CN102156159A - 一种烟草中淀粉含量的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种烟草中淀粉含量的检测方法，属烟草分析检测技术领域。本发明将烟草中的淀粉首先用淀粉酶酶解，糖化酶糖化，得到酶解液。在菲林试剂A液和B液共同作用下生成Cu2O，加入硫酸(2mol/L)和硫酸铁氨溶解，在电位滴定仪上用高锰酸钾标准溶液滴定测定。本发明的检测方法包括样品处理、电位滴定及淀粉含量计算步骤。本发明的特点在于：a.酶解-电位滴定分析方法测定烟叶中淀粉含量，淀粉的糊化和液化同时进行，极大地缩短了样品前处理时间，为快速测定烟草中的淀粉含量提供了前提条件；b.酶解-电位滴定分析方法有效的解决了酸解法存在的问题，操作简单，重复性好，回收率高，设备投资小，能够满足烟草中淀粉含量的批量测定。
Description
技术领域：
本发明涉及一种烟草中淀粉含量的检测方法，属烟草分析检测技术领域。
背景技术：
淀粉是烟草中一类重要的碳水化合物，是烟叶成熟度的重要判断依据之一，其对烟草的色香味是一种不利化合物。新鲜烟叶通过调制，大部分淀粉经酶解反应降解为还原糖。但调制后的烟叶仍残留少量淀粉，以淀粉形态存在的糖类在燃吸时，对烟气质量产生不良影响，影响燃烧速度和燃烧完全性，燃烧时产生糊焦味，影响烟草制品的质量。因此淀粉含量已成为烟草品质评价的重要指标，快速准确测定烟草中的淀粉含量具有重要意义。目前烟草行业测定淀粉的方法主要是酸解法和比色法，酸解法不具有选择性，在淀粉水解时纤维素、半纤维素、果胶等高分子糖类物质也会发生水解，产生的葡萄糖、木糖和阿拉伯糖等单糖使测定结果偏高。而比色法测定，结果不准确。
发明内容：
本发明的目的在于克服现有技术之不足，而提供一种方法简单、成本低、效率高和分析数据精确的烟草淀粉含量测定方法。
本发明根据淀粉酶具有高效性和专一性，探寻一种快速准确测定烟草中淀粉含量的方法，依据姆松-华尔格法原理，采用了酸解法85％酒精回流洗去小分子糖，减少烟叶本身还原糖的影响，然后用淀粉酶酶解，糖化酶将糊精降解为葡萄糖，建立了采用电位滴定检测烟草淀粉的分析检测方法。
本发明将烟草中的淀粉首先用淀粉酶酶解，糖化酶糖化，得到酶解液。在菲林试剂A液和B液共同作用下生成Cu2O，加入硫酸(2mol/L)和硫酸铁氨溶解，在电位滴定仪上用高锰酸钾标准溶液滴定测定。
本发明的烟草中淀粉含量的检测方法步骤如下：
(1)样品处理
a.称取精确到0.0001g的2.0000g烟末置于150mL平底烧瓶中，加入50ml 80％乙醇，±80℃回流30min，沸腾开始计时；
b.然后过滤，待乙醇过滤完后，用蒸馏水多次洗涤残渣，直至乙醇洗涤干净；将残渣转移至200mL烧杯中，加入活力≥30000U/g，最适温度95-100℃的淀粉酶20mL，在95-100℃水浴中水解30min，在电炉上加热至沸腾2min灭活；冷却后加入活力≥100000U/g，最适温度58-62℃的糖化酶20mL，在58-60℃水浴中水解30min，在电炉上加热至沸腾2min灭活，过滤至100mL容量瓶中，定容，摇匀；
c.取样25mL置于250mL烧杯中，加入菲林试剂A液和B液各15mL，摇匀，在电炉上加热，在4分钟内沸腾，煮沸2分钟，用离心机分离Cu2O沉淀，取25mL的硫酸铁铵溶液和25mL(2mol/L)的硫酸加入Cu2O沉淀中使其全部溶解并转移到200mL烧杯中；其中：
菲林试剂A液为：取硫酸铜结晶34.69g，加适量水溶解，加硫酸0.5mL，再加水至500mL，用精制石棉过滤，贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内；
菲林试剂B液为：取酒石酸钾钠173g与氢氧化钠50g，加适量水溶解，稀释至500mL，用精制石棉过滤，贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内；
2、电位滴定
用高锰酸钾标准溶液在电位滴定仪上滴定，得到淀粉百分含量；
3、淀粉含量计算
淀粉(％)＝C*C1*54.4/C2*(1-W)
式中C----耗用高锰酸钾量(mL)；
G1---高锰酸钾标定浓度(mol/L)；
C2----样重(g)；
w----样品的水分含量；
54.4--系数。
本发明的特点在于：
a.酶解-电位滴定分析方法测定烟叶中淀粉含量，淀粉的糊化和液化同时进行，极大地缩短了样品前处理时间，为快速测定烟草中的淀粉含量提供了前提条件；
b.酶解-电位滴定分析方法有效的解决了酸解法存在的问题，操作简单，重复性好，回收率高，设备投资小，能够满足烟草中淀粉含量的批量测定。
具体实施方式：
本方法采用的设备均为市场购买。方法的具体操作步骤如下：
1.样品处理
