CN101881776B - 一种鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种混合天然丝蛋白的定量分析方法，具体涉及一种鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法，包括以下步骤：对待检测混合丝样品进行脱胶处理，然后烘干至恒重，再进行水解处理，使丝蛋白完全水解成氨基酸，然后定量分析待检测混合丝样品中的氨基酸组成及质量百分含量，然后计算待检测混合丝样品中桑蚕丝和柞蚕丝的质量百分含量，该发明可以准确定量分析桑蚕丝中混入柞蚕丝，误差在1个百分点以内，可以解决目前市场上桑蚕丝混入柞蚕桑而不能定量分析的实际问题，对于规范蚕丝被市场，保护广大消费者的利益具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种混合天然丝蛋白的定量分析方法，具体涉及一种定量分析混合丝中桑蚕丝和柞蚕丝的含量的方法。
背景技术
桑蚕(Bombyx mori L.)在我国已经被人工驯养5700多年，属鳞翅目蚕蛾科完全变态昆虫，世代包括卵、幼虫、蛹和成虫(蛾)四个虫态。幼虫到后期吐丝结茧，桑蚕茧可用于缫制生丝，生丝是重要的纺织原料。近来年，采用桑蚕丝制作的蚕丝被深受广大消费者的喜爱。据统计，我国2009年的蚕茧总产量的三分之一被用于蚕丝被的制作，蚕丝被已经成为我国蚕茧加工的重要产品之一。
柞蚕(Antheraea pernyi)是靠栽培柞树，进行饲养的野外昆虫，经济价值体现在两个方面，其一是柞蚕蛹可以食用，其二是柞蚕茧制作的丝绵可以作为绢纺原料，主要是用于生产柞蚕丝绵被。由于柞蚕丝和桑蚕丝相比，具有纤度粗、质地硬、颜色黄等特点，在市场上的价格为远低于桑蚕丝。近年来，许多蚕桑被生产厂家为了谋求高额的利润，将的柞蚕丝进行漂白处理后，均匀混入蚕桑丝，进行丝綿被的制作，制作的丝绵被还被标上“100％纯蚕丝”。由于桑蚕丝和柞蚕丝都是天然的丝蛋白，而且二者的外观也极为相似，采用常用的“火浇法”、“眼观法”以及“触摸法”均不能对均匀混合以后的样品进行分辨。因此市场上迫切需要采用定量分析的方法，对桑蚕丝和柞蚕丝进行准确的定量，以规范我国的蚕丝被市场，保护广大消费者的利益。
发明内容
本发明目的是提供一种鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法，包括以下步骤：对待检测混合丝样品进行脱胶处理，然后烘干至恒重，再进行水解处理，使丝蛋白完全水解成氨基酸，然后定量分析待检测混合丝样品中的氨基酸组成及质量百分含量，然后计算待检测混合丝样品中桑蚕丝和柞蚕丝的质量百分含量，混合丝中桑蚕丝的质量百分含量x％＝(c-b)/(a-b)；混合丝中柞蚕丝的质量百分含量为1-x％；其中，a％为纯桑蚕丝中氨基酸A的质量百分含量，b％为纯柞蚕丝中氨基酸A的质量百分含量，c％为测得的混合丝样品中氨基酸A的质量百分含量；
上述氨基酸A选自：丙氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸、缬氨酸或组氨酸中的一种，上述氨基酸在桑蚕丝和柞蚕丝中含量差异均在一倍以上。
上述技术方案中，桑蚕丝和柞蚕丝虽然均为天然丝蛋白，但其氨基酸组成上存在很大的差异，而且相对稳定，由于各氨基酸的组成及含量均为恒定的比例，因此，纯桑蚕丝或纯柞蚕丝中任一氨基酸对应的a和b均为定值。
上述技术方案中，脱胶处理采用的方法0.3～0.5％Na2CO3水溶液，100℃水煮45min处理，连续进行两次脱胶处理，以避免丝胶的残留对丝素氨基酸含量测定数据的影响；优选的技术方案中，脱胶后的丝样经双蒸水漂洗2次，避免Na2CO3残留对氨基酸分析的影响。
上述技术方案中，由于桑蚕丝和柞蚕丝在空气中的吸水性不同，样品处理前要烘干至恒重，以保证测定数据的客观性和可重复性；所述烘干步骤为在65±5℃下烘1h±10min。
