CN102198290A - 注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架及制造方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架及制造方法，它由以下重量比的组分组成：聚乳酸—羟基乙酸组成的生物降解性聚合物0.8～1，温度感应性辅助剂3。本发明所述的共聚物颗粒支架注入人体后在身体内形成利于组织细胞生长的微环境支架，对细胞换氧、提供营养物质及排出废物非常有利，在较短的时间内颗粒支架可以完全生物降解，最终会变成二氧化碳和水自然排出体外，本发明所使用的原料以及代谢产物对人体是无害、无毒的，颗粒支架在注射前是液体状态，注入人体后因温度变化会成为胶冻状态，这对需要固定形状的整形部位是相当便利的，并且本发明具有携带抗生素的作用，治疗时不需另外给药。

Description

注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架及制造方法

技术领域

本发明涉及注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架及制造方法。

背景技术

由于创伤、先天性疾病、癌症、感染、炎症等原因所造成的组织与器官的缺损日渐增多。目前，临床上常采用自体、同种异体或异种组织器官进行移植修复，但仍因供源不足、造成供体受损及免疫排斥等问题而难以满足临床需求。传统的修复方法是自体组织移植术，虽然可以取得满意疗效，但它是以牺牲自体健康组织为代价的办法，会导致很多并发症及附加损伤；人体器官功能衰竭，采用药物治疗、暂时性替代疗法可挽救部分病人生命，但供体器官来源极为有限，因免疫排斥反应需长期使用免疫抑制剂，由此而带来的并发症有时是致命的。近十几年来，组织工程学的兴起和发展为解决这一难题提供了新思路和手段。组织工程学是应用生物学和工程学的原理，在正确认知哺乳动物正常及病理两种状态下组织结构与功能关系的基础之上，研究开发能够修复、维持或改善损伤组织功能的生物替代物的一门科学。

随着生物材料和组织工程学的发展，组织工程学产品逐渐应用于临床疾病的诊断及治疗，特别是应用于人体部分脏器的修复和再生，生物降解性聚合物在人体内上皮组织等多种组织及细胞的附着及生长方面较容易，而且在细胞或组织生长后被生物降解，具有可被人体吸收或者排除特性的材料，在组织工程学上应用广泛。

为了使组织更有效率的成长，生物降解性聚合物的基质应对组织具有吸附力的同时要促进细胞的成长，维持组织的功能，而且要具备生物相容性和生物降解性，也要根据不同用途及粒子大小途的性质，通过细胞培养可以广泛地在人工组织及皮肤美容等相关领域里应用。依据上述制造方法制作出的降解生物支架颗粒除了在皮肤再生用途以外还可以用于多种细胞组织恢复所需的组织上应用。

现在作为人工合成的生物降解性聚合物，聚乳酸(Poly Lactic Acid：PLA)和羟基乙酸(Poly Glycolic Acid：PGA)的聚合体使用甚广，它们的生物降解原理基于其水解作用。聚乳酸现在用在断骨的固定板和制作生物降解的螺丝上，而羟基乙酸作为吸水性缝合线而使用。以上聚乳酸和聚羟基乙酸，各自的单体聚合物生物降解时间，根据分子量有所不同，但是通常在1年以上，它们的共聚体PLGA[Poly(D，L-Lactide-Co-Glycolide)]根据平均分子量的变化，在生物体内降解的时间为数周至数十周。

