CN102138895A - 一种含盐酸法舒地尔的滴眼剂及其制备 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含盐酸法舒地尔的滴眼剂及其制备方法。本发明提供一种能降低刺激性的盐酸法舒地尔滴眼剂，所述滴眼剂中含有盐酸法舒地尔及增稠剂、pH调整剂、抑菌剂、等渗剂、抗氧剂、降低眼刺激性物质等药学上可接受的辅料。

Description

一种含盐酸法舒地尔的滴眼剂及其制备

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含盐酸法舒地尔的滴眼剂及其制备方法。

背景技术

法舒地尔，是一种Rho激酶制剂，其药理作用主要包括：

1.抑制钙敏化效应，扩张血管。所谓钙敏化效应，在平滑肌的收缩过程中，肌球蛋白轻链(myosin light chain，MLC)的磷酸化水平是决定平滑肌的收缩程度的一个重要因素，MLC的磷酸化水平受到依赖Ca2+钙调蛋白(calmodulin，CcM)的肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase，MLCK)和Ca2+非肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain phosphase，MLCP)的双重调节。MLCK磷酸化MLC的Ser19位点，引起肌动蛋白-肌球蛋白系统的活化，导致平滑肌的收缩；MLCP的抑制可以使MLC的磷酸化和平滑肌的收缩进一步加强，即增加了收缩或调解装置对Ca2+的敏感性，一系列证据显示这种钙敏化机制主要是通过三聚体G蛋白(Gq和G12/13)、RhoA及其底物Rho激酶(Rho kinase，ROK)介导。法舒地尔通过阻断Rho激酶对MLCP的抑制作用，抑制钙敏化效应，介导血管平滑肌舒张，扩张血管。

2.抑制炎细胞的迁徙和浸润，减少炎症介质的产生，减轻炎症反应肌动蛋白一肌球蛋白系统不仅参与了平滑肌的收缩，在非肌肉细胞的迁徙和形成改变过程中也发挥了重要作用。由于肌动蛋白--肌球蛋白系统受到由Rho激酶介导的钙敏化效应的调节，法舒地尔通过拮抗Rho激酶就可以有效地抑制炎细胞的迁徙和浸润。另外，法舒地尔通过Rho激酶和其他蛋白激酶，可以减少炎症介质的产生，从而减轻炎症反应，发挥组织保护作用。

3.增加内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)的表达，促进一氧化氮(NO)生成eNOS的表达受到Rho激酶的调控，但具体机制不详。法舒地尔通过拮抗Rho激酶可以增加eNOS的表达，提高eNOS活性及NO的产量，发挥其药理作用。

4.抑制细胞增殖，减轻器官重构，近年来的研究提示，Rho/Rho激酶通路参与了对细胞增殖和器官重构的调控。因此，法舒地尔通过抑制Rho激酶可以有效地抑制细胞增殖，减轻器官重构。

此外，法舒地尔通过降低血液中葡萄糖和同型半胱氨酸的浓度、拮抗氧化应激，可以防止糖尿病和高同型半胱氨酸血症大鼠的血管内皮功能紊乱；将法舒地尔应用于胰岛素抵抗的Zucker肥胖大鼠，可以降低血压，纠正葡萄糖和脂质代谢紊乱，抑制胰岛素受体底物(IRS-1)的丝氨酸磷酸化及胰岛素信号传导通路的紊乱，恢复乙酰胆碱和硝普钠对血管的扩张作用；用Hydroxy fasudil处理培训的成骨细胞，可以增加骨形成蛋白-2(BMP-2)和骨钙素的mRNA表达的抑制作用，提示法舒地尔通过抑制Rho激酶可能对骨质疏松有治疗作用；用法舒地尔处理培养的未受刺激的大鼠皮质星形胶质细胞，说明法舒地尔通过拮抗、Rho激酶可以影响星形胶质细胞的形态。

随着对于法舒地尔药理作用认识的不断深入，其临床应用领域也不断得到扩展。除了防治SAH后的慢性脑血管痉挛，将其用于治疗其他疾病。

其临床主要用于：

1.防治SAH后的慢性脑血管痉挛，减轻SAH病人的缺血性脑损伤。

2.改善缺血性中风病人的预后，

3.抑制冠状动脉痉挛，减轻缺血性心肌损伤，改善冠心病患者的心功能。

4.治疗肺动脉高压。

目前盐酸法舒地尔已用于临床的剂型主要是注射剂，虽然起效快，生物利用度高，但是注射液的安全性及机体适用性差，因此若剂量不当或注射过快，或药品质量存在问题，均有可能给患者带来危险，甚至造成无法挽回的后果。此外注射时的疼痛、不能由患者自己给药、注射局部产生硬结以及静脉注射引起血管炎症都是临床应用时存在的问题。