上述技术方案中，混合丝的水解采用盐酸标准水解方法，即浓度为6mol·L-1的盐酸、恒温110℃的条件下水解24h，使蚕丝完全水解为氨基酸；优选的技术方案中，控制水解后的混合丝氨基酸的终浓度在0.3-0.5mg/mL，有利于分析氨基酸含量。
上述技术方案中，定量分析待检测混合丝样品中的氨基酸组成可以选用任意氨基酸分析仪。
由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：
本发明可以定量分析出混合丝中桑蚕丝和柞蚕丝的含量，误差小于1％；同时本发明具有操作方便、成本低、测定数量稳定的优点。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述：
实施例一：一种鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法
(1)材料及设备：
蚕桑丝绵、柞蚕丝绵为国家丝绸检测中心(苏州)提供，丝绵烘干设备为电热密闭干燥箱(型号：AC-2B)，氨基酸分析仪为日立L-8800高速氨基酸分析仪。
(2)脱胶：
称取桑蚕丝和柞蚕丝各1g，放到存有250mL 0.5％Na2CO3水溶液的烧杯中，100℃进行水浴45min处理，连续进行两次脱胶处理。
(3)混合样品的制备：
将脱胶后的样品经吸水纸吸干后，放入信封，采用进行65℃烘干1h至恒重，取100％桑蚕丝50mg作样品1、100％柞蚕丝50mg作样品2、50％桑蚕丝和50％的柞蚕丝共计50mg，进行均匀混合作样品3。
(4)氨基酸分析：
对以上样品1、样品2、样品3进行水解，浓度为6mol·L-1的盐酸、恒温110℃的条件下水解24h，使丝蛋白完全水解为氨基酸，控制水解后的混合丝氨基酸的终浓度在0.4mg/mL，有利于分析氨基酸含量，采用日立L-8800高速氨基酸分析仪进行测定。
(5)数据分析
根据公式：x％＝(c-b)/(a-b)
当选用丙氨酸作用考察对象时，
c％＝33.35％
a％＝28.81％；b％＝38.80％
x％＝(c-38.80)/(28.81-38.80)
x％＝50.49％≈50％(理论值)
当选用天门冬氨酸作用考察对象时，
c％＝4.62％
a％＝2.2％；b％＝7％
x％＝(4.62-7)/(2.2-7)
x％＝49.58％≈50％(理论值)
以上结果表明，经该发明方法对混合样品进行定量分析，结果与理论值基本一致，误差小于1个百分点，说明该方法可以用于蚕桑丝和柞蚕丝混合样品的定量分析。
上述百分数都是质量百分数。
Claims (4)
1.一种鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法，其特征在于，包括以下步骤：对待检测混合丝样品进行脱胶处理，然后烘干至恒重，再进行水解处理，使丝蛋白完全水解成氨基酸，然后定量分析待检测混合丝样品中的氨基酸组成及质量百分含量，然后计算待检测混合丝样品中桑蚕丝和柞蚕丝的质量百分含量，混合丝中桑蚕丝的质量百分含量x％＝(c-b)/(a-b)；混合丝中柞蚕丝的质量百分含量为1-x％；其中，a％为纯桑蚕丝中氨基酸A的质量百分含量，b％为纯柞蚕丝中氨基酸A的质量百分含量，c％为测得的混合丝样品中氨基酸A的质量百分含量；
上述氨基酸A选自：丙氨酸、天门冬氨酸中的一种。
2.根据权利要求1所述的鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法，其特征在于，所述脱胶处理采用的方法为：采用质量百分数0.3～0.5％Na2CO3水溶液，100℃水煮30～45min处理，连续进行两次脱胶处理。
3.根据权利要求1所述的鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法，其特征在于，脱胶后的丝样经双蒸水漂洗2次。
4.根据权利要求1所述的鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法，其特征在于，所述烘干步骤为在65±5℃下烘1h±10min。
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