CN102295671B - 具有抗炎活性的大环内酯化合物的晶形 - Google Patents

Abstract

本发明涉及具有抗炎活性的大环内酯类化合物，更特别涉及具有抗炎活性的大环内酯衍生物的新的稳定晶形，用于制备这些晶形的方法，包含它们作为活性成分的药物组合物和所述晶形用于治疗炎性疾病的用途。

Description

具有抗炎活性的大环内酯化合物的晶形

本发明是申请日为2006年7月5日的中国专利申请200680024413.7的分案申请，原申请的发明名称为“具有抗炎活性的大环内酯化合物的晶形”。

本发明涉及具有抗炎活性的大环内酯类化合物，更特别涉及具有抗炎活性的大环内酯衍生物的新的稳定晶形，用于制备这些晶形的方法，包含它们作为活性成分的药物组合物和所述晶形用于治疗炎性疾病的用途。

众所周知许多抗生素，特别是基于红霉素的具有14个环原子的大环内酯类，在它们的抗菌活性之外具有抗炎性质[Clin.Immunother.，(1996)，6，454-464]。

红霉素是一种天然的大环内酯(The Merck Index，XIII Edition，No.3714，p.654)，其已经被广泛用于治疗由革兰氏阳性菌、一些革兰氏阴性菌和支原体引起的感染。

最近学术界的兴趣已经转移到红霉素和其衍生物的抗炎和免疫调节性质[Journal of Antimicrobial Chemotherapy，(1998)，41，Suppl.B，37-46]。

这种活性在临床研究和体内体外试验中都有充分的文献证明。

然而，传统的大环内酯化合物具有很强的抗菌活性这一事实不允许它们广泛用于不是由病原微生物引起的炎性过程的慢性治疗中，因为这可能引起耐药菌株的快速产生。

上述技术问题在相同申请人的国际专利申请WO 2004/013153(WO′153)中被成功地解决了，其中描述了具有抗炎活性和不具有抗生活性的大环内酯衍生物。

特别地，以固体无定形形式得到了下式化合物(9S)-3-去克拉定糖基3′-去甲基-3′-乙酰-9-脱氧-9-脱氢红霉素A(下文称为该化合物)。

物质以超过一种晶体结构结晶的能力被称为多晶型现象，一种特定的晶形被称为多晶型。

WO′153没有公开或暗示该化合物的结晶性多晶型的可能存在。

在本领域已知，相同活性化合物的不同固体形式可以显示不同的物理性质，例如溶解性、溶解速率、和/或贮存期限稳定性，其可以导致疗效上的不同。

另外，有关结晶态或无定形状态的固体形式的不同物理性质，可以显著地影响一种化合物的化学与药学可制造性，特别是在工业规模上制备或使用时。

例如，能够提供药用物质的尽可能纯的形式是很重要的。

典型地，无定形物质比结晶形式更加难于处理和配制，经常面临稳定性和不纯的问题。

因此，技术人员期望获得该化合物的基本上结晶稳定的形式，其可以容易地分离，使它特别适合作为药品使用。

WO′153提供了一种从红霉素开始生产该化合物的无定形形式的高效方法。

现在已经发现，通过使用合适的反应条件和溶剂，可以从反应混合物中分离该化合物的稳定固体结晶形式，收率和纯度良好。

通过测量粉末样品的X射线衍射来确认多晶型的结晶度。

因此，本发明的一个客体是该化合物的结晶稳定形式，本文称之为晶形I。

晶形I可以提供基本上与图1所示一致的X射线粉末衍射图案。

在下表1中报告衍射峰的2θ角值以及它们对应的相对强度：

表1

角(°2θ)	强度(％)
		4.9	40.2
5.5	13.4
		6.8	7.5
8.5	17.7
		9.1	100.0
9.6	62.0
		10.0	45.1
10.3	79.5
		11.1	29.7
11.6	14.9
		12.6	20.7
13.5	26.4
		14.0	15.9
14.5	56.5
		15.8	15.4
16.2	33.9
		16.6	26.3
17.0	28.6
		18.2	57.3
19.3	31.4
		20.0	25.3
20.9	30.5
		21.4	26.9
21.9	20.9
		23.3	15.9
23.9	16.2
		29.1	13.6

该化合物的晶形I的特征在于提供X射线粉末衍射图，包括2θ角值大约4.9；大约8.5；大约9.1；大约9.6；大约10.3；大约11.1；大约14.5；大约17.0；大约18.2；大约19.3。

