CN101965902A - 一种饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂的生产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂的生产方法，所述饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂是按照以下方法生产的：(1)将枯草芽孢杆菌菌种活化培养；(2)对活化后的枯草芽孢杆菌进行诱变、筛选；(3)将筛选到的枯草芽孢杆菌菌种的扩培养；(4)用扩培后的菌种制备枯草芽孢杆菌菌液；(5)将枯草芽孢杆菌菌液与吸附载体混合，所述吸附载体为玉米酒精糟与玉米芯粉的混合物；(6)将吸附菌液的载体进行气流干燥，得成品，采用本方法可以生产出成本低、质量稳定的枯草芽孢杆菌活菌制剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种活菌制剂的生产方法，尤其是一种饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂的生产方法。
背景技术
枯草芽孢杆菌进入动物体内能够抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等有害细菌，消耗肠道内的氧气，降解大分子物质，有利于肠道厌氧菌，尤其是乳酸菌的生长，同时能够产生蛋白酶、纤维素酶等，有利于动物对食物的消化吸收。现有技术中的枯草芽孢杆菌制剂主要有两种，一种是采用液态发酵喷雾干燥制得的粉剂，一种是采用固态发酵后粉碎制得的粉剂，采用液态发酵喷雾干燥方法生产枯草芽孢杆菌制剂成本较高，不利于在饲料中大规模推广使用；而采用固态发酵方法生产的枯草芽孢杆菌制剂在发酵过程中容易被杂菌感染，影响枯草芽孢杆菌制剂的质量。
发明内容
发明要解决的技术问题：本发明要解决的技术问题是提供一种饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂的生产方法，采用本方法可以生产出成本低、质量稳定的枯草芽孢杆菌活菌制剂。
解决技术问题所采取的技术方案：
一种饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂的生产方法，所述饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂是按照以下方法生产的：
(1)将枯草芽孢杆菌菌种活化培养；
(2)对活化后的枯草芽孢杆菌进行诱变、筛选；
(3)将筛选到的枯草芽孢杆菌菌种的扩培养；
(4)用扩培后的菌种制备枯草芽孢杆菌菌液；
(5)将枯草芽孢杆菌菌液与吸附载体混合，所述吸附载体为玉米酒精糟与玉米芯粉的混合物；
(6)将吸附菌液的载体进行气流干燥，得成品。
作为本发明的改进：玉米酒精糟与玉米芯粉混合的重量比为3∶1。
作为本发明的进一步改进：菌液与载体按6∶4的重量比进行混合。
作为本发明的再进一步改进：进行气流干燥的温度小于等于85摄氏度。
有益效果：由于采用了将枯草芽孢杆菌菌液与吸附载体混合制成活菌制的方法，克服了采用枯草芽孢杆菌固态发酵过程中受到杂菌的感染、液态发酵喷雾干燥成本高的缺点，使制得的活菌制剂质量稳定，产品中的枯草芽孢杆菌95％以孢子形式存在，具有耐高温、耐酸碱、耐挤压和耐温度变化的特点，能够满足各种饲料在制粒加工方面的要求；由于采用了玉米酒精糟与玉米芯粉的混合物作为吸附载体，充分利用了玉米酒精糟的中所含的营养和残余的酵母菌，并且可以抑制其它杂菌繁殖，使本发明的枯草芽孢杆菌活菌制剂更有利于动物生长，同时，玉米芯粉也弥补了单纯的玉米酒精糟吸附能力不足、粘度大、不易干燥处理的缺点，使得本发明的枯草芽孢杆菌活菌制剂含菌量高且成本低；由于对玉米酒精糟与玉米芯粉混合的重量比作了合理的限定，使载体的吸附性、营养价值、易加工性达到最佳状态；由于采用了菌液与载体按6∶4的重量比进行混合的技术特征，使菌液和载体能够达到最佳的吸附状态；由于采用气流干燥的温度小于等于85摄氏度的技术特征，使得活菌制剂中的有效成分不被破坏，采用本发明方法制得的活菌制剂中每克孢芽数大于200亿个，保质期达到1年以上。
具体实施方式
下面对本发明的技术方案作进一步详细说明：
一种饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂的生产方法，所述饲料用活菌制剂是按照以下方法生产的：
(1)将枯草芽孢杆菌菌种活化培养
将冻干枯草芽孢杆菌种(如：CGMCC.NO.0321)接种到肉汤培养液中，37℃培养24小时，然后划线转种于营养平板培养基，37℃培养箱中培养24小时后，观察透明圈情况，选取透明圈内单个菌落进行纯培养，得到纯培养的枯草芽孢杆菌。
(2)枯草芽孢杆菌菌种的诱变、筛选
用前步得到的枯草芽孢杆菌制成菌悬液，将菌悬液放于培养皿中，置于电磁搅拌器上，放在紫外线灯正中下方，先将整个平皿照射1分钟后，打开皿盖，此时开始记时并启动电磁搅拌器，准确计算照射时间，照射1-2分钟。取照射处理后的菌液，涂布后用黑纸包好，置于37℃恒温培养24～48小时，通过观察透明圈的大小来定性判断是否产生中性蛋白酶和产中性蛋白酶的多少，选取最大的透明圈作为出发菌株，进行扩培。一般经过诱变的枯草芽孢杆菌，经过培养后，酶活力可以达到600-1000Unit/ml。
(3)枯草芽孢杆菌菌种的扩培养
将上述筛选到的枯草芽孢杆菌按一定比例接入已配好的牛肉膏蛋白东培养基内放到摇床上进行培养40小时左右，观察成熟即为扩大培养的菌种。
(4)制备枯草芽孢杆菌菌液
将上述扩大培养的菌种接入发酵罐内的液态培养基，培养温度37度，培养压力0.03——0.05帕培养时间40小时，即得枯草芽孢杆菌菌液。
(5)将枯草芽孢杆菌菌液与吸附载体混合
将上述培养好的菌液与事先已经混好的载体充分搅拌混匀，使菌液占60％，载体占40％即得到载体吸附的水分占65％左右的湿料。
(6)将吸附菌液的载体进行气流干燥，得成品
将上述拌好的湿料导进入气流干燥机进行干燥，同时温度控制在85度左右低温干燥，保证菌体不损失条件下烘干，烘干后成品活菌数达到200亿，每克孢子数达到95％以上，可耐受较差的环境，存储期可长达1年以上。
Claims (4)
1.一种饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂的生产方法，其特征是：所述饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂是按照以下方法生产的：
(1)将枯草芽孢杆菌菌种活化培养；
(2)对活化后的枯草芽孢杆菌进行诱变、筛选；
(3)将筛选到的枯草芽孢杆菌菌种的扩培养；
(4)用扩培后的菌种制备枯草芽孢杆菌菌液；
(5)将枯草芽孢杆菌菌液与吸附载体混合，所述吸附载体为玉米酒精糟与玉米芯粉的混合物；
(6)将吸附菌液的载体进行气流干燥，得成品。
2.根据权利要求1所述的一种饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂的生产方法，其特征是：玉米酒精糟与玉米芯粉混合的重量比为3∶1。
3.根据权利要求2所述的一种饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂的生产方法，其特征是：菌液与载体按6∶4的重量比进行混合。
4.根据权利要求1至3任一项所述的一种饲料用枯草芽孢杆菌活菌制剂的生产方法，其特征是：进行气流干燥的温度小于等于85摄氏度。
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