CN102008003A

CN102008003A - Md昆虫活性蛋白中间体的提取方法

Info

Publication number: CN102008003A
Application number: CN 201010586614
Authority: CN
Inventors: 张昌郴; 陆源
Original assignee: 韦秀凤
Priority date: 2010-12-14
Filing date: 2010-12-14
Publication date: 2011-04-13

Abstract

本发明公开了一种MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，包括以下步骤：MD幼虫洗净甩干；MD幼虫经40℃鼓风吹干后吹干物粉碎；充分脱脂；加碱1-1.5％加水恒温水解；二次脱盐；浸提脱盐后的沉淀物冷冻干燥。本发明由于采用了上述技术方案，透析除盐很复杂，生产成本高，改为二次脱盐，大大降低了工艺操作难度，大大降低了生产成本；二次脱盐要求水解液沉淀，所以不需要使用AgNO₃检测，保护了工人身体健康；原物质洗净甩干后用40℃鼓风吹干工序相比中科院动物研究所稀碱法的煮沸15分钟，冷冻干燥，可以节约相当的能源和减少设备投资，减少人工使用，生产成本大大降低。

Description

MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法

技术领域

本发明涉及一种MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法。

背景技术

昆虫活性蛋白是植物蛋白、动物蛋白之后的第三代蛋白。它不仅具有植物蛋白、动物蛋白的增加人体氮源、补充营养的作用，更具有植物蛋白、动物蛋白所缺乏的神奇物质和多种活性，有着很强的对人体的细胞、器官、组织的特殊的，特别的吸收、利用、转化的功能和作用，以及对人体细胞的修复、人体病毒、致病菌的抑制、灭杀的功能。

世界生物学界、营养学界一致公认：MD昆虫活性蛋白各个方面的功能、作用的优势，居所有昆虫活性蛋白之首。也就是说，MD昆虫活性蛋白是最好的蛋白，而它的生产成本是所有昆虫活性蛋白(生产成本)最低的。MD昆虫是家蝇Musca domestica的简称，取拉丁学名中的属名和种名的第一个字母。

MD昆虫活性蛋白是一种“优质蛋白”，富含高蛋白、低脂肪、低胆固醇，营养结构合理，肉质纤维少，又易于吸收，明显优于植物蛋白和肉质蛋白(动物蛋白)。现在市场上的确有许多种蛋白粉在销售，但都不外乎植物蛋白和动物蛋白，昆虫活性蛋白不同于市场上的其他蛋白粉，它是第三代昆虫活性抗菌蛋白。植物蛋白是不完全蛋白，不能满足人体对8种必需氨基酸的需求，一般缺少1-3种，易使人发胖，不能长期单独食用，动物蛋白是完全蛋白，但是饱和脂肪酸和胆固醇过多，经常服用易诱发心脑血管疾病和增加肝、肾的负担。昆虫蛋白不同于植物蛋白和动物蛋白，不仅营养全面、均衡，低胆固醇、低脂肪酸，更独有几丁质、抗菌肽、防御素、外源性凝集素等六大生命要素，被誉为“人体免疫王”。

MD昆虫蛋白有多种提取方法，绝大多数处于实验室阶段，其中最为先进的工艺技术是中科院动物研究所张爱君、秦启联等人研发的“稀碱法提取MD蛋白”(以下简称“稀碱法”)工艺。他们的“稀碱法”工艺为：(1)原物质(MD幼虫)水煮；(2)粉碎并冷冻干燥；(3)粉碎物用“索氏浸提法”充分脱脂；(4)脱脂物过滤去杂；(5)恒温下用稀碱水浸提；(6)浸提物调PH值，透析除盐，用AgNO₃(硝酸银)检测至透析液无沉淀为止；(7)浸提液冷冻干燥。