现在，利用组织工程的组织再生用产品的要求是：1、植入时无超敏反应，2、与人体内的周边组织具有亲和力，3、拥有生物粘合性表面且没有排斥现象。

要解决以上问题，我们要做到调节材料的吸湿度-亲水性/疏水性，表面糙性，并且表面电荷和植入时周围不能有流动现象。

目前常用的材料由于材料本身特性在人体内容易诱发血栓栓塞性疾病，而且又由于其不具有生物降解性，所以在生物体内有存积性问题。现在的合成聚合物及其他聚合物构成的组织再生物质在皮肤注入时，作用于人体内的细胞和组织的附着成长的空间有限制，虽然给细胞提供了一定的生长空间，但不便于细胞换氧、提供营养物质及排出废物，同时注入人体后材料的可应用性能较差，已经无法适用于需要固定形状的整形部位，有在注入部位流动的现象，这也是必须要解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架及制造方法，在植入人体时无超敏反应，同时与人体内的周边组织具有亲和力，拥有生物粘合性表面且没有排斥现象。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架，它主要由以下重量比的组分组成：基质0.8～1，温度感应性辅助剂3，其中，所述的基质为聚乳酸-羟基乙酸组成的生物降解性聚合物PLGA，温度感应性辅助剂包括以下重量比的组分组成：聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物1.95～2.5，无毒性的降解性海藻酸钠为主的生物相容性高分子聚合物0.48～1，Ca²⁺离子0.02～0.05，聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物组成。

所述的注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的平均分子量为90000～110000，平均颗粒尺寸为50μm～90μm，具有吸湿性，而且具有植入体内时辅助剂会变成凝胶状态的相变特征。

所述的聚乳酸-羟基乙酸生物降解性聚合物中聚乳酸和羟基乙酸的重量百分比75∶25。

注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的制造方法，它包括以下步骤：

(1)筛选生物降解支架颗粒，包括：

a、把生物降解性聚合物溶解在有机溶剂和NaCl混合液里形成有机溶液，形成高浓度溶液，有机溶剂、PLGA、NaCL各占份额为2～5∶0.5～2∶10～15，NaCl颗粒尺寸为80～100um，直至PLGA充分溶入到NaCl的间隙里，然后在20±5℃的环境下加以3～7Mpa，10～40min的压力，直至有机溶剂蒸发以保证成型时维持所定形状，得到成型片状产品；

b、将成型片状产品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去把片状产品表面上留存的残留有机溶剂；

c、进行脱盐处理，用超纯的蒸馏水经过3～4次反复地进行不少于24小时的脱盐处理，使得残存的Cl-浓度接近零，然后在-50～80℃的环境下进行10～15小时的冷冻，再移到-40℃以下的冷冻干燥机里进行至少24小时的冷冻干燥；d、在无菌室里面对其进行筛选、粉碎，粉碎时对粒子的变形要做到最小化的同时粒子的平均大小要维持在70μm±20μm。

(2)制作温度感应性辅助剂的过程：

a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物混合后在去离子超纯水中对其进行溶解并稀释，共聚物的重量份为1.95～2.5；

b、温度降低到15℃以下以20000rpm以上速度高速搅拌，高速搅拌时加入Ca²⁺离子及降解性海藻酸钠，其中，Ca²⁺离子和降解性海藻酸钠的重量百分比为0.48～1∶0.02～0.05，搅拌时间不能超过2分钟；

(3)把步骤(1)和步骤(2)得到的物质按0.8～1∶3的比例进行混合并分装涂层，分装后在-70℃的超低温冰箱里进行12小时以上的冷冻，结束后将其放在-40℃以下，并以55～65Mpa的压力在冻结干燥机里面进行24小时以上的冷冻干燥，然后用环氧乙烷气体进行灭菌，灭菌结束后去除残存的环氧乙烷气体，然后对最终得到的成品进行检查，并将最终的合格品进行真空包装。

所述的真空干燥箱中的条件为20℃，2atm物理大气压。

所述的有机溶剂包括丙酮、三氯甲烷、二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、二氯甲烷、丁酮、二甲亚砜、N-甲基吡咯烷酮、二噁英和四氢呋喃中的一种或两种混合物。

