CN102318664B - 一种杀菌组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种防腐保鲜剂,特别公开了一种杀菌组合物。该杀菌组合物,其特征在于:包括凤尾兰提取物和大叶女贞提取物,二者的重量配比为9:1-1:9。本发明杀菌组合物的有益效果是:本发明杀菌组合物具有良好的杀菌效果,凤尾兰提取物和大叶女贞提取物组合后具有协同增效作用,能抑制果蔬采后微生物病害,用于采后果蔬病害的防腐保鲜,能有效控制果蔬的腐烂,达到果蔬保鲜的目的;本杀菌组合物安全环保,从植物中提取,作为保鲜剂的有效成分,和化学合成的产品相比,对环境和果蔬都比较安全;毒性低,对人和环境安全,对大鼠急性经口LD50>15000mg/kg·bw。

Description

一种杀菌组合物
(一)      技术领域
    本发明涉及一种防腐保鲜剂,特别涉及一种杀菌组合物。
(二)      背景技术
    果蔬采后易受病原微生物的侵染而腐烂变质,这也是果蔬采后损失的主要原因之一(J. L. Gonzalez Urena,2003)。据统计报道,每年世界各地的果蔬在采后至销售期间的损失高达25%~30%,其中绝大部分是由于微生物侵染造成的(朱璇,2004)。为了解决这一问题,人们采取了筛选抗病品种、控制采收质量、调节贮运环境指标、延缓成熟衰老等一系列技术措施,目前也常配合使用化学防腐保鲜剂控制或延缓病害的发生。使用化学防腐保鲜剂现在已成为部分果蔬长期贮藏中不可缺少的辅助保鲜方法,如葡萄、柑桔的长期贮藏(葡萄目前贮存多采用释放二氧化硫的保鲜剂,柑橘则多使用咪鲜胺、抑霉唑等农用化学成分加工的产品)。随着人民生活水平的提高,消费者对果蔬质量要求日益提高,对果蔬的食用安全性也更重视,这就需要防病效果更好、食用安全性更高的防腐保鲜剂。由于自然选择和对环境的适应性,众多植物具有很好的抑病、防病效果,从植物中提取无毒抑菌物质来代替化学合成防腐保鲜剂已成为国内外采后病害研究的热点。
凤尾兰(Yucca gloriosa L.)又名菠萝花,属龙舌兰科丝兰属,原产北美东部及东南部,现长江流域各地普遍栽植,常绿灌木,是一种重要的药材,有降低胆固醇、减轻关节,等药理作用,还有抑菌活性。有研究报道,凤尾兰花提取物对皮肤真菌有较好的抑制作用,对水果蔬菜保鲜具有一定的作用。参考文献山东农业大学陈庆敏毕业论文,凤尾兰提取的制备方法和抑菌效果。但是凤尾兰提取物,单独使用效果仍不理想,与化学杀菌剂相比,仍有一定的差距。
大叶女贞(Ligustrum lucidum Ait)又名蜡树,属木犀科,女贞属,原产中国,分布在长江流域及南方各省,华北、西北地区也有栽培,栽培甚普遍,常绿灌木或乔木,果实含淀粉可酿酒,并入药为强壮剂。叶可治疗口腔炎、咽喉炎;树皮研磨可治疗烫伤等;根茎泡酒,治风湿且有抑菌活性。现有的单一植物提取物存在杀菌能力弱、保鲜效果差和化学杀菌剂安全性差的问题。
(三)      发明内容
    本发明为了弥补现有技术的不足,提供了一种安全环保、防腐保鲜的杀菌组合物。
本发明是通过如下技术方案实现的:
一种杀菌组合物,其特征在于:包括凤尾兰提取物和大叶女贞提取物,二者的重量配比为9:1-1:9。
该杀菌组合物,其最佳配比为凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的重量配比为2:3。
凤尾兰提取物的提取方法为:洗净晾干的凤尾兰鲜叶用组织粉碎机粉碎,加入30%乙醇(V/V),料液比1g:10mL,于70℃的恒温水浴锅中浸提3h,过滤,浓缩至固体粉末。
大叶女贞提取物的提取方法为:洗净晾干的大叶女贞鲜叶用组织粉碎机粉碎,加入30%乙醇(V/V),料液比1g:15mL,于60℃的恒温水浴锅中浸提2h,过滤,浓缩后至粉末。
凤尾兰中主要化学成分为甾体皂苷元和甾体皂苷等,大叶女贞中主要成分为萜类、黄酮类、苯乙醇类等。