已知眼用药物吸收的途径主要有2条：1)角膜吸收，主要适用一般脂溶性药物；2)结膜吸收，主要指全身作用，亲水性及多肽蛋白药物，经过调查，目前国内眼用药水品种较少，为此我们针对法舒地尔的剂型方面进行研究，法舒地尔有很好的水溶性，这使得研究法舒地尔眼用制剂起到全身治疗作用成为可能，能遍布全身起到治疗脑血管疾病的作用。

本发明同时发现法舒地尔眼用制剂可以降低眼内压，对白内障有一定疗效，因此本发明具有很大意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含盐酸法舒地尔的滴眼剂及其降低眼内压，对青光眼，白内障的应用及制备方法。

本发明提供一种能降低刺激性的盐酸法舒地尔滴眼剂，所述滴眼剂中含有盐酸法舒地尔及增稠剂、PH调整剂、抑菌剂、等渗剂、抗氧剂、降低眼刺激性物质等药学上可接受的辅料。

本发明提的盐酸法舒地尔滴眼剂，所用的增稠剂包括：羟丙甲基纤维素、甲基纤维素、玻璃酸钠、聚维酮、卡波姆、聚乙二醇、聚乙烯醇，但不限于此，其含量约为所述制剂的0.001-1.0％

本发明提的盐酸法舒地尔滴眼剂，所用的PH调节剂包括：磷酸二氢钠·2H2O和硼酸和硼砂、硼酸和无水碳酸钠，但不限于此，其含量约为所述制剂的0.01-5％。

本发明提的盐酸法舒地尔滴眼剂，所用的抑菌剂包括：三氯叔丁醇、硫柳汞、对羟基苯甲酸乙酯、苯扎溴铵、氯化苯甲铵，但不限于此，其含量约为所述制剂的0.001-0.5％。

本发明提的盐酸法舒地尔滴眼剂，所用的等渗剂包括：氯化钠、氯化钾、甘油，硼酸和硼砂，但不限于此，其含量约为所述制剂的0.2-2.0％。

本发明提的盐酸法舒地尔滴眼剂，所用的抗氧剂包括：亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、维生素E及维生素C，但不限于此，其含量约为所述制剂的0.05％-5％。

本发明提的盐酸法舒地尔滴眼剂，所用的降低眼液刺激性物质为L-赖氨酸，其含量约为所述制剂的0.25-2.0％。

因此，本发明的盐酸法舒地尔滴眼剂，各组分的重量百分比如下：

其余为注射用水或生理盐水。

优选的本发明的盐酸法舒地尔滴眼剂，各组分的重量百分比如下：

其余为注射用水或生理盐水。

最优选的本发明的盐酸法舒地尔滴眼剂，各组分组成如下：

本发明还提供本发明的盐酸法舒地尔滴眼剂的制备方法，其制备步骤如下：

(1)取上述处方量的增稠剂，用新鲜注射用水浸泡过夜，搅拌加热，保温，冷却至室温，滤过，得A液，备用。

(2)取上述处方量的盐酸法舒地尔，加入新鲜注射用水搅拌加热，保温，搅拌均聚后得B液，备用。

(3)用新鲜注射用水10ml分别溶解上述处方量的等渗剂，抑菌剂，PH调整剂，抗氧剂，降低眼刺激性物质，一次加入上述A液和B液，再用新鲜注射用水稀释至全量，并搅拌均匀，冷却后测定PH值及含量，经过滤至澄明后，分装。

上述步骤1中注射用水为全量的2/5-2/4，加热温度60℃-100℃，保温10-60分钟。

上述步骤2中注射用水为全量的1/5-1/4，搅拌加热温度50℃-90℃，保温10-60分钟。

上述步骤3中测定的PH为6.8-7.8及含量90-110％。

本发明的配方组成是经过筛选的，筛选过程如下：

1.粘度的调整

滴眼剂合适的粘度在4.0～5.0mPa·s之间，应用甲基纤维素这一亲水性高分子材料来增加水溶液粘度，可减少流失，延长药物与角膜接触时间，有利于药物渗透。

2.PH的调整

PH值对滴眼剂有很重要的影响，PH值不适当会对眼部造成刺激，增加泪液分泌，导致药物迅速流失，甚至损伤角膜。正常眼可耐受的PH值为5.0-9.0，当PH值为6.0-8.0时无不适感觉，小于5.0和大于11.0时都会有明显的感觉。为了尽可能减轻不适感，眼用溶液应具有与泪液相同的PH值。本发明用硼酸调整PH7.0-8.0，用量为0.6g。

