CN101871910A

CN101871910A - 制备酶试剂油墨的方法

Info

Publication number: CN101871910A
Application number: CN201010165786A
Authority: CN
Inventors: M·F·卡多西; M·奥康奈尔
Original assignee: LifeScan Scotland Ltd
Current assignee: LifeScan Scotland Ltd
Priority date: 2009-04-24
Filing date: 2010-04-23
Publication date: 2010-10-27
Anticipated expiration: 2030-04-23
Also published as: EP2243841B1; US8025788B2; CA2701572A1; HK1148557A1; ES2446321T3; CN101871910B; JP5676135B2; EP2243841A1; JP2010256357A; CA2701572C; US20100270151A1

Abstract

本发明提供制备酶试剂油墨的方法，所述油墨用于分析测试条，包括确定代表性疏水性二氧化硅材料的润湿性和包括含有代表性疏水性二氧化硅材料的酶试剂油墨的分析测试条的至少第一标定特性之间的第一关系。在该方法中，第一关系限定提供合格的第一标定特性的最小润湿性。方法还包括：确定限定特定疏水性二氧化硅材料和特定表面活性剂的混合物在所述疏水性二氧化硅材料和特定表面活性剂的相对量的整个范围内的润湿性的第二关系，接着，将一定量的特定疏水性二氧化硅材料、一定量的特定表面活性剂和一定量的酶组合以形成酶试剂油墨。此外，特定疏水性二氧化硅材料和特定表面活性剂的量是基于第二关系预定的，以至少提供由第一关系限定的最小润湿性。

Description

制备酶试剂油墨的方法

技术领域

本发明通常涉及试剂油墨，具体地说，涉及酶试剂油墨、相关的制备方法和相关的分析测试条。

背景技术

已经对酶试剂油墨在分析测试条中的使用进行了广泛的商业开发。例如，已在基于电化学的分析测试条中使用酶试剂油墨来确定全血样中的葡萄糖。在例如美国专利No.7,465,380；No.7,462,265；No.7,291,256；No.7,112,265；No.5,708,247；No.7,250,105和美国核准前公开(Pre-Grant Publication)No.2004/0026243和国际公开No.WO2004039600中描述了这种酶试剂油墨和分析测试条，上述申请的每个通过引用全部包含于此。酶试剂油墨的商业开发必然导致对制备这种油墨的方法的关注增加。

附图说明

本发明的新颖特征特别在所附权利要求书中阐明。通过参照下面示出其中利用本发明原理的示例性实施例的具体实施方式，将更好地理解本发明的特征和优点，附图中：

图1是描绘根据本发明一个实施例的酶试剂油墨的制备方法中的各阶段的流程图；

图2是描绘代表性疏水性二氧化硅材料的润湿性(测量为30％甲醇和水溶液中的凝胶层高度(mm))和采用包括该代表性亲水性二氧化硅材料的酶试剂油墨的基于电化学的分析测试条的标定特性(即，标定斜率(calibration slope))之间的关系的曲线图；

图3是特定疏水性二氧化硅材料(即，H18)和特定表面活性剂(即，Tergitol)的混合物在被表示为Tergitol v/v百分比的H18和Tergitol的相对量的整个范围内的润湿性(测量为30％甲醇溶液中的凝胶体积)的柱状图；

图4是特定疏水性二氧化硅材料(即，Cab-o-Sil)与多种特定表面活性剂的混合物(相对浓度均为0.1％v/v)的润湿性(测量为30％甲醇溶液中的凝胶体积)的柱状图；

图5是包括Cab-o-Sil疏水性二氧化硅材料和Tergitol表面活性剂的酶试剂油墨的标定斜率相对于表面活性剂百分比(v/v)的曲线；

图6是根据本发明的实施例的分析测试条的简化分解透视图；

图7是描绘在根据本发明的方法中利用凝胶高度和体积进行润湿性测量时可采用的凝胶体积和凝胶高度之间的关系的曲线图。

具体实施方式

以下具体实施方式应当参照附图进行理解。各附图仅出于说明的目的描绘示例性的实施例，并不意在限制本发明的范围。详细描述以举例的方式而不是限制性方式说明了本发明的原理。此描述将使得本领域技术人员能够制备和使用本发明，并且描述了本发明的若干实施例、修改、变化、替代形式和用途，包括目前认为的实施本发明的最佳方式。

