CN102038689B - 葫芦素在制备治疗咳嗽药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，公开葫芦素在制备治疗咳嗽药物上的用途。所述葫芦素包括葫芦素A、B、C、D、E、I、Q、S，双氢葫芦素A、B、C、D、E、I、Q、S和异葫芦素A、B、C、D、E、I、Q、S，各种葫芦素对应的糖甙类物质中的一种或者两种以上。所述的葫芦素可与药学上可接受的载体制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、混悬剂、糖浆剂、口服液、贴剂、软膏剂、气雾剂、栓剂、滴鼻剂或注射剂等，可用于治疗各种原因引起的咳嗽，并具有祛痰作用。健康成人用剂量为0.1mg～5mg/日，最佳为0.3mg～3mg/日；儿童用量酌减。

Description

葫芦素在制备治疗咳嗽药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及已知物质葫芦素在制备治疗咳嗽药物上的医药新用途。

背景技术

葫芦素(Cucurbitacins)属于19-甲基出现在C-9位上的一类四环三萜化合物，主要分布于葫芦科植物中，在十字花科、玄参科、秋海棠科、杜英科、四数木科等高等植物及一些大型真菌中也有发现。中国科学院昆明植物所研究员邱明华带领科技人员在发现的一系列新型葫芦素的基础上，研究了229个几乎所有的葫芦素类化合物，提出了新的结构分类模式，由此前的5类结构类型重新分为12类，得到了国际学术界的认可。目前，我国批准生产的葫芦素又叫葫芦素BE，为中药甜瓜蒂(别名：苦丁香)提取物，主要含葫芦素B、E等成分，现有的提取物中葫芦素B含量为60％以上，其质量标准收载于我国部颁标准中。葫芦素片用于治疗慢性肝炎(参见葫芦素片[J]，药学通报，1986，21(6)：357)，经上海、北京、重庆等地十三家医院临床，其有效率为75.2％，显效率为44.6％。临床上观察到葫芦素片能较全面地改善慢性肝炎常见症状和主要体征，并有明显的降酶(S-GPT)、降浊(TTT、ZnTT)和降胆红质作用，停药后不引起S-GPT反跳，对蛋白倒置和高球蛋白血症也有明显的纠正作用，还能提高慢性肝炎患者的非特异性细胞免疫能力，无明显毒副作用。除此而外，葫芦素片还能用于治疗原发性肝癌，经上海、北京、广西等地六家医院临床观察，统计169例，有效率69％，显效率39％。临床观察表明，该药与5-氟脲嘧啶比较，其改善症状、消除肝痛、缩小瘤体、延长生存期、恢复体力等，均优于对照组，且无一般化疗药物的毒副作用(参见治疗肝炎、肝癌新药葫芦素片[J]，中草药，1987，18(10)：21；葫芦素治疗原发性肝癌50例临床观察[J]，新药与临床，1984，3(2)：21-22；葫芦素的药理与临床应用[J]，中草药，1992，23(11)：605-608)。有作者将葫芦素片与化疗药联合，治疗中晚期肝癌，中位生存期由单一化疗药的6.1±7.12月，提高到12.5±7.54月(参见葫芦素片加化疗药治疗中晚期原发性肝癌的临床疗效观察[J]，癌症，1989，8(6)：434-436)；另有文献报道葫芦素B、E对鼻咽癌细胞具有较强的杀伤作用；还有文献指出，长疗程用药(6周)能明显抑制肝纤维组织增生，防止肝脂肪变性以及肝硬变的形成和发展。现有葫芦素专利多为与剂型相关的专利，如“纳米葫芦素制剂药物及其制备方法，CN01103658.3”、“葫芦素环糊精包合物及其制剂，CN02153647.3”、“葫芦素脂质体组方及其制剂，CN02144633.4”、“葫芦素滴丸及其制备方法，CN200310100943.3”。而葫芦素的新用途专利包括“葫芦素新的医药用途，CN200810190113.7”、“葫芦素的医药新用途，CN200710158890.9”、“葫芦素新的医药用途，CN200710011515.1”、“葫芦素药理新用途，CN200610046738.7”、“葫芦素或葫芦素组合物在制备提高白细胞的药物中的应用，CN200780000160.4”、“葫芦素在治疗癌症方面的新的医药用途，CN200710012267.2”、“23，24-二氢葫芦素B的制备方法及其在治疗肿瘤疾病药物中的用途，CN200710070792.X”，均是与肿瘤治疗有关，未见将其用于咳嗽的治疗。

