CN101833007A - 一种蛋白印迹检测装置 - Google Patents

Abstract

本发明属于生物检测技术领域，涉及一种通过控制电路自动对蛋白印迹进行检测的装置，控制电路可以依照写入的控制程序控制蛋白印迹检测装置，该装置包括反应装置、向反应装置加液的加液装置、从反应装置中吸液的吸液装置以及控制反应装置、加液装置及吸液装置的控制电路，反应装置、加液装置及吸液装置均与控制电路连接，控制电路依照写入的控制程序分别控制反应装置、加液装置及吸液装置工作，从而解决了现有蛋白印迹检测装置一般采用手工将各个操作步骤连续成完整检测，操作繁琐而复杂，并且人与具潜在性感染血物品的接触多，检测过程也容易受周围环境的影响，造成试验结果差异的问题。

Description

一种蛋白印迹检测装置

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，涉及一种蛋白印迹检测装置，特别是涉及一种通过控制电路自动对蛋白印迹进行检测的装置，控制电路可以依照写入的控制程序控制蛋白印迹检测装置。

背景技术

蛋白免疫印迹法是一种借助特异性抗体鉴定抗原的有效方法，该方法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。蛋白免疫印迹法是把电泳分离的蛋白质组分从凝胶转移至一种固相支持体，通过抗体与附着于固相支持物的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性免疫反应进行检测，整个过程包括：蛋白质电泳分离，电转移，免疫学检测和信号检测四部分。目前，现有的蛋白印迹实验中免疫检测部分包括如下过程：封闭，第一抗体结合，清洗，第二抗体结合，清洗。在该部分实验流程中需要处理的试剂为封闭液，第一抗体稀释液，清洗缓冲液，第二抗体稀释液，清洗缓冲液。

目前采用的是手工操作的方法来更换不同的试剂，频繁的换液操作增加了实验者的工作强度并且浪费时间。

同时，蛋白印迹检测传统方法是采用手工将各个操作步骤连续成完整检测，缺点是繁琐而复杂，人与具潜在性感染血物品的接触多，环境变化而造成的试验结果差异，工作强度高。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于现有蛋白印迹检测装置一般采用手工将各个操作步骤连续成完整检测，操作繁琐而复杂，并且人与具潜在性感染血物品的接触多，检测过程也容易受周围环境的影响，从而造成试验结果差异的问题，并针对该问题提供一种蛋白印迹检测装置，该装置至少可以自动检测，并极大的减少人与具潜在性感染血物品的接触。

本发明通过以下技术方案解决上述技术问题：

一种蛋白印迹检测装置，包括反应装置、向反应装置加液的加液装置以及从反应装置中吸液的吸液装置，所述蛋白印迹检测装置还包括控制反应装置、加液装置及吸液装置的控制电路，反应装置、加液装置及吸液装置均与控制电路连接，控制电路依照写入的控制程序分别控制反应装置、加液装置及吸液装置工作。

采用上述技术方案后，本发明所述蛋白印迹检测装置的组成部分，如反应装置、吸液装置及加液装置等即可在控制电路的控制下自动运行，从而极大的提高了蛋白印迹检测装置的检测效率，并减少了检测的认为误差。该控制电路可以是常见的控制电路，例如单片机等，但是本发明为了使该控制电路能够更加精确的控制蛋白印迹检测装置，并且使控制操作更加的人性化，为该控制电路写入了相应的控制程序。

控制电路对吸液装置及加液装置控制的一个重要内容就是将液体按照本领域技术人员的要求加入反应装置或者从反应装置中吸出，而蛋白印迹装置中的反应装置的核心部件一般包括反应实际进行部件反应槽，那么也就需要将液体准确的加入反应槽或者从反应槽中吸出，为此，本发明所述加液装置包括加液臂和安装在加液臂上的加液管，加液装置通过加液管向反应装置加液，所述吸液装置包括吸液臂和安装在吸液臂上的吸液管，吸液装置通过吸液管从反应装置中吸液，反应装置包括反应槽。

并且在以上设计的基础上，本发明还在蛋白印迹检测装置上增设了将加液装置的加液管及吸液装置的吸液管移动至反应槽上的移动定位装置，该装置与加液装置的加液臂、吸液装置的吸液臂连接，从而本领域技术人员能够利用移动定位装置，完成向反应槽中加液或者吸液等基本操作，为了体现蛋白印迹检测装置自动检测的特点，移动定位装置与控制电路连接。

当然，蛋白印迹检测装置在检测时，一般需要进行多个反应，这样该装置的反应装置上就必须设置多个反应槽(即每个反应占用一个反应槽)，那么加液或者吸液操作就应该在确定的反应槽上进行，而不是对不该加液或吸液的反应槽进行上述操作，由于现有反应槽一般是并排排列，因此在确定的反应槽上进行加液或者吸液操作只需要将加液臂或吸液臂移至确定的反应槽所在的位置即可，为此本发明所述的移动定位装置还进一步的包括定位座、包括同步带的同步带机构、带动同步带机构移动的移动电机，加液臂及吸液臂设置在定位座上，定位座固定在同步带上，移动电机与同步带机构连接，这样，只需控制同步带的移动，即可控制加液臂及吸液臂的移动。当然，同步带最好与反应槽并排排列的方向平行，为了体现蛋白印迹检测装置自动检测的特点，移动定位装置中的移动电机与控制电路的控制端连接。

