CN101776608B - 适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法 - Google Patents
适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101776608B CN101776608B CN2009101145030A CN200910114503A CN101776608B CN 101776608 B CN101776608 B CN 101776608B CN 2009101145030 A CN2009101145030 A CN 2009101145030A CN 200910114503 A CN200910114503 A CN 200910114503A CN 101776608 B CN101776608 B CN 101776608B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- rhenium
- concentration
- resonance scattering
- gold
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
本发明公开了一种适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法，它是利用Hg2+可以稳定ssDNA序列中的T-T错配，使ssDNA无法稳定金铼复合纳米微粒，从而使金铼复合纳米微粒在高浓度电解质条件下发生聚集这一现象，将其和纳米金铼催化反应有机地结合起来，催化反应生成的碲微粒存在共振散射，Hg2+与共振散射强度呈线性关系。测量时先制备已知汞浓度的测试体系和试剂空白体系，测两体系波长在734nm的共振散射强度，绘制工作曲线，再制备样品检测体系，求其ΔI样，依据工作曲线，求得样品中汞的含量。本发明的优点是：与已有的方法相比，本测定方法的仪器简单，操作简便，灵敏度高，选择性好，反应条件容易达到；本方法所用核酸适配体及Hg2+溶液浓度低，试剂用量少，成本低廉。
Description
技术领域
本发明涉及Hg2+的测定方法，特别是一种适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法。
背景技术
汞离子是一种具有很强毒性和分布广泛的金属离子，能够破坏人的大脑、神经系统、肾脏和内皮组织，从而导致很严重的后果。因此，建立一种简便、快速、灵敏度高和选择性好的测定方法就显得尤为重要。目前，测定汞离子的方法主要有冷原子吸收光度法，原子荧光光度法，以及基于生色团和荧光团的化学传感器测定方法等。以上这些方法有的是灵敏度不高，有的是步骤繁琐，不易操作。
发明内容
本发明的目的是为克服现有技术的不足，而提供一种适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量hg2+的方法，这种方法简单，灵敏度高，选择性好，试剂用量少。
本发明的原理是：在pH 7.0的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液中和0.04mol/L NaCl存在时，核酸适配体ssDNA能与金铼复合纳米微粒结合形成较稳定的AuRessDNA复合物；当溶液中存在Hg2+时，Hg2+与ssDNA形成非常稳定的双链T-T错配复合物，从而使AuRessDNA中的AuRe纳米析出并聚集形成较大微粒，溶液颜色由红变蓝。Hg2+浓度越高，金铼复合纳米微粒聚集越多。
经过过滤可除去反应后聚集的大粒径AuRessDNA复合微粒，以滤液中的AuRe-ssDNA作为纳米催化剂，可催化NaTeO4-酒石酸-SnCl2这一反应，产物碲微粒在734nm处有一共振散射峰；随着Hg2+浓度的增加，使更多的金铼复合纳米微粒聚集，过滤后滤液中AuRe-ssDNA纳米微粒减少，增强作用减弱，共振散射强度降低。据此建立了一个简便、灵敏检测Hg2+的AuRe纳米催化Te(VI)增强共振散射光谱法。
应用催化共振散射光谱法快速测定Hg2+的方法，包括如下步骤：
(1)制备金铼复合纳米微粒：常温下，量取40.0mL二次蒸馏水于50mL锥形瓶，磁力搅拌器搅拌的同时加入0.45mL 2.4×10-2M HAuCl4溶液(1％氯金酸)，0.25mL 4.8×10-3M铼酸盐溶液；0.2mL0.20M碳酸钾溶液，充分混合后，加热，使温度在35℃左右，缓慢滴加5.0mL 0.5mg/mL的硼氢化钠，溶液颜色从暗红色变为红黑色再变成红色，之后颜色不再改变，继续搅拌10min。最后定容到50mL，得到浓度为52.2μg/mL(以Au计)的金铼复合纳米微粒，金/铼的摩尔比为9∶1，4℃密封保存；
(2)制备AuRessDNA探针
在50mL锥形瓶中加入1.8mL 0.17μmol/L ssDNA，37.5mL 52.2μg/mL金铼复合纳米微粒，混合均匀室温下静置5min，使ssDNA与金铼复合纳米微粒充分组装形成AuRessDNA备用。以Au计算，其浓度为49.8μg/mL AuRessDNA；
(3)制备滤液：在7支5mL的具塞刻度试管中，依次加入400μL pH 7.0的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液，393μL49.8μg/mL AuRessDNA，混合均匀室温下静置5min，然后加入不同量Hg2+溶液，加入30.0μL2mol/LNaCl溶液，用二次蒸馏水定容到1.5mL。反应液用0.15μm滤膜过滤，取滤液备用，其中第一管不加Hg2+溶液，作溶液的空白；