但是该方法不允许浸提液中沉淀物存在，即浸出的蛋白完全溶于浸提液中，其工艺大大增加了冷冻干燥的工作量，大大增加了设备投资和人工、电耗等生产成本，不可能用于大批量生产。该方法使用AgNO₃，对工人身体健康和环境的影响大，并且工艺操作难度大，生产成本高。而且现有技术中都没有涉及对工艺中的废水处理步骤。由于MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法中所产生的废水成分复杂，需要特别设置一种废水处理方法对此进行处理。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，不需要使用AgNO₃检测，保护了工人身体健康，且减少了对环境的影响，大大降低了工艺操作难度，降低了生产成本，提高了产品质量和产量。同时对生产过程中所产生的废水提出了一种废水处理步骤，进一步达到绿色环保的效果。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

(1)MD幼虫洗净甩干；

(2)将经过(1)步骤的MD幼虫经40℃鼓风吹干；

(3)将经过(2)步骤的MD幼虫吹干物粉碎；

(4)使用有机溶剂对经过(3)步骤的粉碎物通过索氏浸提法进行脱脂；

(5)将(4)步骤中生成的脱脂物加水匀浆；

(6)将(5)步骤中生成的匀浆液过滤去表皮物质，按体积百分比1-1.5％加碱水解，并加热至75-85℃，恒温1.5小时-2小时；

(7)将经过(6)步骤的产物用酸中和水解液，调整水解液PH值到7-8，水解液沉淀；

(8)将(7)步骤中产生的沉淀物用离心机脱盐；

(9)将(8)步骤中生成的脱盐产物加清水洗涤二次脱盐；

(10)将(9)步骤中生成的二次脱盐产物加水匀浆；

(11)将(10)步骤中生成的匀浆液沉淀排水；

(12)将(11)步骤中生成的沉淀物利用小分子肽分离技术将难溶蛋白分离出来。MD昆虫的蛋白组分中，其它的蛋白种类都是优质蛋白，只有难溶蛋白达不到优质标准，在浸提脱盐沉淀的蛋白冷冻干燥前，用小分子肽分离技术将难溶蛋白分离出来，可以使分离难溶蛋白后的MD昆虫活性蛋白中间体的蛋白组分达到百分之百的优质化。

(13)将(12)步骤生成的产物进行冷冻干燥。这样就能得到高产量的优质MD昆虫活性蛋白中间体成品了。

优选的，所述(4)步骤中所述有机溶剂为甲醇或者乙醚或者石油醚。

优选的，所述(7)步骤中采用的酸为乙酸或盐酸。在中和过程中需要进行监测，使用酸的浓度和总量，以达到中和后的PH值7为标准。

优选的，所述(5)步骤中加水匀浆比例为1∶3，即1份脱脂物用3份水匀浆。加水量过少，达不到超细匀浆的目的。如加水太少，则会对匀浆液沉淀速度有影响，因为匀浆液太浓不易沉淀。

优选的，所述(10)步骤中加水匀浆比例为1∶4，即1份二次脱盐产物用4份水匀浆。二次脱盐产物比重较高，因此需要稍微多加一些水才能保证匀浆更为均匀。

优选的，各步骤中所收集的废水在集水池汇集降温，将集水池中降温后的水通入除渣池除渣后再采用生物吸附氧化法处理，生物吸附氧化法处理后上清水的再转回集水池循环使用，其余出水通入三级处理机房处理，处理后的水汇入清水池储存。这样的废水处理方法将现有技术中的生物吸附氧化法进行改进，更适合本发明所排出的污水处理，提高了出水的质量。

优选的，所述生物吸附氧化法包括A段中相互连接的A段曝气池和中间沉淀池以及B段中相互连接的B段曝气池和B段沉淀池，其中A段曝气池中设置微孔扩散器设备和鼓风曝气装置人工供氧系统，并且投放粉末活性炭。A段曝气池以极高负荷运行，活性污泥具有一定的吸附能力。投放粉末活性炭，加大对进水有机物的吸附和对进水脱色及微生物对活性炭吸附的有机物降解，并使活性炭稳定嵌入活性污泥中起到改善活性污泥沉淀性和抑制污泥膨胀的作用。

优选的，在所述集水池中将各步骤中所收集的废水用螺旋桨打水降温至50-55℃，再和生物吸附氧化法处理后循环回的上清水混合降温至20-30℃。这样的技术方案利用循环水降温，降温效果好而且还节能环保。

