析公认的难题。本发明利用化学振荡对复合氨基酸中L-色氨酸的进行直接定性、定量检测准确高，检测限低，操作简单。 
发明内容
用B-Z化学振荡方法可以检测氨基酸的机理就是：根据不同的氨基酸对化学振荡体系有不同的扰动而形成不同的振荡图形；不同的氨基酸对化学振荡体系扰动大小与氨基酸的浓度成一定比例关系。根据这一原理首次利用化学振荡的方法对复合氨基酸中色氨酸的进行直接定性、定量检测。结果表明，L-色氨酸可使振荡体系的振幅和周期均增大，且当L-色氨酸的浓度在5.36×10-4～3.35×10-7mol/L范围内时，振幅、周期的增大值与L-色氨酸浓度的负对数呈良好的线性关系，最低检出限为1.68×10-8mol/L，相关系数为0.9934(n＝9)。 
为实现上述发明目的，本发明所提出的技术方案是： 
实验装置采用SY-601型超级恒温水浴；85-2数显恒温磁力搅拌器；CHI-832型电化学分析仪；213型铂电极；217型饱和硫酸亚汞电极；302型溴离子选择电极；带恒温夹套全玻璃反应器(50mL)；微量注射器。 
实验所用H2SO4、CH2(COOH)2、KBrO3和Ce(SO4)2均为分析纯，水为二次去离子水。其中Ce(SO4)2，CH2(COOH)2，KBrO3用0.7mol/L H2SO4配制。 
利用化学振荡的方法对复合氨基酸中色氨酸的进行直接定性、定量检测，步骤如下： 
化学振荡反应在带有恒温夹套和磁力搅拌的玻璃反应器中进行，依次向反应器中加入CH2(COOH)2.Ce(SO4)2，H2SO4，KBrO3，使反应底液总体积为20.0mL。实验温度为303±0.1K，恒定搅速，以213型铂电极分别为工作电极和对电极，217型饱和硫酸亚汞电极为参比电极，用CHI-832型电化学分析仪连接计算机检测记录体系电位。在优化实验条件下，振荡体系稳定后，在稳定的B-Z振荡体系中加入不同浓度的L-色氨酸溶液，体系的振幅和周期不同程度增大(如图2B所示)。结果显示，在当所加入色氨酸的浓度在5.36×10-4～3.35×10-7mol/L 范围内时，L-色氨酸浓度的负对数logC与振幅的变化量(ΔA)和周期变量(ΔT)呈良好的线性关系(如图3所示)，最低检出限为1.68×10-8mol/L，其线性回归方程分别为： 
ΔA(mv)＝14.84-1.620log[L-tryptophan](n＝9，r＝0.9934) 
ΔT(s)＝18.08-2.506log[L-tryptophan](n＝9，r＝0.9954) 
本发明的优点和产生有益效果是： 
1、采用化学振荡的方法对复合氨基酸中微量色氨酸直接定性、定量检测，利用不同氨基酸在化学振荡体系存在差异，从而实现色氨酸的定性，定量研究。 
2、该方法简单，仪器价廉，检测快捷，重现性好，准确度高。 
3、该方法所用能快速地满足日常复合氨基酸中色氨酸检测的需要，具有良好的经济效益。 
附图说明
图1.各影响因素对色氨酸测定的影响 
a、H2SO4浓度的影响如图1A所示 
b、催化剂的影响如图1B 
c、KBrO3的影响如图1C 
d、丙二酸的影响如图1D 
e、温度的影响如图1E 
图2.20种氨基酸对振荡图形的影响(共同条件：C(L-tryptophan)＝6.35×10-5mol/L) 
图3.复合氨基酸中色氨酸的振荡图形及L-色氨酸浓度的负对数logC与振幅的变化量(ΔA)的线性关系 
图4.20种氨基酸在振荡体系中对L-色氨酸扰动的影响((共同条件：在振荡周期的底点进样；实验条件与图1相同)。 

Claims (4)

1.一种直接定性、定量检测复合氨基酸中L-色氨酸的方法，其特征是：在硫酸介质中以金属铈离子(Ce4+/Ce3+)作催化剂的条件下丙二酸被溴酸氧化的B-Z振荡体系。在B-Z化学振荡反应进行的过程中向体系中加入L-色氨酸，振荡图形立刻被扰动，振荡周期和振幅发生变化，当L-色氨酸的浓度在一定范围内时，振幅、周期的增大值与L-色氨酸浓度的负对数呈良好的线性关系。
2.如权利要求1实验条件是由丙二酸-Ce(SO4)2-H2SO4-KBrO3组成的B-Z化学振荡体系。
3.如权利要求1或2B-Z化学振荡体系组成浓度：KBrO3：0.065mol/L，Ce(SO4)2：0.002mol/L，MA：0.163mol/L，H2SO4：0.7mol/L，T＝303K
4.如权利要求1或2利用B-Z化学振荡反应进行氨基酸的定性识别，探讨了对复合氨基酸中其他氨基酸的影响范围。
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