本发明的有益效果表现在：(1)所述的注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架，可以按使用目的不同而制成不同大小的颗粒，具备了可应用于多样的细胞和组织上优点，强制性赋予产品湿润性，最小化了支架粒子注射时注射出不来的瓶颈现象，也可促进细胞和组织在支架粒子上的附着力；(2)颗粒支架被注入人体后使其在身体内形成利于组织细胞生长的微环境支架，给细胞提供了生长的三维空间，对细胞换氧，提供营养物质及排出废物非常有利；(3)在有限的时间内颗粒支架可以完全生物降解，最终会变成二氧化碳和水自然排出体外；(4)本发明生产中所使用的原料及代谢产物对人体是无害，无毒的；(5)本发明在注射前是液体状态，注入人体后因温度变化会成为胶冻状态，对需要固定形状的整形部位是相当便利的产品；(6)本发明具有携带抗生素的作用，治疗时不需另外给药。

附图说明

图1为聚乳酸-羟基乙酸比例为75/25的PLGA不同分子量的分解数据

图2为注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的物质性质

图3为注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架在不同温度下的粘度变化

图4为PLGA中PLA和PGA不同配比条件下的分解数据

图5为PLGA化学的分解机制

图6为PLGA棱型粒子的彩色扫描电子显微照片彩色扫描电子显微

图7为辅助剂与PLGA棱型粒子混合时的无结转现象的图片

图8为注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的细胞附着电子的显微镜照片

图9为注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的细胞附着电子的成品的100倍电子显微镜照片

图10为注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的细胞附着电子的成品的400倍电子显微镜照片

图11为PLGA分碎粒子GPC数据(平面图)

图12为PLGA分碎粒子GPC数据(立体图)

图13为玻璃转化温度变化数据。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明做进一步的描述，但保护范围不局限于所述。

实施例1

注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架，它主要以下重量比的组分组成：基质0.8，温度感应性辅助剂3，其中，所述的基质为聚乳酸-羟基乙酸组成的生物降解性聚合物PLGA，温度感应性辅助剂包括以下重量比的组分组成：聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物2，无毒性的降解性海藻酸钠为主的生物相容性高分子聚合物0.95，Ca²⁺离子0.05，聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物组成。所述的生物降解性颗粒支架的颗粒平均分子量为90000～110000，平均颗粒尺寸为70μm±20μm，具有吸湿性，而且具有植入体内时辅助剂会变成凝胶状态的相变特征。

所述的聚乳酸-羟基乙酸生物降解性聚合物中聚乳酸和羟基乙酸的重量百分比75∶25。

注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的制造方法，它包括以下步骤：

(1)筛选生物降解支架颗粒，包括：

a、把生物降解性聚合物溶解在有机溶剂和NaCl混合液里形成有机溶液，形成高浓度溶液，有机溶剂、PLGA、NaCl各占份额为3.5∶1∶12.6，颗粒尺寸为80～100um，直至PLGA充分溶入到NaCl的间隙里，然后在20℃的环境下加以5Mpa，20min的压力，直至有机溶剂蒸发以保证成型时维持所定形状，得到成型片状产品；

b、将上一步骤得到的成型片状产品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去把片状产品表面上留存的残留有机溶剂；

c、进行脱盐处理，用超纯的蒸馏水经过3次反复地进行25小时的脱盐处理，使得残存的Cl^-浓度接近零，然后在-70℃的环境下进行12小时的冷冻，再移到-50℃的冷冻干燥机里进行26小时的冷冻干燥；

d、在无菌室里面对其进行筛选、粉碎，粉碎时对粒子的变形要做到最小化的同时粒子的平均大小要维持在70μm±20μm。

(2)制作温度感应性辅助剂的过程：

a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物混合后在去离子超纯水中对其进行溶解并稀释，共聚物的重量份为2；

b、温度降低到12℃以21000rpm速度高速搅拌，高速搅拌时加入Ca²⁺离子及海藻酸钠，其中，Ca²⁺离子和海藻酸钠的重量比为0.05∶0.95，搅拌时间1.5分钟；

(3)把步骤(1)和步骤(2)分别得到的物质按0.8∶3的比例进行混合并分装涂层，分装后在-70℃的超低温冰箱里进行14小时的冷冻，结束后将其放在-40℃，并以60Mpa的压力在冻结干燥机里面进行25小时的冷冻干燥，然后用环氧乙烷气体进行灭菌，灭菌结束后去除残存的环氧乙烷气体，然后对最终得到的成品进行检查，并将最终的合格品进行真空包装。

