CN102318649B - 一种抗植物病毒的植物源制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种抗植物病毒的植物源制剂，由商陆根、松树枝叶复合提取物与溶剂配制而成，其主要组成重量比为：商陆多糖6.9-7.6%、商陆蛋白1.7-2.1%、三萜皂甙0.5-1.0%、a-蒎烯0.64-0.7%、β-蒎烯0.3-0.33%、75%乙醇88.27－89.96％；试验结果表明本发明抗植物病毒的植物源制剂不仅对植物病毒病具有较高的预防及治疗作用，而且不污染环境，成本低廉、制备工艺简单，节约成本，安全、直接、环保、高效。
Description
技术领域
本发明涉及一种抗植物病毒的植物源制剂的制备及应用方法，特别是适用于防控植物病毒病。该制剂可以钝化植物病毒、抑制其繁殖并具有诱导植物对病毒产生抗性的作用，2-3次用药可有效控制植物病毒的危害。
背景技术
植物病毒病广泛发生于粮油、蔬菜、果树等多种作物上，危害相当普遍，造成的损失非常严重，并且其防治比较困难，可称得上是植物病害中的顽症，日益受到重视。
中国传统中医药和民间医药中蕴藏着极为丰富的抗病毒天然活性物质，是开发抗植物病毒抑制剂的重要资源。由于天然抗植物病毒物质的作用特点与化学农药有很大不同，只有了解其作用特点并掌握正确的使用方法，才能更好地发挥其对病毒病的防治作用。90％以上的植物病毒属RNA病毒，因此从机理上筛选RNA合成抑制剂或蛋白合成抑制剂将是一种有的放矢的研究方法。我们认为从新的天然化合物中或将各种杂环及取代杂环引入现已发现的天然化合物活性母体上去一定能研发出新型、高效、低毒、低残留的环境友好的抗植物病毒抑制剂。
目前，植物病毒病的防治主要是化学药物喷洒防治法，它虽然对病毒病的发生发展起到了一定防控作用，但同时又带来了农药在蔬菜、果品上的残留、对土壤、大气、水源等环境的污染、杀死天敌等弊端。特别是蔬菜、果品对农药的使用要求较高，有毒、残留期长的药物已禁止使用。
植物源抗植物病毒制剂是一种新的生物农药，具有无毒、不污染环境、无残留、不杀伤天敌、保护人畜安全等特点。并且生产过程中无“三废”排放，生产的原材料可再生。具有用药量少、药的持效期长、成本低廉等优点。
发明内容
本发明的目的是提供一种低成本、高活性的抗植物病毒的植物源制剂及其制备和应用方法，以有效控制植物病毒病的危害。
核糖体失活蛋白(RibosomeInactivatingProteins,RIPs)是一类专一作用于真核细胞核糖体抑制蛋白合成的蛋白毒素,分为单链SCRIPs和双链RIPs,具有广谱的抗病毒活性.RIPs只能选择性进入病毒感染等异常细胞内,而对正常宿主细胞感染较小,它们除对不同的植物病毒有效外,体外试验表明还可抑制流感病毒,乙型脑炎病毒,柯萨奇病毒,麻疹病毒,单纯疱疹病毒,脊髓灰质炎病毒,肝炎病毒及腺病毒等；多糖(Polysaccharides,PS)是广泛存在于自然界中的一类大分子物质,也是生命必需的成分之一.大量研究表明,许多多糖对各种病毒如艾滋病毒(HIV-1),单纯疱疹病毒,巨细胞病毒,流感病毒,囊状胃炎病毒,劳斯肉瘤病毒,乌肉瘤病毒等有抑制作用；三萜皂甙广泛分布于植物中,对多种病毒均有抑制作用.从植物中分离得到的三萜类化合物已被证实具有广泛的抗病毒活性,对艾滋病病毒HIV,水痘带状疱疹病毒(VAV),巨细胞病毒等有抑制作用。
本发明就是通过提取商陆、松树枝叶中植物蛋白、多糖、三萜皂甙等抗病毒成分，辅以适当的溶剂而研制出的一种植物源抗病毒制剂。
其技术解决方案如下：一种抗植物病毒的植物源制剂，由商陆根、松树枝叶的复合提取物与溶剂配制而成，其中各成分的重量百分比为：
商陆多糖 6.9-7.6%
商陆蛋白 1.7-2.1%
三萜皂甙 0.5-1.0%
a-蒎烯 0.64-0.7%
β-蒎烯 0.3-0.33%
75%乙醇 88.27－89.96％。
所说的溶剂，为有机溶剂75%乙醇。
上述抗植物病毒的植物源制剂，其制备方法，是将商陆根、松树枝叶按重量比3：1混合，加工碎成颗粒，过20筛目，把25kg颗粒放入中药多功能提取设备的提取釜中进行萃取，加入75升75%乙醇，在82－85℃的温度蒸煮2.0小时后，再浓缩1小时，即成商陆根、松树枝叶复合提取物浓缩膏及结晶体；再加入75%乙醇溶剂，充分溶解，制成饱和液，装瓶密封。
上述抗植物病毒的植物源制剂，其使用方法包括下述步骤：将抗植物病毒的植物源饱和液配制成50ug/ml —100ug/ml的用量均匀的喷洒到植物上即可。
本发明的有益效果：
本发明抗植物病毒制剂对各类植物病毒病均具有很好的防控作用。不仅防控效果好，而且不污染环境，成本低廉、制备工艺简单，极大地减少了劳动量，安全、直接、环保、高效。本发明抗植物病毒制剂可用于粮油、蔬菜、果树等多种作物病毒病的预防和防治，通过早期用药可以预防病毒病的发生、对已发生的病毒病可抑制其进一步的发生、传播、蔓延，达到遏制病毒病危害的目的，为植物病毒病的综合治理提供了技术保障。
