CN101780212B - 一种治疗冠心病心绞痛的无糖型中药口服液的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗冠心病心绞痛的无糖型口服液的制备方法。为克服传统矫味工艺制备无糖型口服液的的不足，本发明采用β—环糊精包合技术进行矫味，开发出了无糖型口服液规格，实现了包合技术应用于中药口服液生产过程的产业化，改善了制剂的口感，提高了患者用药的依从性，确保了产品临床疗效，同时通过包合物的形成增加了低极性有效成分的水溶性，提高了制剂质量的稳定性。

Description

一种治疗冠心病心绞痛的无糖型中药口服液的制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种治疗冠心病心绞痛的无糖型中药口服液的制备方法。

背景技术

冠心病心绞痛是一种由心肌暂时缺血缺氧所引起的，以发作性胸痛或胸部不适为主要表现的临床综合征症。心绞痛常发生于劳力、情绪激动或其它因素使心肌耗氧量增加时，心绞痛发作时心电图常可见暂时性ST段改变或伴有T波变化，冠脉造影可见冠状动脉管腔狭窄。

冠心病是临床上最常见的心脏病，发病率为3～4％，其死亡率占心血管病死亡的20％左右。随着国民工作生活节奏的加快，膳食结构及生活习惯的不合理等因素的影响，该病发病率呈逐年上升趋势，成为危害人类健康的重大疾病。冠心病心绞痛药物治疗的目的为终止和预防心绞痛发作。药物治疗的途径有：(1)增加心肌血流量。包括扩张冠状动脉，促进侧支循环，减慢心率而延长舒张时间使冠状动脉灌注时间增加。(2)减低心肌耗氧量。包括减低心肌收缩力，降低心率，降低收缩的前后负荷。冠状动脉固定狭窄和心肌耗氧量增加为主要原因引发的心绞痛，治疗以减少心肌耗氧量为主；冠状动脉痉挛基础上发生的心绞痛，治疗则以增加冠脉血流量为主。

目前临床用于治疗心绞痛应用最广泛的三大类药物有硝酸酯类、β-肾上腺素能受体阻滞剂和钙离子拮抗剂。

1、硝酸酯类：硝酸酯类药物治疗心绞痛的主要机制为减少静脉回心血量，降低前负荷，减少心室容积，降低室壁张力，而降低心肌耗氧量；选择性扩张冠状动脉；使心肌缺血部位血流再分布。

2、β-受体阻滞剂：β-受体阻滞剂的抗心绞痛作用是通过减慢心率、减弱心肌收缩力，从而减低心肌耗氧量。

3、钙离子拮抗剂：钙离子拮抗剂的抗心绞痛作用是扩张冠状动脉，解除冠脉痉挛，增加心肌供血，扩张外周血管，减轻心脏负荷，抑制心肌收缩，减少心肌耗氧。

冠心病心绞痛，其临床表现与中医心阳不振、气滞血瘀等引起的症状极为相似。因此中医把它归属于“胸痹”、“心痛”、“厥心痛”、“真心痛”等范畴。本病多因中老年脏腑功能渐衰，膏粱厚味损伤脾胃，或七情内伤所致气滞、血瘀、痰浊内生，使脉络不通，不通则痛而发病。《金匮要略.胸痹心痛短气病脉证治》认为：“胸痹”的主要表现为胸中气塞，心痛，短气，其病理关键为胸部的“阳气”极虚所致；故临床上往往表现出本虚标实之病证。本虚以脏气亏虚为主；标实以血瘀痰阻为多见。脏气亏虚以心气虚为主。心气虚可进而导致心阳不足，阳气亏损，鼓动无力，清阳失展，血行滞涩，不通则痛。心痛病位在心，其本在肾。肾为先天之本，心肾二脏以经络相连。肾阴不足，不能上济于心，阴虚生内热，热结于里，熬煎血液而成瘀滞，阻于心脉，心失所养，而致心痛；肾阳不足，心失温煦，亦可致心阳不足，鼓动无力，而成瘀滞。血瘀痰阻，又以血瘀为多见，因寒凝、热结、痰阻、气滞、气虚等因素皆可致血脉郁滞，而为瘀证，血瘀停着不散，心脉不通，故疼痛如刺如绞而痛处不移。