还应当看到的是，吸液臂在吸液时必须与反应槽中的液体接触，那么吸液臂至少应当随着反应槽中液体的液面的高度不同，在垂直于液面的方向上作出位置上的调整或者将吸液装置的位置调整到与反应槽的底部接触，以便吸液装置完成对反应槽的吸液工作，因此本发明所述移动定位装置还包括与加液装置的加液臂及吸液装置的吸液臂移动方向(也即同步带移动方向)平行的滑轴，吸液臂上设有供滑轴穿过的吸液臂轴孔，加液臂上设有供滑轴穿过的加液臂轴孔，吸液臂和加液臂套在所述的滑轴上，吸液臂甚至是加液臂可以沿着吸液臂及加液臂轴孔转动，以使吸液臂中的吸液管端口位于反应槽中的液面内。

进一步的，所述吸液装置还包括一与吸液臂连接的使吸液臂绕吸液臂轴孔摆动的摆动机构，该机构包括吸液臂摆臂电机，所述吸液臂摆臂电机的输出轴与吸液臂连接，为了体现蛋白印迹检测装置自动检测的特点，吸液臂摆臂电机与控制电路得控制端连接，从而至少随着反应槽中液体的液面的高度不同，吸液臂可以做出较为准确的调整，保证使吸液臂中的吸液管端口始终位于反应槽中的液面内。

通常情况下，加液装置及吸液装置完成对反应槽进行加液或吸液需要泵提供液体的输送动力，因此，加液装置还应当包括与加液臂中的加液管连接的加液泵，吸液装置包括与吸液臂中的吸液管连接的吸液泵，为了体现蛋白印迹检测装置自动检测的特点，加液泵与吸液泵均与控制电路的控制端连接，以便在需要时自动对反应槽进行加液或吸液。

以上这些技术措施已经能够完成蛋白印迹检测装置的基本功能，加液及吸液的自动化运行，为了添加新的功能(例如反应温度的调控等)，以便扩大蛋白印迹检测装置的应用范围及提高其检测精度，还可以在上述蛋白印迹检测装置的基础上增加新的部件，但为了体现蛋白印迹检测装置自动检测的特点，这些新增的部件同样也需要与控制电路的控制端连接。

附图说明

图1为实施例所述一种蛋白印迹检测装置的原理图(未示出位移传感器、吸液臂角度传感器及摇摆电机传感器)；

图2为实施例所述一种蛋白印迹检测装置的结构示意图(未示出滑轴)；

图3为实施例所述一种蛋白印迹检测装置中加液泵泵体的结构放大图；

图4为实施例所述一种蛋白印迹检测装置中加液臂及吸液臂的侧视透视图(未示出定位座)；

图5为实施例所述一种蛋白印迹检测装置中反应装置的截面图；

图6为实施例所述一种蛋白印迹检测装置的俯视图(未示出同步轮)；

图7为实施例所述一种蛋白印迹检测装置控制软件的主菜单流程图；

图8为实施例所述一种蛋白印迹检测装置控制软件的运行模式上部分流程图；

图9为实施例所述一种蛋白印迹检测装置控制软件的运行模式下部分流程图；

图10为实施例所述一种蛋白印迹检测装置控制软件的编辑模式流程图；

图11为实施例所述一种蛋白印迹检测装置控制软件校准模式流程图；

图12为实施例所述一种蛋白印迹检测装置控制软件自动清洗模式流程图；

图13为实施例所述一种蛋白印迹检测装置控制软件维护检测模式流程图；

图14为实施例所述一种蛋白印迹检测装置控制软件设置模式流程图；

图15为实施例所述一种蛋白印迹检测装置控制软件功能菜单模式上部分流程图；

图16为实施例所述一种蛋白印迹检测装置控制软件功能菜单模式下部分流程图。

具体实施方式

实施例

本实施例所述的一种蛋白印迹检测装置，包括反应装置、向反应装置加液的加液装置、从反应装置中吸液的吸液装置以及控制反应装置、加液装置及吸液装置的控制电路，反应装置、加液装置及吸液装置均与控制电路连接，控制电路依照写入的控制程序分别控制反应装置、加液装置及吸液装置工作。

为了对蛋白印迹进行检测，需要完成多次加液以及吸液操作，现有技术所提供的蛋白印迹检测装置一般需要采用手工完成对反应装置的加液以及吸液操作，而本实施例所述蛋白印迹检测装置能够通过控制电路自动控制加液装置、反应装置以及吸液装置，从而至少避免了技术人员与潜在性感染血物品的接触，环境变化而造成的检测结果的偏差，并且提高了检测操作效率。

当然从提高蛋白印迹检测操作效率的角度出发，仅仅有以上技术方案是不够的，至少还需要对反应装置进行准确的加液与吸液，例如，对于一般的蛋白印迹检测装置来说，反应装置一般包括多个反应槽30(或者称为孵育槽)，加液和吸液操作均在反应槽30上操作，这就至少要求加液装置及吸液装置的加液及吸液操作能够在不同的反应槽30之间自由的进行，以便在需要的时候对某个反应槽30进行加液或吸液操作，为了完成上述要求，本实施例所述加液装置包括加液臂15和安装在加液臂15上的加液管66，加液装置通过加液管66向反应装置加液，所述吸液装置包括吸液臂14和安装在吸液臂14上的吸液管，吸液装置通过吸液管从反应装置中吸液，蛋白印迹检测装置还包括将加液装置的加液臂15及吸液装置的吸液臂14移动至反应槽30上的移动定位装置，所述移动定位装置与加液装置的加液臂15、吸液装置的吸液臂14以及控制电路的控制端连接。