(4)制备已知Hg2+浓度的催化反应测定体系：在5mL的具塞刻度试管中，依次加入0.3mL0.012mol/LNa2TeO4溶液，0.15mL 0.3mol/L酒石酸溶液；30μL含不同浓度Hg2+的滤液，0.7mL0.9mol/L SnCl2溶液，混匀，定容到3mL。置于恒温水浴锅中在65℃下加热10min。流水快速冷却至室温；用荧光分光光度计，在λex-λem＝Δλ＝0条件下同步扫描获得共振散射光谱，测定734nm波长处的共振散射光强度I734nm；
(5)按步骤(4)的方法，以不含Hg2+滤液的第一管作为空白体系，并测定其空白体系值(I734nm)0；
(6)计算ΔI734nm＝(I734nm)0-I734nm，以ΔI对Hg2+的浓度关系作工作曲线；
(7)样品测定：依照步骤(4)的方法制备检测体系，其中加入的漓江水样为含有Hg2+但未知浓度的被测物，求出被测物的ΔI样；
(8)依据步骤(6)的工作曲线，计算出被测物的Hg2+的浓度。
本方法Hg2+的检出范围为1.33pM-0.267nM。
本发明的优点是：
(1)与已有的方法相比，本测定方法的仪器简单，操作简便，灵敏度高，选择性好，反应条件容易达到。
(2)所用Hg2+溶液和核酸适体溶液浓度较低，试剂用量少。
附图说明
图1为本发明具体实施方式AuRe ssDNA催化体系的共振散射光谱图。
图中：a：0.0012M Na2TeO4-0.015M酒石酸-0nmol/L Hg2+-AuRessDNA滤液-0.21MSnCl2b：a-0.00133nmol/L Hg2+ c：a-0.0066nmol/L Hg2+ d：a-0.0133nmol/L Hg2+ e：a-0.066nmol/L Hg2+ f：a-0.133nmol/LHg2+ g：a-0.267nmol/L Hg2+.
具体实施方式
(1)按照前述步骤(1)所述方法制备金铼复合纳米微粒；
(2)按照前述步骤(2)所述方法制备AuRessDNA探针；
(3)按前述步骤(3)制备滤液；
(4)制备已知Hg2+浓度的催化反应测定体系：在5mL的具塞刻度试管中，依次加入0.3mL0.012mol/L Na2TeO4溶液，0.15mL 0.3mol/L酒石酸溶液；30μL含不同浓度Hg2+的滤液，0.7mL0.9mol/L SnCl2溶液，混匀，定容到3mL。置于恒温水浴锅中在65℃下加热10min。流水快速冷却至室温。用荧光分光光度计volt＝400v，入射狭缝宽度＝出射缝宽度＝5nm，，λex-λem＝Δλ＝0条件下同步扫描获得共振散射光谱，测定734nm波长处的共振散射光强度I734nm；
(5)按步骤(4)的方法，以不含Hg2+滤液的第一管作为空白体系，并测定其空白体系值(I734nm)0；
(6)计算ΔI734nm＝(I734nm)0-I734nm，以ΔI对Hg2+的浓度关系作工作曲线，工作曲线为ΔI＝786.4c+4.4，c-Hg2+浓度，单位是nmol/L，线性范围从1.33pmol/L到0.267nmol/L。
(7)样品测定：依照步骤(4)的方法制备检测体系，其中加入的水样为含有Hg2+但未知浓度的被测物，求出被测物的ΔI样，ΔI样＝12.3。
(8)依据步骤(6)的工作曲线，计算出被测物的Hg2+的浓度，样品的的浓度为0.010nmol/L。
Claims (3)
1.适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法，其特征是：测定方法包括步骤如下：
(1)制备金铼复合纳米微粒：常温下，量取40.0mL二次蒸馏水于50mL锥形瓶，磁力搅拌器搅拌的同时加入HAuCl4溶液、铼酸盐溶液、碳酸钾溶液，充分混合后，加热，使温度在35℃左右，缓慢滴加硼氢化钠，溶液颜色从暗红色变为红黑色再变成红色，之后颜色不再改变，继续搅拌10min，最后定容到50mL，得到浓度为52.2μg/mL的金铼复合纳米微粒，金/铼的摩尔比为9∶1，4℃密封保存；
(2)制备AuRessDNA探针
在50mL锥形瓶中加入1.8mL 0.17μmol/L ssDNA，37.5mL 52.2μg/mL金铼复合纳米微粒，混合均匀室温下静置5min，使ssDNA与金铼复合纳米颗粒充分组装形成AuRessDNA备用，以Au计算，其浓度为49.8μg/mL AuRessDNA；
(3)制备滤液：在7支5mL的具塞刻度试管中，依次加入400μL pH 7.0的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液，393μL49.8μg/mL AuRessDNA，混合均匀室温下静置5min，然后加入不同量Hg2+溶液，加入30.0μL2mol/L NaCl溶液，用二次蒸馏水定容到1.5mL，反应液用0.15μm滤膜过滤，取滤液备用，其中第一管不加Hg2+溶液，作滤液的空白；
(4)制备已知Hg2+浓度的催化反应测定体系：在5mL的具塞刻度试管中，依次加入0.3mL0.012mol/L Na2TeO4溶液，0.15mL 0.3mol/L酒石酸溶液；30μL含不同浓度Hg2+的滤液，0.7mL0.9mol/L SnCl2溶液，混匀，定容到3mL，置于恒温水浴锅中在65℃下加热10min，流水快速冷却至室温，用荧光分光光度计λex-λem＝Δλ＝0条件下同步扫描获得共振散射光谱，测定734nm波长处的共振散射光强度I734nm；
(5)按步骤(4)的方法，以不含Hg2+滤液的第一管为空白体系，并测定其共振散射强度(I734nm)0；
(6)计算ΔI734nm＝(I734nm)0-I734nm；以ΔI对Hg2+的浓度关系作工作曲线；
(7)样品测定：依照步骤(4)的方法制备检测体系，其中加入的水样为含有Hg2+但未知浓度的被测物，求出被测物的ΔI样；
(8)依据步骤(6)的工作曲线，计算出被测物的Hg2+的浓度。