所述的真空干燥箱中的条件为20℃，2atm。

所述的有机溶剂为乙酸己酯。

实施例2

注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架，它主要由以下重量比的组分组成：基质1，温度感应性辅助剂3，其中，所述的基质为聚乳酸-羟基乙酸组成的生物降解性聚合物PLGA，温度感应性辅助剂包括以下重量比的组分组成：聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物2.5，无毒性的降解性海藻酸钠为主的生物相容性高分子聚合物0.48，Ca²⁺离子0.02，聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物组成。所述的生物降解性颗粒支架的颗粒平均分子量为90000～110000，平均颗粒尺寸为70μm±20μm，具有吸湿性，而且具有植入体内时辅助剂会变成凝胶状态的相变特征，具有吸湿性，而且具有植入体内时辅助剂会变成凝胶状态的相变特征。

所述的聚乳酸-羟基乙酸生物降解性聚合物中聚乳酸和羟基乙酸的重量百分比75∶25。

注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的制造方法，它包括以下步骤：

(1)筛选生物降解支架颗粒，包括：

a、把生物降解性聚合物溶解在有机溶剂和NaCl混合液里形成有机溶液，形成高浓度溶液，有机溶剂、PLGA、NaCl各占份额为2∶0.5∶11，颗粒尺寸为80～100um，直至PLGA充分溶入到NaCl的间隙里，然后在25℃的环境下加以7Mpa，10min的压力，直至有机溶剂蒸发以保证成型时维持所定形状，得到成型片状产品；

b、将成型片状产品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去把片状产品表面上留存的残留有机溶剂；

c、进行脱盐处理，用超纯的蒸馏水经过4次反复地进行24小时的脱盐处理，使得残存的Cl^-浓度接近零，然后在-50℃的环境下进行18小时的冷冻，再移到-40℃的冷冻干燥机里进行18小时的冷冻干燥；

d、在无菌室里面对其进行筛选、粉碎，粉碎时对粒子的变形要做到最小化的同时粒子的平均大小要维持在70μm±20μm。

(2)制作温度感应性辅助剂的过程：

a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物混合后在去离子超纯水中对其进行溶解并稀释，共聚物重量份为2.5；

b、温度降低到14℃以22000rpm以上速度高速搅拌，高速搅拌时加入Ca²⁺离子及降解性海藻酸钠，其中，Ca²⁺离子和降解性海藻酸钠的重量为0.02∶0.48，搅拌时间2分钟；

(3)把步骤(1)和步骤(2)得到的物质按重量比1∶3进行混合并分装涂层，分装后在-70℃的超低温冰箱里进行16小时的冷冻，结束后将其放在-50℃，并以65Mpa的压力在冻结干燥机里面进行28小时的冷冻干燥，然后用环氧乙烷气体进行灭菌，灭菌结束后去除残存的环氧乙烷气体，然后对最终得到的成品进行检查，并将最终的合格品进行真空包装。

所述的真空干燥箱中的条件为20℃，2atm。

所述的有机溶剂包括二氯甲烷和二甲基酰胺。

实施例3

注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架，它主要由生物降解性聚合物组成，其中所述的生物降解性聚合物包括重量比的组分组成：基质0.9，温度感应性辅助剂3，其中，所述的基质为聚乳酸-羟基乙酸组成的生物降解性聚合物PLGA，温度感应性辅助剂包括以下重量比的组分组成：聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物1.95，无毒性的降解性海藻酸钠为主的生物相容性高分子聚合物1.0，Ca²⁺离子0.05，聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物组成。所述的生物降解性颗粒支架的颗粒平均分子量(Mw)为90000～110000，平均颗粒尺寸为70μm±20μm，具有吸湿性，而且具有植入体内时辅助剂会变成凝胶状态的相变特征。

