CN102172331B - 胚胎运输方法及运输装置 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种应用于胚胎移植过程的胚胎运输方法及运输装置，使用保温容器为运载工具，容器内存有温水，在温水中放置轻质浮漂，利用温水承载浮漂，使得容器内所装载的胚胎处在一种温度均匀适当，并有轻微震荡的模仿母体的环境中，能够在运输途中能够保持胚胎的活力，有利于胚胎的发育，不失为胚胎移植过程中用于胚胎运输的一种取材容易、操作方便的运输方法和装置。
Description
[技术领域]
本发明涉及胚胎移植技术领域，尤其涉及一种应用于胚胎移植过程中的胚胎运输方法及运输装置。
[背景技术]
胚胎移植又可以称之为受精卵移植技术，主要是指将通过各种技术得到的胚胎(自然胚胎或者体外受精胚胎或者克隆胚胎)，经过手术，将其移植到同种的受体雌性动物体内，后期发育并能得到后代的新技术。世界上第一例胚胎移植是由英国人W·希普于1890年完成的，胚胎移植技术由此创始。
自从胚胎移植技术应用于畜牧业以来，给其带来了丰厚客观的效益，例如，在短时间内扩大了优良种畜群，方便引进国外优良品种资源等。1997年Dolly的诞生证实了体细胞核移植的可能性，同时也为转基因动物的生产提供一种高效的路径，即是通过转基因与核移植技术相结合来生产动物，大大的提高了转基因动物的阳性率，通过该技术顺利的得到转基因山羊、绵羊、猪、牛、小鼠等动物。
无论是得到体外受精胚胎还是体细胞克隆胚胎，无论是在转基因课题，还是克隆技术中，胚胎移植是其一整套流程中不可或缺的一步，胚胎移植的成否对课题的进行有着直接的影响。胚胎的生产主要在实验室内进行，而一般的胚胎移植操作主要在养殖场内。由于运输和疾病预防的需要，养殖场一般选址都是在远离市区，郊区，个别的甚至在山区里，从实验室到养殖场有很长的一段路程。因此当胚胎生产后到移植前，需要一段时间的临时输送和保存。因此选择合适理想的胚胎输送方法及其装置，对于胚胎移植后，胚胎在受体动物体内的发育以及妊娠率有着至关重要的作用，进而影响着整个课题项目的顺利开展。
实验室常规使用的是一种日本公司生产的细胞培养输送器，该设备能够调节恒温，且设置了防震设施，可以防止运输过程中剧烈的震荡对胚胎造成的伤害。但是，该细胞培养输送器的结构复杂，价格也不菲。
[发明内容]
本发明要解决的技术问题是提供一种在胚胎移植过程中模拟胚胎所在母体环境的胚胎运输方法。
本发明要解决的另外一个技术问题是提供一种可模拟胚胎所在母体环境且取材容易、操作简便的胚胎运输装置。
对于胚胎运输方法来说，本发明采用的技术方案是：其包括以下步骤：
1)胚胎的装管：首先将麦管提前紫外照射灭菌，装胚胎前用已经热平衡的胚胎培养液(PZM3)润洗麦管两遍，其次吸取胚胎培养液，做两个气段，每段液体0.5cm左右，第三段液体吸取装有胚胎的胚胎培养液，该段液体要多一些，并与前后的气段留有足够长的具体，保证胚胎在运输中有足够的营养和气体供给，然后再做第四，五两个气段，每段约0.5cm，最后用镊子在酒精灯上加热后将麦管端口封口；
2)先将保温容器干燥，并用紫外照射消毒，将热水与冷的自来水勾兑后倒入保温容器内，用电子温度计测量保温容器内的水温为38.5℃±0.2℃；
3)放置胚胎：将装有胚胎的麦管插于浮漂中，一并置于保温容器的温水中，使得浮漂上的麦管保持直立状态，立即合上保温容器盖子，交至运输人员；
4)胚胎运输：将保温容器置于车内或者由坐在车上的运输人员持于手中，运输时车内要避免剧烈的震荡，护送至胚胎移植地点；
5)胚胎释放和移植：到达移植目的地，待受体动物准备妥当并已经找到输卵管位置，将保温容器的盖子打开，将装载胚胎的麦管取出，拭去麦管周身的水；准备一无菌的培养皿，在体式显微镜下剪开麦管封口段，将胚胎释放至培养皿内；最后用胚胎移植管收集胚胎，交至胚胎移植人员完成胚胎移植工作。
对于胚胎运输装置来说，本发明采用的技术方案是：一种胚胎运输装置，应用于胚胎移植过程，包括保温容器、麦管和浮漂，保温容器具有抽真空夹层结构，容器内存有适量的温水，浮漂以漂浮状态置于在温水中，将装载胚胎的麦管竖向插在浮漂中，通过水中的浮漂保持麦管为直立状态。
作为优选，所述的保温容器为真空保温杯。
作为优选，所述的浮漂直径小于保温杯的口径。
作为优选，所述的浮漂用聚苯乙烯泡沫板块或其他比重较轻且不吸水的轻质材料制做。
本发明的有益效果是，使用保温容器为运载工具，利用温水承载浮漂，使得容器内所装载的胚胎处在一种温度均匀适当，并有轻微震荡的模仿母体的环境中，能够在运输途中能够保持胚胎的活力，有利于胚胎的发育，不失为胚胎移植过程中的胚胎运输的一种取材容易、操作方便的运输方法和装置。
[附图说明]
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
图1是本发明胚胎运输装置实施例的示意图。
图1中，1-杯盖，2-杯体，3-浮漂，4-麦管，5-温水。