本发明杀菌组合物的有益效果是:本发明杀菌组合物具有良好的杀菌效果,凤尾兰提取物和大叶女贞提取物组合后具有协同增效作用,能抑制果蔬采后微生物病害,用于采后果蔬病害的防腐保鲜,能有效控制果蔬的腐烂,达到果蔬保鲜的目的;本杀菌组合物安全环保,从植物中提取,作为保鲜剂的有效成分,和化学合成的产品相比,对环境和果蔬都比较安全;毒性低,对人和环境安全,对大鼠急性经口LD50>15000 mg/kg·bw。
(四)      具体实施方式
以下通过试验实施例对本发明进一步的详细说明,但本发明并不限于此。
本发明实施例是采用室内毒力测定和田间试验相结合的方法。先通过室内毒力测定,明确两种提取物按一定比例复配后的增效比值(SR),SR<0.5为拮抗作用,0.5≤SR≤1.5为相加作用,SR>1.5为增效作用,在此基础上,再进行田间试验。
实施例1:凤尾兰提取物、大叶女贞提取物及其复配对柑橘青霉病菌室内毒力测定:
Ⅰ)供试药剂:
A:凤尾兰提取物:提取方法为:洗净晾干的凤尾兰鲜叶用组织粉碎机粉碎,加入30%乙醇(V/V),料液比1g:10mL,于70℃的恒温水浴锅中浸提3h,过滤,浓缩至固体粉末;
B:大叶女贞提取物:提取方法为:洗净晾干的大叶女贞鲜叶用组织粉碎机粉碎,加入30%乙醇(V/V),料液比1g:15mL,于60℃的恒温水浴锅中浸提2h,过滤,浓缩后至粉末;
AB1:凤尾兰提取物:大叶女贞提取物=9:1
AB2:凤尾兰提取物:大叶女贞提取物=8:2
AB3:凤尾兰提取物:大叶女贞提取物=7:3
AB4:凤尾兰提取物:大叶女贞提取物=6:4
AB5:凤尾兰提取物:大叶女贞提取物=5:5
AB6:凤尾兰提取物:大叶女贞提取物=4:6
AB7:凤尾兰提取物:大叶女贞提取物=3:7
AB8:凤尾兰提取物:大叶女贞提取物=2:8
AB9:凤尾兰提取物:大叶女贞提取物=1:9;
Ⅱ)供试病菌:柑橘青霉(Penicillium italicum);
Ⅲ)试验方法:
采用菌丝生长速率测定法:设13个处理,即凤尾兰提取物、大叶女贞提取物、9个两种成分的不同配比、溶剂对照和空白对照,将两种药剂按不同比例加入到定量的熔化的PDA培养基中,使两个单剂和复配剂的最终浓度分别为100、50、25、12.5、6.25mg/L,充分摇匀,倒入已灭菌的培养基中,待培养基凝固后,用直径为0.5cm的打孔器制取菌碟,用接种针将菌碟接种到培养基中央,菌丝面朝下,每皿一块,每个处理重复3次,置于25~26℃培养箱中培养48h后用十字交叉法测定菌落直径。以3次重复的平均值计算抑制率。计算公式为:
Figure 446484DEST_PATH_IMAGE001
将菌丝生长抑制率换算成几率值,将剂量浓度换算成对数,以剂量对数(x)和几率值(y),得到毒力公式y=a+bx,计算出每种药剂的EC50值。根据Wadley的方法计算混配剂的相互作用,以增效系数SR值分析混配效果,SR<0.5为拮抗作用,0.5≤SR≤1.5为相加作用,SR>1.5为增效作用。计算公式如下:
Figure 260856DEST_PATH_IMAGE002
Figure 21002DEST_PATH_IMAGE003
其中:a、b分别为凤尾兰提取物和大叶女贞提取物在组合中所占的比例;A为凤尾兰提取物;B为大叶女贞提取物;
Ⅳ)实验结果:
凤尾兰提取物和大叶女贞提取物两种单剂及不同复配组合物对供试植物病原菌的抑制率、毒力回归方程、EC50值和混剂的增效系数SR见表1:
Figure 747691DEST_PATH_IMAGE004
由表1可以看出,凤尾兰提取物与大叶女真提取物以不同比例混用的增效比值均在1.0以上,其中两药剂配比在4:6和5:5时的SR值均大于1.5,表现不同程度的增效作用,其中以4:6配比增效比值最大,为1.69,可作为最佳配比。
实施例2:含凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的杀菌组合物对柑橘的药效试验:
Ⅰ)供试材料:
柑橘:购于济南市堤口路果品批发市场,剔除病虫果和机械损伤的果,挑选果形大小、成熟度基本一致的果实供试验用;