移动定位装置一般能够完成将加液臂15和吸液臂14移动至反应槽30位置处即可，例如，对于本实施例而言，移动定位装置包括定位座、包括同步带20的同步带机构、带动同步带20移动的移动电机13，加液臂15及吸液臂14设置在定位座上，定位座固定在同步带20上，移动电机13与同步带20及控制电路的控制端连接，这样通过控制电路即可控制由移动电机13带动的同步带20的移动，因此固定在同步带20上的定位座的位移也就可以轻松控制，实现将加液臂15和吸液臂14移动至反应槽30位置处的目的，同时，为了保持同步带20在传送定位座的过程中能够更加平稳(防止同步带20与定位座的整体振动)，本实施例所述同步带机构还可以包括设置在同步带20上的，起支撑同步带20作用的若干同步轮。

本实施例在定位座的结构设计上将加液臂15与吸液臂14的位置设计为相邻，这样的设计至少有这样的好处：由于本实施例所述蛋白免疫印迹检测装置需要经常对同一个反应槽30进行加液或吸液，那么将加液臂15与吸液臂14的位置关系设置为相邻时，可以在加液臂15完成加液后，基本不用同步带20移动定位座，就可以用定位座上的吸液臂14对同一个反应槽30进行吸液，简化了操作步骤，提高了检测效率。

还应当看到的是，吸液装置在吸液时，吸液管的端口吸液咀143必须与反应槽30中的液体接触，那么吸液装置中的吸液臂14至少应当随着反应槽30中液体的液面的高度不同，在垂直于液面的方向上作出位置上的调整或者将吸液咀143的位置调整到与反应槽30的底部接触，以便吸液装置完成对反应槽30的吸液工作。由此，本实施例所述移动定位装置还包括与加液装置的加液臂15及吸液装置的吸液臂14移动方向平行的滑轴21，吸液臂14上设有供滑轴21穿过的吸液臂轴孔16，加液臂15上设有供滑轴21穿过的加液臂轴孔，吸液臂14和加液臂15套在所述的滑轴上，吸液臂14甚至是加液臂15可以沿着吸液臂及加液臂轴孔转动，以使吸液臂14中的吸液咀143位于反应槽30中的液面内。

为了体现蛋白印迹检测装置自动检测的特点，进一步的，本实施例所述吸液装置还包括一与吸液臂14连接的摆动机构，摆动机构使吸液臂14绕吸液臂轴孔16摆动，所述摆动机构包括吸液臂摆臂电机11，所述吸液臂摆臂电机11的输出轴与吸液臂14连接，同时还与控制电路的控制端连接，当吸液臂电机11工作后，位于吸液臂14朝向反应槽30一端的吸液管的端口吸液咀143可以在垂直于反应槽30液面的方向上移动，采用上述结构后，控制电路即可通过控制吸液臂摆臂电机11来确定吸液臂14的转动角度，或者说吸液咀143与反应槽30底部之间的距离，从而至少随着反应槽30中液体的液面的高度不同，吸液臂14可以做出较为准确的调整，保证使吸液臂14中的吸液管端口吸液咀143始终位于反应槽30中的液面内。

本实施例在上面所提到的摆动机构是一种能够将吸液臂电机11的动力转化为吸液臂14绕吸液臂轴孔16摆动动力的转化机构，为了使该摆动机构能够实现这样的功能，对于本实施例而言，摆动机构还包括设置在吸液臂摆臂电机11的输出轴上的突起部111以及设置在吸液臂14上的供突起部111插入的滑槽142，所述突起部111可以沿着吸液臂摆臂电机11的输出轴转动，这样既可实现将吸液臂摆臂电机11的动力转化为吸液臂14绕吸液臂轴孔16摆动的动力。

蛋白免疫印迹的反应是将加液装置提供的液体(即反应液)与铺设在反应槽30底部的蛋白质固相支持体进行混合，为了使该混合能够充分，对已经加入反应液的反应槽30进行适当的摇摆也是必要的，

为此，本实施例所述反应装置还包括设置在反应槽30下用以托住反应槽30的托盘1、设置在托盘1下的支撑支架3、摇摆电机2以及摇摆机构，摇摆电机2通过摇摆机构与支撑支架3连接，摇摆电机2与控制电路的控制端连接，从而通过控制摇摆电机2就可以控制反应槽30的摇摆，使反应液与蛋白质固相支持体充分混合。

与前面提到的摆动机构一样，摇摆机构也是一种将摇摆电机2的动力转化为支撑支架3摇摆动力的转化机构，具体到本实施例，所述摇摆机构包括一端与摇摆电机输出轴19连接的偏心摇摆机构，所述偏心摇摆机构包括设置在支撑支架3下端的偏心凹口102，摇摆电机输出轴19上设有插入偏心凹口102的摇摆电机输出轴突起部，支撑支架3的摇摆是以设置在支撑支架3内的支撑轴101为摇摆轴的，转动摇摆电机输出轴19即可实现这一摇摆。

蛋白免疫印迹的反应最好还应当在可调节的温度下进行，而不是仅仅是周围环境温度，这样做至少可以极大的扩大本实施例所述蛋白免疫印迹检测装置的检测范围，因此，本实施例在反应装置中的托盘1上增设了对反应槽30进行加热的加热装置17，加热装置17与控制电路的控制端连接，加热装置17可以采用电阻丝和湿热等技术对反应槽30加热，但这样的技术往往存在装置体积大，不容易控制温度的缺点，本实施例所述加热装置17一般采用低压安全薄膜加热技术对反应槽30进行加热。