2.如权利要求1所述的适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法，其特征是：步骤(1)中所述的制备金铼复合纳米微粒，加入的HAuCl4溶液为0.45mL2.4×10-2M，铼酸盐溶液为0.25mL 4.8×10-3M，碳酸钾溶液为0.2mL 0.20M，硼氢化钠为5.0mL0.5mg/mL。
3.如权利要求1所述的适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法，其特征是：测定Hg2+的浓度范围是1.33pM-0.267nM。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2009101145030A CN101776608B (zh) | 2009-10-29 | 2009-10-29 | 适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2009101145030A CN101776608B (zh) | 2009-10-29 | 2009-10-29 | 适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101776608A CN101776608A (zh) | 2010-07-14 |
| CN101776608B true CN101776608B (zh) | 2011-07-20 |
Family
ID=42513122
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2009101145030A Expired - Fee Related CN101776608B (zh) | 2009-10-29 | 2009-10-29 | 适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101776608B (zh) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102374986B (zh) * | 2010-08-13 | 2013-04-03 | 国家纳米科学中心 | 一种利用表面改性的金纳米颗粒检测汞离子的方法 |
| CN102087222B (zh) * | 2011-02-28 | 2012-09-12 | 湖南大学 | 一种特异性检测二价汞离子的方法 |
| CN102495033B (zh) * | 2011-12-01 | 2013-09-04 | 湖南大学 | 一种汞元素的检测方法 |
| CN102998288A (zh) * | 2012-09-26 | 2013-03-27 | 广西师范大学 | 测定水中As (III)的适配体-纳米金共振瑞利散射光谱法 |
| CN103389293B (zh) * | 2013-07-26 | 2015-11-04 | 中国人民大学 | 一种二价汞离子的检测方法 |
| CN103785854B (zh) * | 2014-01-27 | 2016-04-20 | 武汉纺织大学 | 一种利用海藻酸钠绿色合成纳米金的方法 |
| CN107807117B (zh) * | 2017-08-16 | 2019-09-24 | 广西师范大学 | 一种用适配体调控二氧化硅纳米酶活性表面增强拉曼光谱测定Hg2+的方法 |
| CN107389614B (zh) * | 2017-08-16 | 2019-09-06 | 广西师范大学 | 用氧化石墨烯纳米带催化共振散射光谱测定k+的方法 |
-
2009
- 2009-10-29 CN CN2009101145030A patent/CN101776608B/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101776608A (zh) | 2010-07-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101776608B (zh) | 适体修饰纳米金铼催化-碲微粒共振散射光谱测定痕量Hg2+的方法 | |
| Lin et al. | Silver nanoprobe for sensitive and selective colorimetric detection of dopamine via robust Ag–catechol interaction | |
| Luo et al. | SERS detection of trace nitrite ion in aqueous solution based on the nitrosation reaction of rhodamine 6G molecular probe | |
| CN103264165B (zh) | 一种以单链dna为模板合成银纳米簇的方法 | |
| Wu et al. | Fluorescent and colorimetric dual-readout sensor based on Griess assay for nitrite detection | |
| Erbao et al. | Flow injection determination of adenine at trace level based on luminol–K2Cr2O7 chemiluminescence in a micellar medium | |