所述的聚乳酸-羟基乙酸生物降解性聚合物中聚乳酸和羟基乙酸的重量百分比75∶25。

注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的制造方法，它包括以下步骤：

(1)筛选生物降解支架颗粒，包括：

a、把生物降解性聚合物溶解在有机溶剂和NaCl混合液里形成有机溶液，形成高浓度溶液，有机溶剂、PLGA、NaCl各占份额为5∶2∶15，颗粒尺寸为80um～100um，直至PLGA充分溶入到NaCl的间隙里，然后在15℃的环境下加以7Mpa，40min的压力，直至有机溶剂蒸发以保证成型时维持所定形状，得到成型片状产品；

b、将成型片状产品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去把片状产品表面上留存的残留有机溶剂；

c、进行脱盐处理，用超纯的蒸馏水经过4次反复地进行25小时的脱盐处理，使得残存的Cl^-浓度接近零，然后在-80℃的环境下进行10小时的冷冻，再移到-45℃的冷冻干燥机里进行24小时的冷冻干燥；

d、在无菌室里面对其进行筛选、粉碎，粉碎时对粒子的变形要做到最小化的同时粒子的平均大小要维持在70μm±20μm。

(2)制作温度感应性辅助剂的过程：

a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物按7∶4的比率在去离子超纯水中对其进行溶解并稀释，共聚物重量份为1.95；

b、温度降低到10℃以20000rpm速度高速搅拌，高速搅拌时加入Ca²⁺离子及降解性海藻酸钠，其中，Ca²⁺离子和降解性海藻酸钠的重量百分比为1.0∶0.05，搅拌时间2分钟；

(3)把步骤(1)和步骤(2)得到的物质按0.9∶3进行混合并分装涂层，分装后在-70℃的超低温冰箱里进行12小时的冷冻，结束后将其放在-60℃，并以55Mpa的压力在冻结干燥机里面进行24小时的冷冻干燥，然后用环氧乙烷气体进行灭菌，灭菌结束后去除残存的环氧乙烷气体，然后对最终得到的成品进行检查，并将最终的合格品进行真空包装。

所述的真空干燥箱中的条件为20℃，2atm。

所述的有机溶剂包括二氯甲烷和丙酮。

实施例4

注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架，它主要由生物降解性聚合物组成，其中所述的生物降解性聚合物包括重量比的组分组成：基质1，温度感应性辅助剂3，其中，所述的基质为聚乳酸-羟基乙酸组成的生物降解性聚合物PLGA，温度感应性辅助剂包括以下重量比的组分组成：聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物2.48，无毒性的降解性海藻酸钠为主的生物相容性高分子聚合物0.5，Ca²⁺离子0.02，聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物组成。所述的生物降解性颗粒支架的颗粒平均分子量为90000～110000，平均颗粒尺寸为80μm～110μm，具有吸湿性，而且具有植入体内时辅助剂会变成凝胶状态的相变特征。

所述的聚乳酸-羟基乙酸生物降解性聚合物中聚乳酸和羟基乙酸的重量百分比75∶25。

注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的制造方法，它包括以下步骤：

(1)筛选生物降解支架颗粒，包括：

a、把生物降解性聚合物溶解在有机溶剂和NaCl混合液里形成有机溶液，形成高浓度溶液，有机溶剂、PLGA、NaCl各占份额为4∶1∶12，颗粒尺寸为80～100um，直至PLGA充分溶入到NaCl的间隙里，然后在15℃的环境下加以3Mpa，30min的压力，直至有机溶剂蒸发以保证成型时维持所定形状，得到成型片状产品；

b、将成型片状产品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去把状产品表面上留存的残留有机溶剂；

c、进行脱盐处理，用超纯的蒸馏水经过4次反复地进行24小时的脱盐处理，使得残存的Cl^-浓度接近零，然后在-80℃的环境下进行15小时的冷冻，再移到-50℃的冷冻干燥机里进行27小时的冷冻干燥；