晶形I的进一步特征在于提供差示扫描量热法曲线，具有包括在163-174℃范围内的起始熔化(起始：168.2℃；峰：174.8℃)。

优选地，晶形I提供差示扫描量热法曲线，具有包括在163-168℃范围内的起始熔化。

晶形I比在WO′153中获得的已知固体无定形形式更充分地满足上述加工和稳定性要求。

也已经惊人地发现，可以获得该化合物的更加稳定的结晶形式。

因此，本发明的另一个客体是该化合物的结晶稳定形式，本文称之为晶形II。

晶形II可以提供基本上与图2所示一致的X射线粉末衍射图。

在下表2中报告衍射峰的2θ角值以及它们对应的相对强度：

表2

角(°2θ)	强度(％)
		6.8	5.6
9.4	2.9
		10.0	13.2
11.4	15.2
		11.9	70.8
12.9	27.9
		13.4	91.4
13.9	11.5
		14.6	37.4
15.3	42.8
		16.4	100.0
17.4	5.8
		18.8	34.1
19.0	36.3
		19.5	29.6
19.8	10.5
		20.2	16.3
20.5	18.4
		21.1	24.1
21.5	17.1
		21.9	12.7
22.7	17.7
		23.2	14.3
24.0	14.1
		24.2	10.3
38.1	7.6
		38.8	5.8

该化合物的晶形II的特征在于提供X射线粉末衍射图，包括2θ角值大约11.9；大约13.4；大约13.9；大约14.6；大约15.3；大约16.4；大约17.4；大约18.8；大约19.0；大约19.5；大约21.1；大约22.7。

晶形II的进一步特征在于提供差示扫描量热法曲线，具有包括在218-226℃范围内的起始熔化(起始：222.7℃；峰：225.0℃)。

优选地，晶形II提供差示扫描量热法曲线，具有包括在218-223℃范围内的起始熔化。

晶形II的特征在于热力学活性低，因此显示出有益的性质，例如在热力学上比晶形I更加稳定，特别是在生物体液中。

通过方便应用于工业规模的方法从反应混合物中分离晶形II，收率和纯度良好，作为它的热力学稳定性的结果，它特别适合作为药品使用。

按照本发明进一步提供通过按照抗溶剂沉淀法分离产物来制备晶形I的方法。

在WO′153的第二种合成路线中，该化合物的制备是从红霉素A开始的，还原9位酮基团，单脱甲基化3′位氮原子，水解克拉定糖，再乙酰化所得胺。

在乙酰化步骤的结尾，将该化合物的干燥残留物溶解在乙酸乙酯中，用稀柠檬酸溶液洗涤杂质。

过滤如此获得的有机相，蒸馏溶剂。

为了分离所需的晶形I，向该化合物的乙酸乙酯溶液加入甲基-叔丁基醚作为抗溶剂。

因此，本发明的进一步客体是用于制备晶形I的方法，其包括：向该化合物的乙酸乙酯溶液加入甲基-叔丁基醚，冷却所得反应混合物，过滤并干燥结晶产物。

例如，晶形I的制备是如下进行的，将在WO′153中所述工艺之后获得的该化合物的干燥残留物溶于乙酸乙酯，向所得溶液加入甲基-叔丁基醚作为抗溶剂。

作为替代选择，向直接来自乙酰化步骤的该化合物溶液加入甲基-叔丁基醚，得到包含该化合物的混合溶剂/抗溶剂，也就是包括乙酸乙酯/甲基-叔丁基醚的混合物。

换句话说，在抗溶剂沉淀中优选作为原料的该化合物溶液是直接来自乙酰化步骤后处理的反应混合物。

优选地，乙酸乙酯与甲基-叔丁基醚之间的重量比是约1∶1w/w。

优选地，抗溶剂的加入是在温度大约50℃下进行的。

优选地，乙酸乙酯溶液具有按重量计约30-40％的产物浓度。

优选地，按照一个预计降低温度0.08℃/分钟直至大约10℃的过程，历经3小时冷却混合物。

本发明方法客体的一种实施方式包括蒸馏乙酸乙酯溶液直到产物浓度达到按重量计30-40％，在室温下保持缓慢的搅拌。产物开始沉淀，加热混悬液直到约50℃，随后加入甲基-叔丁基醚，在大约3小时后冷却反应混合物直至约10℃。过滤固体，用乙酸乙酯/甲基-叔丁基醚1/1洗涤，在真空下干燥。分离到产物的晶形I。

按照本发明进一步提供用于转化晶形I为更稳定的晶形II的方法。

因此，本发明的进一步客体是用于制备晶形II的方法，其包括通过加热所述晶形I的水悬液使晶形I向晶形II转化。优选地，为了改善混悬液的流变性质和避免可能发生的搅拌和过滤缺点，水/底物的重量比是约15∶1w/w。