3.渗透压的调节

眼用溶液的渗透压应尽量和泪液相等，泪液的渗透压为7.4个大气压。高渗溶液在眼内使角膜失去水分，使组织干燥而产生不适的感觉；低渗溶液能使角膜组织细胞胀大而产生刺激。溶液渗透压过高或高低还会刺激眼部使泪液增加，造成药液迅速稀释或流失，因此一般眼用溶液均应调节其渗透压。眼睛对渗透压的耐受性比血液高，可耐受相当于0.5％-2.0％氯化钠溶液的渗透压范围。在0.7％-1.5％氯化钠的范围内大多数人是可以接受的，所以眼用溶液的渗透压可调节在此范围内。

4.无菌度的保持

作为滴眼剂的抑菌剂，不仅要求有效，还要求迅速，在2小时内发挥作用，即在病人两次用药的间隔时间内达到抑菌。能符合这些要求的抑菌剂不多，硫柳汞无毒、无刺激、性质稳定。

5.抗氧剂的确定

在针对该制剂进行稳定性考察时发现有氧化反应的发生，药液呈现出少量白色絮状沉淀，故本发明在制剂中加入少量抗氧剂以防药物氧化，加入中性的亚硫酸氢钠也不会对制剂的PH值产生影响。

本发明还提供了该制剂的含量测定、稳定性试验、毒性试验及刺激性试验结果，具体如下：

1.含量测定

本品含盐酸法舒地尔应为标示量的90％-110％。

2.稳定性试验

本品分别经4500LX强光照射10天、60℃、室温空气中放置10天，各项考察指标与0天比较无明显变化，表明本品对光、热均基本稳定。本品经模拟上市包装，在40℃、相对湿度75％条件下放置6个月和长期留样考察18个月，各项考察指标与0天比较无明显变化。

结论：本品经影响因素实验，加速试验及室温考察18个月，结果表明：各项指标无明显变化。本品应置于25℃以下保存，有效期可暂定为二年。本品制备工艺简便，方便可行，质量可控，适合工业化生产。

3.毒性实验

(1)材料

实验药物：0.5％甲基纤维素溶剂，0.3％法舒地尔滴眼液(按实施例1制备)。

实验动物：大耳白兔4只，雌雄各半，体重2-3kg。

(2)方法

将四只家兔随机分为两组，分别用0.5％甲基纤维素溶剂(阴性组)和0.3％法舒地尔滴眼液。具体操作为，拉开家兔眼结膜囊，将相应的药物滴入结膜囊内，与左侧给予生理盐水作为对照，给药后使眼睛被动闭合5-10秒，注意不可压迫。每日给药两次，每次2滴，连续给药7天，记录给药后6、12、48、72、96、120、144、168小时眼部损伤情况，用裂隙灯观察角膜透明度和虹膜纹理改变并评分。7天后，将所有家兔处死，减去全部角膜制做石蜡切片，HE染色，显微镜下观察角膜。

(3)实验结果

法舒地尔滴眼液短期刺激性实验，盐酸法舒地尔各剂量组未发现任何异常；各族角膜均未发现明显病理改变。

在盐酸法舒地尔滴眼液应用后对角膜的毒副作用研究中发现，法舒地尔未引起角膜基质的变化，则未显示出明显的眼表毒性作用。

4.刺激性实验

采用一次滴药法进行兔眼的刺激性试验。用生理盐水作对照，在给药后1、2、4、24、48、72小时，观察角膜、结膜、虹膜及分泌情况。根据刺激性实验积分和判定标准，结果表明盐酸法舒地尔滴眼液对兔眼无刺激性。

本发明的盐酸法舒地尔滴眼剂具有以下医疗用途：

白内障的治疗

病例：

治疗组60例，其中男35例，女25例，均为双眼发病，计患眼120眼，年龄为40岁至50岁为4例，年龄为50岁至60岁为13例，年龄为60岁至70岁为35例，年龄为70岁以上为8例。

用法：

经对数视力表、裂隙灯显微镜等检查(并排除其他眼病影响视力者)确认本病后，治疗组以盐酸法舒地尔滴眼剂给药，每日4～6次，每次1～2滴，1个月为一个疗程，连续3个疗程。

