CN102090558A - 一种含益生菌、dha和乳铁蛋白的组合物及其应用 - Google Patents

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张和春
杭晓敏
张旻
陈培青
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Abstract

本发明涉及一种含有益生菌、DHA和乳铁蛋白的组合物及其应用,使用的植物乳杆菌LP-Onlly保藏登记号为CGMCCNO.1258、嗜酸乳杆菌LA-Onlly保藏登记号为CGMCCNO.2106、长双歧杆菌BL88-Onlly保藏登记号为CGMCCNO.2107。该组合物中含有植物乳杆菌LP-Onlly、嗜酸乳杆菌LA-Onlly、长双歧杆菌BL88-Onlly,还含有低聚糖、维生素、DHA、乳铁蛋白等。该组合物可作为食品、保健品或药物,适于长期食用,主要用于调节肠道菌群和增强免疫力。

Description

一种含益生菌、DHA和乳铁蛋白的组合物及其应用
技术领域
本发明涉及一种含有益生菌、DHA和乳铁蛋白的组合物及其应用,该组合物可作为食品或保健品或药物,适于长期食用,主要用于调节肠道菌群和增强免疫力。
背景技术
乳酸菌作为人体有益菌,在食品和医药上的应用非常广泛,通过补充肠道益生菌,恢复和保持微生态平衡,起到调节宿主肠道菌群作用。另外,乳酸菌定植于人体肠道,相当于自然免疫,能激活机体吞噬活性;作为免疫原诱发特异性和非特异性免疫反应,产生特异性抗体和致敏淋巴细胞,调节机体免疫应答,增强机体免疫力,提高抗感染的能力。
低聚糖或称寡糖,是一种高效双歧因子,也是一种膳食纤维,是由2~10个单糖通过糖苷键连接形成直链或支链的低聚糖。低聚糖不能被人体直接吸收利用,所以可直接到达肠道,被肠道内双歧杆菌优先利用,增殖双歧杆菌,抑制肠内腐败菌生长,调节肠道菌群平衡,增强机体免疫力。
与成年人相比,儿童的免疫力低,另外,多数儿童饮食无规律,易造成肠胃功能紊乱,有些食品中的添加剂、化学物质甚至扮演肠道杀手的角色,严重危害儿童肠道健康;另外使用抗生素也会使儿童肠道内有益菌群减少,造成肠道微生态失调;大气环境污染、有害物质的增加、整个生活环境不断遭到破坏,加上孩子的生活节奏加快,学习压力的增大,这都会影响孩子肠道健康,引起免疫力低下、便秘、腹泻等一系列亚健康症状。     因此,针对儿童的肠道微生态和免疫力低的特点,通过体外补充益生菌、体内增殖肠道有益菌的合生元配方,复配以儿童生长发育需要的维生素、DHA、乳铁蛋白,开发出适合儿童并具有调节肠道菌群、增强免疫力功能的组合物,将带来十分重要的经济效益和社会效益。
发明内容
本发明目的是提供一种含益生菌、DHA和乳铁蛋白的组合物及其应用,用于调节人体肠道菌群和增强免疫力。该组合物不含任何人工合成色素、激素、甜味素、鲜味素和防腐剂,不含任何违禁药物,安全无毒。
本发明中涉及的生物材料保藏信息如下: 
一种植物乳杆菌LP-Onlly,该菌株于2004年12月6号在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址:中国北京市海淀区中关村一条13号,中国科学院微生物研究所)保藏,保藏登记号CGMCC NO. 1258。该菌株在本申请人递交的中国专利申请CN200410093213.x中已公开。
一种嗜酸乳杆菌LA11-Onlly,该菌株于2007年7月13号在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址:中国北京市海淀区中关村一条13号,中国科学院微生物研究所)保藏,保藏登记号CGMCC NO. 2106。该菌株在本申请人递交的中国专利申请CN200710044171.4中已公开。
一种长双歧杆菌BL88-Onlly,该菌株于2007年7月13号在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址:中国北京市海淀区中关村一条13号,中国科学院微生物研究所)保藏,保藏登记号CGMCC NO. 2107。该菌株在本申请人递交的中国专利申请CN200710044170.x中已公开。
实现上述发明目的的解决方案是: 
一种含有益生菌、DHA和乳铁蛋白的组合物,其特征在于,所述组合物是由按重量百分比计的1~10%植物乳杆菌LP-Onlly、1~10%嗜酸乳杆菌LA11-Onlly、1~10%长双歧杆菌BL88-Onlly、10~30%低聚糖、1~10%维生素、0.5~2%DHA、0.5~2%乳铁蛋白组成的复合配方,其余为食品辅料。
所述植物乳杆菌LP-Onlly保藏登记号为CGMCC NO.1258,所述嗜酸乳杆菌LA11-Onlly保藏登记号为CGMCC NO.2106,所述长双歧杆菌BL88-Onlly 保藏登记号为CGMCC NO.2107。
所述低聚糖是低聚果糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖和低聚半乳糖中的一种或多种。
所述维生素是维生素C钠、维生素B1、维生素B2、维生素B6中的一种或多种。
所述食品辅料是麦芽糊精、木糖醇、乳糖、果汁粉中的一种或多种。
上述含有益生菌、DHA和乳铁蛋白的组合物在调节肠道菌群和增强免疫力功能食品或保健品或药物方面的应用。
具体实施方式
下面,通过以下实施例对本发明作进一步说明,它将有助于理解本发明,但并不限制本发明的内容。