通常情况下，加液装置及吸液装置完成对反应槽进行加液或吸液需要泵提供液体的输送动力，因此，本实施例所述加液装置及吸液装置各自设有与加液臂15中的加液管66连接的加液泵6和与吸液臂14中的吸液管连接的吸液泵10来向反应液或反应后的废液的输送提供动力，并且所述加液泵6与吸液泵10均与控制电路的控制端连接，以便控制电路对加液和吸液操作进行控制。

然而，蛋白免疫印迹检测往往需要定量的向反应槽30加入反应液，反应液加入量过多或者过少均会引起检测的误差，所以有必要对加液泵6进行进一步的设计以使其能够向反应槽30输送定量的反应液，对于本实施例而言，所述加液泵6包括加液泵电机5、与加液泵电机5的输出轴连接的泵轮、用于容纳所述泵轮的泵壳62、进液口A、出液口B、泵管61、泵管固定座60、用于固定加液泵电机5及泵管固定座60的安装板69以及通过泵壳62向泵管61挤压的挤压装置，泵管固定座60位于所述泵壳62的上方，所述加液管66包括进液管及出液管，泵管61一端通过进液口A与进液管连接，另一端通过出液口B与出液管连接，所述加液泵电机5与控制电路的控制端连接，从而使挤压过程容易通过加液泵电机5的运转而得到控制。

本实施例所述加液泵6是通过对泵管61的挤压，产生一定的负压，然后松开，通过进液管66快速吸入一定量的反应液，然后再挤压，向加液臂15挤出一定量的反应液，依次重复进行上述步骤来不断的向加液臂15输送反应液，因此至少部分泵管位于泵壳与压臂之间，对于本实施例而言，该部分泵管为中部泵管，由于泵管61被挤压部分的管内体积是不变的，也即每次挤压均能向加液臂15输送固定量的反应液，从而通过控制加液泵6的转动圈数就可以精确控制反应液的加液量，极大的减少了因反应液加入量的忽高忽低所引起的检测误差。

当然，为了使上述技术效果能够顺利实现，还需要对挤压装置做进一步的设计，对本实施例来说，首先，所述挤压装置至少包括压臂63，泵管61中部位于泵壳62与压臂63之间，从而使泵壳62及压臂63对泵管61中部形成挤压态势；

其次，还需要一个能够将泵壳62、泵管61中部及泵臂63之间距离尽量减少的装置，使压臂63和泵壳62能够对泵管61中部进行实质上的挤压，为此，本实施例所述挤压装置还包括调压机构，所述调压机构包括调压螺栓65、旋在所述调压螺栓65上的调压螺母64以及套在调压螺栓上的调压弹簧，所述调压螺栓65的螺栓脚铰接在安装板上；压臂63的一端通过铰轴与安装板69活动连接，另一端设置有容调压螺栓65穿过的叉口，调压螺母64位于所述叉口的下方，用于将所述叉口向泵壳62方向夹持，调压弹簧位于调压螺母64和调压螺栓65螺栓头之间，也即由调压弹簧向压臂63间接提供挤压的动力；

第三，这点最为重要，该加液泵6需要随着泵壳62的转动有规律的对泵管61中部进行有效的挤压，也即本实施例所述加液泵6的工作阶段至少分为两个部分：第一，挤压阶段，压臂63与泵管61受挤压部分接触的一面以及此时的泵壳62与泵管61受挤压部分接触的一面应当吻合，从而使泵管61受挤压部分内的反应液挤空；第二，放松阶段，此时泵壳62与泵管61接触部分不是一个面，而是一些突出部(因为此时压臂63与泵壳62挤压面并不吻合)，由于这些突出部的作用，能够将压臂63沿着调压弹簧弹力的反方向抵回去，从而使泵管61处于不受挤压的负压状态，并且迅速在泵壳62旋转进入挤压阶段之前，从进液管66补充反应液，因此，本实施例所述压臂位于泵壳一侧的侧面至少与泵壳部分圆周面(也即挤压阶段时与泵壳62接触的部分圆周面)吻合，以便加液泵6在挤压阶段对泵管61中部进行充分的挤压，当然，为了便于控制电路控制加液泵6，进入挤压阶段和放松阶段的时间比最好是一定的，也即随着泵壳62的转动，泵壳62圆周挤压面是与压臂63挤压面吻合与不吻合有规律的反复进行。

进液管66可以与试剂瓶8连接，也可以与洗液瓶7连接。

综上，本实施例所述的加液泵6能够向加液臂15提供高精度的定量反应液，从而使本实施例所述蛋白免疫印迹检测装置的检测精度大大提高。

另外，针对本实施例所述吸液装置还包括与吸液泵10连接的用于存放从反应装置中吸取的液体的废液瓶9，废液瓶9与吸液管连接，并且在废液瓶9上设置了废液溢流报警装置，以便在废液瓶9中废液达到一定容量时，提醒技术人员技术处理，该废液溢流报警装置与控制电路的控制端连接，从而在废液瓶9中废液达到一定容量时，由控制电路控制吸液泵10停止工作。

吸液泵10由于没有规定定量从反应槽30吸液的要求，因此可以是任何能够抽液的泵，例如，对于本实施例而言，吸液泵10一端与废液瓶9连接，另一端与大气连接，并通过排出废液瓶9中的空气，降低废液瓶9中的气压完成对反应槽30的吸液。

