CN101919416B - 中药青葙杀虫活性物质的提取方法及应用 - Google Patents

中药青葙杀虫活性物质的提取方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种中药青葙杀虫活性物质的提取方法及应用,是将青葙全部植物组织经洗净、烘干、冷却、粉碎得到青葙粉末;用甲醇进行提取得到青葙提取液;将青葙提取液减压浓缩至粘稠膏状得到青葙粗提物;将青葙粗提物用甲醇溶解后,与硅藻土混合均匀,挥干溶剂甲醇,得到青葙粗提物-硅藻土混合物;将青葙粗提物-硅藻土混合物经正己烷萃取后再进行乙醚萃取,收集乙醚萃取相并减压浓缩得到青葙杀虫活性物质提取物。本发明工艺简单,通过对青葙进行化学提取,有效地保留中药青葙的杀虫活性物质,所得提取物用于农业害虫防治具有防治效果好、防治成本低、无污染、无残留等特点,具有良好的社会效益和生态效益。

Description

中药青葙杀虫活性物质的提取方法及应用
技术领域
本发明涉及一种植物活性成分的提取方法及应用,特别涉及一种中药青葙杀虫活性物质的提取方法及应用。
背景技术
20世纪50年代开始,大量使用有机合成杀虫剂,对害虫防治起重大作用。然而,长期大量使用化学杀虫剂会带来种种弊端,抗药性的产生、毒性残留以及环境污染等已成为危及人类健康、生态平衡和社会发展的危险因素。与化学杀虫剂相比,植物源杀虫剂对人和动物的毒性低、对生态环境的影响小,具有很大的开发价值和应用前景。从植物中筛选和发现新的杀虫活性物质,进而开发出具有一定作用特点的植物源农药是新农药开发研究的一个重要方面。据《本草纲目》记载,中药植物百部、藜芦、狼毒、苦参等都有很好的杀虫作用。近年来研究较多的杀虫植物印楝、苦皮藤、黄杜鹃、菖蒲、雷公藤等展现出了良好的应用价值,从植物中寻找杀虫活性物质,是开发、研制新型杀虫剂的热点之一。
青葙(Celosia argentea)是苋科(Amaranthcea)一年生草本植物,分布遍及全国,生于田野、路旁和荒地,为旱地常见杂草,也是一种著名的中草药。目前国内外对其研究主要集中在医药方面。青葙具有很强的抗菌消炎作用,对青葙子的研究发现,其种子含有丰富的脂肪油、不饱和脂肪酸和矿物质,已经从青葙子水提液中分离出来的一种酸性多糖Celosian,该物质具有保肝作用,可抑制ALT活性的升高,可能是一种治疗急性肝炎,保护肝细胞的有效物质,另外研究还发现青葙子水提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠具有降血糖作用,青葙子乙醇提取物具有抗糖尿病活性,然而目前对其在农林病虫害防治方面的作用很少研究。
不同植物体内所含有的活性物质存在很大的差异,即便是存在的同一种物质,其含量也有所不同,这就造成了它们在提取方法上会多有不同。对植物活性物质的提取工艺中,提取效能的高低通常与提取溶剂的种类、溶剂的比例、提取时间、提取温度等因素有关。不同的提取溶剂、不同的提取设备以及不同的提取时间等,都会造成所提取的活性物质的种类差异和提取量的差异。
发明内容
本发明的目的是提供一种中药青葙杀虫活性物质的提取方法,所得青葙活性物质提取物用于农业害虫防治具有防治效果好、防治成本低、无污染、无残留的特点,具有良好的社会效益和生态效益。
本发明的另一目的是提供一种青葙杀虫活性物质提取物在农业害虫防治上的应用。
本发明所采用的技术方案:
一种中药青葙杀虫活性物质的提取方法,其具体步骤如下:
1、采集青葙全部植物组织,用清水洗净,置于室内阴干,于45~55℃烘干至恒重后冷却,粉碎得到青葙粉末。所述青葙全部植物组织是指根、茎、叶、花、种子。
2、将青葙粉末与甲醇按体积比为1∶5~10的比例混合,反复提取12小时以上,得到青葙提取液;将青葙提取液进行减压浓缩至提取液变成粘稠膏状,即为青葙粗提物。
3、将青葙粗提物用甲醇溶解后,按青葙粗提物∶硅藻土=1∶3~10的重量比例与硅藻土混合均匀,挥干溶剂甲醇,得到青葙粗提物-硅藻土混合物。
4、将青葙粗提物-硅藻土混合物经正己烷萃取后再进行乙醚萃取,收集乙醚萃取相并减压浓缩至相对密度为0.25~1g/cm3,得到青葙杀虫活性物质提取物。
青葙杀虫活性物质提取物可直接用于植物害虫的防治,或按体积比1∶500~1000的比例加入表面活性剂和蒸馏水,使青葙活性物质提取物溶解,定容后即可作为原药液,然后于4℃低温避光保存。
本发明的另一目的是提供一种青葙杀虫活性物质提取物的应用,该提取物在防治农业害虫药物中的应用。所述农业害虫为红脉穗螟(Tirathaba rufivena Walker)、三药槟榔扁蚜(Astegopteryxxinglongensis Zhang)、螺旋粉虱(Aleurodicus dispersus Russell)、三药槟榔坚蚜(Cerataphis lataniae Boisduval)。
本发明工艺简单,通过对青葙进行化学提取,有效地保留中药青葙的杀虫活性物质,所得青葙杀虫活性物质提取物用于农业害虫防治具有防治效果好、防治成本低、无污染、无残留的特点,具有良好的社会效益和生态效益。