Ⅱ)供试药剂:
含凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的杀菌组合物,其中凤尾兰提取物:大叶女贞提取物的重量比为2:3;
Ⅲ)试验方法:
将含凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的杀菌组合物分别用水配制成浓度为2000ppm、1000ppm和400ppm的药液。将待处理果一次性倒入药液桶中浸没,在药液中浸渍1min后,捞起晾干,装入衬有保鲜袋的纸箱内,每个浓度重复4次,入库常温贮藏。试验期间仓库平均温度10~13℃,相对湿度80% ~90%。柑橘贮藏后30d进行第1次统计,以后每隔15d调查1次,共统计3次。统计各处理的烂果数,按下列公式计算防病效果。
烂果率(% )=(烂果数/统计总果数)×100
防病效果(% )=[(清水对照处理烂果率-试验药剂处理烂果率)/清水对照处理烂果率]×100;
Ⅳ)试验结果:
表2 含凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的杀菌组合物防治柑橘贮藏期青霉病和绿霉病的效果:
Figure 946591DEST_PATH_IMAGE005
含凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的杀菌组合物对柑橘贮藏期的青霉病和绿霉病有很好的防治效果,用2000ppm、1000ppm和400ppm的药液处理柑橘果实并贮藏,两个高剂量处理的防效显著高于低剂量,烂果率显著低于对照。
实施例3:含凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的杀菌组合物对葡萄的药效试验:
Ⅰ)供试材料:
葡萄:购于济南市堤口路果品批发市场,运回后进行挑选,选择成熟度一致,无伤害,无机械伤,无病虫害的果实;
Ⅱ)供试药剂:
含凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的杀菌组合物,其中凤尾兰提取物:大叶女贞提取物的重量比为2:3;
Ⅲ)试验方法:
将含凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的杀菌组合物分别用水配制成浓度为2000ppm、1000ppm和400ppm的药液。将葡萄放入溶液中浸泡5s,对照于水中浸泡相同时间。取出晾干室温下(25℃左右)存放。贮藏至第6天统计腐烂率、落粒率,以平均值为试验数据,
腐烂率=(腐烂果重/总果重)×100%
落粒率=(落粒数/总果数)×100%;
Ⅳ)实验结果:
表3 含凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的杀菌组合物防治葡萄贮藏期青霉病和绿霉病的效果:
Figure 553153DEST_PATH_IMAGE006
由表3可以看出,贮藏 6d后,不同处理的葡萄,其腐烂率与对照相比均得到显著抑制(P < 0.05),各处理腐烂率均低于20%,尤其是2000ppm的腐烂率最低。

Claims (2)

1.一种杀菌组合物,其特征在于:由凤尾兰提取物和大叶女贞提取物组成,二者的重量配比为9:1-1:9;凤尾兰提取物的提取方法为:洗净晾干的凤尾兰鲜叶用组织粉碎机粉碎,加入30%乙醇(V/V),料液比1g:10mL,于70℃的恒温水浴锅中浸提3h,过滤,浓缩至固体粉末;大叶女贞提取物的提取方法为:洗净晾干的大叶女贞鲜叶用组织粉碎机粉碎,加入30%乙醇(V/V),料液比1g:15mL,于60℃的恒温水浴锅中浸提2h,过滤,浓缩后至粉末。
2.根据权利要求1所述的杀菌组合物,其特征在于:凤尾兰提取物和大叶女贞提取物的重量配比为2:3。
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