为了使本实施例所述的蛋白免疫印迹检测装置运行的精确度更高，进一步的，移动定位装置还包括用于检测定位座位移的位移传感器，对于本实施例而言，位移传感器包括位于同步带一端的第一传感器23和位于同步带另一端的第二传感器22，第一传感器23和第二传感器22均与控制电路的控制端连接，从而使定位座的移动更加精确。

吸液臂14还设有用于检测吸液臂摆臂电机11转动角度的吸液臂角度传感器141，所述吸液臂角度传感器141与控制电路的控制端连接，从而吸液臂14的转动更加精确(也即吸液咀143的吸液位置更加精确)。

摇摆电机2上设有用于检测摇摆电机2转动角度的摇摆电机传感器18，摇摆传感器18与控制电路的控制端连接，从而使托盘1能够在设定的角度内摇摆，确保反应液不因摇摆角度不当而从反应槽30内甩出。

下面通过对控制电路控制流程的说明来详细的说明下本实施例所述一种蛋白免疫印迹检测装置的具体工作情况。

对于本实施例来说，控制电路通过蛋白印迹系统控制软件的运行来实现对蛋白免疫印迹检测装置的自动控制。

见图7，所述蛋白印迹系统控制软件包括七种流程模式，并在该软件在控制电路上运行时，显示由该七种流程模式组成的主菜单，该七种流程模式包括：A、运行模式；B、编辑模式；C、校准模式；D、自动清洗模式；E、维护检查模式；F、设置模式；G、功能菜单模式，H、I、J、K、L、M分别为相邻流程模式之间的连接点。

技术人员可以在主菜单上，根据实际需要选择合适的模式对蛋白免疫印迹检测装置进行自动操作，为了便于对下面对上述七种模式进行详细介绍，该蛋白印迹系统控制软件所涉及的蛋白免疫印迹检测装置的加液装置包括六个配液泵(加液泵)，孵育盘(托盘)上设有36个孵育槽(反应槽)，孵育盘因检测需要可以分成长(LONG)和短(SHORT)两种类型，同时，该装置还设有隔离罩盖，用以防止灰尘进入孵育盘(托盘)、加液臂、吸液臂以及移动定位装置，并且孵育盘为一次性孵育盘，另外，所涉及的蛋白免疫印迹检测装置还设有在具体流程操作过程中，起提醒作用的蜂鸣器，该蜂鸣器与控制电路连接。

A、运行模式(见图8及图9，H代表上一程序)

在主菜单上选择运行模式后，就进入已编检测项目主菜单，选择需要的已编项目参数，YES键确认，NO键返回(H)，如选择YES键，则进入配液泵垫是否锁紧和配液泵管路是否在瓶内的提示程序，选择NO键返回上一程序(H)，选择YES键进入配液泵管路灌注程序，该灌注程序主要是由蛋白印迹系统控制软件控制配液泵的泵轮转动，从而排除与配液泵相连管路内的空气，并使配液泵输送试剂(该试剂可以是洗液)或反应液液灌满整个管道。

在本实施例中，蛋白印迹系统控制软件控制配液泵的数量为1-6个，每个与配液泵相连管路均需要灌注程序逐一排空灌注，灌注程序界面采用对话方式进行，逐一用YES、NO和[↑][↓]键选择对i(对于本实施例，i为1，2，3，4，5，6中之一)号加液泵是否采取灌注操作，对某个配液泵首次按YES键，配液泵的灌注量为2mL，而再次对同一个配液泵按YES键，配液泵的灌注量为1mL，对于本实施例而言，对与配液泵相连管路进行灌注最多进行两次。

灌注程序结束后就进入孵育盘类型选择程序，所述孵育盘分为长(LONG)和短(SHORT)两种类型，长型孵育盘具有1-36条带(反应槽)，短型孵育盘具有1-30条带(孵育槽)，技术人员可以根据实际需要用[↑][↓]键在孵育盘类型LONG/SHORT程序下选择长型孵育盘类型，按YES键确认。

随后，确定对哪些孵育槽进行检测，即在膜条位置计数起止程序下，输入膜条(孵育槽)的编号，即可根据需要自由设置膜条起止数，其缺省值为01-36，然后在摇床温度设置**℃程序下，用[↑][↓]键选择多达四种可控温度温度，以便在多种温度下，对孵育槽进行检测。

上述设置工作完成后，流程进入开始项目检测程序，按YES键确认，进入放孵育盘程序，这时控制蜂鸣提示操作，技术人员按ALARM操作键关闭蜂鸣，并完成放孵育盘操作。操作完成后，按YES键确认，弹出关闭隔离罩盖程序，按YES键确认，从而可以在检测过程中防止灰尘进入孵育盘、加液臂、吸液臂以及移动定位装置。

然后，进入底物孵育时间变数**MIN程序，如果在编辑项目中有加底物试剂步骤，则有此程序对话，一般根据试剂参数已设置时间参数，但本蛋白印迹系统控制软件在进入该项目后，可临时根据需要改变底物孵育原设置时间变数，按YES键确认。

上述时间变数设定完成之后，进入选择起始步数程序，用[↑][↓]键输入检测起始步数，按YES键确认则进入运行。

见图9，软件进入选择起始步数程序后，按进入步骤设置参数，自动进行加液、排液、孵育、控温等运行，其中******##注入量####uL中，******是步骤##所用的液体名，该液体可以是洗液，去离子水，底物等等，注入量即为这一步骤已设置的分配量；