心通口服液是治疗冠心病心绞痛的的三类中成药，其中国发明专利ZL200410057369.2已获得授权，具有益气养阴，化痰通络之功能。用于胸痹气虚、痰瘀交阻证，心痛、心悸、胸闷气短、心烦乏力、脉沉细、弦滑、结代；冠心病心绞痛见上述症状者。其组方以益气养阴为主，方中首选补气药黄芪为君药，黄芪甘温纯阳，补诸虚不足，益元气，壮脾胃；脾为生化之源，肺主一身之气，脾肺气虚则出现食少便溏，气短乏力等症，故黄芪主用于补脾肺气虚或中气下陷；党参、丹参、当归三味用作臣药，党参用于中气不足所产生的四肢倦怠，与黄芪配伍以增强补气之功。丹参以祛瘀养血用于多种瘀血为患或血行不畅的病症；当归既能补血活血又善止痛，与黄芪配伍以增强养心血而止痛之功效。麦冬养阴生津用于清心除烦安神；何首乌补益精血而养阴；葛根与淫羊藿补肾阳以济心火，并能助黄芪的升阳作用；海藻、昆布、牡蛎与枳实用以化痰软坚和行气；皂角刺以活血助当归、丹参的活血养阴之功；上述麦冬等八味药均用为佐药。本方配伍偏温，以温通阳气为首，主用于阴沉阳痿具结气，故以益气，养阴，软坚而散结气以利气血畅达而止痛。上述诸药配伍，功效益彰，共奏益气养阴，软坚化痰，祛瘀通络缓急止痛之奇效。

心通口服液现有制剂规格仅有含糖型，没有无糖型，这给临床上同时患有糖尿病的患者使用该药物带来一些不利影响，为更好地服务临床，开发临床用药对象，亟待开发无糖型心通口服液。但研究过程中发现无糖型制剂如不矫味其口感很差，令患者难以接受，而使用普通矫味剂存在以下缺点：

1)只能增加甜度，不能改善处方中海产药材带来的异味；

2)甜菊素的用量稍微增加就会带来后苦重的味感；

3)其他化学合成的低热量矫味剂如环拉酸钠、阿司帕坦等存在矫味效果差且存在一定的安全隐患，且阿司帕坦存在灭菌降解而导致甜度降低、降解物对人体有害等问题。

这些问题直接影响到病人用药依从性和临床用药安全，因此，有必要开发一种更有效、更安全的矫味工艺方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗冠心病心绞痛的无糖型中药口服液的制备方法，其中的无糖型中药口服液在本说明书中也称为无糖型心通口服液。心通口服液中含有的糖对于临床中一些同时患有冠心病心绞痛和糖尿病患者的使用带来不便。为克服以上矫味工艺的不足，本发明人通过实验研究，对原有规格的心通口服液进行改进，不再添加蔗糖等矫味剂矫味，而采用环糊精包合技术进行矫味，开发出无糖型口服液，实现了包合技术应用于中药口服液生产过程的产业化。本发明改善了心痛口服液口感，提高了患者用药的依从性，同时通过包合物的形成增加了低极性有效成分的水溶性，提高了制剂的稳定性。

