CN102172147A - 采用垃圾堆肥滤液提高草皮抗寒越冬性的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种采用城市生活垃圾堆肥滤液提高天津地区草皮抗寒越冬能力的方法。主要包括：（1）堆肥淋洗液的制备；(2)草坪植物培养；(3)冷锻炼处理及取样；最终技术效果，在天津地区的室外阳台内（无取暖设施），冷锻炼处理草皮在不低于-10℃的冬季环境条件下可完全越冬，并达到了冬季储存草皮的目标，来年春天返青后，黑麦草幼苗与周边草地草坪草相比，还有明显的优势，说明垃圾堆肥滤液在草坪植物生长越冬有着很重要的作用，这对将垃圾堆肥滤液运用于冬季草皮的生长中有着很好的导向作用；这向技术为实现草皮的周年生产奠定了基础。

Description

采用垃圾堆肥滤液提高草皮抗寒越冬性的方法

技术领域

本发明属于环境保护技术领域，涉及一种采用城市生活垃圾堆肥滤液提高草皮抗寒越冬性的方法。

背景技术

近年来，多年生黑麦草(Lolium perenne L.）以其耐寒性好，绿期长，耐粗放管理等特征逐渐为大家所接受，并逐步得到推广应用。但在天津地区冬季气候比较寒冷，干旱多雪，极端最低温度约零下7~9℃，春季多风少雨，很多草坪表现出冬季泛黄，处于休眠状态，这极大地缩短了黑麦草草坪的绿色期。在某些管理较差的草坪，甚至出现夏季与冬季两季枯黄，使得“四季青”的草坪变成“两季黄”。这种情况使得黑麦草的推广应用受到一定限制。

为使北方寒冷地区草皮生产得到提高，缩短草皮生产周期，提高草皮的质量和土地利用率，对于如何提高其草皮的抗寒性、缩短草坪草的枯黄期、扩大其应用范围是草皮生产上亟待解决的问题。目前，关于低温胁迫的研究对象多集中于农作物、经济作物方面。对草坪植物，特别是对天津北方地区的草坪植物开展低温胁迫研究还很少。所以，对黑麦草的幼苗进行冬季低温胁迫研究，通过将近三个月的观察，从生理生态角度探讨了低温胁迫对黑麦草幼苗细胞膜的影响。经过冬季越冬前和春季返青前的对比，发现针对草皮的特性只要采取相应的防寒措施，不仅能很好地越冬，而且返青好，长势喜人。并且通过本项研究在进一步完善当前黑麦草抗寒性理论的同时，为耐寒性黑麦草品种的选育，延长黑麦草品种绿期的建植技术提供一定的理论基础。

目前，草皮生长在草坪在现代生态城市绿化、美化，休闲和运动场地的建设中起着重要的作用，其生产技术已由最初的直接撒播建植发展到有土草皮、无土草皮生产。然而在草皮的周年生长中，如何提高草皮的抗寒能力，如何科学的对草皮进行合理的越冬保存，从而提高生产效益还尚无文献报道。

发明内容

本发明公开了一种采用城市生活垃圾堆肥滤液提高草皮抗寒越冬的方法，其特征在于按如下的步骤进行：

(1)堆肥淋洗液的制备：

称取垃圾堆肥，加入去离子水，充分搅拌后浸泡24-48 h，过滤，所得溶液为堆肥淋洗液，最后将淋洗液置于棕色瓶内，于4℃冰箱冷藏备用；其中垃圾堆肥与去离子水的重量体积比为1：2-4。

(2) 草坪植物培养：

将采集回来的植株盆栽，土壤基质高度为10-15cm，每盆均匀地播种25-30株；一周后对其进行刈割，待植株长成三叶一心期时给予堆肥淋洗液供给，每天统一定量给水，以保持草坪植物培养基质有较好的水状况，经常调换各培养皿的位置保证光照一致，试验在温室植物培养台上进行，温度为20～26℃ ，相对湿度为40%～70 %，光照为透入室内的自然光；