[具体实施方式]
一、所用设备的组成
1)电子温度计：型号为Tp3001，郑州海洋仪器仪表有限公司制造，工作电压0.5v，温度的解析度为0.1℃/℉，测量的准确度为0.0℃～+80℃。
2)保温杯：高真空光口壶，容量为1500ml，杯口直径为75mm，如图1所示，该保温杯的杯体与杯盖均为不锈钢抽真空夹层保温结构，其保温性能说明为：(100℃水注入)6小时80℃，12小时72℃，24小时54℃。本实施方式直接使用国产真空保温杯作为运载工具，经实际测量，经过4h左右，杯中水温从38.5℃仅下降了1.6℃左右，说明其保温效果较为理想，能够满足胚胎运输的要求。
3)浮漂：用聚苯乙烯泡沫板制成圆盘形，上有麦管插入孔，直径小于保温杯的口径。
二、步骤如下：
1)胚胎的装管：首先将麦管提前紫外照射使其无菌，装胚胎前用已经热平衡的胚胎培养液(PZM3)润洗麦管两遍，其次吸取胚胎培养液(PZM3)，做两个气段，每段液体0.5cm左右，第三段液体吸取装有胚胎的胚胎培养液(PZM3)，该段液体要多一些，并与前后的气段留有足够长的具体，保证胚胎在运输中有足够的营养和气体供给，然后再做第四，五两个气段，每段约0.5cm，最后用镊子在酒精灯上加热后将麦管的端口封口。
2)先将保温杯的杯体2与杯盖1干燥，并用紫外照射消毒，将饮水机或热水瓶中的热水与冷的自来水勾兑后倒入保温杯的杯体2中，用电子温度计测量杯内水温并控制在38.5℃±0.2℃范围内。
3)放置胚胎(图1)：放置胚胎：将装有胚胎的麦管4轻轻的插于浮漂3中，一并置于保温杯的温水5中，使得浮漂上的麦管4保持直立状态，立即合上保温杯的杯盖1，交至运输人员；所使用的浮漂3为圆盘形，其直径略小于保温杯的口径，以便放置杯中，并使其漂浮在水中。
4)胚胎运输：将保温杯置于车内或者由坐在车上的运输人员持于手中，运输时车内打开空调，车内尽量保持恒温，最好在25℃左右，要避免剧烈的震荡，护送至胚胎移植地点；
5)胚胎释放和移植：到达移植目的地，待受体动物准备妥当并已经找到输卵管位置，将保温杯打开，轻轻将麦管取出，用干净的吸水纸将麦管周身的水拭去；准备一无菌的培养皿，体式显微镜下，使用一无菌剪刀或者手术剪剪开麦管封口段，将胚胎释放至培养皿内；最后用胚胎移植管收集胚胎，交至胚胎移植人员，完成胚胎移植工作。
本实施方式通过水浴作为载体，为胚胎提供一个包括适宜的温度在内的最佳的模仿母体的环境，同时在运输过程中，胚胎在水浴中有轻微的机械震荡，能够显著提高胚胎的发育能力。
为此，首先要控制好保温杯内水浴的温度，胚胎对温度很敏感，较高或较低的温度都不利于其后期的发育，最好是完全模拟母体的温度。其次是保温杯最好采用光口式，浮漂应为圆盘形，直径小于瓶口，这样利于取放胚胎，同时能够给胚胎一个轻微的震荡环境。最后，保温杯内的水位不宜过高或过低，水位过高，保温杯合盖时会挤压麦管，水位过低，会影响水浴温度，使其保温效果下降。
以上虽然结合附图描述了本发明的实施方式，但是本领域的技术人员可以在所附权利要求范围内做出各种变形或修改。
Claims (5)
1.一种胚胎运输方法，其包括以下步骤：
1)胚胎的装管：首先将麦管提前紫外照射使其无菌，装胚胎前用已经热平衡的胚胎培养液润洗麦管两遍，其次吸取胚胎培养液，做两个气段，每段液体0.5cm左右，第三段液体吸取装有胚胎的胚胎培养液，该段液体要多一些，并与前后的气段留有足够长的间距，保证胚胎在运输中有足够的营养和气体供给，然后再做第四，五两个气段，每段约0.5cm，最后用镊子在酒精灯上加热后将麦管端口封口；
2)先将保温容器干燥，并用紫外照射消毒，将热水与冷的自来水勾兑后倒入保温容器内，用电子温度计测量保温容器内的水温为38.5℃±0.2℃；
3)放置胚胎：将装有胚胎的麦管插于浮漂中，一并置于保温容器的温水中，使得浮漂上的麦管保持竖立状态，立即合上保温容器盖子，交至运输人员；
4)胚胎运输：将保温容器置于车内或者由坐在车上的运输人员持于手中，运输时车内要避免剧烈的震荡，护送至胚胎移植地点；
5)胚胎释放：到达移植目的地，将保温容器打开，将装载胚胎的麦管取出，拭去麦管周身的水；准备一无菌的培养皿，在体式显微镜下剪开麦管封口段，将胚胎释放至培养皿内。
2.一种胚胎运输装置，其特征在于，包括保温容器、麦管和浮漂，所述的保温容器具有抽真空夹层保温结构，保温容器内存有适量的温水，浮漂以漂浮状态置于温水中，将装载胚胎的麦管竖向插在浮漂中，通过水中的浮漂保持麦管为竖立状态。
3.根据权利要求2所述的胚胎运输装置，其特征在于，所述的保温容器为真空保温杯。
4.根据权利要求3所述的胚胎运输装置，其特征在于，所述的浮漂直径小于真空保温杯的口径。
5.根据权利要求2-4任何一项所述的胚胎运输装置，其特征在于，所述的浮漂用聚苯乙烯泡沫板块制做。
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