本发明的无糖型心通口服液是对ZL1200410057369.2专利的进一步改进，所以该专利的部分内容被引用于本发明技术方案。

本发明涉及的一种治疗冠心病心绞痛的无糖型口服液的制备方法，它是这样实现的。

A、浓缩提取工艺(参考“心通口服液”处方专利，专利号ZL1200410057369.2)：

葛根、丹参采用醇提法，加4-12倍量40-80％的醇回流1-3次，每次0.5-3小时，滤过，合并乙醇液另存；药渣拌入其余党参等十一味粗块中，加4-12倍量水，煎1-3次，分别煎煮0.5-3小时，合并煎煮液，滤液减压浓缩至相对密度在60℃条件下为1.01-1.4成清膏；与醇回流液合并，加乙醇使含醇量达40-80％，冷藏24-48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度在60℃条件下为1.1-1.5，加入5倍量纯化水搅拌均匀得水提液。

其中，原料药的重量比为：

黄芪13-52份、党参7-28份、麦冬5-20份、何首乌4-16份、淫羊藿4-16份、葛根11-44份、当归4-16份、丹参7-30份、皂角刺4-16份、海藻7-28份、昆布7-28份、牡蛎7-28份、枳实2-8份。

优选为：

黄芪17-39份、党参9-21份、麦冬6-15份、何首乌5-12份、淫羊藿5-12份、葛根15-33份、当归5-12份、丹参10-23份、皂角刺5-12份、海藻9-21份、昆布9-21份、牡蛎9-21份、枳实3-6份。

优选为：

21-32份、党参11-17份、麦冬8-12份、何首乌6-10份、淫羊藿6-10份、葛根18-26份、当归6-10份、丹参12-18份、皂角刺6-10份、海藻11-17份、昆布11-17份、牡蛎11-17份、枳实3-5份。

最优为：

芪26份、党参14份、麦冬10份、何首乌8份、淫羊藿8份、葛根22份、当归8份、丹参15份、皂角刺8份、海藻14份、昆布14份、牡蛎14份、枳实4份。

B、制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入0.5％-6.0％(g/ml)的β-环糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

其中，制剂工艺中的矫味包合所用的包合材料可以是环糊精及其衍生物中的任何一种，包括α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精等，优选β-环糊精。

β-环糊精的优选的重量/体积比为0.5％--6.0％。

本发明无糖型心通口服液的制备方法可以采用现有环糊精及其衍生物包合技术中的任一种，优选用价廉易得的、已有国家药用标准的药用β-环糊精(中国药典2005年版已收载)进行包合，经试验验证其可操作性强、效果显著、产品质量稳定。

本发明优选β-环糊精包合技术进行包合矫味，β-环糊精具有上宽下窄中空的环筒状空间结构，分子中的伯羟基(6-OH)位于环筒窄边处，仲羟基(2-、3-OH)位于宽边处，环筒外部分布的这些羟基为亲水性基团；环筒内部由碳-氢键和醚键构成，是一个具有一定尺寸的手性疏水亲油性空腔。由于这种特殊结构，β-环糊精作为主体，能将大小和形状适合的疏水性药物分子或官能团作为客体分子嵌入其筒状空腔中而形成一种单分子包合物，所以也称其为“分子微囊”或“超微囊”。

β-环糊精具有稳定的晶体结构，为白色结晶性粉末。熔点介于240～250℃，含有7个葡萄糖残基单位，筒状空腔内径0.6～0.65nm，较利于包合，25℃时水溶解度为1.85％(w/v)，对强酸较不稳定，对碱、热和机械作用都相当稳定。

β-环糊精主体分子的环形筒状空腔内径与被包合的药物客体分子尺寸大小相当时，可形成稳定的包合物，主、客体分子之间不发生化学反应，不存在化学键的作用，包合物的形成主要取决于主体分子与客体分子两者的立体结构和两者的极性，包合作用是一种物理过程，包合物的稳定性依赖于主、客体分子间的范德华力强弱，客体分子全部或部分嵌入β-环糊精分子空腔内，且不影响β-环糊精的分子骨架。包合物在水中溶解时，整个包合物被水分子包围并溶剂化。利用β-环糊精的包合特性，可以增加难溶性药物的溶解度和溶解速率，提高药物生物利用度，增加药物的稳定性，降低药物的毒副作用及不良刺激等。