(3)冷锻炼处理及取样：

第30d将供试材料放入温度设置为10℃的SPX-B-G型的光照培养箱中进行处理；共两个处理组数：一组在2～10℃的低温处理，每梯度处理24h在光照的条件下进行模拟冷锻炼，共处理7d；另一组以20～26℃室温为对照,经一周,每隔5天浇一次淋洗液后对草坪植物的各项指标进行测定，经越冬锻炼返青后，对其植株高度进行最后测量，从培养到实验结束，整个实验历时80d-85。

(4)冷锻炼后对植株进行刈割，放入纸箱，保存的平均温度为-4℃至-10℃，待春天植株开始返青时移植田间，观察其生长状况。

在天津地区的室外阳台内（无取暖设施），冷锻炼处理草皮在不低于-10℃的冬季环境条件下可完全越冬，并达到了冬季储存草皮的目标。

本发明优选的采用城市生活垃圾堆肥滤液提高草皮抗寒越冬的方法：

(1)堆肥淋洗液的制备：

称取200 g的垃圾堆肥，加入400ml的去离子水，充分搅拌后浸泡24 h，过滤,所得溶液为堆肥淋洗液，最后将淋洗液置于棕色瓶内，于4℃冰箱冷藏备用；

(2) 草坪植物培养：

将采集回来的植株盆栽,土壤基质高度为10-15cm，每盆均匀地播种25-30株；一周后对其进行刈割，待植株长成三叶一心期时进行实验处理：处理组给予堆肥淋洗液供给，对照组不供给堆肥淋洗液；每天统一定量给水，以保持草坪植物培养基质有较好的水状况，经常调换各培养皿的位置保证光照一致，试验在温室植物培养台上进行，温度为20～26℃ ，相对湿度为40%～70 %，光照为透入室内的自然光；

(3)冷锻炼处理及取样：

第30d将供试材料放入温度设置为10℃的SPX-B-G型的光照培养箱中进行处理；共两个处理组数：一组在2～10℃的低温处理，每梯度处理24h在光照的条件下进行模拟冷锻炼，共处理7d；另一组以20～26℃室温为对照,经一周,每隔5天浇一次淋洗液后对草坪植物的各项指标进行测定，经越冬锻炼返青后，对其植株高度进行最后测量，从培养到实验结束，整个实验历时80d左右。通过施用堆肥淋洗液比较其对草坪的生长促进作用和越冬保绿技术的研究，为天津市市草皮越冬保绿的施肥措施提供一些参考。

本发明更加详细的制备方法:

1研制材料和方法

1.1材料

垃圾堆肥来自天津市小淀垃圾堆肥处理厂，经烘干后过2 mm筛。本实验选用我国北方常见的草坪植物多年生黑麦草（Lolium perenne L.），取自天津师范大学草坪植物。实验土壤取自天津师范大学，为表层30cm以下的土壤（避免杂草种子过多）。

1.2堆肥淋洗液的制备

称取200 g的垃圾堆肥，加入400ml的去离子水，充分搅拌后浸泡24 h。用定性滤纸过滤,所得溶液为堆肥淋洗液。最后将淋洗液置于棕色瓶内，于4℃冰箱冷藏备用。

1.3研究方法

1.3.1 草坪植物培养

供试草种为多年生冷季型黑麦草(Lolium perenne L.)取自天津师范大学草坪植物，将采集回来的植株盆栽于塑料杯中（土壤基质高度为10cm），共16盆每盆均匀地播种30株。一周后对其进行刈割，待植株长成三叶一心期时进行实验处理：处理组（处A和处B)给予堆肥淋洗液供给，其余则为对照组（对A和对B）不供给堆肥淋洗液。每天统一定量给水，以保持草坪植物培养基质有较好的水状况，经常调换各培养皿的位置保证光照一致。试验在温室植物培养台上进行，温度为20～26℃ ，相对湿度为40%～70 %，光照为透入室内的自然光。