优选的，包括向所述除渣池中投入化学絮凝剂，经化学反应后产生絮凝体，絮凝体下沉吸附除渣池中的悬浮物和胶状颗粒。这样能有效除去除渣池中的悬浮物和胶状颗粒。

优选的，所述三级处理机房中包括混凝设备、过滤设备和离子交换设备。三级处理机房作为生物吸附氧化法的一个补充，能根据实际需要对生物吸附氧化法所排出的水进一步处理，以达到不同的需求。

本发明由于采用了上述技术方案，简化了工艺，降低了生产成本，尤其是避免了加工过程中对MD昆虫活性蛋白中间体的成分被破坏。改为二次脱盐，大大降低了工艺操作难度，降低了生产成本；二次脱盐要求水解液沉淀，所以不需要使用AgNO₃检测，保护了工人身体健康，避免了二次污染；原物质洗净甩干后用40℃鼓风吹干工序相比中科院动物研究所稀碱法的煮沸15分钟，冷冻干燥，可以节约相当的能源和减少设备投资，减少人工使用，生产成本大大降低。尤其重要的是避免高温加热时发生的美拉德反应，避免产品的成分发生变化。

附图说明

图1为本发明一种MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法的废水处理步骤流程图。

具体实施方式

本发明一种MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，包括以下步骤：

(1)MD幼虫洗净甩干；该步骤简单清洁MD幼虫，有利于后续步骤，并且保证了产品的品质。

(2)将经过(1)步骤的MD幼虫经40℃鼓风吹干；40℃鼓风吹干和现有技术中的煮沸加热技术相比，能确保不会发生美拉德反应。美拉德反应(Maillard反应)，是一种广泛分布于食品工业中的非酶褐变反应。它指的是原料中的还原糖(碳水化合物)与氨基酸/蛋白质在常温或加热时发生的一系列复杂的反应，其结果是生成了棕黑色的大分子物质类黑精或称拟黑素。除产生类黑精外，反应过程中还会产生成百上千个有不同气味的中间体分子，包括还原酮、醛和杂环化合物，这些物质会导致MD昆虫活性蛋白中间体发生质变，因此需要避免美拉德反应的产生。

(3)将经过(2)步骤的MD幼虫吹干物粉碎；

(4)使用有机溶剂对经过(3)步骤的粉碎物通过索氏浸提法进行脱脂；MD昆虫中含有较多的脂肪，假定不对MD昆虫粉碎物进行充分脱脂，则蛋白的分离(得率)相当低，蛋白的质量很不理想。索氏浸提法是一种以德国化学家名字命名的、用新鲜溶剂连续回流、浸提、渗滤、萃取固体样品的方法。多用于概略分析中粗脂肪测定。将样品置于滤纸筒中，以从下面烧瓶煮沸、冷凝的新鲜溶剂不断浸提、渗滤、萃取，当积存的溶剂超过一定高度时，即可通过虹吸作用、连同溶于其中的浸出物一道回流到烧瓶中，烧瓶不断加热，溶剂重新煮沸、冷凝、落到样品上，浸出物则留存、积累在烧瓶中。整个过程连续、自动、反复进行。采取“索氏浸提法”，使用有机溶剂(如甲醇、乙醚、石油醚)通过索氏浸提，蛋白中间体的成品中的脂肪含量不大于2％，达到国家食品食用标准；同时，所使用的有机轻溶剂选择能被微生物分解氧化的剂型。“索氏浸提法”是为了规模化生产方便。

(5)将(4)步骤中生成的脱脂物加水匀浆；加水匀浆比例为1∶3，即1份脱脂物用3份水匀浆。

(6)将(5)步骤中生成的匀浆液过滤去表皮物质，按体积百分比1-1.5％加碱水解，加碱1-1.5％加水恒温水解：MD昆虫蛋白组分包括：清蛋白、醇溶蛋白、碱溶蛋白、球蛋白、小分子蛋白和难溶蛋白，上述MD昆虫蛋白组分都能在稀碱热水中分解；