手动加入膜条及样品##准备步骤中均有提醒功能，即蜂鸣提示打开隔离罩，手动加入膜条或准备样品，按ALARM键关闭蜂鸣；

**##时间##HR##MIN为设置的孵育(反应)时间倒计时，**是步骤名，##为ID号，托盘一般按先前设置的速度摇摆，直至倒计时为零。

该运行模式程序执行一直到n＝n-1至n＝0结束，蜂鸣提示，按ALARM键蜂鸣结束，自动进入自动清洗管路程序(D)。

B、编辑模式(见图10)

从主菜单上(见图7)选择编辑模式，按YES键进入编辑检测项目程序，按NO键进入下一子流程(I)，即校准模式；

按YES键进入编辑检测项目程序，软件需要用方向键输入项目的ID号和项目的名称。ID号长度1-40，项目的名称字长3位，英文26字母为单位，按YES键确认；

进入项目开始的步骤(n＝1)的参数编辑，最多可达1-20步骤编辑，每个步骤可编辑的内容均包括：

选择步骤n通道的名称，可选洗液、样品、结合物1、结合物2、酶二抗、蒸馏水、底物1、印迹液、底物2、去离子水和备用；

软件可设置步骤n的孵育时间，长度为1-99HR1-99MIN，增量1MIN；

软件可设置步骤n的注液分配量，长度为1-3000UL，增量1UL；

软件可设置步骤n的摇床的摇摆速率，从0速、低速、中速和高速四种；

软件可设置步骤n的循环次数，长度为1-9次；

软件可设置步骤n的循环是否要排液；

软件可设置步骤n结束后是否要蜂鸣。

步骤(n＝1)编辑结束后，软件进入下一步骤编辑，按NO键退出编辑，按YES键进入下一步骤编辑。

C、校准模式(见图11)

在主菜单上(见图7)，选择校准模式，按YES键进入校准模式程序，按NO键回到主菜单(J，编辑模式与校准模式的连接点)，该程序有二个功能，一是软件控制配液泵的泵管磨合，二是软件自动校准配液泵的准确度；

进入校准程序后，软件询问是否要磨合，按NO键退出磨合程序并进入较准配液泵量程序，按YES键进入所有配液泵管磨合程序，按NO键进入自选择1-6号配液泵的30min泵管磨合。按YES键进入从i＝1到6配液泵开始泵管磨合；

磨合结束后进入较准配液泵量程序，按NO键进入自选择1-6号配液泵校准量。按YES键进入从i＝1到6配液泵开始校准量；

在校准配液泵量之前，软件需排出管路内空气，首次按YES键，配液泵灌注2mL液体，再次按YES键配液泵灌注1mL液体，按NO键退回灌注配液泵程序；

在灌注配液泵程序，按NO键进入配液泵注入量筒40mL液体程序，按YES键软件自动控制配液泵向量筒以每2mL间隔分20次注入液体；

软件要求以量筒实测量值输入，按YES键确认；

软件要求可选择重测定量，按YES键复测，按NO键进入下一个配液泵的自动校准。

D、自动清洗模式(见图12)

在主菜单中(见图7)，选择自动清洗模式，进入自动清洗管路程序，软件控制配液泵自动清洗管路和浸泡管路，包含排空管路液体；

进入自动清洗管路程序后，有一个选择，即进入回流至原液瓶程序，选择YES键即进入软件控制自动从配液泵i＝1至6开始将管道内残余的液体回流至原液瓶，选择NO键即进入清洗配液泵管路数程序；

在进入清洗配液泵管路数程序选择时，可用上下键选择需清洗的通道数，可从i＝1至6内任选。YES键确认；

在自动清洗前，有一个提示即配液泵管路放入清洁液，YES键确认；

然后，软件自动控制配液泵i＝1至6清洗已选择需清洗的通道管路，每个通道管路清洗1分钟；

每一通道清洗结束后，软件控制清洁液在管路内浸泡5分钟；

随后用去离子水替换清洁液，对以选择需要清洗的管道进行自动清洗和浸泡，所述自动清洗和浸泡与上述自动清洗和浸泡程序一致；

当清洗过程结束后，自动进入清洗液槽程序；

清洗液槽程序结束后，提示移去去离子水，按YES键软件自动将管路内残液排空；

提示脱开配液泵压板，整个清洗完成。

E、维护检查模式(见图13)

在主菜单中(见图7)，选择维护检查模式，维护和检查模式主要是控制对各个运动件的检查和调整，包含对加/吸液位置、配液泵运转、摇床摆动位置、蜂鸣声和摇床平台的温控。

在维护检查模式程序对话框，按YES键进入检查摇床水平位置程序。按YES键后，摇床平台自动运动至水平位置，可按[↓][↑]键调整水平位置，YES键确认；

摇床水平位置检查后，进入运行摇床平台程序。按YES键执行，检查摇床平台摇摆情况；

然后，进入检查加/吸液臂定位，这是要对加/吸液臂的位置进行检查，按YES键先显示孵育盘类型LONG/SHORT，选择孵育盘类型LONG(长)和SHORT(短)，选定后按YES键进入检查加/吸液臂机械零位定位程序对话框，按YES键后，加/吸液臂向右复位(即机械零位)，检查加/吸液臂复位后，按[→][←]键左右调整，YES键确认；

进入检查孵育槽首定位程序对话框，按YES键后，加液臂自动移到摇床平台孵育位首位，检查加液臂中的加液管在孵育槽内中心位置，按[→][←]键左右调整，YES键确认；

孵育槽首位检查后，进入检查吸液臂首定位程序，按YES键后，摇床平台向内倾斜，吸液臂向下移至孵育槽内，检查吸液臂吸口至孵育槽底距离，按[↓][↑]键调整，YES键确认；

