CN102283822A - 丹皮酚在恶性肿瘤放射增敏中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及丹皮酚的新医药用途，具体地说，涉及丹皮酚作为放射增敏剂的新医药用途。本发明令人意外地发现丹皮酚具有增加肿瘤细胞放射敏感性的作用，对Lewis肺癌具有明显的体内、外放射增敏作用，对肺A-549细胞、神经胶质瘤C6细胞、食管癌ECA-109细胞等具有广谱的放射增敏作用。与现有的放射增敏剂相比较，丹皮酚具有高效低毒的特点，有望成为一种安全有效的放射增敏新药。

Description

丹皮酚在恶性肿瘤放射增敏中的应用

技术领域

本发明涉及丹皮酚的新医药用途，具体地说，涉及丹皮酚作为放射增敏剂的新医药用途。属于医药技术领域。

背景技术

尽管当前放疗的技术有了很大发展，但放射治疗效果仍不理想。影响放射治疗效果的一个重要因素是肿瘤细胞的放疗抗拒作用，而通过放射增敏剂提高肿瘤细胞对射线的敏感性是当前研究的热点。放射增敏剂是一类经过化学合成或天然提取的药物制剂，可有效提高肿瘤细胞的放射敏感性，促进射线对肿瘤细胞的杀伤作用。

人乏氧细胞对射线有明显的抗拒作用，是各种肿瘤放射治疗失败甚至是复发、转移的原因，早期的放疗增敏剂研究常围绕乏氧细胞开展。随着对增敏机制研究的不断深入，现已发现很多基于其他机制的放射增敏药物和措施，如靶向治疗的放射增敏剂、基因有关的放射增敏剂、化疗药物类放射增敏剂。已有若干放射增敏剂在完成前期试验后过渡到临床试用，大部分药物由于毒性过大或未能得到预期效果，而最终被放弃，真正上市使用的高效、低毒的放射增敏剂为数不多。

从中药中寻找放射增敏剂是我国放射增敏领域的一大特色，中药作为放疗辅助用药广泛应用于恶性肿瘤的防治，具有多靶点、多效性的特点，毒副反应少，一方面可以增强放疗的敏感性，有助于癌症的治疗、防止转移和复发；另一方面对机体具有整体调节的作用，减轻放疗引起的毒副反应。

丹皮酚(paeonol，Pae)又称牡丹酚，是毛莨科植物牡丹PaeoniaSuffruticcosa Andr根皮和萝摩科植物徐长卿Pycnostelma Paniculatum(Bunge)K Schum干燥根或全草的主要有效成分，具有药理作用广泛和毒性低的特点。文献报道了丹皮酚及其类似物具有抗肿瘤活性。

发明内容

本发明在研究丹皮酚抗癌、抗肿瘤研究中，令人意外地发现丹皮酚具有增加肿瘤细胞放射敏感性的作用，丹皮酚具有高效低毒的特点，成为一种安全有效的放射增敏新药。

本发明技术方案如下：

本发明提供了丹皮酚或其类似物在制备用于放射增敏的药物的新应用。

优选地，上述所述的应用，其中所述的药物是用于肿瘤或癌症的放疗增敏药物。

特别是，上述所述的应用，其中所述的肿瘤是恶性肿瘤。

优选地，上述所述的应用，其中所述的肿瘤或癌症选自肺癌、食道癌、乳腺癌、宫颈癌、神经胶质瘤、头颈部肿瘤、软组织肿瘤、白血病、肝癌及其转移性肿瘤等。

本发明上述所述的应用，其中所述的丹皮酚是天然的丹皮酚或者人工合成的丹皮酚。

优选地，本发明上述所述的应用，其中所述的丹皮酚是从毛莨科植物牡丹(Paeonia Suffruticcosa Andr)或者萝摩科植物徐长卿(PycnostelmaPaniculatum(Bunge)K Schum)中提取得到的。

本发明研究发现，丹皮酚体内、外具有放射增敏作用，对Lewis肺癌具有明显的体内、外放射增敏作用，进一步研究发现丹皮酚对肺A-549细胞、神经胶质瘤C6细胞、食管癌ECA-109细胞等具有广谱的放射增敏作用。而且与现有的放射增敏剂相比较，丹皮酚具有高效低毒的特点，因此是一种安全有效的放射增敏新药。

附图说明

图1：小鼠Lewis肺癌细胞存活曲线

图2：移植瘤生长曲线

图3：肺腺癌A549细胞在不同浓度丹皮酚与射线联合作用下的存活曲线

图4：人食管癌细胞Eca-109剂量-存活曲线

图5：大鼠神经胶质瘤C6细胞存活曲线

具体实施方式

实施例1：丹皮酚对小鼠Lewis肺癌细胞放射敏感性的影响

【方法】采取克隆形成实验测定细胞在不同干预条件下的存活率，通过单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算相关参数与放射增敏比(SER)。具体方法参见参考文献：殷蔚伯、余子豪、徐国镇等，肿瘤放射治疗学(第四版)[M]，中国协和医科大学出版社，2007：234-237

【结果】结果见附图1和表1。

表1：存活曲线主要参数值

试验结果表明，5.0、10.0mg/LPae联合射线作用时，平均致死剂量D0值和准阈剂量Dq均减小，放射增敏比SER分别为：1.081和1.164；提示这两个浓度的Pae处理后，细胞放射敏感性增加。