具体实施方式
下面用实施例对本发明作进一步说明。
实施例一
1、中药青葙杀虫活性物质的提取
采集青葙全部植物组织,用清水洗净,置于室内阴干后放入鼓风式烘干箱内45℃,烘干24小时,冷却、粉碎得到青葙粉末;称取青葙粉末2kg置于索氏提取器中,按体积比为1∶8的比例加入有机溶剂甲醇,温度65℃反复提取18小时以上,得到青葙提取液;将青葙提取液移至旋转蒸发仪上,45℃减压浓缩至提取液变成粘稠膏状,即为青葙粗提物;将青葙粗提物用甲醇溶解后,按青葙粗提物∶硅藻土=1∶5的重量比例与硅藻土混合均匀,挥干溶剂甲醇,得到青葙粗提物-硅藻土混合物;将青葙粗提物-硅藻土混合物经正己烷萃取后再进行乙醚萃取,收集乙醚萃取相并减压浓缩至相对密度为0.5g/cm3,得到青葙杀虫活性物质提取物。
2、青葙杀虫活性物质提取物对红脉穗螟生物活性测定
将青葙杀虫活性物质提取物按体积比1∶700的比例加入表面活性剂和蒸馏水得到原药液,将原药液用蒸馏水稀释成有效物质50倍、100倍、200倍、500倍和1000倍,用喷雾法处理红脉穗螟3龄幼虫,置于养虫盒中正常饲养,饲以正常槟榔花穗,并放脱脂棉球保湿,饲养条件为:温度26℃,相对湿度80%。每处理用虫50头,重复3次,药后12小时、24小时、48小时、72小时、100小时检查死亡率,并计算校正死亡率。结果列表如下。
表1中药青葙杀虫活性物质对红脉穗螟的杀虫效果
Figure BSA00000246717300051
3、青葙杀虫活性物质提取物对螺旋粉虱生物活性测定
采用浸渍法进行测定。将青葙杀虫活性物质提取物按体积比1∶600的比例加入表面活性剂和蒸馏水得到原药液,将原药液用蒸馏水稀释成有效成分200倍、400倍、800倍、1600倍和3200倍。取田间采集的新鲜印度紫檀感虫叶片,剔除成虫及其他龄若虫,仅留取3龄若虫供试,放在药液中浸泡5s后取出,置于室内自然晾干后放入培养皿中培养,用湿棉球包住叶柄保湿,以蒸馏水处理的叶片作为对照,用保鲜膜为培养皿封口,并在保鲜膜上扎若干个小孔以利于透气,处理后24小时、36小时、48小时、60小时、72小时后在双目显微镜下检查螺旋粉虱若虫死亡情况,用解剖针将虫体翻转,轻轻触动虫体及触角,完全不动者为死亡。每个处理重复3次,每重复至少50头。结果列表如下。
表2中药青葙杀虫活性物质对螺旋粉虱的杀虫效果
Figure BSA00000246717300061
实施例二
1、中药青葙杀虫活性物质的提取
采集青葙全部植物组织,用清水洗净,置于室内阴干后放入鼓风式烘干箱内50℃,烘干18小时,冷却、粉碎得到青葙粉末;称取青葙粉末2kg置于索氏提取器中,按体积比为1∶10的比例加入有机溶剂甲醇,温度65℃反复提取18小时以上,得到青葙提取液;将青葙提取液移至旋转蒸发仪上,50℃减压浓缩至提取液变成粘稠膏状,即为青葙粗提物;将青葙粗提物用甲醇溶解后,按青葙粗提物∶硅藻土=1∶8的重量比例与硅藻土混合均匀,挥干溶剂甲醇,得到青葙粗提物-硅藻土混合物;将青葙粗提物-硅藻土混合物经正己烷萃取后再进行乙醚萃取,收集乙醚萃取相并减压浓缩至相对密度为0.75g/cm3,得到青葙杀虫活性物质提取物。
2、青葙杀虫活性物质提取物对三药槟榔扁蚜生物活性测定
采用浸渍法进行测定。将青葙杀虫活性物质提取物按体积比1∶800的比例加入表面活性剂和蒸馏水得到原药液,将原药液用蒸馏水稀释成有效成分200倍、400倍、800倍、1600倍和3200倍,对照为蒸馏水。将田间采回的染虫槟榔花絮,用小毛笔挑去花絮上其它蚜虫、剔除若蚜,保留个体一致,健康活泼的无翅成蚜浸入上述溶液中,5s后取出,吸干多余的药液,调查蚜虫基数,然后将枝条插到带水的玻璃瓶中,每日定时换水,24小时、36小时、48小时、60小时、72小时在双目显微镜下检查枝条上的活蚜虫数。正常爬行的为活虫,其它个体(不能爬行、仰翻或完全死亡等)属于死虫。每处理用虫50头,重复3次。结果列表如下。
表3中药青葙杀虫活性物质对三药槟榔扁蚜的杀虫效果
Figure BSA00000246717300071
3、青葙杀虫活性物质提取物对三药槟榔坚蚜生物活性测定
采用浸渍法进行测定。将青葙杀虫活性物质提取物按体积比1∶900的比例加入表面活性剂和蒸馏水得到原药液,将原药液用蒸馏水稀释成有效成分200倍、400倍、800倍、1600倍和3200倍,对照为蒸馏水。将田间采回的染虫叶片,用小毛笔挑去叶片上其它有害生物、剔除若蚜,保留个体一致,健康活泼的无翅成蚜浸入上述溶液中,5s后取出,吸干多余的药液,调查蚜虫基数,然后将其置于养虫盒中,保湿培养,于处理后24小时、36小时、48小时、60小时、72小时在双目显微镜下检查枝条上的活蚜虫数。正常爬行的为活虫,其它个体(不能爬行、仰翻或完全死亡等)属于死虫。每处理用虫50头,重复3次。结果列表如下。
表4中药青葙杀虫活性物质对三药槟榔坚蚜的杀虫效果
Figure BSA00000246717300081