咳嗽是呼吸系统疾病的主要症状，如咳嗽无痰或痰量很少为干咳，常见于急性咽喉炎、支气管炎的初期；急性骤然发生的咳嗽，多见于支气管内异物；长期慢性咳嗽，多见于慢性支气管炎、肺结核等。咳嗽的不利作用，是可把气管病变扩散到邻近的小支气管，使病情加重。另外，持久剧烈的咳嗽可影响休息，还易消耗体力，并可引起肺泡壁弹性组织的破坏，诱发肺气肿。咳嗽的形成和反复发病，常是许多复杂因素综合作用的结果。治疗咳嗽的药物最好同时具备止咳与祛痰功能。

目前市场上有诸多咳嗽用药，在缓解咳嗽症状的同时，由于其特有成分使患者产生赖药性，葫芦素是一种中药提取物，具有安全低毒、无赖药性的特点，且目前没有报道将其用于治疗咳嗽，可见其在此方面具有优于西药的较好的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供葫芦素在制备治疗咳嗽药物中的应用。

本发明中所述的葫芦素为葫芦科植物、十字花科、玄参科、秋海棠科、杜英科、四数木科植物及一些大型真菌中提取的一类四环三萜化合物，数量达数百种。本发明主要涉及植物粗提物，如瓜蒂素(葫芦科植物甜瓜的瓜蒂提取物，含有葫芦素B(含量约为13％)、D、E，异葫芦素(isocucurbitacin)B，葫芦素B-2-O-β-D喃葡萄糖甙(cucurbitacinB-2-O-β-D-glucopyranoside)等成分

(；植物精提物-)葫芦素BE(市售葫芦素原料，含有葫芦素B(含量约为62％)、异葫芦素B、双氢葫芦素B、葫芦素E、双氢葫芦素E等成分；粗提物与精提物中葫芦素B含量大于10％。另外，本发明还涉及各种单体，所说的葫芦素单体主要包括葫芦素A、葫芦素B、葫芦素C、葫芦素D、葫芦素E、葫芦素I、葫芦素Q、葫芦素S，以及相对应的双氢葫芦素A、双氢葫芦素B、双氢葫芦素C、双氢葫芦素D、双氢葫芦素E、双氢葫芦素I、双氢葫芦素Q、双氢葫芦素S和异葫芦素A、异葫芦素B、异葫芦素C、异葫芦素D、异葫芦素E、异葫芦素I、异葫芦素Q、异葫芦素S；也包括各自对应的糖甙类物质。其中，葫芦素A、葫芦素B、葫芦素C、葫芦素D、葫芦素E、葫芦素I、葫芦素Q、葫芦素S的化学结构式同发明人的另一发明申请“葫芦素新的医药用途，CN200810190113.7”，结构式如下。

葫芦素A                                       葫芦素B

葫芦素C                                       葫芦素D

葫芦素E                                       葫芦素I

葫芦素Q                                         葫芦素S

本发明所述的葫芦素可以以单体形式应用，也可以采用任意两种或者两种以上的成分组合应用。

以葫芦素单体或各种葫芦素单体的组合物作为主要成分的药物可以制备成包括固体制剂、半固体制剂、液体制剂等在内的多种剂型，如片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、混悬剂、糖浆剂、软膏剂、贴剂、口服液、气雾剂、喷雾剂、栓剂、滴鼻剂、注射剂，以及各自对应的缓控释制剂等，也可以制成脂质体、微球、纳米粒、乳剂、胶束等特殊剂型。给药途径包括口服、外用、腔道给药和注射给药。可以单独给药，也可以联合治疗。葫芦素给药剂量按照总葫芦素计算，小鼠以0.001mg/公斤～5mg/公斤体重给药，健康成人用剂量为0.1mg～5mg/日，小儿用量酌减为0.01mg～1mg/日；最佳剂量分别为小鼠0.01mg/公斤～3mg/公斤体重给药，健康成人用剂量为0.3mg～3mg/日，小儿用量酌减为0.05mg～0.5mg/日，分1次～4次给药。