加热至75-85℃，恒温1.5小时-2小时；在充分脱脂后，液料比、浸提温度、浸提时间、碱体积百分含量等4个指标是提取的重要条件。对上述4个指标进行反复实验与比较，最后以优选法确定了4个最佳区域条件分别为：液料比：20-25ml/g，浸提温度：75℃-85℃，浸提时间1.5h-2h，碱体积百分含量1％-1.5％。其中，所有反应参数都是采取梯度水平处理，单因素试验，正交试验和各因素对蛋白中间体提取的差异分析，所优选出来的最佳区域条件。只有在这些技术参数上进行优化才能确保最终产品的生产效率和产品的品质。

(8)将(7)步骤中产生的沉淀物用离心机脱盐；将沉淀物与温水倾入大容量离心机，调节好转速及离心时间。通常采用转速6000r/min-7000r/min，离心时间15分钟。

(9)将(8)步骤中生成的脱盐产物加清水洗涤二次脱盐；一次脱盐工艺耗时费力、成本高，而且需对分解液(浸提液)使用硝酸银检测，本发明改一次脱盐为二次离心脱盐，根据盐成分与蛋白质的比重不同的原理，以离心方式将盐分从分解液(浸提液)中分离出来，随浸提热水进入废水处理工序，二次脱盐耗时省，成本适中，尤其是不需使用硝酸银检测，对生产工人和环境有利。

(10)将(9)步骤中生成的二次脱盐产物加水匀浆；加水匀浆比例为1∶4，即1份二次脱盐产物用4份水匀浆。

(11)将(10)步骤中生成的匀浆液沉淀排水；

(12)将(11)步骤中生成的沉淀物用MD昆虫小分子生物活性肽分离技术清除难溶蛋白；MD昆虫的蛋白组分中，其它的蛋白种类都是优质蛋白，只有难溶蛋白达不到优质标准，在浸提脱盐沉淀的蛋白冷冻干燥前，用小分子肽分离技术将难溶蛋白分离出来，可以使分离难溶蛋白后的MD昆虫活性蛋白中间体的蛋白组分达到百分之百的优质化。《中国生化药物杂志》2005年26卷4期中《小分子肽分离方法研究进展》中提出过几种小分子生物活性肽的提取方法，可以直接采用。

(13)将(12)步骤中生成的沉淀物冷冻干燥。浸提脱盐后的沉淀物冷冻干燥：MD昆虫活性蛋白中间体产品优质与否，是与蛋白活性保持程度密切相关，冷冻干燥能保证产品的活性不被破坏，色、味、形不起变化，不结块，易溶于水。

其中，所述(4)步骤中所述有机溶剂为甲醇或者乙醚或者石油醚。

所述(7)步骤中采用的酸为乙酸或盐酸。其浓度和加入量需要进行监控，使得最终添加后达到中和，(pH值7)。

本发明与现有技术中，即中科院的“稀碱法”相比，中科院的“稀碱法”不允许浸提液中沉淀物存在，即浸出的蛋白完全溶于浸提液中，其工艺大大增加了冷冻干燥的工作量，大大增加了设备投资和人工、电耗等生产成本，不可能低成本地用于大批量生产，增加了生产企业的生产压力，提高了消费者的负担。而本发明将碱水与蛋白质分离，将碱水排出，留下沉淀的蛋白质冷冻干燥，其设备投资少，生产成本低。中科院的“稀碱法”在MD昆虫原物质煮沸、粉碎后冷冻干燥，所耗成本同样很大，不可能低成本地应用于大批量生产，而本发明将MD昆虫原特质清洗甩干，用40℃的鼓风机吹干，避免美拉德反应发生，既能保持MD干物质的活性不被破坏，又大大降低生产成本和减少设备投资。

尤其关键的是，本发明完全摆脱了中科院的“稀碱法”中的思维定势，没有贸然学习其从浸提液中提取的方案，而是转变思路，改为通过对沉淀物进行提取，不仅不必考虑浸提液的溶解率的问题，保证了产量，更能确保最终产品的质量。最后所制成的MD昆虫活性蛋白中间体可以直接作为一种昆虫蛋白质粉产品进行推广，也可以作为下一个产品的中间体，供企业进行二次加工。