图1是描绘根据本发明实施例的制备分析测试条中使用的酶试剂油墨(例如，粘度在36,000至48,000cP范围内的可丝网印刷的(screenprintable)酶试剂油墨)的方法100的各阶段的流程图。根据方法100制备的酶试剂油墨可用于(例如)被构造用于确定全血样中的葡萄糖的基于电化学的分析测试条中。在例如美国专利No.5,120,420；No.5,288,636；No.5,628,890和No.6,461,496中参照传统的试剂油墨描述了这种基于电化学的分析测试条。

另外，在图6中描绘并在以下相关说明中描述了根据本发明实施例的采用根据本发明的酶试剂油墨的分析测试条。但是，一旦了解本发明，本领域普通技术人员就可采用根据本发明实施例的方法来制备用于任何合适类型的分析测试条的酶试剂油墨。

方法100包括：确定代表性疏水性二氧化硅材料(例如，疏水性热解二氧化硅材料)的润湿性和包括含有该代表性疏水性二氧化硅材料的酶试剂油墨的分析测试条的至少第一标定特性(例如，标定斜率和/或标定截距(intercept))之间的第一关系(见图1的步骤110)。此外，因此确定的第一关系限定了提供合格的第一标定特性的最小润湿性。本领域技术人员应该认识到，“合格的”标定特性指能够适当准确和精确地确定关注的被分析物(例如，葡萄糖)的特性。

图2是描绘一个这样的第一关系的曲线图，即，商品名为Cab-o-Si1(美国马萨诸塞州比尔里卡的卡博特公司(Cabot Corp，Billerica，Massachusetts，USA))的市售代表性疏水性二氧化硅材料的润湿性和基于电化学的分析测试条的标定斜率之间的第一关系，所述基于电化学的分析测试条被构造为利用含有该代表性疏水性二氧化硅材料的酶试剂油墨来确定血液中的葡萄糖。在图2中，针对以下描述的工序，将润湿性作为凝胶层高度进行测量。对于产生图2所采用的分析测试条构造来说，合格的标定斜率为大于大约0.017uA/mg/dL的标定斜率，在图2中以水平虚线指示。

已经意外发现了代表性疏水性二氧化硅材料(例如，Cab-o-Sil)的第一关系，其有利于在后续步骤中采用不同的(即，非相同的)特定疏水性二氧化硅材料的方法。例如，当代表性疏水性二氧化硅材料是Cab-o-SilTS610时，即使当第二关系的确定和组合步骤(在以下进一步描述)使用市售的疏水性二氧化硅材料H15，H18(二者均可从德国斯图加特的瓦克化学股份有限公司(Wacker Chemie AG，Stuttgart，Germany)获得)或Aerosil(可从德国杜塞尔多大的赢创德固赛有限公司(Evonik Degussa LTD，Düsseldorf，Germany)获得)时，也可采用第一关系。因此，对于包括(例如)热解二氧化硅材料的多种疏水性二氧化硅材料，根据本发明实施例的方法简单且易于使用。

图2清楚地表明了标定斜率是疏水性二氧化硅材料的润湿性的线性函数(如直的实线所描绘的)。应该指出的是，采用了代表性疏水性二氧化硅材料的各种生产批次来产生图2。当采用传统生产技术时，这种疏水性二氧化硅材料的润湿性在批次之间的变化可导致特定批次的酶试剂油墨具有合格的标定特性(例如，在图2中大于0.017的斜率)，而其他批次具有不合格的特性(即，在图2中小于0.017的斜率)。但是，根据本发明实施例的方法能够在适应亲水性二氧化硅材料的批次之间的变化的同时，有利地使得宽范围的疏水性二氧化硅材料能够被成功地使用。