实施例2：丹皮酚对小鼠Lewi s肺癌移植瘤模型的放射增敏作用

【方法】

(1)动物模型的制作：72只C57BL/6小鼠，雄性，6-8周龄，20±2克。制备Lewis肺癌细胞悬液，浓度为1×10⁷个/mL。每鼠右下肢皮下注射0.2mL细胞悬液。5-7d后，肿瘤体积增长到800±100mm3时开始试验。

(2)分组：72只小鼠随机分为6组(每组12只)：模型组、低剂量药物组、高剂量药物组、放射组、低剂量药物+放射组、高剂量药物+放射组。

(3)干预条件：照射剂量：单次10Gy；低剂量药物：20％LD50(156.2mg/kg)腹腔注射；高剂量药物：50％LD50(390.5mg/kg)腹腔注射。

(4)观察指标：肿瘤体积、生长时间、生长延缓时间、生长抑制率

【结果】结果见图2和表2。

表2：各组相关参数结果

试验结果说明，丹皮酚与放射线联合作用后的肿瘤生长速度减慢，生长时间延长；生长延缓时间和生长抑制率增加。提示丹皮酚联合射线能有效的增加射线对肿瘤的杀伤效果，并减慢其生长速度。

实施例3：丹皮酚对肺腺癌A-549细胞放射敏感性的影响

【方法】采取克隆形成实验测定细胞在不同干预条件下的存活率，通过单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算相关参数与放射增敏比(SER)。具体方法参见参考文献：殷蔚伯、余子豪、徐国镇等，肿瘤放射治疗学(第四版)[M]，中国协和医科大学出版社，2007：234-237

【结果】结果见图3和表3。

表3：丹皮酚对肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响(细胞存活曲线参数)

试验结果说明，用20％IC₅₀左右选择的三个浓度的丹皮酚(2.5、5.0、10.0mg/L)作用A-549细胞24h后均能提高细胞放射敏感性，并呈现剂量依赖性。其放射增敏比依次为1.104、1.215和1.285。

实施例4：丹皮酚对食管癌ECA-109细胞放射敏感性的影响

【方法】采取克隆形成实验测定细胞在不同干预条件下的存活率，通过单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算相关参数与放射增敏比(SER)。具体方法参见参考文献：殷蔚伯、余子豪、徐国镇等，肿瘤放射治疗学(第四版)[M]，中国协和医科大学出版社，2007：234-237

【结果】结果见图4和表4。

表4：各组别克隆形成率及主要参数值

试验结果说明，7.81、15.63mg/LPae联合射线作用时，平均致死剂量D0值和准阈剂量Dq均减小，放射增敏比SER分别为：1.074和1.092；提示这两个浓度的Pae处理后，Eca-109细胞放射敏感性增加。

实施例5：丹皮酚与射线联合对细胞DNA损伤的影响

【方法】CB微核法(胞质分裂阻滞法微核试验)，具体方法参见参考文献：曹佳、林真、余争平，微核试验[M]，军事医学科学出版社，2000：264-272

【结果】Eca-109细胞单纯照射组和照射+7.81mg/L Pae联合组细胞的微核率(MNF)和微核细胞率(MNCF)比较见下表5。可见，相同照射剂量下，7.81mg/L Pae预先处理后细胞的MNF和MNCF均高于单纯照射组。

表5 射线和Pae对Eca-109细胞形成MNF、MNCF的影响

试验结果说明，在照射剂量范围内，Eca-109细胞的MNF和MNCF均随剂量增加而升高。提示丹皮酚能增加放射线对细胞DNA的损伤。

实施例6：丹皮酚对大鼠神经胶质瘤C6细胞放射敏感性的影响

【方法】采取克隆形成实验测定细胞在不同干预条件下的存活率，通过单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算相关参数与放射增敏比(SER)。具体方法参见参考文献：殷蔚伯、余子豪、徐国镇等，肿瘤放射治疗学(第四版)[M]，中国协和医科大学出版社，2007：234-237

【结果】结果见图5和表6。

表6 存活曲线主要参数

试验结果说明，5.0、10.0mg/L Pae联合射线作用时，平均致死剂量D0值和准阈剂量Dq均减小，放射增敏比SER分别为：1.096和1.178；提示这两个浓度的Pae处理后，细胞放射敏感性增加。

Claims (6)

1.丹皮酚或其类似物在制备用于放射增敏的药物的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其中所述的药物是用于肿瘤或癌症的放疗增敏药物。

3.根据权利要求2所述的应用，其中所述的肿瘤是恶性肿瘤。

4.根据权利要求2所述的应用，其中所述的肿瘤或癌症选自肺癌、食道癌、乳腺癌、宫颈癌、神经胶质瘤、头颈部肿瘤、软组织肿瘤、白血病、肝癌及其转移性肿瘤等。

5.根据权利要求1-4所述的应用，其中所述的丹皮酚是天然的丹皮酚或者人工合成的丹皮酚。

6.根据权利要求5所述的应用，其中所述的丹皮酚是从毛莨科植物牡丹(PaeoniaSuffruticcosa Andr)或者萝摩科植物徐长卿(Pycnostelma Paniculatum(Bunge)K Schum)中提取得到的。

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