本发明利用β-环糊精包合技术制备无糖型心通口服液的优点是：

A β-环糊精由天然淀粉经酶解制得，无化学残留污染，无毒，使用安全；

B β-环糊精尽管是碳水化合物，但其体内代谢慢，不会导致服用者服用后血糖快速上升，包合物具有超微结构，呈分子状态存在，在制剂中分散效果好，服用后药物易于吸收，进入机体后断链开环成直链低聚糖，能被人体吸收利用，体内代谢完全，不产生蓄积，使用安全；

C β-环糊精环筒状结构大小适宜于多种分子结构的化合物包合，与药物中成分包合是一种物理过程，不发生化学反应，使药物成分仍保持原有性质和作用，形成包合物后，在一定程度上切断了药物分子与周围环境的接触，避免受光、氧以及水解条件的影响，提高药物的稳定性，并能减少挥发性药物的逸失，延长药效和保质期；

D β-环糊精的药用级产品价廉易得，中国药典2005年版已收载，符合当前国家药政部门关于药用辅料的使用规定。

E β-环糊精矫味口感纯正，药液密度增加不明显，凉爽感强，特别是对海产品提取带来的异味掩蔽效果明显，优于一般甜味剂、增稠剂、香精的矫味效果。

具体的实施方式

现通过以下具体实施例详细阐述本发明，但本发明的范围并不仅限于此，本领域普通技术人员显而易见的改变或修饰也包含在本发明范围之内。

实施例1：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根22份、丹参15份用8倍量70％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根22份、丹参15份醇提后的药渣与黄芪26份、党参14份、麦冬10份、何首乌8份、淫羊藿8份、当归8份、皂角刺8份、海藻14份、昆布14份、牡蛎14份、枳实4份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达65％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量0.5％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例2：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根11份、丹参7份用8倍量40％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根11份、丹参7份醇提后的药渣与黄芪13份、党参7份、麦冬5份、何首乌4份、淫羊藿4份、当归4份、皂角刺4份、海藻7份、昆布7份、牡蛎7份、枳实2份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达40％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量1.0％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例3：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根44份、丹参30份用8倍量80％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根44份、丹参30份醇提后的药渣与黄芪52份、党参28份、麦冬20份、何首乌16份、淫羊藿16份、当归16份、皂角刺16份、海藻28份、昆布28份、牡蛎28份、枳实8份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达80％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量1.5％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例4：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根15份、丹参10份用8倍量50％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根15份、丹参10份醇提后的药渣与黄芪17份、党参9份、麦冬6份、何首乌5份、淫羊藿5份、当归5份、皂角刺5份、海藻9份、昆布9份、牡蛎9份、枳实3份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达50％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量2.0％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例5：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根33份、丹参23份用8倍量60％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根33份、丹参23份醇提后的药渣与黄芪39份、党参21份、麦冬15份、何首乌12份、淫羊藿12份、当归12份、皂角刺12份、海藻21份、昆布21份、牡蛎21份、枳实6份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达60％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量2.5％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例6：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根18份、丹参12份用8倍量70％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根18份、丹参12份醇提后的药渣与黄芪21份、党参11份、麦冬8份、何首乌6份、淫羊藿6份、当归6份、皂角刺6份、海藻11份、昆布11份、牡蛎11份、枳实3份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达70％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量3.0％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例7：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根26份、丹参18份用8倍量75％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根26份、丹参18份醇提后的药渣与黄芪32份、党参17份、麦冬12份、何首乌10份、淫羊藿10份、当归10份、皂角刺10份、海藻17份、昆布17份、牡蛎17份、枳实5份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达65％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量3.5％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例8：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根26份、丹参18份用8倍量65％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根26份、丹参18份醇提后的药渣与黄芪32份、党参17份、麦冬12份、何首乌10份、淫羊藿10份、当归10份、皂角刺10份、海藻17份、昆布17份、牡蛎17份、枳实5份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达55％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量4.0％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例9：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根18份、丹参12份用8倍量55％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根18份、丹参12份醇提后的药渣与黄芪21份、党参11份、麦冬8份、何首乌6份、淫羊藿6份、当归6份、皂角刺6份、海藻11份、昆布11份、牡蛎11份、枳实3份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达60％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量4.5％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例10：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根22份、丹参15份用8倍量45％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根22份、丹参15份醇提后的药渣与黄芪26份、党参14份、麦冬10份、何首乌8份、淫羊藿8份、当归8份、皂角刺8份、海藻14份、昆布14份、牡蛎14份、枳实4份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达70％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量5.0％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例11：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根22份、丹参15份用8倍量65％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根22份、丹参15份醇提后的药渣与黄芪26份、党参14份、麦冬10份、何首乌8份、淫羊藿8份、当归8份、皂角刺8份、海藻14份、昆布14份、牡蛎14份、枳实4份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达75％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量5.5％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例12：无糖型心通口服液的制备