一旦了解本发明，本领域技术人员将认识到，在根据本发明的方法中可采用除了凝胶层高度或凝胶层体积之外的其他确定润湿性的合适方法。例如，可采用光谱技术来测量润湿性。此外，在本发明的实施例中，可采用其他合适的代表性疏水性二氧化硅材料，并且可采用其他合适的标定特性(例如，标定截距)。

在图1的步骤120，方法100包括：确定第二关系，该第二关系限定特定疏水性二氧化硅材料和特定表面活性剂的混合物在该特定疏水性二氧化硅材料和特定表面活性剂的相对量的整个范围内的润湿性。

如上所述，所述特定疏水性二氧化硅材料可以与步骤110中采用的代表性疏水性二氧化硅材料相同，或者可以是不同的(即，非相同的)疏水性二氧化硅材料。可在根据本发明的方法中采用的疏水性二氧化硅材料的实例包括(例如)市售的疏水性二氧化硅材料H15和H18(德国斯图加特的瓦克化学股份有限公司；经火焰水解生成的合成疏水性无定形二氧化硅)和市售的疏水性二氧化硅材料Aerosil(德国杜塞尔多夫的赢创德固赛有限公司)。Cab-o-Sil、H15和H18是热解二氧化硅材料(也被称作热解二氧化硅)的实例。

图3是特定疏水性二氧化硅材料(即，H18)和特定表面活性剂(即，Tergitol)的混合物在被表示为Tergitol v/v百分比的H18和Tergitol的相对量的整个范围内的润湿性(测量为30％甲醇溶液中的凝胶体积)的柱状图。因此，图3用于显示特定亲水性二氧化硅材料(即，H18)和特定表面活性剂(即，Tergitol)的混合物的润湿性与所述混合物中所述特定亲水性二氧化硅材料和特定表面活性剂的相对量之间的示例性第二关系。应当指出的是，在图3中，v/v符号指8ml甲醇水溶液中的表面活性剂与0.1g的恒定重量下存在的表面活性剂的体积比率(见下面的润湿性工序说明)。

已经确定非离子表面活性剂尤其适于在根据本发明的方法中使用。例如，图4是特定疏水性二氧化硅材料(即，Cab-o-Sil)与多种表面活性剂的混合物(相对浓度均为0.1％v/v)的润湿性(测量为30％甲醇溶液中的凝胶体积)的柱状图。图4的水平虚线表示提供合格的标定特性(例如，标定斜率和/或标定截距)所需的最小润湿性。在图4中，v/v符号还是指8ml甲醇水溶液中的表面活性剂与0.1g的恒定重量下存在的表面活性剂的体积比率(见下面的润湿性工序说明)。

图4的对照组没有添加表面活性剂，并且润湿性不足以提供合格的标定特性。图4示出各种表面活性剂的添加使得疏水性二氧化硅材料的润湿性增加至变化的程度。当将Tergitol和Igepal添加至0.1％v/v的最终浓度时，导致润湿性最大程度地增加。Niaproof(一种离子表面活性剂)仅导致润湿性的微量增加。

Igepal和Tergitol均是含有聚乙二醇醚芳环的(非离子)表面活性剂。这种非离子表面活性剂看起来是实现最大润湿性的最合适的试剂。Triton X 100是聚乙二醇叔辛基苯基醚(polyethylene glycol tert-octylphenyl ether)(非离子)表面活性剂。这类表面活性剂对润湿性的提高没有达到与Igepal和Tergitol相同的程度，但是仍可适于在根据本发明的方法中使用。Niaproof，即7-乙基-2-甲基-4-十一烷基硫酸钠(sodium7-ethyl-2-methyl-4-undecyl sulfate)是阴离子表面活性剂，当在0.1％v/v下采用时，导致最小的润湿性增加。

当比较图3和图4时，应该指出的是，H18是极其疏水的二氧化硅材料，因此与Cab-o-Sil相比，需要更大相对量的表面活性剂来将润湿性增加到实现合格的标定特性所必需的程度。但是，通过根据本发明实施例的方法，可以使得即使例如H18的极其疏水的二氧化硅材料也可适用于酶试剂油墨。