我们还观察到，在MD昆虫蛋白中间体生产过程中，会在以下工序产生废水：a.MD原物质洗净甩干(产生无机废水)，b.40℃鼓风吹干(产生无机废水)c.索氏脱脂(产生含脂肪的有机废水)d.二次脱盐(产生含1-1.5％碱的高温水--无机废水和含脂肪蛋白质虫干粉状表皮等有机物废水，形成有机无机混合废水)e.匀浆液沉淀排水(产生有机废水)f.冷冻干燥(产生有机废水和无机废水)h.分离难溶蛋白(产生有机无机废水)。而为了保证整个工艺的绿色环保，我们在工艺中需要考虑废水处理步骤，现有技术《环境持染与防治》杂志1993年8月的《生物吸附氧化法(AB法)的理论和实践》一文中提供了一种非常好的污水处理方法，较为适合本发明的废水处理，但是实际上本发明工艺过程中所产生的废水种类较多，不能简单套用现有技术中的生物吸附氧化法(AB法)，因此，如图1所示，本发明设计了一个新的废水处理步骤，包括各步骤中所收集的废水在集水池汇集降温，将集水池中降温后的水通入除渣池除渣后再采用生物吸附氧化法处理，生物吸附氧化法处理后上清水的再转回集水池循环使用，其余出水通入三级处理机房处理，处理后的水汇入清水池储存。所述三级处理机房中包括混凝设备、过滤设备和离子交换设备。

所述生物吸附氧化法包括A段中相互连接的A段曝气池和中间沉淀池以及B段中相互连接的B段曝气池和B段沉淀池，其中A段曝气池中设置微孔扩散器设备和鼓风曝气装置人工供氧系统，并且投放粉末活性炭。A段曝气池以极高负荷运行，活性污泥具有一定的吸附能力。投放粉末活性炭，加大对进水有机物的吸附和对进水脱色及微生物对活性炭吸附的有机物降解，并使活性炭稳定嵌入活性污泥中起到改善活性污泥沉淀性和抑制污泥膨胀的作用。

其中，在所述集水池中将各步骤中所收集的废水用螺旋桨打水降温至50-55℃，再和生物吸附氧化法处理后循环回的上清水混合降温至20-30℃。向所述除渣池中投入化学絮凝剂，经化学反应后产生絮凝体，絮凝体下沉吸附除渣池中的悬浮物和胶状颗粒。

A段曝气池中设置微孔扩散器设备，降低电耗节约成本，设置鼓风曝气装置人工供氧系统；A段曝气池以极高负荷运行，活性污泥具有一定的吸附能力。投放粉末活性炭，加大对进水有机物的吸附和对进水脱色及微生物对活性炭吸附的有机物降解，并使活性炭稳定嵌入活性污泥中起到改善活性污泥沉淀性和抑制污泥膨胀的作用。进水在A段曝气池处理后，进入中间沉淀池沉淀，A段上清水进入B段曝气池，25％左右的污泥回流到集水池，强烈吸附和氧化有机物。进水在A段曝气池和中间沉淀池处理后，被吸附部分有机物，进入B段曝气池以低负荷运行，主要发挥微生物的生物降解作用，经B段曝气池处理后的出水达到较好水平。出水在B段曝气池处理后，进入B段沉淀池。25％左右的活性污泥回流到B段曝气池，强烈吸附和氧化有机物其余绝大部分剩余污泥排放。出水可以排放和灌溉农田也可用于集水池降温、降低碱度。其余的进入入三级处理机房处理，入三级处理机房处理设置混凝、过滤、离子交换等设备，使经过A段曝气和B段曝气的进水达到自然水标准。最后存储在清水池中。