1.3.2 冷锻炼处理及取样

第30d将供试材料放入温度设置为10℃的SPX-B-G型的光照培养箱中进行处理。本实验设置4次重复，实验处理过程中一次性放入光照培养箱内。处理温度是2～10℃，以2℃为一个温度梯度进行降温处理。共两个处理组数：一组以处理B组（4盆）及对照B组（4盆）进行2～10℃的低温处理，每梯度处理24h在光照的条件下进行模拟冷锻炼，共处理7d。另一组则以处理A组（4盆）和对照A组（4盆）以20～26℃室温为对照。经一周（每隔5天浇一次淋洗液）后对草坪植物的各项指标进行测定，经越冬锻炼返青后，对其植株高度进行最后测量，从培养到实验结束，整个实验历时80d左右。

1.4 指标测定

1.4.1 相对电导率(REL)的测定：相对电导率的测定参照刘祖祺的方法。

1.4.2 幼苗生长指标测定

盆栽一周后对其进行刈割，待植株长成三叶一心期每隔5天对其测定1次株高，经低温锻炼一周后，对其株高、地上鲜重以及叶绿素进行测定。地上鲜重测定方法为：将草坪植物齐根剪下，用电子天平称量鲜重，测量地上部的鲜重。叶绿素含量测定参考李合生主编的《植物生理生化实验原理和技术》。      

1.4.3 脯氨酸的测定 ：脯氨酸的测定参照刘祖棋的方法进行。

1.4.4 保护酶的测定 ：POD活性测定采用愈创木酚法，CAT活性测定采用紫外分光光度法，SOD活性测定采用NBT法。

1.5 冷锻炼处理草皮的越冬：观察冷锻炼处理草皮在不低于-10℃的冬季环境下越冬情况。

1.6 数据分析方法：数据分析采用EXCEL和SPSS14.0分析软件进行处理。

2　研制结果分析

2.1低温锻炼条件下堆肥滤液对黑麦草的株高与地上生物量的影响

通过株高的测定，可以在很大程度上更深入地认识垃圾堆肥滤液对草坪植物生长的效应。表1草坪的株高动态表明垃圾堆肥的缓释作用能为草坪植物提供持续的养分供应，保证草坪植物的生长需要。而经历低温锻炼的处理后，植物的生长状况虽然受到抑制，但供给过堆肥滤液的植株生长的良好，并且实验组（处A和处B）与对照相（对A和对B)比差异显著（p<0.05）。

草坪即草坪植被，是由草坪植物的地上部分以及根系和表土层构成的整体。地上生物量能够反映草坪植物生长情况，是反映草坪植物抗性的重要指标。表1说明经过低温胁迫后，植物的地上生物量明显的减少，并且影响差异不显著(P>0.05)但供给过堆肥滤液的植物（处A和处B )的地上生物量多于没有被供给过的(对A和对B)。表明垃圾堆肥滤液处理能够明显提高草坪植物的生物量，因为垃圾堆肥中含有较高的有机质以及丰富的氮、磷等营养元素，施用后能够改善土壤理化性质，促进草坪植物的生长。

表 1 不同处理对草坪植物株高和地上生物量的影响

处理	种植30d(cm)	低温处理7d(cm)	越冬返青9(cm)	地上生物量(g)
					处A	19.14±2.50a	17.90±1.05a	11.12±0.89a	5.24±0.76a
对A	15.75±0.48ab	14.88±0.59bc	9.32±0.72a	5.18±0.71a
					处B	18.44±1.81ab	16.75±1.34ab	10.25±0.82a	5.22±0.71a
对B	14.92±0.76b	13.76±0.45d	8.75±0.75a	5.14±0.68a