a.准确称取2.0000g烟末(精确到0.0001g)于150mL平底烧瓶中，加入50ml 80％乙醇，±80℃回流30min，沸腾开始计时。
b.然后过滤，待乙醇过滤完后，用蒸馏水多次洗涤残渣，直至乙醇洗涤干净。将残渣转移至200mL烧杯中，准确加入淀粉酶(活力≥30000U/g，最适温度95-100℃)20mL，在95或100℃水浴中水解30min，在电炉上加热至沸腾2min灭活。冷却后准确加入糖化酶(活力≥100000U/g，最适温度58-62℃)20mL，在58或60℃水浴中水解30min，在电炉上加热至沸腾2min灭活，过滤至100mL容量瓶中，定容，摇匀。
c.取样25mL于250mL烧杯中，加入菲林试剂A液和B液各15mL，摇匀，在电炉上加热，在4分钟内沸腾，煮沸2分钟，用离心机分离Cu2O沉淀，取25mL的硫酸铁铵溶液和25mL(2mol/L)的硫酸加入Cu2O沉淀中使其全部溶解，转移到200mL烧杯中；其中：
菲林试剂A液为：取硫酸铜结晶34.69g，加适量水溶解，加硫酸0.5mL，再加水至500mL，用精制石棉过滤，贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内；
菲林试剂B液为：取酒石酸钾钠173g与氢氧化钠50g，加适量水溶解，稀释至500mL，用精 制石棉过滤，贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内。
2、电位滴定
用高锰酸钾标准溶液在电位滴定仪上滴定，得到淀粉百分含量。
3、淀粉含量计算
淀粉(％)＝C*C1*54.4/C2*(1-W)
式中C----耗用高锰酸钾量(mL)；
G1---高锰酸钾标定浓度(mol/L)；
C2----样重(g)；
w----样品的水分含量；
54.4--系数。
4、酶解法与酸解法的对比实验
分别称取两份以下三种样品，一份按酶解方法处理后检测，一份按传统方法处理，洗糖后酸解，测定淀粉含量。对比结果如下：
酶解法与酸解法的比对
| 样品名称 | 酶解法测定的淀粉含量(％) | 酸解法测定的淀粉含量(％) |
| 03云南B3 F | 3.67 | 5.56 |
| 03龙岩B3 F | 5.45 | 7.37 |
| 03龙岩C2F | 3.68 | 6.01 |
实际应用表明：同一样品酸解法测定结果比酶解法高±2％，因为酸解法测定时，采用25％盐酸，因酸性较强，且不具有选择性，在淀粉水解时，纤维素、半纤维素、果胶的高分子糖类物质同时水解，使测定结果偏高。而酶具有高度的专一性，对纤维素等高分子糖类物质没有降解作用，因此用该方法检测淀粉，结果准确可靠。
Claims (1)
1.一种烟草中淀粉含量的检测方法，其特征在于该烟草中淀粉含量的检测方法步骤如下：
(1)样品处理
a.称取精确到0.0001g的2.0000g烟末置于150mL平底烧瓶中，加入50ml 80％乙醇，±80℃回流30min，沸腾开始计时；
b.然后过滤，待乙醇过滤完后，用蒸馏水多次洗涤残渣，直至乙醇洗涤干净；将残渣转移至200mL烧杯中，加入活力≥30000U/g，最适温度95-100℃的淀粉酶20mL，在95-100℃水浴中水解30min，在电炉上加热至沸腾2min灭活；冷却后加入活力≥100000U/g，最适温度58-62℃的糖化酶20mL，在58-60℃水浴中水解30min，在电炉上加热至沸腾2min灭活，过滤至100mL容量瓶中，定容，摇匀；
c.取样25mL置于250mL烧杯中，加入菲林试剂A液和B液各15mL，摇匀，在电炉上加热，在4分钟内沸腾，煮沸2分钟，用离心机分离Cu2O沉淀，取25mL的硫酸铁铵溶液和25mL的硫酸加入Cu2O沉淀中使其全部溶解并转移到200mL烧杯中，硫酸的浓度为2mol/L；其中：
菲林试剂A液为：取硫酸铜结晶34.69g，加适量水溶解，加硫酸0.5mL，再加水至500mL，用精制石棉过滤，贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内；
菲林试剂B液为：取酒石酸钾钠173g与氢氧化钠50g，加适量水溶解，稀释至500mL，用精制石棉过滤，贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内；
(2)、电位滴定
用高锰酸钾标准溶液在电位滴定仪上滴定，得到淀粉百分含量；
(3)、淀粉含量计算：淀粉(％)＝C*C1*54.4/C2*(1-W)
式中C----耗用高锰酸钾量mL；
G1---高锰酸钾标定浓度mol/L；
C2----样重g；
w----样品的水分含量；
54.4--系数。
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