和现有技术相比，常规的碱性无机废水处理，都采用乙酸稀释中和的方式，成本比较高，对环境也有一定的影响。本发明的处理工艺是：在集水池汇集上述各道工序废水，在开始投产后的集水池的第一批混合水中，加入自来水，使混合水降温到20-35℃，含盐量降至0.7％左右，然后进行生物吸附氧化处理与化学辅助处理的工艺，经曝气、沉淀处理后，含盐量0.3％的上清水可循环进入集水池，使第二批集水池内的混合废水水温降至20-35℃，含盐量0.7％左右，然后再进行生物吸附氧化处理与化学辅助处理工艺，上清水再加入到集水池的第三批碱性混合水中，进行下一轮的生物吸附氧化处理和化学辅助处理工艺，周而复始。因为曝气池、沉淀池产生的上清水较多，超过集水池需要。因此，曝气池和沉淀池处理产生的部分上清水可进入混凝、过滤、离子交换处理，产生的上清水可供生产车间使用，含盐量为0.1％，这样就完成了对碱性(含盐1-1.5％)的二次脱盐废水和高温及非高温废水的处理，处理过程中不使用乙酸。

在MD昆虫活性蛋白中间体废水的生化处理中，废水中的有机物经微生物的氧化、分解，其中的一部分氮、磷、硫经同化作用合成为微生物的细胞组成部分，并以剩余污泥(活性污泥是由细菌、微型动物为主的微生物与悬浮物质，胶体物质混杂在一起，形成的具有很强的吸附分解有机物能力和良好的沉淀性能的絮体颗粒；剩余污泥是指曝气池中活性污泥的量超过一定浓度时应及时排放的那部分污泥)方式排出。剩余的氮、磷、硫以NH₃(或NO^- ₂、NO^- ₃)、PO^3- ₄、SO^2- ₄的形式随出水排出。经除渣、曝气池和沉淀处理后，磷、硫分别去除60％以上，氮分解去除30％左右。

为了把随水排到曝气池的剩余的化合态氮从废水中除去，途径是使还原态的氨经硝化作用氧化成NO^- ₃，然后通过反硝化作用，使NO^- ₃转化为对人体无害的N₂，而逸入大气中。含氮有机物经微生物解释放出氨的过程，即为氨化过程，也称为氨化作用。含氮有机物的蛋白质的氨化过程，首先是在微生物产生的蛋白酶作用下进行水解，生成多肽和二肽，然后由肽酶进一步水解成氨基酸、氨基酸被微生物吸收，在微生物体内以脱氮和脱羧二种基本方式继续被降解。在曝气池(微生物氧化有机物，需要耗用大量的氧，须向池内曝气充氧，称为曝气)内，好氧条件下和好氧或兼性条件下，许多细菌具有很强的氨化能力、分解蛋白质、释放出氨。除渣池内未处理完的干物质粉碎后的表皮，脂肪等有机物，也是用这个方法分解。

硝化作用是指NH₃氧化成NO^- ₂，然后再氧化成NO^- ₃的过程，硝化作用的程度是生物脱氮的关键。硝化作用由两类细菌参与：亚硝化菌或亚硝化单胞菌，能将NH₃氧化成NO^- ₂；硝化杆菌将NO^- ₂氧化成NO^- ₃，两类细胞菌都能利用氧化过程释放的能量，使CO₂合成为细胞有机物质，属于化能自养细菌。在水处理工程上，为了达到硝化目的，一般都采用低负荷运行，延长曝气的时间。微生物在曝气池中的硝化反应，生成强酸会使水中酸性增强，据测定，每氧化1克NH₃-N，耗去了7.14克碱度，硝化反应降低了废水中的碱度。

反硝化作用是指硝酸盐和亚硝酸盐被还原为气态氮和氧化亚氮的过程，参与这一过程的细菌是反硝化菌，能利用各种各样的有机基质作为反硝化过程中的电子供体(碳源)，其中包括碳水化合物有机酸类、醇类、基酸盐类，烷烃类及基衍物，这些化合物在废水处理中显得十分重要，它们是废水的主要组分，因此反硝化不仅被认为是一种“非污染式”脱氮手段(因NO^- ₃转化为对人类无害的N₂)，而且也是一种氧化分解废水中有机物的好方法。微生物在曝气过程中的反硝化反应，会产生碱度，据测定，NO^- ₃-N，被还原成N₂可产生3.57克碱度，可使硝化反应所耗去的碱度有所弥补，但耗去的碱度大于还原产生的碱度。因此，废水中的碱度有所降低。与此同时，废水自身净化又耗去部分碱度，由此，在硝化反应和废水自净两方面作用下，处理后的上清水碱度大大降低，达到含盐量0.3％左右的程度。