再参照图1，在方法100的步骤130，将一定量的特定疏水性二氧化硅材料、一定量的特定表面活性剂和一定量的酶组合以形成酶试剂油墨。此外，所述特定疏水性二氧化硅材料和特定表面活性剂的量是基于第二关系预定的，以至少提供由第一关系所限定的最小润湿性，并且因此提供合格的预定的标定特性。例如，所述表面活性剂的量可以是预定的，使得其浓度合适以在制备酶试剂油墨的同时在组合步骤期间为所述量的疏水性二氧化硅材料提供所需润湿性，从而提供合格的预定的标定特性。

根据本发明的方法的有利之处在于：即使疏水性材料的疏水本质正常情况下会妨碍其使用，本发明的方法也使得疏水性二氧化硅材料能够容易地在酶试剂油墨中使用。换句话说，通过加入按照本文中描述的第一和第二关系确定的一定量的表面活性剂，使得过于疏水因而不易使用的二氧化硅材料也适于使用。例如，图4表明Cab-o-Sil疏水性二氧化硅材料的对照批次过于疏水因而不能在酶试剂油墨中成功使用。但是，加入大约0.1％(v/v)量的Tergitol(即，在组合步骤中为0.1％的体积浓度)使得疏水性二氧化硅材料适于使用，而不用花费多或耗时的制备处理。这个结论由图5的数据支持，图5示出了将Tergitol添加到Cab-o-Sil中获得合适的标定斜率(即，大于0.017的标定斜率)，而缺乏表面活性剂导致不合格的标定斜率(即，小于0.017的标定斜率)。就这一点而言，应该指出的是，在图5中，v/v％Tergitol是在与Cab-o-Sil组合之前基于Tergitol添加到缓冲溶液中的体积百分比(见以下的制备酶试剂油墨部分)。

在没有限制的情况下进行假设，根据本发明实施例的疏水性二氧化硅材料和表面活性剂的按量组合在分析测试条上生成试剂层，所述试剂层具有合适的开放结构(孔隙度)和/或密度，从而导致合格的标定特性。虽然可以通过在酶油墨制备期间增加各种混合时间来将这种密度和孔隙度控制在一定程度，但是这种增加可导致加热降低以及制备时间延长、成本增加。

此外，实验结果表明，根据本发明实施例添加表面活性剂不会对分析测试条的功能产生不利影响。例如，没有发现对于潜在干扰化合物(例如L-多巴胺、尿酸、抗坏血酸、扑热息痛(对乙酰氨基酚)和龙胆酸)的不利影响，并且分析测试条稳定性与不含有表面活性剂的分析测试条的稳定性相同。

本文描述的第一和第二关系可利用简单的实验室设备确定。因此，根据本发明的方法由于低成本而有利。此外，由于所述方法采用简单的疏水性二氧化硅材料(例如，热解二氧化硅材料)，因此它们消除了采用具有亲水性和疏水性质的高级二氧化硅材料的任何需要。

根据本发明实施例的酶试剂油墨包括一定量的疏水性二氧化硅材料(例如，一定量的热解二氧化硅材料)、一定量的表面活性剂(例如，非离子表面活性剂)和一定量的酶(例如，葡萄糖氧化酶)。酶试剂油墨中存在的疏水性二氧化硅材料和表面活性剂的量基于第一和第二关系预定。第一关系是代表性疏水性二氧化硅材料的润湿性和包括含有该代表性疏水性二氧化硅材料的酶试剂油墨的分析测试条的第一标定特性之间的关系。此外，这种第一关系限定了提供合格的第一标定特性的最小润湿性。第二关系是限定疏水性二氧化硅材料和表面活性剂的混合物在疏水性二氧化硅材料和表面活性剂的相对量的整个范围内的润湿性的关系。酶试剂油墨中的疏水性二氧化硅材料和表面活性剂的相对量被预定，以至少提供由第一关系限定的最小润湿性，并且因此提供合格的第一标定特性。

一旦了解本发明，本领域技术人员应当认识到，根据本发明的酶试剂油墨为根据本发明的方法制备的那些油墨。因此，本文中针对本发明的方法描述的组分、特性和有益效果也应用到本发明的酶试剂油墨。