优选地，加热混悬液直至包括在30-35℃之间的温度。

本发明方法客体的一种实施方式包括加热晶形I在水中的混悬液直至温度约30-35℃，在同样的温度下保持搅拌约一天，冷却至室温，过滤反应混合物，用水洗涤，在真空下干燥。分离到产物的晶形II。

按照本发明进一步提供用于制备热力学稳定的晶形II的方法，避免动力学晶形I的分离和随后由晶形I转化。

目前已经发现，从甲基乙基酮中结晶有可能诱导热力学晶形II的直接沉淀。

因此，本发明的进一步客体是用于制备晶形II的方法，其包括该化合物从甲基乙基酮中结晶。

例如，晶形II的制备是如下进行的，将在WO′153中所述工艺之后获得的该化合物的干燥残留物溶于甲基乙基酮，使所得溶液结晶。

作为替代选择，优选作为本发明结晶客体中的起始产物的该化合物在甲基乙基酮中的溶液，是直接来自乙酰化步骤后处理按照惯用方法溶剂从乙酸乙酯变为甲基乙基酮的反应混合物。

优选地，该化合物在甲基乙基酮中的溶液包括按重量计低于15％的乙酸乙酯残留量。

优选地，浓缩该化合物在甲基乙基酮中的溶液，直到产物浓度达到按重量计25-50％之间。

更优选地，浓缩溶液直到产物浓度达到按重量计约36％。

为了促进产物沉淀，用晶形II接种可能是有用的。

优选地，在蒸馏之前在室温下接种溶液，直到获得适合于晶形II沉淀的溶液浓度。

优选地，当达到所述适合的浓度和产物开始沉淀时，使所得混悬液维持在约75℃下达几个小时。

优选地，历经5小时冷却混合物直至大约0℃，维持在该温度下达大约1小时。

本发明方法客体的一种实施方式包括将如WO′153所述以固体无定形形式获得的该化合物溶解在甲基乙基酮中。

蒸馏溶液，直到获得按重量计约36％的产物浓度。

在冷却至约75℃之后，保持反应混合物搅拌达几个小时。然后历经5小时冷却至0℃，在该温度下保持大约1小时。过滤混合物，用甲基乙基酮洗涤。分离到产物的晶形II。

本发明方法客体的另一种实施方式包括来自乙酰化步骤操作的反应混合物的溶剂从乙酸乙酯变为甲基乙基酮。在过滤和用甲基乙基酮洗涤之后，用晶形II接种溶液，蒸馏混合物，直到获得获得按重量计约36％的产物浓度。

在冷却至约75℃后，保持反应混合物搅拌达几个小时。然后历经5小时冷却至0℃，在该温度下保持大约1小时。过滤混合物，用甲基乙基酮洗涤。分离到产物的晶形II。

技术人员将认识到甲基乙基酮结晶法、即本发明的客体如何也可用于从晶形I开始制备晶形II。

本发明的化合物客体是没有抗生活性的抗炎大环内酯，因此可用于治疗和预防炎性疾病。

因此，本发明的进一步客体是所述化合物的晶形I作为药品的用途。

本发明的进一步客体是所述化合物的晶形II作为药品的用途。

治疗性或预防性用在上述病变中的本发明化合物将优选地用在适合于口服、直肠、舌下、非胃肠道、局部、透皮和吸入给药的药物组合物中。

因此，本发明的另一个客体是药物组合物，包括治疗有效量的该化合物的晶形I作为活性组分与药学上可接受的载体的混合物。

本发明的另一个客体是药物组合物，包括治疗有效量的该化合物的晶形II作为活性组分与药学上可接受的载体的混合物。

本发明的药物组合物客体可以是液体，适合于口服和/或非胃肠道给药，例如滴剂、糖浆、溶液、可直接使用或稀释冻干制剂制备的注射溶液，和固体或半固体例如片剂、胶囊、颗粒、粉剂、小丸、阴道栓、栓剂、霜剂、软膏、凝胶、油膏；或者溶液、混悬液、乳液和其他适合于吸入或透皮给药的形式。

依赖于组合物的类型，除了治疗有效量的本发明化合物客体之外，它们将包含普遍用在药物组合物制备中的某些药用固体或液体赋形剂或稀释剂，和可选的进一步的添加剂，例如增稠剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、矫味剂和着色剂。