随后进入检查孵育槽末定位程序对话，按YES键后，加液臂自动移到摇床平台孵育槽末位，检查加液臂加液管在孵育槽内中心位置，按[→][←]键左右调整，YES键确认；

在孵育槽末位检查后，进入检查吸液臂末定位程序对话框，按YES键后，摇床平台向内倾斜，吸液臂向下移至孵育槽内，检查吸液臂吸口至孵育槽底距离，按[↓][↑]键调整，YES键确认；

进入检查配液泵程序，可逐一顺序检查配液泵运转情况；

进入检查蜂鸣报警程序，按YES键检查蜂鸣，ALARM退出；

进入检查摇床控制温度程序对话框，检查摇床面控制温度，按YES键后，用[↓][↑]键选择25℃、30℃、37℃和室温温度，按YES键执行。

F、设置模式(见图14)

在主菜单中(见图7)，选择设置模式，设置模式主要是对硬件初始化参数恢复、重命名、参数的锁定、检验项目删除等进行操作。

初始化内存内容为软件设置的二个固定项目参数恢复和配液泵名恢复。在初始化内存程序对话框下，按YES键弹出确认初始化内存程序，再次YES键确认，即机内恢复原先出厂设置的全部参数，并显示已初始化，按NO键退出；

随后进入配液泵的数量n程序对话框，该步骤是用来设置机内配液泵的数量的，用[↓][↑]输入数量，例输入5，即配液泵序号1-5可在线工作。输入3，即配液泵序号1-3可在线工作。本机默认值为6。按YES键确认，NO键退出；

在改变配液泵名程序对话框内，可通过设置改变原先配液泵序号和步骤名称的对应设置，进行个性化设置。按YES键进入，弹出配液泵i命名为****程序对话，用[↓][↑]键选择与配液泵对应步骤名称，其余设置操作以此类推。需要注意是在编辑项目时如超出命名，则默认为最后泵名，NO键退出；

在锁定检验项目程序对话框内，如需对某一项目参数要锁定，按YES键进入弹出锁定检验项目名称程序对话框，用[↓][↑]键选择锁定检验项目名称，按YES键确认，可多项锁定。NO键退出；

在解锁检验项目程序对话内，可对锁定的检验项目进行解锁操作，以便修改。按YES键进入弹出解锁检验项目名称程序，用[↓][↑]键选择解锁检验项目名称，按YES键确认执行，可多项解锁，NO键退出；

进入删除检验项目程序，可对已预编的项目进行删除操作，按YES键进入弹出删除全部检验项目，可进行删除全部检验项目。按NO键可进入删除单个检验项目，用[↓][↑]键选择单个检验项目的名程，按YES键执行。NO键退出；

进入设定蜂鸣叫时间程序，可设置蜂鸣时间，用[↓][↑][←][→]键输入，按YES键确认，NO键退至设置模式。

G、功能菜单模式(见图15)

在主菜单中(见图7)，选择功能菜单模式，所述功能菜单模式，主要是对日期、时间设置，查询已编项目参数、插入和删除已编项目中的某步骤和特定实验项目实施。

日期、时间设置，进入设置日期和时间程序对话框，按YES键进入，用[↓][↑][←][→]键输入要设置的日期、时间，NO键退出；

查询已编项目参数，进入查询已编项目参数程序对话框，按YES键进入已编项目清单程序，用[↓][↑]键选择要查询已编项目名称，按YES键确认进入该项目，这时逐行显示各步骤的参数，用YES键翻行，直至结束。在查询过程中，如要中间插入步骤或删除步骤，按NO键进入[1.插入步骤2.删除步骤]操作，其操作见下述：

插入步骤

在查询已编项目参数程序中，要中间插入步骤，可在进入查询已编项目参数程序后，选定某步骤按NO键进入，显示[1.插入步骤2.删除步骤]程序，用[↓][↑]键选择步骤，选择好后即在该步骤下插入新步骤，在程序对话框下编入新步骤的各个参数，并且可插入多步骤，插入新步骤后，原步骤以下步骤序号自动+1。当显示插入步骤结束程序对话，按YES键退入[1.插入步骤2.删除步骤]程序，用[↓][↑]键重新选择；

其中，步骤n******表示选择步骤n所用的液体******，可选样品或配液名；

步骤n******时间##HR##MIN表示设置步骤n的孵育时间；

步骤n******分配量####uL中的分配量即为步骤n所用液体的注入量；

步骤n******摇床速度**中摇床速度可选零速(不摇)，低速，中速，高速；

步骤n******循环次数#中循环运行次数可选1-9。

删除步骤(见图16)

在[1.插入步骤2.删除步骤]程序下，按YES键选择删除步骤(即h)，显示以下步骤删除程序，按YES键，将该项目内这一步以下步骤(含这一步)全部删除。按NO键，进入这一步骤删除程序，按YES键，将该步骤删除。该步骤以下原步骤序号自动-1。

如果在查询已编项目参数程序对话框中按NO键，则进入用于检查各配液泵的加液精度的实验程序步骤(见图16)。

在实验程序程序下，按YES键进入精密度准确度实验程序，选择YES，软件进入配液泵加液精密度准确度检查，软件输入检查配液泵的号码，软件提示是否要灌注，以清空管路内的空气，首按YES键，灌注2mL的试剂，以后按YES键灌注1mL的试剂，直至灌满。退出灌注，软件进入[配液泵注入量筒2mL]程序，将测量的量筒放在出液口，按YES键，这是软件通过配液泵自动注入量筒2mL试剂，测量实测值，将实测值直接通过输入装置输入软件，软件自动将实测值计算，生成修正值，在重测，直至调整符合要求。上述软件调整完成后，软件可进入精密度准确度测试程序，按YES键，可输送2mL试剂进入量筒测量，连按11次，可得到11个数据，作为精密度准确度测试。