注：同一栏中不同小写字母表示差异显著（P<0.05），下同。

与对照相比，经过一周冷锻炼的黑麦草生长减缓，植株整体呈矮小、紧缩状态，叶片变厚，根颈部位膨大、叶色有点偏黄。随着低温锻炼的持续，黑麦草的株高增长速率比对照明显降低(表1)。与低温处理前相比，株高增长速率的降低幅度更大，这可能暗示黑麦草在低温锻炼下将更多的光合净积累用于对低温条件的适应而非维持生长。而将经过冬季低温锻炼后，将其移植到田间试验测得植株高度从表1可以看出：与冬天返青后的户外草坪植物（株高6.50cm)相比较，实验室栽培的黑麦草的株高有所增高，说明黑麦草经过冬天低温锻炼后能够较好的生长，进一步说明垃圾堆肥滤液在草坪植物生长越冬有着很重要的作用，它有利于植物抵抗低温的胁迫，增强草坪植物的抵抗能力。

2.2低温锻炼条件下堆肥滤液对黑麦草的叶绿素含量变化

叶绿素含量多少影响着对光能的吸收和转换，但进过逆境损害后，其含量逐步降低，影响捕获光能并转化成化学能的能力，使得光合速率会明显下降。在本试验中经过不同处理后，对草坪植物的叶绿素含量进行了测定（表2）。从表中可以看出，叶绿素a的影响是以处A的浓度含量最高；叶绿素b含量的影响差异显著(P<0.05),以处A的浓度含量最高；叶绿素总含量以处A浓度为最高，而处B次之。叶绿素a和b的比值是在浓度为处A和处B的最高，和对照相比差异显著（表2）。说明垃圾堆肥滤液对植物生长有利，供给过滤液的植株的叶绿素含量高于没有供给的；另一方面，经过低温逆境胁迫的植株虽然叶绿素含量有所减少，但在与同一逆境胁迫的条件下，给与过堆肥滤液的处理组生长状况比没有供给过的生长的较好，对有明显的显著差异。

表2不同处理对黑麦草的叶绿素含量的影响

2.3低温锻炼条件下堆肥滤液对黑麦草的保护酶的含量变化

植物组织中通过多种途径产生O₂ ^+－、OH⁺等自由基。这些自由基具有很强的氧化能力，对许多生物功能分子有破坏作用。细胞内也存在消除这些自由基的多种途径，如超氧化物歧化酶(SOD)可以消除O₂ ^+－，细胞中H₂O₂的积累可使CO₂的固定效率下降；而过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)能分解H₂O₂。只有SOD、CAT和POD三者的活性协调一致，才能使自由基维持平衡，所以上述3种酶统称保护酶系统。

表3冬季低温胁迫对叶片中SOD、CAT和POD活性的影响

2.3.1 SOD活性的影响变化

SOD是防护氧自由基对细胞膜系统伤害的防护酶，其活性受底物浓度的诱导。SOD是植物体内的一种能清除自由基的防御酶，可降低丙二醛等有毒物质的积累，使质膜得到保护。S0D活性时指出低温引起SOD活性下降，植物SOD活性与其本的抗寒性成正相关.研究发现柑桔各品种达到冷害临界点时，SOD活性上升，并在一温度范围内SOD活性随温度的降低成递增趋势，当温度下降至某一时刻，SOD活性达到最高。SOD升高的现象是植物低温伤害开始时的一种防御反应，表明SOD在环境胁迫下的保护功能。

黑麦草的SOD活性对冬季低温胁迫的响应(表3)表现为：随着冬季低温的到来，活性逐渐上升。实验组与对照组相比较差异显著(p<0.05)，而另一方面供给了垃圾堆肥滤液的（处A和处B）的SOD的活性比没有供给的（对A和对B）高。这种响应说明黑麦草的幼苗SOD活性对冬季零上低温胁迫反应敏感，特别是气温接近零度时，SOD活性的增加或维持较高的活性状态；并且说明垃圾堆肥滤液它们均有利于提高植物的抗寒性，有利于黑麦草幼苗的顺利越冬。