d、在无菌室里面对其进行筛选、粉碎，粉碎时对粒子的变形要做到最小化的同时粒子的平均大小要维持在70μm±20μm。

(2)制作温度感应性辅助剂的过程：

a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物混合后在去离子超纯水中对其进行溶解并稀释，共聚物的重量份为2.48；

b、温度降低到14℃以24000rpm以上速度高速搅拌，高速搅拌时加入Ca²⁺离子及降解性海藻酸钠，其中，Ca²⁺离子和降解性海藻酸钠的重量百分比为0.5∶0.02，搅拌时间2分钟；

(3)把步骤(1)和步骤(2)得到的物质按1∶3进行混合并分装涂层，分装后在-70℃的超低温冰箱里进行18小时的冷冻，结束后将其放在-50℃，并以60Mpa的压力在冻结干燥机里面进行26小时的冷冻干燥，然后用环氧乙烷气体进行灭菌，灭菌结束后去除残存的环氧乙烷气体，然后对最终得到的成品进行检查，并将最终的合格品进行真空包装。

所述的真空干燥箱中的条件为20℃，2atm。

所述的有机溶剂包括三氯甲烷和丁酮。

以下是本发明所述的注射用聚乳酸-羟基乙酸聚合物颗粒支架的物理性质、粘度、分解等做一分析说明。

1、物理性质

如图1，摩尔比为75/25的PLGA的粒子形态是非定型的，它们的共聚体PLGA根据平均分子量的变化，它的分解速度也不同，不变形的最大温度(Tg)为45-52℃。在生物体内降解的时间为20-24周。

图2为注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的组成成分以及性质，从去除水后全部固体中各成分的体积比以及PEO/PPO比等不难看出其粒子间的排斥力和引力的大小单位、PH值、平均粒子大小、基准温度、最终形成物等都较为稳定，无毒，具有较好的生物相容性。

2、产品的粘度实验

图3是根据温度变化发生的粘度变化图，其中曲线代表本发明的实验数据，根据人体温度36～37.5度为标准，注入人体后产品产生胶冻相变，可见本发明在注入人体后因温度变化会成为胶冻状态，对需要固定形状的整形部位是相当便利的产品。

3、产品中PLGA的产品分解对比实验

如图4为PLGA分解数据，PLGA的Lactide和Glycolide的混合比例不同的体外分解时间数据；

其中I曲线代表Lactide和Glycolide的混合比例为50/50时PLGA的分解曲线，

其中II曲线代表Lactide和Glycolide的混合比例为75/25时PLGA的分解曲线，

其中III曲线代表Lactide和Glycolide的混合比例为87/13时PLGA的分解曲线，

其中IV曲线代表Lactide和Glycolide的混合比例为100/0时PLGA的分解曲线，

可见当Lactide和Glycolide的混合比例为75/25时PLGA在人体内的分解速度和分解时间最为合适。因此我公司的研发项目也正是以它为标准而制作的。

4、分解成分说明

如图5为PLGA化学的分解机制，PLGA在体内被水份分解成单体的过程，其成品以及代谢产物对人体是无害、无毒的。

5、效果分析实验

图6是加工后PLGA的非定型颗粒的彩色扫描电子显微照片。表面的结构有利于附着细胞及形成组织。

图7是辅助剂和图6的颗粒混合(1∶3)后的电子显微镜照片。可以看得出分散的表面是非常均匀的。

图8PLGA颗粒种子干细胞的照片。电子显微镜下可确认到干细胞稳定地附着在颗粒支架上。

图9是把图8扩大到100倍的图片。

图10是把图8扩大到400倍的图片。

6、产品的凝胶渗透色谱法实验

图11是PLGA颗粒的重均分子量平面图，也是图2数据的证明材料。

图12是PLGA颗粒的重均分子量3维立体图，也是图2数据的证明材料。

图13是温度感应性辅助剂的半成品的玻璃化转变温度测量图。各单体均无化学变化的情况下稳定地分散的证明材料。

粒子中PLGA的重均分子量(M/w)采取的是凝胶渗透色谱法(GPC)测得。将样品溶解在含有0.025％甲苯的氯仿中。往GPC系统容器库中注入150ul样品溶液，用折光率检测器完成测量。容器库和检测器的温度维持在40℃左右。样品分子量可以通过比较聚苯乙烯标准分子量计算得到，得到粒子的重量平均分子量为90000～110000。