| Qiu et al. | N, S-GQDs mixed with CdTe quantum dots for ratiometric fluorescence visual detection and quantitative analysis of malachite green in fish | |
| CN110987843B (zh) | 基于双金属mof纳米类氧化酶的磷酸根比色检测法 | |
| Zhao et al. | A Hg 2+-mediated label-free fluorescent sensing strategy based on G-quadruplex formation for selective detection of glutathione and cysteine | |
| Li et al. | Alkaline phosphatase activity assay with luminescent metal organic frameworks-based chemiluminescent resonance energy transfer platform | |
| Al-Onazi et al. | Catalytic oxidation of O-phenylenediamine by silver nanoparticles for resonance Rayleigh scattering detection of mercury (II) in water samples | |
| Fadhel et al. | Selective nano-sensing approach for the determination of inorganic phosphate in human urine samples | |
| Zhang et al. | A universal sensing platform based on iron and nitrogen co-doped carbon dots for detecting hydrogen peroxide and related metabolites in human fluid by ratiometric fluorometry and colorimetry | |
| Lu et al. | A novel dual response ratiometric fluorescent probe for the determination of H 2 O 2 and glucose via etching of silver nanoparticles | |
| Koronczi et al. | Development of a submicron optochemical potassium sensor with enhanced stability due to internal reference | |
| CN102435587B (zh) | 纳米金共振散射光谱法快速测定水中亚硝酸盐的方法 | |
| Kong et al. | Dual-responsive ratiometric fluorescence detection of Ce4+ and ascorbic acid by regulating oxidase-mimicking activity of Ce4+-based nanocomplex | |
| Guan-Ting et al. | Smartphone assisted fluorescent sensor for Fe3+ and ascorbic acid determination based on off-on carbon dots probe | |
| Liang et al. | Europium coordination polymer particles based electrospun nanofibrous film for point-of-care testing of copper (II) ions | |
| Li et al. | Coordination polymer nanoprobe integrated carbon dot and phenol red for turn-on fluorescence detection of urease activity | |
| Wang et al. | Potassium-induced G-quadruplex DNAzyme as a chemiluminescent sensing platform for highly selective detection of K+ | |
| CN109799215B (zh) | 一种基于G-四联体DNA的Pb2+荧光传感检测方法 | |
| Du et al. | Boric acid-functionalized lanthanide metal-organic framework used as a ratiometric fluorescence probe for uric acid detection | |
| Shi et al. | Carbon dots derived from peptone as “off-on” fluorescent probes for the detection of oxalic acid | |
| CN103084073A (zh) | 1,4-二羟基蒽醌与二价铜离子掺杂纤维素组成的多孔膜及其制备方法和用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20110720 Termination date: 20121029 |