A提取浓缩工艺：

将葛根22份、丹参15份用8倍量75％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，得醇提液；

将葛根22份、丹参15份醇提后的药渣与黄芪26份、党参14份、麦冬10份、何首乌8份、淫羊藿8份、当归8份、皂角刺8份、海藻14份、昆布14份、牡蛎14份、枳实4份一起加入8倍量水，煎煮2次，分别煎煮2.0小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)的清膏；与葛根、丹参的醇提液合并，加乙醇使含醇量达75％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20(60℃)，加入5倍量纯化水，冷沉，得水提液；

B制剂工艺：

将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，加入配制总量6.0％(g/ml)的β-环状糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例13：本发明心通口服液与原工艺心通口服液的药效学试验对比

本发明药物治疗冠心病、心绞痛和高血脂，具有确切的疗效，为表明本发明药物与原含糖型规格在治疗冠心病、心绞痛和高血脂疾病方面具有更好或同样的效果，我们做了一些对比实验研究，用于进一步说明本发明。

受试药物：

本发明心通口服液，由鲁南厚普制药有限公司实验室制备提供。

含糖型心通口服液(原工艺心通口服液)，由鲁南厚普制药有限公司提供受试动物：

雄性大白鼠为Wistar种，山东新时代药业药理中心提供

雄性SD大鼠，山东新时代药业药理中心提供

雌性昆明种小鼠，山东新时代药业药理中心提供

雄性日本鹌鹑(Coturnit，Coturnix，Japonia)，青岛种禽场提供。

方法与结果

一、对小鼠常压耐缺氧的影响

按照常压耐缺氧试验法，取健康昆明雌性小鼠90只，体重(20±2)克，随机分为三组，由腹腔注射药物，本发明组无糖型心通口服液(1g生药/ml)剂量为12ml/kg，原工艺组含糖型心通口服液(1g生药/ml)剂量为12ml/kg，对照组注射同体积生理盐水，各组在注射后30分钟后开始实验，将每只小鼠放入150ml密闭广口瓶内(瓶内装有5克钠石灰)，将瓶密闭，立即开动秒表，记录每只小鼠的呼吸停止时间，最后将各组动物的呼吸停止时间进行统计学处理，结果详见表1：

表1  本发明无糖型心通口服液和原含糖型心通口服液对小鼠常压耐缺氧能力的影响

^*与对照组比较，P＜0.01；

结果表明，本发明无糖型心通口服液组与含糖型心通口服液两个剂量组与生理盐水对照组相比具有显著性差异，本发明组与原工艺组比较无显著性差异，说明两组均能显著延长小鼠在常压缺氧条件下的存活时间。