2.3.2 CAT的含量变化

低温胁迫下，细胞内易产生H₂O₂破坏膜系统的稳定，而过氧化氢酶（CAT）能把H₂O₂分解为H₂O和O₂，从而清除H₂O₂维护膜的稳定性。研究表明，梁李宏等研究低温胁迫对腰果幼苗的生理指标的测定发现抗寒性强的品种有较高的过氧化氢酶活性，且随着温度下降，以抗寒性强的品种下降幅度小，与抗寒性呈显著性有关。

黑麦草CAT活性对冬季低温胁迫的响应如表3：随着冬季气温的降低，CAT活性呈上升趋势，与对照相比，特别是供给过垃圾堆肥滤液的处B，上升值较大；但相互之间差异不是很显著。结果说明在冬季低温胁迫下，黑麦草幼苗叶片保持较高的CAT活性，有利于清除细胞中过剩H₂O₂，从而降低对细胞的毒害作用。

2.3.3 POD的含量变化

POD是植物对膜脂过氧化的酶促防御系统中重要的保护酶，其酶活性与植物抗寒性呈一定得相关性。POD在保护酶系统中主要起到酶促降解H₂O₂的作用，从而使植物抵抗在逆境胁迫下代谢过程产生的有害物质对细胞的伤害，表现出一定的抗逆性。经低温胁迫处理后，黑麦草叶片POD活性的上升可能是植物细胞对低温胁迫因子的一种保护性应激反应。多数研究表明：抗寒性强的植物在低温胁迫下，POD等保护系统仍能维持较高的活性水平，因而防止了因冷害产生的毒害物质如活性氧自由基的积累，减轻了由膜脂过氧化所引起的膜伤害，从而增强了机体的抗寒能力。本实验中：在低温胁迫下，黑麦草叶片POD活性上升，并且能维持较高的活性水平，来增强机体的抗寒能力，表现出较强的抗寒性。

由表3得，经过低温处理（处B）的黑麦草的POD与其他各组具有显著性差异(p<0.05)，而供给过堆肥滤液的（处A和处B）的POD明显高于没有供给的组数（对A和对B）。说明堆肥淋洗液能提高植物对抗寒性的能力，保护植物遭受因冷害而产生的毒害物质得伤害。

由此可知：由于冬季的低温胁迫下，使得植物组织不断的产生O₂ ^+－、OH⁺等自由基。黑麦草幼苗便通过提高SOD活性来消除O₂ ^+－，由此在细胞中积累H₂O₂则分别得到POD、CAT活性的提高而协调一致，使自由基维持在一个低水平，随着低温胁迫程度的加剧。CAT活性增加受到限制，此时，SOD在消除O₂ ^+－的过程中积累H₂O₂可由POD活性得到分解，形成SOD活性和POD活性的协调一致的转移现象。

2.4 经低温锻炼下堆肥滤液对黑麦草叶片电导率的变化

表4 不同处理下对黑麦草的叶片相对电导率(REL)的影响

处理t	相对电导率
		处A	52.11±0.84bc
对A	47.80±1.18c
		处B	59.68±0.93a
对B	53.31±2.87b

植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要作用。植物在受到低温胁迫时，细胞膜的不饱和脂肪酸会发生氧化降解，导致质膜的空隙增大，通透性变大，细胞内离子大量外渗，从而使组织渗出液电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，质膜透性直接反映膜系统受伤程度，而相对电导率的大小反映了质膜透性大小，因此，可以通过测定电导率反映植物受冷害程度。