葫芦素适合于各种原因(包括不明原因)导致的咳嗽，如感冒、感染、气候改变、精神因素、癌症、肺结核、急性\慢性气管炎、急性\慢性支气管等等。

本发明具有的优点：

1、可以快速解除咳嗽症状，多数患者在用药一天后，咳嗽症状即明显减轻，甚至治愈。

2、葫芦素适用于各种原因导致的咳嗽，适应症广，特别适用于难治性咳嗽。

3、祛痰效果明显，减轻肺部(包括气管、支气管、细支气管)感染，提高肺功能，协同抗生素等药物治疗严重性肺部感染疾病。

具体实施方式

下面结合实施例，更具体地说明本发明的内容。应当理解，本发明的实施并不局限于下面的实施例，对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本发明保护范围。

在本发明中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。本发明实施例中用的各种单体葫芦素的纯度均大于90％(HPLC面积归一化法测定的纯度大于90％)。

实施例1止咳作用研究

取体重18～22克小鼠，雌雄各半，随机分组，每组10只，各组给药剂量见表1。各小鼠每天按照0.2ml/10g体重灌胃给药1次，连续5天。末次给药后1小时，将小鼠逐一放入钟罩内，均匀地喷入氨水的气雾，持续30秒，把小鼠移至罩外，立即进行观察。记录小鼠的咳嗽潜伏期及3分钟内咳嗽次数(咳嗽时表现为小鼠嘴张大，腹肌强烈收缩)。结果见表1。

表1.止咳作用研究结果

从表1的结果可以看出，不同的葫芦素单体灌胃及注射均可以发挥止咳作用；多组分提取物-瓜蒂素与葫芦素BE也具有优良的止咳作用；联合治疗组优于各自单独用药组。

阳性对照药物磷酸可待因是一种中枢抑制药，具有成瘾性，不适合痰多的患者，尤其是不能用于支气管哮喘的小儿。而葫芦素不仅具有优良的止咳作用，还具有祛痰作用(见实施例2)，更为重要的是，在与磷酸可待因联合用药时，产生了协同作用；另外，葫芦素可用于小儿(见应用例6)，具有更大的治疗应用价值。

实施例2祛痰作用研究

取体重18～22克小鼠120只，雌雄各半分为12组，按照酚红法进行试验。给药途径为腹腔注射，对照组等量生理盐水。45分钟后，各小鼠均腹腔注射5％酚红生理盐水溶液0.25ml。注射30分钟后，处死动物，分离气管，将6号针头插入气管内约0.5毫米，固定之，随用注射器吸取5％碳酸氢钠溶液0.5毫升，通过针头反复冲洗6遍，收集碳酸氢钠冲洗液于5ml容量瓶中，定容至5ml，混匀，过滤，546nm比色测定酚红含量，结果见表2。

表2祛痰作用研究结果

样品	剂量(mg/kg)	动物数(只)	酚红浓度(μg/ml)
				生理盐水	10ml/kg	10	0.22
瓜蒂素	1	10	0.56
				葫芦素BE	1	10	0.63
葫芦素B	0.5	10	0.43
				葫芦素B	1	10	0.61
双氢葫芦素B	1	10	0.59
				异葫芦素B	1	10	0.68
葫芦素E	1	10	0.73
				双氢葫芦素E	1	10	0.66
葫芦素I	1	10	0.55
				葫芦素Q	1	10	0.59

葫芦素B葡萄糖甙

3mg/kg(静脉注射)

10

0.92

由表2的数据可知，与生理盐水组相比，葫芦素类物质均具有显著的祛痰作用。

目前用于治疗咳嗽的药物主要有两类，一类是镇咳药，另外一类是祛痰药。咳嗽分为无痰干咳与有痰湿咳。若由感冒、免疫力下降、天气变化和抽烟过多等原因引起的无痰干咳，可以选用中枢性止咳药，如可待因，虽然有立竿见影的效果，但具有成瘾性。而有痰湿咳患者需用祛痰药，如氯化铵、桔梗、远志、愈创甘油醚等。多痰患者不能再选择镇咳药，而需选用祛痰止咳药，通过稀释痰液或液化黏痰，使其容易咳出。及时祛痰的目的是使气管、支气管和肺内变性坏死的组织细胞以及分泌过多的黏液清除，使呼吸道畅通。如果对于有痰湿咳患者应用镇咳药，则有可能加重病情，不利于治疗。葫芦素类物质具有祛痰作用，利于咳嗽的治疗。