根据本发明的酶试剂油墨的一个实例具有以下配方：

DC 1500消泡剂质量的20.3％

聚乙烯醇质量的0.7％

柠檬酸质量的0.6％

柠檬酸三钠质量的2.0％

Tergitol表面活性剂质量的0.07％

聚乙烯吡咯烷酮-乙酸

乙烯酯共聚物质量的0.7％

羟乙基纤维素质量的3.5％

Cab-o-Sil疏水性二氧化硅质量的5.0％

铁氰化钾质量的20％

葡萄糖氧化酶质量的1.9％

水质量的65％

以下详细描述制备上面描述的酶试剂油墨的合适方法。一旦了解本发明(包括以下描述的酶试剂油墨制备例)，本领域技术人员将认识到，在根据本发明的方法中采用的特定表面活性剂的特定量不仅取决于本文所述的第一和第二关系，还取决于本领域技术人员容易理解的制备处理的细节。例如，在以下描述的酶试剂油墨制备例中，将10ml特定量的Tergitol添加到大约10,000ml体积的缓冲液中以实现所需的0.1％v/v量，0.1％v/v基于根据本发明实施例的方法的第一和第二关系确定。然后，当与疏水性二氧化硅材料组合时，表面活性剂以所需的v/v％(例如，大于0.10v/v％的v/v％)存在。

通常，根据本发明的分析测试条包括基底和设置在基底的一部分上的试剂层。试剂层包括酶试剂油墨，酶试剂油墨包括一定量的疏水性二氧化硅材料、一定量的表面活性剂以及一定量的酶。酶试剂油墨中的疏水性二氧化硅材料和表面活性剂的相对量利用第一关系和第二关系被预定。第一关系是代表性疏水性二氧化硅材料的润湿性和包括含有所述代表性疏水性二氧化硅材料的酶试剂油墨的分析测试条的至少第一标定特性(例如，标定斜率和/或标定截距)之间的关系。此外，第一关系限定了提供合格的第一标定特性的最小润湿性。

第二关系限定了疏水性二氧化硅材料和表面活性剂的混合物在疏水性二氧化硅材料和表面活性剂的相对量的整个范围内的润湿性。酶试剂油墨中采用的疏水性二氧化硅材料和表面活性剂的预定相对量至少提供由第一关系限定的最小润湿性，并且因此提供合格的第一标定特性。

图6是根据本发明的被构造用于确定血样中的葡萄糖的基于电化学的分析测试条200的简化分解透视图。

基于电化学的分析测试条200包括电绝缘基底212(还被简称为基底)、图案化导体层214(限定三电极)、绝缘层216(具有穿过其延伸的电极暴露窗口217)、试剂层218、图案化粘合剂层220、亲水层222和顶部膜224。

电绝缘基底212可以是本领域技术人员所知的任何合适的电绝缘基底，包括(例如)尼龙基底、聚碳酸酯基底、聚酰亚胺基底、聚氯乙烯基底、聚乙烯基底、聚丙烯基底、聚对苯二甲酸乙二醇酯(PETG)基底或聚酯基底。电绝缘基底可具有任何适当的尺寸，包括(例如)约5mm的宽度尺寸，约27mm的长度尺寸和约0.5mm的厚度尺寸。

绝缘层216可(例如)由可丝网印刷的绝缘油墨形成。这种可丝网印刷的绝缘油墨可以按照名称“Insulayer”从美国马萨诸塞州韦勒姆的Ercon(Ercon of Wareham，Massachusetts U.S.A.)商购获得。图案化粘合剂层220可由(例如)可从英国斯坦福郡塔姆沃思的ApolloAdhesives(Apollo Adhesives，Tamworth，Staffordshire，UK)商购获得的可丝网印刷的压敏粘合剂形成。

亲水层222可(例如)为具有亲水性质的透明膜，该亲水性质可促进基于电化学的分析测试条200由流体样品(例如全血样)润湿和填充。这种透明膜可从(例如)美国明尼苏达州明尼阿波利斯的3M商购获得。顶部膜224可以是(例如)由黑色装饰油墨叠印的透明膜。合适的透明薄膜可从Tape Specialities(Tring，Hertfordshire，UK)商购获得。