本实验的结果也说明了这一点，植物细胞质膜透性会增大，随着胞外电解质大量渗漏，相对电导率也相应增大，但抗寒性强的品种原生质膜的稳定性大于抗寒性弱的品种。即在低温胁迫下，经过低温锻炼（处B和对B)的相对电导率比未经低温(处A和对A）锻炼高，而供给堆肥淋洗液没经过低温处理的处A的相对电导率比经过处理过的处B低，都具有显著差异。说明供给堆肥淋洗液对植物抵抗逆境胁迫有利，能使质膜稳定性提高，受低温伤害程度降低，因此这一指标可在一定程度上反映品种抗寒性强弱。植物是否能够忍受低温、不被伤害，由该种或品种在长期的系统发育过程中形成的的遗传特性决定。同时还与它在个体发育过程中受到外界环境影响而产生的生理适应的程度有密切关系。

2.5低温锻炼条件下堆肥滤液对黑麦草的脯氨酸含量变化

大量研究表明，脯氨酸的大量积累可降低组织和细胞的冰点温度，使细胞水合度增大，保水能力增强，避免原生质在低温下的脱水伤害；也是越冬植物的重要能量和更新芽的萌动力，与草坪草抗寒性密切相关。脯氨酸具有溶解度高、在细胞内积累无毒性、提高细胞水势等特点，它的积累可促进蛋白质胶体亲水面增大，使可溶性蛋白增多，对细胞起保护作用。故在植物处于低温胁迫时，它使植物具有一定的抗寒力。脯氨酸的积累是对寒冷的一种适应性反应。因而，亦可作为抗寒育种的生理指标。

表5低温胁迫对黑麦草脯氨酸的影响

处理	脯氨酸  (ug/g FW)
		处A	17.04±0.10b
对A	14.22±0.04d
		处B	19.41±0.06a
对B	14.76±0.07c

游离脯氨酸在细胞内的含量与温度变化有很大关联，从本实验可以看出：经低温处理的(处B)的脯氨酸的含量比没有经过处理的（处A和对A）的高，表明低温可以明显地增加脯氨酸含量，提高细胞的抗逆能力。而另一方面，供给堆肥淋洗液并且经低温处理的处B的脯氨酸的含量比没经低温处理的处A的高，相互之间都有显著性差异(p＜0.05)。说明对草坪植物供给堆肥淋洗液对植物忍受冬天的抗寒性有关，能加强植物的冷锻炼能力。

3 技术讨论与结论

众多研究表明，植物在低温胁迫下，细胞质的膜透性发生不同程度的增大，表现为组织电解质外渗，电导率升高，这已成为低温伤害的重要标志。而质膜是冻害的原始部位，低温胁迫引起植物细胞透性改变，溶质外渗。因此植物细胞电解质渗漏的多少，反应了低温胁迫下植物受伤害程度。抗寒性强的植物或受害较轻者，透性增大速度较慢、且透性变化可逆转，易恢复正常。相反，抗寒性弱的植物或受害较重者，透性增大速度较快、不易逆转，不能恢复正常，以致造成植物伤害、死亡。本实验从酶活性、脯氨酸、REL等的变化来看，脯氨酸是重要的渗透调节物质和营养物质，它们的增加积累能提高细胞的保水能力、对细胞的生命物质及生物膜起保护作用，防止活性氧对膜脂和蛋白质的过氧化作用，也是植物越冬，再生的重要能量物质。由于多种因子的作用，耐低温的黑麦草叶片的活性氧控制接近于正常水平，使得根体内的活性氧产生与清除的平衡系统维持平衡，细胞膜的结构和功能不受损。因此要使黑麦草能顺利渡冬，需要增强膜结构的稳定性与维持活性氧平衡。