二、对大鼠心肌细胞搏动时间的影响

用直立显微镜，通过(TVC)TK-10视频摄象机和TM-9060系统监视心肌单细胞的搏动。从Wistar乳鼠心脏分离提取心肌细胞，在无菌条件下用PBS洗净，用0.06％胰蛋白酶消化7min，一共四次，在1000转/min×10min，去掉上清夜，用PBS洗一次，然后放入盖玻片上，3小时后加入培养基，放置CO₂培养箱中，48小时后取出，以M199加10％小牛血清为培养基，在盖玻片上培养，实验时将站拊有心肌细胞的盖玻片倒置复在特制小室的观察孔上，并将周围环境温度维持在37℃。

培养液配方：NaCl 4.09g，KCl 0.209g，NaHCO₃ 0.15g，0.2MBS(PH7.4)37.5ml，葡萄糖0.99g，配成500ml，本发明无糖型心通口服液(1g生药/ml)，稀释成50mg/ml备用。

取培养3-7天的心肌细胞盖玻片30片，10片为一组，用恒流泵抽入相当于每毫升含50mg生药量的本发明无糖型心通口服液(药液配制在营养液中)，对照组用营养液，阳性对照组用稀释每毫升含50mg生药量的含糖型心通口服液，每隔10分钟观察其搏动频率，记录其停搏时间(min)，用t检验进行统计，结果如表2所示：

表2  本发明无糖型心通口服液对大鼠心肌停搏时间的影响(X±SD)

^*与对照组比较，P＜0.01；

结果表明，本发明无糖型心通口服液、原含糖型心通口服液与生理盐水组比较有显著性差异，本发明无糖型心通口服液和原含糖型心通口服液组间无明显差异，说明两组均能延长心肌细胞的搏动时间，能延长心肌细胞在缺氧小室充满溶液后与外界空气隔绝情况下的搏动时间，提示本发明无糖型心通口服液能在降低心肌氧消耗量的前提下，有效延长心脏跳动。

三、大鼠血小板聚集试验

1、体外试验：Wistar大鼠15只，雄性体重200-250g，分成三组，生理盐水组，含糖型心通口服液和本发明无糖型心通口服液组，每组5只，戊巴比妥钠麻醉后，腹主动脉取血以9∶1肝素抗凝素制备富血小板血浆(PRP)，贫血小板血浆(PPP)，按比浊法测定血小板聚集程度，样品均作复管，取平均值。以等量的缓冲液或药液作对照管。药液容量为5μl、10μl、20μl加入血浆中ADP用0.2M磷酸缓冲溶液稀释，吸6.5μl加入测定杯中终浓度为3μm，描记光密度曲线，以曲线下降幅度计算最大聚集率。

实验结果：含糖型心通口服液和本发明无糖型心通口服液无论5μl、10μl、20μl均明显抑制ADP(3UM)诱导血小板凝聚，并具有量效关系，与生理盐水组比较，经统计学处理差异均非常显著(P＜0.01)，含糖型心通口服液组抑制聚集50％的浓度(LD50)为6.5mg/ml，本发明无糖型心通口服液为6.5mg/ml，当ADP诱导血小板聚集后再分别加入两药，均能使聚集的血小板解聚，表明两药均有明显解聚作用(P＜0.05)。

2、体内试验：

灌胃给药，雄性Wistar大鼠30只分三组，每组10只，给药前禁食24小时，第一次灌服本发明无糖型心通口服液(6g生药/kg)与含糖型心通口服液(6g生药/kg)，与生理盐水对照组，隔1.5小时再给同剂量的药液，1.5小时后取血，观察药物对ADP诱导血小板的最大聚集率和聚集抑制率。