本蛋白印迹系统控制软件具有如下优点：

操作界面采用全中文化人机对话方式，界面友好易操作；温控方式采用模糊控制技术，温控精度好；

可对控制硬件的参数进行软件自动校正，操控自由度好；

大存储量，永久储存；

编程的工步骤宽，可满足蛋白印迹各种要求；

软件具有自检功能；

软件可自由插入和调整工步骤参数及锁定和解锁各种工步骤参数。

Claims (18)

1.一种蛋白印迹检测装置，包括反应装置、向反应装置加液的加液装置以及从反应装置中吸液的吸液装置，其特征在于所述蛋白印迹检测装置还包括控制反应装置、加液装置及吸液装置的控制电路，反应装置、加液装置及吸液装置均与控制电路连接，控制电路依照写入的控制程序分别控制反应装置、加液装置及吸液装置工作。

2.根据权利要求1所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述加液装置包括加液臂和安装在加液臂上的加液管，加液装置通过加液管向反应装置加液，所述吸液装置包括吸液臂和安装在吸液臂上的吸液管，吸液装置通过吸液管从反应装置中吸液，反应装置包括反应槽，所述蛋白印迹检测装置还包括将加液装置的加液管及吸液装置的吸液管移动至反应槽上的移动定位装置，移动定位装置与加液装置的加液臂、吸液装置的吸液臂以及控制电路的控制端连接。

3.根据权利要求2所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述移动定位装置包括定位座、同步带机构、带动同步带机构移动的移动电机，加液臂及吸液臂设置在定位座上，定位座固定在同步带上，移动电机与同步带机构及控制电路的控制端连接。

4.根据权利要求3所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述移动定位装置还包括与加液装置的加液臂及吸液装置的吸液臂移动方向平行的滑轴，吸液臂上设有供滑轴穿过的吸液臂轴孔，加液臂上设有供滑轴穿过的加液臂轴孔，吸液臂和加液臂套在所述的滑轴上。

5.根据权利要求4所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述吸液装置还包括一与吸液臂连接的摆动机构，所述的摆动机构使吸液臂绕吸液臂轴孔摆动，所述的摆动机构包括吸液臂摆臂电机，所述吸液臂摆臂电机的输出轴与吸液臂连接，同时还与控制电路得控制端连接。

6.根据权利要求2或3或4或5所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于加液臂与吸液臂相邻设置。

7.根据权利要求2或3或4或5所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述反应装置还包括设置在反应槽下用以托住反应槽的托盘，设置在托盘下的支撑支架、摇摆电机以及摇摆机构，摇摆电机通过摇摆机构与支撑支架连接，摇摆电机与控制电路的控制端连接。

8.根据权利要求7所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述摇摆机构包括一端与摇摆电机输出轴连接的偏心摇摆机构。

9.根据权利要求7所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述反应装置还包括设置在托盘上对反应槽进行加热的加热装置，加热装置与控制电路的控制端连接。

10.根据权利要求2或3或4或5所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述加液装置包括与加液管连接的加液泵，加液泵与控制电路的控制端连接。

11.根据权利要求2或3或4或5所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述吸液装置包括与吸液管连接的吸液泵，吸液泵与控制电路的控制端连接。

12.根据权利要求10所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述加液泵包括加液泵电机、与加液泵电机的输出轴连接的泵轮、用于容纳所述泵轮的泵壳、进液口、出液口、泵管、泵管固定座、用于固定加液泵电机及泵管固定座的安装板，泵管固定座位于所述泵壳的上方，所述加液管包括进液管及出液管，泵管一端通过进液口与进液管连接，另一端通过出液口与出液管连接，所述加液泵还包括通过泵壳向泵管挤压的挤压装置，所述加液泵电机与控制电路的控制端连接。

13.根据权利要求12所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述挤压装置包括压臂与调压机构，至少部分泵管位于泵壳与压臂之间，所述调压机构包括调压螺栓、旋在所述调压螺栓上的调压螺母以及套在调压螺栓上的调压弹簧，调压螺栓的螺栓脚铰接在安装板上的；所述压臂的一端通过铰轴与安装板活动连接，另一端设置有容调压螺栓穿过的叉口，调压螺母位于所述叉口的下方，用于将所述叉口向泵壳方向夹持，调压弹簧位于调压螺母和调压螺栓的螺栓头之间。

14.根据权利要求13所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述压臂位于泵壳一侧的侧面至少与泵壳部分圆周面吻合。

15.根据权利要求1或2或3或4或5所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述吸液装置包括废液瓶，废液瓶与吸液管连接，废液瓶上设有废液溢流报警装置，所述废液溢流报警装置与控制电路的控制端连接。

16.根据权利要求3或4或5所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述移动定位装置还包括用于检测定位座位移的位移传感器，位移传感器与控制电路的控制端连接。

17.根据权利要求4或5所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于所述吸液臂还设有用于检测吸液臂摆臂电机转动角度的吸液臂角度传感器，所述吸液臂角度传感器与控制电路的控制端连接。

18.根据权利要求7所述的一种蛋白印迹检测装置，其特征在于摇摆电机上设有用于检测摇摆电机转动角度的摇摆电机传感器，摇摆传感器与控制电路的控制端连接。

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