Claims (6)

1.注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架，其特征在于：它主要由以下重量比的组分组成：基质0.8～1，温度感应性辅助剂3，其中，所述的基质为聚乳酸-羟基乙酸组成的生物降解性聚合物PLGA，温度感应性辅助剂包括以下重量比的组分组成：聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物1.95～2.5，海藻酸钠0.48～1，Ca²⁺离子0.02～0.05，所述的聚氧乙烯PEO和聚氧丙烯PPO三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物组成，共聚物中PEO和PPO的比率为7∶3。

2.根据权利要求1所述的注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架，其特征在于：所述的聚乳酸-羟基乙酸生物降解性聚合物PLGA中，聚乳酸和羟基乙酸的重量百分比75∶25。

3.注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的制造方法，其特征在于：它包括以下步骤：

(1)筛选生物降解支架颗粒

a、把生物降解性聚合物PLGA溶解在有机溶剂和氯化钠NaCl混合液里形成高浓度有机溶液，有机溶剂、PLGA、NaCl各占重量份为2～5∶0.5～2∶10～15，NaCl颗粒尺寸为80～100um，直至PLGA充分溶入到NaCl的间隙里，然后在15～25℃的环境下加以3～7Mpa，10～40分钟的压力，直至有机溶剂蒸发以保证成型时维持所定形状，得到成型片状产品；

b、将成型片状产品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去片状产品表面上留存的残留有机溶剂；

c、进行脱盐处理，用超纯的蒸馏水经过3～4次反复地进行不少于24小时的脱盐处理，使得残存的Cl^-浓度接近零，然后在-50～80℃的环境下进行10～15小时的冷冻，再移到-40℃以下的冷冻干燥机里进行至少24小时的冷冻干燥；

d、在无菌室里面对成型片状产品进行筛选、粉碎，粉碎时，对粒子的变形要做到最小化，同时粒子的平均大小维持在50μm～90μm；

(2)制作温度感应性辅助剂

a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为70％的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率为80％的聚合物混合后在去离子超纯水中对其进行溶解和稀释，共聚物重量份1.95～2.5；

b、温度降低到15℃以下以至少20000rpm转速高速搅拌，搅拌时加入Ca²⁺离子及海藻酸钠，其中，Ca²⁺离子和海藻酸钠的重量比为0.48～1∶0.02～0.05，搅拌时间不能超过2分钟；

(3)把步骤(1)和步骤(2)分别得到的物质按0.8～1∶3的比例进行混合并分装涂层，分装后在-70℃的超低温冰箱里进行不少于12小时的冷冻，结束后将其放在-40℃以下，并以55～65Mpa的压力在冻结干燥机里面进行不少于24小时的冷冻干燥，然后用环氧乙烷气体进行灭菌，灭菌结束后去除残存的环氧乙烷气体，然后对最终得到的成品进行检查，并将最终的合格品进行真空包装。

4.根据权利要求3所述的注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的制造方法，其特征在于：所述的真空干燥箱中的条件为20℃，2atm物理大气压。

5.根据权利要求3所述的注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的制造方法，其特征在于：所述的有机溶剂包括丙酮、三氯甲烷、二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、二氯甲烷、丁酮、二甲亚砜、N-甲基吡咯烷酮、二噁英和四氢呋喃中的任意一种或两种的混合物。

6.根据权利要求1或3所述的注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架，其特征在于：所述的注射用聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒支架的平均分子量为90000～110000，平均颗粒尺寸为50μm～90μm。

Images