综合实施例1、实施例2可知，各种葫芦素单体、瓜蒂素(含有葫芦素B、葫芦素D、葫芦素E，异葫芦素B，葫芦素B-2-O-β-D-吡喃葡萄糖甙(cucurbitacin B-2-O-β-D-glucopyranoside)等成分)、葫芦素BE(含有葫芦素B、异葫芦素B、双氢葫芦素B、葫芦素E、双氢葫芦素E等成分)均同时具备止咳、祛痰功能，适用于无痰干咳与有痰湿咳，具有极大的应用价值。

临床应用例

应用例1

周XX，男，46岁。因为疲劳而引发咳嗽，从2007年2月开始，一直到6月份，咳嗽严重，每天多次咳嗽，每次连续咳嗽10余分钟；晚上平躺咳嗽更为严重，侧卧减轻，甚至整夜咳嗽睡不着觉。采用过各种治疗，如盐酸氨溴索，剂量由每天3次，每次10mg，持续增加至每天3次，每次100mg，甚至高达每次300mg，均无效果；也进行抗生素治疗，无效；服用过川贝琵芭膏、梨糖膏、甘草片、艾叶油软胶囊、桉柠蒎肠溶软胶囊、愈创甘油醚片与吉诺通等均无效。2007年6月开始，在发明人建议下改服葫芦素BE乳剂(配制方法、工艺详见CN 200710011513.2)，每次0.2mg(总葫芦素0.2mg，其中葫芦素B0.12mg)，每日2次，共服用3天，彻底治愈。

应用例2

李XX，女，38岁。支气管哮喘5年，平时每天用平喘粉雾剂控制哮喘，但时常咳嗽，各种药物治疗咳嗽，有一定效果，咳嗽严重时，无效果。2009年3月11日外因导致严重咳嗽，发明人建议下服用市售葫芦素片剂(0.1mg/片)，每次1片，每天3次，共服用2天，解除咳嗽症状，至2009年8月31号，未发生咳嗽。

应用例3

曹XX，男，55岁，吸烟36年。遇到外部刺激因素，急咳数分钟，气管中痰不易咳出，各种药物对症治疗，效果一般，严重时，需要服用可待因片剂止咳。服用葫芦素软胶囊(制备方法见CN 200710011513.2)，每晚一粒(含总葫芦素0.3mg，其中葫芦素B0.18mg)，每日1次，共服用26天(严重时可以同服“吉诺通”，一日3次，每次2粒)，基本解除咳嗽症状，气管中痰很轻易咳出。

应用例4

李XX，女，33岁，慢性咽炎7年。遇到外部刺激因素而不断咳嗽(每次咳嗽时间长短不一)，尝试过各种药物治疗，虽有一定效果，但仍需持续吃药，否则易复发。发明人建议其服用葫芦素片(含总葫芦素0.1mg，其中葫芦素B含量为0.06mg)，每天3次，每次一片，服用5天后，完全解除咳嗽症状。随后改为每天1次，每次一片，至今2年，未再复发。

应用例5

李XX，女，47岁，因护理家人而劳累，引发肺部感染，感冒、咳嗽。在常规治疗(感冒咳嗽冲剂、头孢克肟胶囊)5天后，未见好转，特别是晚间平躺后，咳嗽更加剧烈。建议其在原有治疗的基础上服用葫芦素乳剂(自制，每支含总葫芦素0.3mg，其中葫芦素B含量为0.18mg)，每晚睡前一支。结果在第一次服用(睡前3小时)后，睡时的咳嗽大大减轻。第二天继续服用一支，睡时基本不咳