本发明药物组合物客体的制备可以按照普通的技术进行。

通过参考如下所述的附图来说明本发明。

图1显示晶形I的粉末X射线衍射图。

图2显示晶形II的粉末X射线衍射图。

图3显示晶形I的差示扫描量热图。

图4显示晶形II的差示扫描量热图。

差示扫描量热图是在TA Q100上测定的(10℃/min；铝盘)。

起始熔化被定义为从基线发生显著变化的点，并测量之。

技术人员将认识到，精确的熔点值将受到化合物纯度、样品重量、加热速率和粒度的影响。

本发明的晶形I和II的X射线衍射图是在具有Cu K alpha-1辐射源的X′Pert Philips(Bragg-Brentano geometry)X射线衍射仪上测定的。

峰的位置和强度是使用程序X′Pert Philips Analitycal测定的。

X射线粉末衍射峰的相对强度可以因样品制备技术、样品安装程序和使用的特定仪器而异。

可以理解尽管在这里结合优选的实施方式说明发明，不过本领域技术人员知道不偏离本发明精神可以有其他实施方式。

提供下列实施例用于更好地理解发明。

实施例1

(9S)-3-去克拉定糖基-3′-去甲基-3′-乙酰-9-去氧-9-脱氢红霉素A晶形 I的制备。

将按照WO′153所述乙酰化步骤后处理获得的固体无定形形式的该化合物(26.0g)溶于乙酸乙酯(39.0g)。将混合物在室温下搅拌2小时，产物开始沉淀，加热所得混悬液直至约50℃。

然后历经30分钟加入甲基-叔丁基醚(39.0g)，将混悬液在50℃下搅拌2小时，然后在8小时内冷却到10℃，进一步在这种温度下保持搅拌2小时。

过滤分离所得固体，用乙酸乙酯/甲基-叔丁基醚混合物(1∶1)洗涤(3x5ml)，然后在45℃真空下干燥16小时，得到晶形I(14.4g)，为白色固体。

实施例2：

晶形I向晶形II的转化。

将晶形I(55.4g，0.098摩尔)在软化水898.5g中的混悬液加热直至30-35℃，在该温度下保持搅拌至少24小时。

当差示扫描量热图形显示一个单峰和起始温度≥219.0℃时，认为转化完全了。

然后历经30分钟冷却混悬液直至25℃，在室温下维持1小时。

在古氏滤器上过滤固体，用软化水(60.0g)洗涤平板。

在50℃真空下干燥固体，得到晶形II(52.4g，效价96.9％，收率92.7％)。

实施例3

(9S)-3-去克拉定糖基-3′-去甲基-3′-乙酰-9-去氧-9-脱氢红霉素A晶 形II的制备。

将按照WO′153所述方法获得的该化合物(126.7g)溶于甲基乙基酮(1586.0g)。在常压下蒸馏所得溶液直至浓度约为15-17％w/w，然后接种，进一步蒸馏直至最终浓度约为25-26％w/w。将所得混悬液在75℃下搅拌5小时，历经7.5小时冷却到0℃(约10℃/h)，在这种温度下保持搅拌2小时。过滤分离所得固体，用冷(0℃)甲基乙基酮洗涤(2x 56g)，然后在50℃真空下干燥16小时，得到晶形II(110.2g)，为白色固体。

Claims (11)

1.下式化合物的晶形II， 

特征在于X射线粉末衍射图包括2θ角值大约11.9;大约13.4;大约13.9;大约14.6;大约15.3;大约16.4;大约17.4;大约18.8;大约19.0;大约19.5;大约21.1;大约22.7。 

2.根据权利要求1所述的晶形，其提供基本上与图2所示一致的X射线粉末衍射图。 

3.根据权利要求1或2所述的晶形，特征在于差示扫描量热法曲线具有包括在218－226℃范围内的起始熔化。 

4.根据权利要求3所述的晶形，特征在于差示扫描量热法曲线具有包括在218－223℃范围内的起始熔化。 

5.一种用于制备根据权利要求1-4中任一项的晶形II的方法，其包括通过加热式I化合物的晶形I的水悬液使晶形I向晶形II转化，其中所述式I化合物的晶形I特征在于X射线粉末衍射图包括2θ角值大约4.9;大约8.5;大约9.1;大约9.6;大约10.3;大约11.1;大约14.5;大约17.0;大约18.2;大约19.3。 

6.根据权利要求5所述的方法，其中悬液被加热到包括在30-35℃之间的温度。 

7.一种用于制备根据权利要求1-4中任一项的晶形II的方法，其包括式I化合物从甲基乙基酮中结晶。 

8.根据权利要求7所述的方法，进一步包括用晶形II接种溶液。 

9.一种药物组合物，包括治疗有效量的根据权利要求1-4中任一项的晶形II作为活性组分与药学上可接受的载体的混合物。 

10.根据权利要求9所述的药物组合物在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。 

11.权利要求10的用途，其中所述炎性疾病是呼吸疾病。 

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