CN102273406B - 一种培育红杆芋的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种培育红杆芋的方法，该方法包括以下步骤：(1)无菌材料的获得；(2)芽的分化和增殖；(3)不定芽壮苗培养；(4)生根培养；(5)炼苗与移栽。与现有技术相比，本发明通过组培技术，可大大提高繁殖速度和苗木的整齐度，更好地保持原有的母本性状，并且能够提高成活率，从而提高产量，移栽成活率可达95％。
Description
技术领域
本发明涉及一种草本植物的组织培养方法，尤其是涉及一种培育红杆芋的方法。
背景技术
红杆芋Colocasia‘Red Stem’，为多年生草本植物，株高50-60厘米。叶柄为紫红色，为人工选育的优良品种。红杆芋性喜高温多湿，适应性强，可在岸边、湿地种植，观赏效果好。做为国外引进的品种引种数量较少，其分株慢，市场需求量大，种苗供应受限制。通过组培技术，极大提高繁殖速度和苗的整齐度，更好地保持原有的母本性状。红杆芋Colocasia‘Red Stem’在国内的组培报道尚未见。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种可极大提高繁殖速度和苗的整齐度，更好地保持原有的母本性状的一种培育红杆芋的方法。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：
一种培育红杆芋的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)无菌材料的获得：春天红杆芋刚萌芽时挖取其基部小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用浓度为75wt％的乙醇浸泡20-40s，1wt‰的升汞溶液浸泡10-20min，经无菌水冲洗5-6次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于诱导培养基上；
(2)芽的分化和增殖是：小芽接种于诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月，然后切下带芽愈伤组织放入不定芽增殖培养基进行培养；
(3)不定芽壮苗培养
在不定芽增殖培养基中诱导出的丛生芽，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基上，不定芽迅速伸长，20天后可以长成2-3cm的小植株；
(4)生根培养
取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至4-6cm；
(5)炼苗与移栽
生根培养20-30天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可移栽室外，给予肥水管理即可。
所述的小芽诱导培养基的成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L或MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L。
所述的小芽诱导培养基的成分优选MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L。
所述的增殖培养基的成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。
所述的增殖培养基的成分优选MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。
所述的壮苗培养基的成分为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L或MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。
所述的壮苗培养基的成分优选MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。
所述的生根培养基的成分为MS+NAA0.05mg/L、MS+NAA0.1mg/L或MS+NAA0.2mg/L。
所述的生根培养基的成分优选MS+NAA0.1mg/L。
所述的小芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基成分还包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，该培养基的培养温度为24-26℃，光照为70-90μmol/ms，pH值为5.5-6.0。
与现有技术相比，本发明通过组培技术，可大大提高繁殖速度和苗木的整齐度，更好地保持原有的母本性状，并且能够提高成活率，从而提高产量。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
一种培育红杆芋的方法，该方法包括以下步骤：
(1)无菌化处理
春天红杆芋刚萌芽时挖取其基部小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用浓度为75wt％的乙醇浸泡30s，1wt‰的升汞溶液浸泡15min，经无菌水冲洗5-6次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L上；
(2)芽的分化和增殖
小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长发育良好；
(3)不定芽壮苗培养
在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；
(4)生根培养
取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.1mg/L中诱导生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至4-6cm，根系粗壮，须根众多，生根率为100％；
(5)炼苗与移栽
生根培养25天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。
实施例2
一种培育红杆芋的方法，该方法包括以下步骤：
(1)无菌化处理
春天红杆芋刚萌芽时挖取其基部小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用浓度为75wt％的乙醇浸泡20s，1wt‰的升汞溶液浸泡10min，经无菌水冲洗5-6次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L上；
(2)芽的分化和增殖
小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长发育良好；
(3)不定芽壮苗培养
在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；
(4)生根培养
取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.05mg/L中诱导生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至2-3cm；
(5)炼苗与移栽
继续生根培养20天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。
实施例3
一种培育红杆芋的方法，该方法包括以下步骤：
(1)无菌化处理
春天红杆芋刚萌芽时挖取其基部小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用浓度为75wt％的乙醇浸泡40s，1wt‰的升汞溶液浸泡20min，经无菌水冲洗5-6次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L上；
(2)芽的分化和增殖
小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长发育良好；
(3)不定芽壮苗培养
在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；
(4)生根培养
取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.2mg/L中诱导生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至2-3cm；
(5)炼苗与移栽
继续生根培养30天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。
实施例4
一种培育红杆芋的方法，该方法包括以下步骤：
(1)无菌化处理
春天红杆芋刚萌芽时挖取其基部小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用浓度为75wt％的乙醇浸泡30s，1wt‰的升汞溶液浸泡15min，经无菌水冲洗5-6次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L上；