而另一方面我们可知给草皮科学施肥可以改良土壤的理化性质，为其植物提供适宜的生长环境，从而提高对不利环境的抵抗能力。以往草皮越冬保绿施用的肥料多为无机肥料，只能给土壤提供一定的养分，却很难明显地改良土壤物理性状，而且长期施用对土壤的质地还有较强的破坏作用。单纯施用有机质，虽然可以改良土壤的物理性状，但很难提供给草皮所需的速效养分，而且有时还和草坪争夺土壤中的速效养分。由于堆肥滤液中含有植物生长和土壤改良所需的均衡的养分和有机质，本实验我们通过实验方法将城市固体废弃物合理利用，为草皮提供了适宜的有机肥料。它也是为草皮在周年生长越冬提供了充足的养分和草坪植物生长所需要的营养来源。也更进一步的说明垃圾堆肥滤液在草坪植物生长越冬有着很重要的作用，这对将垃圾堆肥滤液运用于冬季草皮的生长中有着很好的导向作用。

最终技术效果，在天津地区的室外阳台内（无取暖设施），冷锻炼处理草皮在不低于-10℃的冬季环境条件下可完全越冬，并达到了冬季储存草皮的目标，为实现草皮的周年生产奠定了基础。

具体实施方式

为了更充分的解释本发明的实施，提供下述制备方法实施实例。这些实施实例仅仅是解释、而不是限制本发明的范围。

实施例1

(1)堆肥淋洗液的制备：

称取200g的垃圾堆肥，加入400ml的去离子水，充分搅拌后浸泡24 h，过滤,所得溶液为堆肥淋洗液，最后将淋洗液置于棕色瓶内，于4℃冰箱冷藏备用；

(2) 草坪植物培养：

将采集回来的植株盆栽,土壤基质高度为10cm，每盆均匀地播种25株；一周后对其进行刈割，待植株长成三叶一心期时进行实验处理：处理组给予堆肥淋洗液供给，对照组不供给堆肥淋洗液；每天统一定量给水，以保持草坪植物培养基质有较好的水状况，经常调换各培养皿的位置保证光照一致，试验在温室植物培养台上进行，温度为26℃ ，相对湿度为50%，光照为透入室内的自然光；

(3)冷锻炼处理及取样：

第30d将供试材料放入温度设置为10℃的SPX-B-G型的光照培养箱中进行处理；共两个处理组数：一组在8℃的低温处理，每梯度处理24h在光照的条件下进行模拟冷锻炼，共处理7d；另一组以25℃室温为对照,经一周,每隔5天浇一次淋洗液后对草坪植物的各项指标进行测定，经越冬锻炼返青后，对其植株高度进行最后测量，从培养到实验结束，整个实验历时80d左右。冷锻炼后对植株进行刈割，放入纸箱，保存的平均温度为-4℃，待春天植株开始返青时移植田间，观察其生长状况。

实施例2

(1)垃圾堆肥来自天津市小淀垃圾堆肥处理厂，经烘干后过2mm筛。本实验选用我国北方常见的草坪植物多年生黑麦草（Lolium perenne L.），取自天津师范大学草坪植物。实验土壤取自天津师范大学，为表层30cm以下的土壤（避免杂草种子过多）。

(2)堆肥淋洗液的制备

称取400g的垃圾堆肥，加入1200ml的去离子水，充分搅拌后浸泡24 h。用定性滤纸过滤,所得溶液为堆肥淋洗液。最后将淋洗液置于棕色瓶内，于4℃冰箱冷藏备用。

(3)供试草种为多年生冷季型黑麦草(Lolium perenne L.)取自天津师范大学草坪植物，将采集回来的植株盆栽于塑料杯中（土壤基质高度为10cm），共16盆每盆均匀地播种30株。一周后对其进行刈割，待植株长成三叶一心期时进行实验处理：处理组（处A和处B)给予堆肥淋洗液供给，其余则为对照组（对A和对B）不供给堆肥淋洗液。每天统一定量给水，以保持草坪植物培养基质有较好的水状况，经常调换各培养皿的位置保证光照一致。试验在温室植物培养台上进行，温度为26℃ ，相对湿度为50% ，光照为透入室内的自然光。