疗效：

(1)疗效标准

显效：视力增进三行以上或晶体混浊部分消退，或视力恢复至正常者；有效：视力增进一至两行，晶体混浊无变化者；无效：视力增进一行以下或无增进甚至减退者，晶体混浊度无变化或加重者。

(2)结果

治疗组中显效24眼，有效80眼，无效16眼，总有效率为86.7％；从治疗组的治疗结果来看，盐酸法舒地尔对治疗白内障有肯定疗效。

因此本发明还提供用本发明的盐酸法舒地尔滴眼剂制备一种治疗白内障的药物。

本发明的盐酸法舒地尔滴眼剂在治疗青光眼和白内障的同时也可以治疗

1.防治SAH后的慢性脑血管痉挛，减轻SAH病人的缺血性脑损伤。

2.改善缺血性中风病人的预后，

3.抑制冠状动脉痉挛，减轻缺血性心肌损伤，改善冠心病患者的心功能。

4.治疗肺动脉高压。

具体实施方式：

实施例1

制备方法

(1)按处方量将硼酸溶于新鲜的煮沸蒸馏水中，搅拌均匀，得甲液。

(2)取氯化钠、硫柳汞、L-赖氨酸、亚硫酸氢钠并溶于适量的蒸馏水中，加热使其溶解，得乙液。

(3)另取适量蒸馏水，加入法舒地尔搅拌使溶解，再加入甲液，搅拌均匀得丙液。

(4)在搅拌下降乙液加入丙液种，搅拌均匀后，过滤，于滤器上加蒸馏水至全量，搅拌均匀。

(5)测定法舒地尔的含量，控制含量为标示量的90％-120％。PH值为7.0-8.0。

(6)检验合格后分装。

实施例2

制备方法

(1)按处方量将硼酸溶于新鲜的煮沸蒸馏水中，搅拌均匀，得甲液。

(2)取氯化钠、L-赖氨酸、亚硫酸氢钠并溶于适量的蒸馏水中，加热使其溶解，得乙液。

(3)另取适量蒸馏水，加入法舒地尔搅拌使溶解，再加入甲液，搅拌均匀得丙液。

(4)在搅拌下降乙液加入丙液种，搅拌均匀后，过滤，于滤器上加蒸馏水至全量，搅拌均匀。

(5)测定法舒地尔的含量，控制含量为标示量的90％-120％。PH值为7.0-8.0。

(6)检验合格后分装。

实施例3

制备方法

(1)按处方量将三氯叔丁醇溶于新鲜的煮沸蒸馏水中，搅拌均匀，得甲液。

(2)取氯化钠、磷酸二氢钠·2H2O、L-赖氨酸、亚硫酸氢钠并溶于适量的蒸馏水中，加热使其溶解，得乙液。

(3)另取适量蒸馏水，加入法舒地尔搅拌使溶解，再加入甲液，搅拌均匀得丙液。

(4)在搅拌下降乙液加入丙液种，搅拌均匀后，过滤，于滤器上加蒸馏水至全量，搅拌均匀。

(5)测定法舒地尔的含量，控制含量为标示量的90％-120％。PH值为7.0-8.0。

(6)检验合格后分装。

实施例4

制备方法

(1)取处方量的聚乙烯醇，用新鲜注射用水(全量的2/4)浸泡过夜。搅拌加热至70保温30分钟，冷却至室温，经滤过，得A液。

(2)取处方量盐酸法舒地尔，加入新鲜注射用水(全量的1/4)，搅拌30分钟，搅拌均匀后，得B液。

(3)用新鲜注射用水10ml分别溶解处方量的硼酸，无水碳酸钠、氯化苯甲烃铵，甘油，L-赖氨酸，焦亚硫酸钠，依次加入A液和B液，再用新鲜注射用水稀释至全量，并搅拌均匀，冷却后测定值7.5及含量98％，再经滤至澄明后共分装用。

Claims (10)

1.一种含盐酸法舒地尔的滴眼剂，是由盐酸法舒地尔和药学上可接受的辅料组成的，所述的药学上可接受的辅料选自增稠剂、PH调整剂、抑菌剂、等渗剂、抗氧剂和降低眼刺激性物质。