具体实施方式
实施例。本发明所述的抗植物病毒的植物源制剂，其各成分的重量百分比如下表：
其制备方法如下：
（1）将商陆根、松树枝叶按重量比3:1，加工碎成颗粒，过20筛目把25kg颗粒装入中药提取釜中进行萃取；
（2）加入75%乙醇75升，82－85℃温度蒸煮2.0小时后，再浓缩1小时，浓缩成浓缩膏及结晶体，即商陆根、松树枝叶复合提取物；
（3）取提取物再加入溶剂75%乙醇，边加边搅拌直至充分溶解配制成饱和液即为抗病毒制剂成品。
（4）分别灌装：将抗病毒制剂500ml装入塑料瓶中密封待用。
本发明抗病毒制剂的应用技术，步骤以下：
⑴在各类植物幼苗期，病毒病发生以前，均匀喷洒50ug/ml的本植物源抗病毒制剂，预防各类病毒病的发生。
⑵在各类植物病毒病发生期均匀喷洒100ug/ml的本植物源抗病毒制剂，治疗各类病毒病发生、传播、蔓延。
田间预防效果试验。
2009年5月6号在在泰安市岱岳区良庄镇进行预防试验。当番茄苗第一片真叶出现（破心），喷施药剂，每个处理喷施番茄苗100株。以后间隔5天喷一次，连喷三次。药剂处理为植物源抗病毒制剂（实施例1所得产品）100ug/ml、植物源抗病毒制剂50ug/ml、植物源抗病毒制剂25ug/ml、20%病毒Ａ（北方齐齐哈尔化工厂生产）50ug/ml、清水对照等共5个处理，每个处理3次重复，随机排列。药剂喷施完毕后，接种病毒。病毒的制备方法是：采感染病毒病的番茄鲜叶，按鲜病叶：缓冲液=1:3的重量体积比加缓冲液，缓冲液种类为0PBS，缓冲液的酸碱度pH7。然后用石英砂将混合体碾磨成匀浆后纱布过滤，摩擦接种。接种10天后调查病情。计算病情指数及预防效果。结果见表一。
表一：植物源抗病毒制剂对番茄病毒病的预防效果。
注：病毒病分级标准：0级：无病症；1级：叶片明显呈花叶或黄化，有疮斑；3级：叶片凹凸不平，变小且畸形；5级：植株形成丛枝，大量落花落蕾；7级：整个植株矮化、果小质劣，果实花脸。
病情指数=∑（各级病株数x相对级数值）/（调查总株数x最高病级数）x100
预防效果=（CK0病指数-药剂处理后病指数）/ CK0病指数x100
式中：CK0—对照区用药前；CK1—对照区用药后；CL0—处理区用药前；CL1—处理区用药后。
由表一可以看出，植物源抗病毒制剂使用浓度100ug/ml、50ug/ml均具有较好的预防效果，平均预防效果分别为：89.18%、83.70%，均高于对照20%病毒Ａ50ug/ml 76.14%的预防效果；植物源抗病毒制剂使用浓度25ug/ml的预防效果相对较差。综合分析，植物源抗病毒制剂使用浓度100ug/ml、50ug/ml均具有较好的预防效果，但比较成本以50ug/ml的使用浓度抗病毒效果好，较经济。
田间治疗效果试验。
当番茄苗第一花序现蕾，接种病毒。接种方法同实施例3。接种48h后喷施药剂。药剂处理和喷施方法同实施例3。每次喷药前和第三次喷药5天后调查病情。结果见表二。
病情分级标准，病情指数计算方法，符号代表含义同田间预防效果试验。
相对防效=[1-（ CK0病指数xCL1病指数）/（ CK1病指数xCL0病指数）] x100
表二：植物源抗病毒制剂对番茄病毒病的治疗效果。
由表二可以看出，植物源抗病毒制剂通过三次用药治疗均取得了一定的效果。以使用浓度100ug/ml具有较好的治疗效果，平均治疗效果为：72.19%，显著高于使用浓度50ug/ml，平均治疗效果为51.86%、使用浓度25ug/ml，平均治疗效果为9.93%及对照20%病毒Ａ50ug/ml，平均治疗效果为50.96%的治疗效果。综合分析，植物源抗病毒制剂使用浓度100ug/ml具有较好的治疗效果。
Claims (2)
1.一种抗植物病毒的植物源制剂，由商陆根、松树枝叶的复合提取物与溶剂配制而成，其中各组分的重量百分比为：
商陆多糖 6.9-7.6%
商陆蛋白 1.7-2.1%
三萜皂甙 0.5-1.0%
a-蒎烯 0.64-0.7%
β-蒎烯 0.3-0.33%
75%乙醇 88.27－89.96％；
所述的抗植物病毒的植物源制剂，其制备方法是将商陆根、松树枝叶按重量比3：1混合，加工碎成颗粒，过20筛目，把25kg颗粒放入中药多功能提取设备的提取釜中进行萃取，加入75升75%乙醇，在82－85℃的温度蒸煮2.0小时后，再浓缩1小时，即成商陆根、松树枝叶复合提取物浓缩膏及结晶体；再加入75%乙醇溶剂，充分溶解，制成饱和液，装瓶密封即可。
2.如权利要求1所说的抗植物病毒的植物源制剂，其特征在于所说的溶剂为有机溶剂75%乙醇。
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