本发明还采用向废水中投加絮凝剂和饱和粉末活性炭，使之与水中的污染物起化学反应，生成不溶于水或难溶于水的化合物，析出沉淀，使废水得到净化。利用化学反应的作用，通过改变污染物的性质，有利于污染物分离和除去。

混凝、过滤、离子交换处理能够深度去除水中残留微生物、细小悬浮物、残留有机物(大多为生物降解的有机物)，发黑物质和溶解性盐类。混凝、过滤、离子交换处理后的出水进入清水池，由清水池水泵输送到MD昆虫活性蛋白中间体生产车间，作为生产循环用水，节约水资源。

本发明在生产过程中产生的是多元化的废水，不能用简单的方法进行彻底清理。因此本发明将现有技术中的生物吸附氧化法(AB法)进行改进，使得其更对本发明的产生的废水更有针对性的清理，而且清理出的水质可以根据实际需要运用到不同场合，非常符合环保的要求。

Claims

1.MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)MD幼虫洗净甩干；

(2)将经过(1)步骤的MD幼虫经40℃鼓风吹干；

(3)将经过(2)步骤的MD幼虫吹干物粉碎；

(5)将(4)步骤中生成的脱脂物加水匀浆；

(6)将(5)步骤中生成的匀浆液过滤去表皮物质，按体积百分比1-1.5％加碱水解，液料比：20-25ml/g，并加热至75-85℃，恒温1.5小时-2小时；

(8)将(7)步骤中产生的沉淀物用离心机脱盐；

(9)将(8)步骤中生成的脱盐产物加清水洗涤二次脱盐；

(10)将(9)步骤中生成的二次脱盐产物加水匀浆；

(11)将(10)步骤中生成的匀浆液沉淀排水；

(12)将(11)步骤中生成的沉淀物用MD昆虫小分子生物活性肽分离技术清除难溶蛋白；

(13)将(12)步骤生成的产物进行冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，其特征在于：所述(4)步骤中所述有机溶剂为甲醇或者乙醚或者石油醚。

3.根据权利要求1所述MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，其特征在于：所述(7)步骤中采用的酸为乙酸或盐酸。

4.根据权利要求1所述MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，其特征在于：所述(5)步骤中加水匀浆比例为1∶3，即1份脱脂物用3份水匀浆。

5.根据权利要求1所述MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，其特征在于：所述(10)步骤中加水匀浆比例为1∶4，即1份二次脱盐产物用4份水匀浆。

6.根据权利要求1-5其中任一所述MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，还包括废水处理步骤，所述废水处理步骤为改进型的生物吸附氧化法(AB法)，其特征在于：各步骤中所收集的废水在集水池汇集降温，将集水池中降温后的水通入除渣池除渣，除渣池中的出水再采用生物吸附氧化法处理，生物吸附氧化法处理后的出水中的上清水的再转回集水池循环使用，其余出水通入三级处理机房处理，处理后的水汇入清水池储存。

7.根据权利要求6所述MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，其特征在于：所述生物吸附氧化法包括A段中相互连接的A段曝气池和中间沉淀池以及B段中相互连接的B段曝气池和B段沉淀池，其中A段曝气池中设置微孔扩散器设备和鼓风曝气装置人工供氧系统，并且投放粉末活性炭。

8.根据权利要求6所述MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，其特征在于：在所述集水池中将各步骤中所收集的废水用螺旋桨打水降温至50-55℃，再和生物吸附氧化法处理后循环回的上清水混合降温至20-30℃。

9.根据权利要求6所述MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，其特征在于：包括向所述除渣池中投入化学絮凝剂，经化学反应后产生絮凝体，絮凝体下沉吸附除渣池中的悬浮物和胶状颗粒。

10.根据权利要求6所述MD昆虫活性蛋白中间体的提取方法，其特征在于：所述三级处理机房中包括混凝设备、过滤设备和离子交换设备。