实验结果：生理盐水对照组的血小板聚集率为84％，本发明无糖型心通口服液组血小板聚集率为67.9％，含糖型心通口服液血小板聚集率为68％，抑制聚集率本发明无糖型心通口服液为19％，含糖型心通口服液为20％。统计学分析得知本发明无糖型心通口服液组和含糖型心通口服液组两组间血小板聚集率无显著性差异(P＞0.05)，两组对于生理盐水对照组均有显性著性差异(P＜0.01)，说明本发明无糖型心通口服液组和含糖型心通口服液组均有很好的抑制血小板聚集作用。

四、对大鼠高血脂症的影响

选体重(200±20)克雄性健康SD大鼠40只，观察一周后随机分为四组，每组10只。

模型对照组：给予高脂饲料，同体积生理盐水灌胃。

空白对照组：给予普通饲料，同体积生理盐水灌胃。

本发明组：给予高脂饲料，灌胃本发明无糖型心通口服液6ml/kg/d。

原工艺组：给予高脂饲料，灌胃含糖型心通口服液6ml/kg/d。

分组后除空白对照组外开始喂高脂饲料，同时灌胃给药，每日一次，于第14天连续给药(12小时给药一次)2次后禁食12小时，戊巴比妥钠腹腔麻醉，腹主动脉取血，酶法测定血清总胆固醇(CH)，高密度脂蛋白(HDL-C)，乙酰丙酮显色法，测定甘油三脂(TG)进行统计学处理，结果如表3、4所示：

表3  本发明无糖型心通口服液对实验性高血脂症大鼠血清CH值及TG的影响(X±SD)

^*与模型对照组比较P＜0.01.^#与原工艺组比较，P＜0.05.

表4  本发明无糖型心通口服液对实验性高血脂症大鼠血清HDL-C值的影响(X±SD)

^*与模型对照组比较P＜0.01；^#与原工艺组比较，P＜0.05.

实验结果表明：本发明无糖型心通口服液组、原工艺含糖型心通口服液组均能显著降低高血脂大鼠的CH、TG值，和模型组比较有显著性差异(P＜0.01)，还能明显升高HDL-C值，和模型组比较有显著性差异(P＜0.01)，本发明组和原工艺组在降低大鼠TG值方面表现出了一定的趋势，但受实验动物数量的限制，没有统计学意义，在降低血清CH和升高HDL-C值这两个指标上、本发明意想不到的好于原工艺组(P＜0.05).

五、本发明无糖型心通口服液对实验性鹌鹑动脉硬化的影响

选用8周龄，体重(105±10)g，雄性日本实验性鹌鹑120只观察一周后，按体重随机分为4组，每组30只。

模型对照组：给予高脂饲料，同体积生理盐水灌胃。

空白对照组：给予普通饲料，同体积生理盐水灌胃。

本发明组：给予高脂饲料，灌胃本发明无糖型心通口服液6ml/kg/d(1g生药/ml)。

原工艺组：给予高脂饲料，灌胃含糖型心通口服液6ml/kg/d(1g生药/ml)。

每组再随机分为2个小组，其中一小组20只，供测血脂用，另一小组10只，供作病理学检查用。分别每10只饲养于1个不锈钢笼中，室温在18-24℃每日光照12小时，并给予足量的饮水及饲料。

实验期间各组动物活动正常，体重无明显差异。各组分别灌胃给药8周后，禁食10小时，右侧颈动脉取血测血脂，断头处死动物后，取主动脉及左、右头肩干动脉，10％福尔马林液固定，作病理检查，并进行统计学处理。

动脉病理学检查：

肉眼观察：

空白对照组动物动脉内膜光华，苏丹III染色着色极浅，无明显血块形成；模型对照组动物动脉内膜粗糙，苏丹III染色可见大量的脂点，脂纹、脂班，斑块发生率为90％，大斑块多分布于主动脉及左、右臂干动脉根部；本发明组动物动脉内膜染色轻，有较多脂点、脂纹，斑块发生率为49％且斑块较小；原工艺组动物动脉内膜染色轻，有较多脂点、脂纹，斑块发生率为51％且斑块较小。