应用例6

张XX，男，11岁，感冒引发肺部感染，导致咳嗽。常规治疗(双黄连口服液，罗红霉素，中间改服阿奇霉素)，咳嗽未见好转，建议其在常规治疗基础上加服葫芦素乳剂(自制，每支含总葫芦素0.2mg/2mL，其中葫芦素B含量为0.12mg)，一天两次，一次一支。结果服用一天后，咳嗽大大减轻；服用二天后，已经基本不咳；服用第三天，咳嗽痊愈。

应用例7

何先生与王女士，2006年5月分别诊断为肺癌和肝转移肺癌，咳嗽严重，且痰中带血，属于晚期，医院建议患者回家治疗、休息，未给予药物。发明人建议其服用葫芦素B口服液(含葫芦素B0.05mg/mL，葫芦素B纯度大于98％)，每天2次，每次10mL，服用2天后，咳嗽症状减轻，7天后痰中基本无血。两患者均连续服用超过9个月，服药期间，基本未再发生咳嗽与痰中带血现象。

应用例8

宋XX，男，41岁，咳嗽数月，诊断为肺结核引起的咳嗽。发明人建议其服用葫芦素B口服液(含葫芦素B0.05mg/mL，葫芦素B纯度大于98％)，每天1次，每次10mL，连续服用5天后基本解除咳嗽症状。

应用例9

江XX，女，53岁，因劳累、休息不好，及天气变化而引发咳嗽，诊断为急性气管炎。在常规治疗基础上，发明人建议其服用葫芦素B口服液(含葫芦素B0.05mg/mL，葫芦素B纯度大于98％)，每天1次，每次10mL，连续服用3天后基本解除咳嗽症状。

应用例10

徐XX，女，2岁，因天气变化而感冒引发咳嗽。在常规治疗基础上，发明人建议其服用葫芦素B糖浆剂(含葫芦素B0.1mg/mL，葫芦素B纯度大于98％)，每天1次，每次0.5mL(10滴)，连续服用3天后基本解除咳嗽症状。

应用例11

陈XX，女，32岁，教师，因连续讲课而引发急性咽炎，咳嗽频繁。发明人建议其不进行任何其他治疗，仅服用葫芦素B糖浆剂(含葫芦素B0.1mg/mL，葫芦素B纯度大于98％)，每天1次，每次3mL，睡前服用，连续服用2次后解除咳嗽症状。

应用例12

张XX，男，76岁，37年吸烟史，肺癌切除2/3肺部，同时进行化疗半年，并泡服冬虫夏草，虽有好转，但时常咳嗽，且痰不易咳出。发明人建议其服用葫芦素E胶囊(含葫芦素E  0.5mg/粒，葫芦素E纯度大于90％)，每天2次，每次1粒，服用5天后，咳嗽症状减轻，10天后基本痊愈。现患者已经均连续服用3年，精神状态极好，未再发生严重咳嗽与痰中带血现象。

尽管发明人已经对本发明的技术方案做了较为详细的阐述和列举，应当理解，对于本领域一个熟练的技术人员来说，对上述实施例作出修改和/或变通或者采用等同的替代方案是显然的，都不能脱离本发明精神的实质，本发明中出现的术语用于对本发明技术方案的阐述和理解，并不能构成对本发明的限制。

Claims (4)

1.葫芦素在制备治疗咳嗽药物中的应用，其特征在于，所述葫芦素为葫芦科植物、十字花科、玄参科、秋海棠科、杜英科、四数木科植物及大型真菌中提取的一类四环三萜化合物，选自葫芦素A、B、C、D、E、I、Q、BE， 双氢葫芦素 B、E，异葫芦素B或所述葫芦素对应的糖甙类物质中的一种或者两种以上。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述葫芦素为葫芦素BE，其中葫芦素B含量大于10%。

3.如权利要求1-2任一所述的应用，其特征在于，所述治疗咳嗽药物为葫芦素与药学上可接受的载体制成的片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、混悬剂、糖浆剂、口服液、贴剂、软膏剂、气雾剂、栓剂、滴鼻剂或注射剂，及其相应的缓控释剂。

4.如权利要求1-2任一所述的应用，其特征在于，所述治疗咳嗽药物为葫芦素与药学上可接受的载体制成的包合物、脂质体、微球、纳米粒或乳剂。