(4) 冷锻炼处理及取样

第30d将供试材料放入温度设置为10℃的SPX-B-G型的光照培养箱中进行处理。本实验设置4次重复，实验处理过程中一次性放入光照培养箱内。处理温度是10℃，以2℃为一个温度梯度进行降温处理。共两个处理组数：一组以处理B组（4盆）及对照B组（4盆）进行2～10℃的低温处理，每梯度处理24h在光照的条件下进行模拟冷锻炼，共处理7d。另一组则以处理A组（4盆）和对照A组（4盆）以26℃室温为对照。经一周（每隔5天浇一次淋洗液）后对草坪植物的各项指标进行测定，经越冬锻炼返青后，对其植株高度进行最后测量，从培养到实验结束，整个实验历时85d。冷锻炼后对植株进行刈割，放入纸箱，保存的平均温度为-10℃，待春天植株开始返青时移植田间，观察其生长状况。

实施例3

(1)堆肥淋洗液的制备：

称取垃圾堆肥，加入去离子水，充分搅拌后浸泡48 h，过滤，所得溶液为堆肥淋洗液，最后将淋洗液置于棕色瓶内，于4℃冰箱冷藏备用；其中垃圾堆肥与去离子水的重量体积比为1：4。

(2) 草坪植物培养：

将采集回来的植株盆栽，土壤基质高度为15cm，每盆均匀地播种30株；一周后对其进行刈割，待植株长成三叶一心期时给予堆肥淋洗液供给，每天统一定量给水，以保持草坪植物培养基质有较好的水状况，经常调换各培养皿的位置保证光照一致，试验在温室植物培养台上进行，温度为26℃ ，相对湿度为70 %，光照为透入室内的自然光；

(3)冷锻炼处理及取样：

第30d将供试材料放入温度设置为10℃的SPX-B-G型的光照培养箱中进行处理；共两个处理组数：一组在5℃的低温处理，每梯度处理24h在光照的条件下进行模拟冷锻炼，共处理7d；另一组以25℃室温为对照,经一周,每隔5天浇一次淋洗液后对草坪植物的各项指标进行测定，经越冬锻炼返青后，对其植株高度进行最后测量，从培养到实验结束，整个实验历时80d。冷锻炼后对植株进行刈割，放入纸箱，保存的平均温度为-4℃，待春天植株开始返青时移植田间，观察其生长状况。

Claims (1)

1. 一种采用城市生活垃圾堆肥滤液提高草皮抗寒越冬的方法，其特征在于按如下的步骤进行：

(1)堆肥淋洗液的制备：

   称取垃圾堆肥，加入去离子水，充分搅拌后浸泡24-48 h，过滤，所得溶液为堆肥淋洗液，最后将淋洗液置于棕色瓶内，于4℃冰箱冷藏备用；其中垃圾堆肥与去离子水的重量体积比为1：2-4；

(2) 草坪植物培养：

    将采集回来的植株盆栽，土壤基质高度为10-15cm，每盆均匀地播种25-30株；一周后对其进行刈割，待植株长成三叶一心期时给予堆肥淋洗液供给，每天统一定量给水，以保持草坪植物培养基质有较好的水状况，经常调换各培养皿的位置保证光照一致，试验在温室植物培养台上进行，温度为20～26℃ ，相对湿度为40%～70 %，光照为透入室内的自然光；

(3)冷锻炼处理及取样：

第30d将供试材料放入温度设置为10℃的SPX-B-G型的光照培养箱中进行处理；共两个处理组数：一组在2～10℃的低温处理，每梯度处理24h在光照的条件下进行模拟冷锻炼，共处理7d；另一组以20～26℃室温为对照,经一周,每隔5天浇一次淋洗液后对草坪植物的各项指标进行测定，经越冬锻炼返青后，对其植株高度进行最后测量，从培养到实验结束，整个实验历时80d-85；

 (4)冷锻炼后对植株进行刈割，放入纸箱，保存的平均温度为-4℃至-10℃，待春天植株开始返青时移植田间，观察其生长状况。