首先,嗜酸乳杆菌LA11-Onlly生理生化特征说明如下:
本发明的嗜酸乳杆菌LA11-Onlly直接自健康婴儿粪便中分离获得,其形态为杆状,革兰氏染色阳性,不形成芽孢,产生乳酸,兼性厌氧。它能利用半乳糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、甘露醇、纤维二糖、麦芽糖、乳糖、蜜二糖、蔗糖、海藻糖、棉子糖、龙胆二糖,不能利用山梨糖、鼠李糖、D-塔格糖、甲基-D-葡萄糖甙、淀粉、山梨醇、木糖、阿拉伯糖、赤癣醇。   
实施例1   嗜酸乳杆菌LA11-Onlly耐酸性能评价
    将嗜酸乳杆菌LA11-Onlly发酵液以生理盐水洗涤两次,重悬于pH3和pH4的MRS液体培养基中,37℃下分别处理1h、2h,测细胞残存率,对菌株耐酸性能进行评价。
从表1中可见,嗜酸乳杆菌LA11-Onlly耐酸性能较好,pH4、37℃下处理2h,细胞残存率大于95%;pH3、37℃下处理2h,细胞残存率大于50%。
表1 嗜酸乳杆菌LA11-Onlly耐酸性能评价 
Figure 751138DEST_PATH_IMAGE001
实施例2   嗜酸乳杆菌LA11-Onlly耐胆汁盐性能评价
将嗜酸乳杆菌LA11-Onlly发酵液以生理盐水洗涤两次,重悬于含0.5%和1.0%脱氧胆酸钠浓度的MRS液体培养基中,37℃下分别处理12h、24h,测细胞残存率,对菌株耐胆汁盐性能进行评价。
从表2中可见,嗜酸乳杆菌LA11-Onlly耐胆汁盐性能较好,0.5%胆汁盐浓度、37℃下处理24h,细胞残存率大于95%;1.0%胆汁盐浓度、37℃下处理24h,细胞残存率大于50%。
表2 嗜酸乳杆菌LA11-Onlly耐胆汁盐性能评价
Figure 706193DEST_PATH_IMAGE002
实施例3   含植物乳杆菌LP-Onlly、嗜酸乳杆菌LA11-Onlly和长双歧杆菌BL88-Onlly的组合物调节肠道菌群和增强免疫力功能实验
按配方(重量比):植物乳杆菌LP-Onlly 5%、嗜酸乳杆菌LA11-Onlly 3%、长双歧杆菌BL88-Onlly 2%、低聚木糖 10%、维生素C钠 4%、DHA 1%、乳铁蛋白1%、维生素B1 0.05%、维生素B2 0.05%、维生素B6 0.05%、麦芽糊精 28.85%、乳糖 20%、木糖醇 15%、桔子果粉 10%复配成组合物。
上述组合物经上海市预防医学研究院实验结果表明具有调节肠道菌群和增强免疫力功能,以下为实验结果:
1、调节肠道菌群功能动物实验
该组合物人体推荐量为每日2g/30kg。本次实验40只正常小鼠,分成四组,设立低、中、高三个剂量组,分别为0.34、0.67、2g/kg,分别相当于人体推荐量的5、10、30倍,另设蒸馏水对照组。
检测喂养前后小鼠肠道微生物变化情况,应用统计软件SPSS10.0进行t检验及相关分析。从表3~7可见,该组合物能明显增加小鼠肠道内乳杆菌的数量,对双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌和产气荚膜梭菌无明显影响。这表明该组合物具有调节肠道菌群功能。
表3 样品对动物肠杆菌的影响(logCFU/g x±SD)
表4 样品对动物肠球菌的影响(logCFU/g x±SD)
Figure 461626DEST_PATH_IMAGE004
表5 样品对动物双歧杆菌的影响(logCFU/g x±SD)
Figure 478124DEST_PATH_IMAGE005
表6 样品对动物乳杆菌的影响(logCFU/g x±SD)
Figure 528164DEST_PATH_IMAGE006
*:p<0.05与对照组相比  #:p<0.05 与给样前相比
表7 样品对动物产气荚膜梭菌的影响(logCFU/g x±SD)
Figure 549079DEST_PATH_IMAGE007
2、调节肠道菌群功能人群实验
本次试验采用双盲对照法,共选102例受试者,随机分为试食组和对照组(各51例),分别食用该组合物和安慰剂每日1次,每次1条,2克/条。试验期间不改变原来的饮食习惯,正常饮食。
14天后结果表明,试食组双歧杆菌和乳杆菌明显增加,与试食前有显著差异(p<0.05),肠杆菌、产气荚膜梭菌数量减少,拟杆菌、肠球菌无明显变化。这说明该组合物具有调节肠道菌群功能,如下表8所示。
表8 人体肠道菌群检测结果(log CFU/g x±SD)
 *:p<0.05与对照组相比  #:p<0.05 与给样前相比
3、增强免疫力功能动物实验
该组合物人体推荐量为每日2g/30kg。本次实验40只正常小鼠,分成四组,设立低、中、高三个剂量组,分别为0.34、0.67、2g/kg,分别相当于人体推荐量的5、10、30倍,另设蒸馏水对照组。
检测喂养前后小鼠抗体积数、溶血空斑数、胸腺指数、脾指数、ConA值、DTH、NK细胞活性、吞噬%和吞噬指数、变化情况,应用统计软件SPSS10.0进行t检验及相关分析,见表9~15。
表9~15结果经统计学分析可知,样品0.67g/kg和2g/kg剂量组的小鼠抗体积数、ConA值、NK细胞活性、吞噬%和吞噬指数与对照组相比,均有显著性差异;样品1g/kg剂量组的小鼠溶血空斑数和DTH与对照组相比,均有显著性差异;而样品各剂量组的小鼠胸腺指数、脾指数与对照组相比,均无显著性差异。这说明该组合物具有增强免疫力功能。
表9 血清溶血素试验
 