Claims (2)

1.一种中药青葙杀虫活性物质的提取方法,其特征在于,其具体步骤如下:
1)、采集青葙全部植物组织,用清水洗净,置于室内阴干,于45~55℃烘干至恒重后冷却,粉碎得到青葙粉末;所述青葙全部植物组织是指根、茎、叶、花、种子;
2)、将青葙粉末与甲醇按体积比为1∶5~10的比例混合,反复提取12小时以上,得到青葙提取液;将青葙提取液进行减压浓缩至提取液变成粘稠膏状,即为青葙粗提物;
3)、将青葙粗提物用甲醇溶解后,按青葙粗提物∶硅藻土=1∶3~10的重量比例与硅藻土混合均匀,挥干溶剂甲醇,得到青葙粗提物-硅藻土混合物;
4)、将青葙粗提物-硅藻土混合物经正己烷萃取后再进行乙醚萃取,收集乙醚萃取相并减压浓缩至相对密度为0.25~1g/cm3,得到青葙杀虫活性物质提取物。
2.一种权利要求1所述的提取方法得到的青葙杀虫活性物质提取物,其特征在于该提取物在防治农业害虫药物中的应用;所述农业害虫为红脉穗螟、三药槟榔扁蚜、螺旋粉虱和三药槟榔坚蚜。
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