(2)芽的分化和增殖
小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长发育良好；
(3)不定芽壮苗培养
在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；
(4)生根培养
取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.1mg/L中诱导生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至2-3cm，根系粗壮，须根众多，生根率为100％；
(5)炼苗与移栽
继续生根培养25天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。
所述的小芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基成分还包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，该培养基的培养温度为24℃，光照为70μmol/ms，pH值为5.5。
实施例5
一种培育红杆芋的方法，该方法包括以下步骤：
(1)无菌化处理
春天红杆芋刚萌芽时挖取其基部小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用浓度为75wt％的乙醇浸泡20s，1wt‰的升汞溶液浸泡10min，经无菌水冲洗5-6次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.1mg/L上；
(2)芽的分化和增殖
小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长发育良好；
(3)不定芽壮苗培养
在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；
(4)生根培养
取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.05mg/L中诱导生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至2-3cm；
(5)炼苗与移栽
继续生根培养20天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。
所述的小芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基成分还包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，该培养基的培养温度为25℃，光照为80μmol/ms，pH值为5.8。
实施例6
一种培育红杆芋的方法，该方法包括以下步骤：
(1)无菌化处理
春天红杆芋刚萌芽时挖取其基部小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用浓度为75wt％的乙醇浸泡40s，1wt‰的升汞溶液浸泡20min，经无菌水冲洗5-6次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L上；
(2)芽的分化和增殖
小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长发育良好；
(3)不定芽壮苗培养
在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；
(4)生根培养
取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.2mg/L中诱导生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至2-3cm；
(5)炼苗与移栽
继续生根培养30天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。
所述的小芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基成分还包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，该培养基的培养温度为26℃，光照为90μmol/ms，pH值为6.0。
Claims (1)
1.一种用于红杆芋组织培养的培养基，其特征在于，包括小芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基，其中，所述的小芽诱导培养基的成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L；所述的增殖培养基的成分为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L；所述的壮苗培养基的成分为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L；所述的生根培养基的成分为MS+NAA0.05mg/L。
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| 大野芋的组织培养和植株再生;宋喜贵等;《植物生理学通讯》;20041020(第05期);第583页第3节第6行，第4.1节第1-2行 * |
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| 海门香沙芋组培技术研究与应用;林文丽等;《农业科技通讯》;20080617(第06期);第43页第1.1节第3行，表1，第1.2.1节第4-6行，第1.2.2节第6-8行，第44页第2.2节倒数第2行，第2.3节 * |
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| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
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| PB01 | Publication | ||
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Inventor after: Zhang Lang Inventor after: Chen Jianhua Inventor after: Huang Jianrong Inventor after: Shen Qin Inventor before: Chen Jianhua Inventor before: Huang Jianrong Inventor before: Shen Qin |
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| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: CHEN JIANHUA HUANG JIANRONG SHEN QIN TO: ZHANG LANG CHEN JIANHUA HUANG JIANRONG SHEN QIN |
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Owner name: STATE GRID SHANGHAI ELECTRIC POWER COMPANY POWER S Effective date: 20131231 |
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| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20131231 Address after: 201114 Pujiang village, Pujiang Town, Shanghai, Minhang District Patentee after: Gardening Co., Ltd. Shanghai never ending Patentee after: State Grid Shanghai Municipal Electric Power Company Patentee after: Shanghai Urban Power Supply Design Co., Ltd. Address before: 201114 Pujiang village, Pujiang Town, Shanghai, Minhang District Patentee before: Gardening Co., Ltd. Shanghai never ending |