光镜观察：

空白对照组动物动脉内皮完整，中膜平滑肌排列规整。模型对照组动物动脉壁内皮脱落，内膜明显增厚，可见大量泡沫细胞，中膜平滑肌细胞排列絮乱，中膜纤维组织大量增生，大多动物动脉形成突出于内表面的斑块，发生了粥样变化；本发明组动物动脉病变较轻，无明显管内斑块，内皮细胞部分脱落，内膜轻度增厚，可见少量散在的泡沫细胞，中层平滑肌细胞排列尚清楚，有较多增生纤维组织；原工艺组动物动脉病变较轻，无明显管内斑块，内皮细胞有部分脱落，存在少量散在的泡沫细胞，中层平滑肌细胞排列基本清楚，有较多增生纤维组织。

结果表明，本发明无糖型心通口服液组与原工艺含糖型心通口服液组能明显降低高血脂模型的CH和TG值，升高HDL-C值，并可明显降低动脉粥样硬化斑块的发生率，保护动脉内膜。

实施例14本发明无糖型心通口服液与原工艺含糖型心通口服液口味对比

实验方法：

选择14名健康受试者，其中8男6女，采用交叉设计，试验前对志愿者讲明试验目的和意义，但受试者不知实验组样品情况，尽量避免受试者主观差异。试验分为本发明无糖型心通口服液组，每支10ml，原工艺含糖型心通口服液组，每支10ml，每名志愿者随机先后服用本发明组和原工艺组各一支，记录每名志愿者的服用感受，考察指标为对口味的接受程度(分为易于接受、能接受、难接受)。

表5  健康志愿者服用后口味和结合程度对比

^*和原工艺组比较P＜0.05.

由表5可知，健康受试者对于本发明组接受程度显著优于原工艺组。

Claims (2)

1.一种治疗冠心病心绞痛的中药口服液的制备方法，它包括下列步骤：

A 提取浓缩工艺：

将葛根、丹参用8倍量的70%乙醇回流提取2次,每次2小时，滤过，合并醇提取液，另存；

将葛根、丹参醇提后的药渣与黄芪、党参、麦冬、何首乌、淫羊藿、当归、皂角刺、海藻、昆布、牡蛎、枳实一起加8倍量的水煎煮2次，每次2小时，合并水提取液，滤液减压浓缩至相对密度在60℃条件下为1.2的清膏；加入葛根、丹参的醇提取液，补加乙醇使含醇量达65%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度在60℃条件下为1.2，加入5倍量纯化水搅拌均匀得水提液；

B 制剂工艺：

将水提液过滤，每100ml滤液中加入1g活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0-7.5，每100 ml药液中加入0.5-6.0g β-环糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得；

其中，原料药的重量比为：黄芪13-52份、党参7-28份、麦冬5-20份、何首乌4-16份、淫羊藿4-16份、葛根11-44份、当归4-16份、丹参7-30份、皂角刺4-16份、海藻7-28份、昆布7-28份、牡蛎7-28份、枳实2-8份。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，该口服液的原料药的重量比为黄芪17-39份、党参9-21份、麦冬6-15份、何首乌5-12份、淫羊藿5-12份、葛根15-33份、当归5-12份、丹参10-23份、皂角刺5-12份、海藻9-21份、昆布9-21份、牡蛎9-21份、枳实3-6份。

3、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，该口服液的原料药的重量比为黄芪21-32份、党参11-17份、麦冬8-12份、何首乌6-10份、淫羊藿6-10份、葛根18-26份、当归6-10份、丹参12-18份、皂角刺6-10份、海藻11-17份、昆布11-17份、牡蛎11-17份、枳实3-5份。

4、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，该口服液的原料药的重量比为黄芪26份、党参14份、麦冬10份、何首乌8份、淫羊藿8份、葛根22份、当归8份、丹参15份、皂角刺8份、海藻14份、昆布14份、牡蛎14份、枳实4份。