试剂层218可包括任何合适的酶试剂，酶试剂的选择取决于待测的被分析物。例如，如果血样中的葡萄糖待测定，则试剂层218可包括氧化酶或葡萄糖脱氢酶以及用于功能操作所必须的其他成分。但是，根据本发明的实施例，试剂层218至少包括根据本发明实施例的酶试剂油墨。

基于电化学的分析测试条200可(例如)通过图案化导电层214、绝缘层216(具有贯穿延伸的电极暴露窗口217)、试剂层218、图案化粘合剂层220、亲水层222和顶部膜224在电绝缘基底212上按顺序对齐结构制备。本领域技术人员已知的任何合适技术可用于实现这样的按顺序对齐结构，包括(例如)网版印刷、照相平版印刷、凹版印刷、化学气相沉积和条带层合技术。

作为凝胶高度或凝胶体积测量润湿性的工序

材料和试剂：分析天平、玻璃称量皿、Scientific IndustriesVortex Genie 2涡旋混合器、Hettich通用16摆动离心机(HettichUniversal 16 swing-out centrifuge)、Mitutoyo Absolute电子数显卡尺、TPP 91015刻度塑料离心管、AnalaR水、甲醇(分光光度曲线等级)、疏水性二氧化硅材料和合适的表面活性剂。

方法：利用分析天平和玻璃称量皿称量出0.1g的疏水性二氧化硅材料，如果合适的话，称量出所需量的表面活性剂。将疏水性二氧化硅材料和(如果需要)表面活性剂转移到塑料离心管中。添加8ml的30％(v/v)甲醇/水溶液。通过晃动离心管将疏水性二氧化硅材料和(如果存在)表面活性剂分散，然后利用Scientific Industries Vortex Genie 2涡旋混合器的最大设置将所得混合物涡旋处理3分钟。接着，将离心管放置到Hettich通用16摆动离心机中，确保离心机的斗(bucket)平衡。在4,500rpm下离心处理5分钟。

移除离心管，并且利用Mitutoyo Absolute电子数显卡尺测量凝胶层(位于管底部)的高度以及未润湿的热解二氧化硅(管的顶部)的高度。如果需要，可采用图6的图表或公式来将凝胶高度(以mm为单位)转换为凝胶体积(以ml为单位)。

利用疏水性二氧化硅材料制备酶试剂油墨

采用以下工序来制备本文所述的示例性酶试剂油墨。

通过将0.5ml的DC 1500消泡剂(可从BDH/Merck有限公司商购获得)与7500克水(AnalaR，可从BDH/Merck有限公司商购获得的)组合来制备PVA-消泡-柠檬酸溶液。接着，将90克的聚乙烯醇(“PVA”，Sigma-Aldrich公司，分子量为85,000-124,000，87％-89％水解)加入到溶液中并且在＞7000RPM下均化处理2小时。在均化之后，将81.5克的柠檬酸混合到溶液中。

通过将270克柠檬酸三钠混合到1000ml水中来制备pH调节溶液。然后，通过添加足够量的柠檬酸三钠溶液来将PVA-消泡-柠檬酸溶液的pH值调节为pH 5。

pH 5溶液通过125微米筛过滤并被转移到30升不锈钢罐中。将额外的水加入到30升不锈钢罐中直到总溶液重量达到9250克。然后，将44.5ml的DC 1500消泡剂加入不锈钢罐中。将10ml的Tergitol加入到不锈钢罐中。

将90mm直径的混合器叶片附着到Dispersmat混合器中，并安装到不锈钢罐中，以使得混合器叶片在罐底之上2厘米。将混合器设置为800RPM，然后在混合的开始两分钟内加入90克聚乙烯吡咯烷酮-乙酸乙烯酯(PVP/VA S-630共聚物，可从ISP公司商购获得，具有60/40比率以及24,000至30,000的分子量)和449克羟乙基纤维素(“HEC”，可作为Natrosol 250G被商购获得)。接着，将混合速度增加到5500RPM并再持续五分钟，得到HEC溶液。