2.根据权利要求1所述的滴眼剂，其特征在于，其中所述的增稠剂选自羟丙甲基纤维素、甲基纤维素、玻璃酸钠、聚维酮、卡波姆、聚乙二醇、聚乙烯醇，含量为所述制剂的0.001-1.0％，PH调节剂选自磷酸二氢钠·2H2O和硼酸和硼砂、硼酸和无水碳酸钠，含量为所述制剂的0.01-5％，抑菌剂选自三氯叔丁醇、硫柳汞、对羟基苯甲酸乙酯、苯扎溴铵、氯化苯甲铵，含量为所述制剂的0.001-0.5％，等渗剂选自氯化钠、氯化钾、甘油，硼酸和硼砂，含量为所述制剂的0.2-2.0％，抗氧剂选自亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、维生素E及维生素C，含量为所述制剂的0.05％-5％，降低眼液刺激性物质为L-赖氨酸，含量为所述制剂的0.25-2.0％。

3.根据权利要求2所述的滴眼剂，其特征在于，其中所述的增稠剂为甲基纤维素，含量为所述制剂的0.001-1.0％，PH调整剂为硼酸，含量为所述制剂的0.01-5％，抑菌剂为硫柳汞，含量为0.001-0.5％，等渗剂为氯化钠，含量为所述制剂的0.2-2.0％，抗氧剂为亚硫酸氢钠，含量为所述制剂的0.05％-5％，降低眼刺激性物质为L-赖氨酸，含量为所述制剂的0.25-2.0％。

4.根据权利要求3所述的滴眼剂，其特征在于，其配方组成为：盐酸法舒地尔0.3g，甲基纤维素0.5g，硼酸0.6g，硫柳汞0.2g，氯化钠0.9g，亚硫酸氢钠0.5g，L-赖氨酸0.2g，加蒸馏水定溶至1000ml。

5.制备权利要求1所述的滴眼剂的方法，其特征在于，制备方法具体如下：

步骤1

取上述处方量的增稠剂，用新鲜注射用水浸泡过夜，搅拌加热，保温，冷却至室温，滤过，得A液，备用，

步骤2

取上述处方量的盐酸法舒地尔，加入新鲜注射用水搅拌加热，保温，搅拌均聚后得B液，备用，

步骤3

用新鲜注射用水10ml分别溶解上述处方量的等渗剂，抑菌剂，PH调整剂，抗氧剂，降低眼刺激性物质，一次加入上述A液和B液，再用新鲜注射用水稀释至全量，并搅拌均匀，冷却后测定PH值及含量，经过滤至澄明后，分装。

6.根据权利要求5所述的滴眼剂的制备方法，其特征在于，步骤1中注射用水为全量的2/5-2/4，加热温度60℃-100℃，保温10-60分钟。

7.根据权利要求6所述的滴眼剂的制备方法，其特征在于，步骤2中注射用水为全量的1/5-1/4，搅拌加热温度50℃-90℃，保温10-60分钟。

8.根据权利要求7所述的滴眼剂的制备方法，其特征在于，步骤3中测定的PH为6.8-7.8及含量90-110％。

9.权利要求1的盐酸法舒地尔滴眼剂在制备治疗白内障药物中的应用。

10.权利要求1的盐酸法舒地尔滴眼剂的测定方法，步骤如下：

(1)性状的观察，本品为无色或微黄色的澄明液体，

(2)内容物的鉴别，步骤是：

①取本品适量(约含法舒地尔5mg)，至于小试管中，水浴蒸干后，用氢氧化镍试纸盖住试管口，加热，绿色的氢氧化镍试纸即显黑色或灰色斑点，

②取适量溶液，照紫外-可见光光度法测定，在275nm、312nm、324nm波长处有最大吸收，在250nm、297nm波长处有最小吸收，

(3)PH测定：依法测定PH应符合制备时的要求，

(4)颜色：取本品，与黄色1号标准比色液(中国药典2005版二部附录IX A第一法)比较，不得更深，

(5)有关物质：取本品，加流动相稀释制成每1ml中含有法舒地尔0.3mg的溶液，作为供试溶液；精密量取1ml，置于100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录V D)测定。用十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂，以1.0％三乙胺水溶液(用磷酸调PH值至7.0)-甲醇(15∶15)为流动相；检测波长为275nm。理论塔板数按盐酸法舒地尔峰计算一般不低于6600.盐酸法舒地尔峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。取对照液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质的锋面积不得大于对照品溶液珠峰面积的3/10，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积，

(6)含量测定：取本品，加水制成盐酸法舒地尔的浓度约为30μg/ml的溶液，照紫外-可见分光光度法，在275nm的波长处测定吸光度；另取盐酸法舒地尔对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释成30μg/ml的盐酸法舒地尔溶液，同法测定，计算，即得。