 *:p<0.05,与对照组相比
表10 抗体生成检测试验
Figure 363735DEST_PATH_IMAGE010
 *:p<0.05,与对照组相比
表11 胸腺指数、脾指数
Figure 742501DEST_PATH_IMAGE011
表12 ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验
Figure 245683DEST_PATH_IMAGE012
*:p<0.05与对照组相比
表13 DTH测定结果
Figure 102518DEST_PATH_IMAGE013
*:p<0.05与对照组相比
表14 NK细胞活性测定
Figure 450454DEST_PATH_IMAGE014
*:p<0.05与对照组相比
表15 巨噬细胞吞噬试验
Figure 14770DEST_PATH_IMAGE015
*:p<0.05与对照组相比
4、结论
上述实验结果表明,该组合物具有调节肠道菌群和增强免疫力功能。
另外,根据相同实验表明,当该组合物中植物乳杆菌LP-Onlly用量范围为1~10%,嗜酸乳杆菌LA11-Onlly用量范围为1~10%,长双歧杆菌BL88-Onlly用量范围为1~10%,低聚糖(包括低聚果糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖和低聚半乳糖中的一种或多种)用量范围为10~30%,维生素(包括维生素C钠、维生素B1、B2、B6中的一种或多种)用量范围为1~10%,DHA用量范围为0.5~2%,乳铁蛋白用量范围为0.5~2%,其余为食品辅料(包括麦芽糊精、木糖醇、乳糖、果汁粉中的一种或多种)的情况下,也都具有调节肠道菌群和增强免疫力功能,并可用于制作相应的食品或保健品或药物。

Claims (6)

1.一种含有益生菌、DHA和乳铁蛋白的组合物,其特征在于,所述组合物是由按重量百分比计的1~10%植物乳杆菌LP-Onlly、1~10%嗜酸乳杆菌LA11-Onlly、1~10%长双歧杆菌BL88-Onlly、10~30%低聚糖、1~10%维生素、0.5~2%DHA、0.5~2%乳铁蛋白组成的复合配方,其余为食品辅料。
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述植物乳杆菌LP-Onlly保藏登记号为CGMCC NO.1258,所述嗜酸乳杆菌LA11-Onlly保藏登记号为CGMCC NO.2106,所述长双歧杆菌BL88-Onlly 保藏登记号为CGMCC NO.2107。
3.根据权利要求1或2所述的组合物,其特征在于,所述低聚糖是低聚果糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖和低聚半乳糖中的一种或多种。
4.根据权利要求1或2所述的组合物,其特征在于,所述维生素是维生素C钠、维生素B1、维生素B2、维生素B6中的一种或多种。
5.根据权利要求1或2所述的组合物,其特征在于,所述食品辅料是麦芽糊精、木糖醇、乳糖、果汁粉中的一种或多种。
6.权利要求1~5中任一所述的含有益生菌、DHA和乳铁蛋白的组合物在调节肠道菌群和增强免疫力功能食品或保健品或药物方面的应用。
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