在混合阶段之后，将HEC溶液转移到15升小桶中并轻轻地混合(即，滚动)12至25小时。然后测量粘度，确认粘度在13,000至17,000cP范围内(在25℃和5RPM下测量)。

使滚动的HEC溶液在7℃和10℃之间平衡。接着，将9000克的滚动并平衡的HEC溶液与675克的疏水性二氧化硅材料(Cab-o-Sil，可从美国马萨诸塞州比尔里卡的卡博特公司商购获得，01821-7001)在30升不锈钢罐中混合，以形成HEC/二氧化硅混合物。

将175mm直径的混合器叶片附着到Dispersmat混合器中，并安装到不锈钢罐中，使得混合器叶片位于罐底。将组合的HEC/二氧化硅混合物在2600RPM下混合16分钟。然后(利用科尔-帕默比重瓶(Cole-ParmerPycnometer))测量制剂的密度，以确定所述密度在从大约0.85g/cm³至大约1.015g/cm³范围内。

然后，将HEC/二氧化硅混合物转移到15升小桶中并轻轻地滚动8至16小时。然后测量粘度，确认粘度在37,000至50,000cP范围内(在25℃和10RPM下测量)。

在15升不锈钢罐中将4515克HEC/二氧化硅混合物与1386克铁氰化钾和126克葡萄糖氧化酶组合。将125mm直径的混合器叶片附着到Dispersmat混合器，并安装到不锈钢罐中，使得混合器叶片位于罐底，混合物在1500RPM下混合15分钟。在混合之后，pH值在从大约4.8至5.4的范围内，并且粘度在从大约36,000至48,000cP范围内(在25℃和10RPM下测量)。然后，在被构造用于确定血样中的葡萄糖的基于电化学的分析测试条的制备过程中，酶试剂油墨预备好被丝网印刷到电极和/或基底上。

虽然本文显示和描述了本发明的优选实施例，但是对本领域技术人员显而易见的是，这样的实施例仅以举例的方式提供。本领域技术人员现将不偏离本发明而想到多种变化、改变和替代方案。应理解的是，本文描述的本发明实施例的多种替代形式可用于本发明的实施。本发明的范围拟通过以下权利要求书来限定，并且落入这些权利要求及其等同物之范围的装置和方法、组合及装置均由该权利要求书涵盖。

Claims

1.一种制备用于分析测试条中的酶试剂油墨的方法，所述方法包括：

确定代表性疏水性二氧化硅材料的润湿性和包括含有所述代表性疏水性二氧化硅材料的酶试剂油墨的分析测试条的至少第一标定特性之间的第一关系，所述第一关系限定提供合格的第一标定特性的最小润湿性；

确定限定特定疏水性二氧化硅材料和特定表面活性剂的混合物在所述特定疏水性二氧化硅材料和所述特定表面活性剂的相对量的整个范围内的润湿性的第二关系；和

将至少一定量的所述特定疏水性二氧化硅材料、一定量的所述特定表面活性剂和一定量的酶组合以形成酶试剂油墨；

其中所述特定疏水性二氧化硅材料和所述特定表面活性剂的量是基于所述第二关系预定的，以至少提供由所述第一关系所限定的最小润湿性，并因此提供合格的第一标定特性。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述代表性疏水性二氧化硅材料和所述特定疏水性二氧化硅材料是疏水性热解二氧化硅材料。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述代表性疏水性二氧化硅材料和所述特定疏水性二氧化硅材料是不同的疏水性二氧化硅材料。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述特定表面活性剂是非离子表面活性剂。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述非离子表面活性剂是含有聚乙二醇醚芳环的非离子表面活性剂。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少第一标定特性是标定斜率。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少第一标定特性是标定截距。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述润湿性被确定为甲醇和水溶液中的凝胶高度。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述润湿性被确定为甲醇和水溶液中的凝胶体积。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述酶试剂油墨是可丝网印刷的酶试剂油墨。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述分析测试条是被构造用于确定血样中的葡萄糖的基于电化学的分析测试条。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述酶是葡萄糖氧化酶。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述特定表面活性剂的量使得当与所述量的特定疏水性二氧化硅材料组合时所述特定表面活性剂以至少0.10％v/v的浓度存在。