CN101762659A - 去头屑洗发类化妆品中非法添加酮康唑的快速筛查方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种洗发类化妆品中非法添加酮康唑的快速筛查方法，该方法首先利用酮康唑既可溶于有机溶剂也可溶于无机酸溶液的特性，采用乙酸乙酯从洗发剂产品中提取出可能含有酮康唑的部分，再用无机酸溶液萃取使酮康唑溶解在无机酸溶液里进一步将酮康唑与其他干扰物质分开；然后根据酮康唑可与生物碱沉淀剂反应产生沉淀现象的特性，在可能溶有酮康唑的无机酸溶液里滴加三硝基苯酚的饱和水溶液，若有沉淀产生，则说明检测的样品中可能存在有酮康唑，反之则无。本发明方法具有较高的灵敏度和准确性，且操作简便易行、专属性强、检验结果可靠，不需专门的仪器，分析成本低，适用于现场化妆品中非法添加的酮康唑快速筛查。
Description
技术领域
本发明涉及测量领域，具体涉及利用物质的化学物理性质进行定性检测。
背景技术
酮康唑(Ketoconazole)，化学结构如式1所示，易溶于三氯甲烷，微溶于乙醇，几乎不溶于水，是一种抗真菌药，临床用于治疗表皮和深部真菌病，包括皮肤和指甲癣(局部治疗无效者)、胃肠道酵母菌感染、局部用药无效的阴道白色念珠菌病，以及白色念珠菌、类球孢子菌、组织胞浆菌等引起的全身感染。
由于酮康唑具有一定的抗真菌作用，将其添加到洗发类化妆品中可达到较好的去屑效果，然而长期使用添加有酮康唑的洗发剂会使皮肤出现红斑、丘疹、灼烧感、头晕等不良反应，因此卫生部于1998年在卫监发〔1998〕第21号文规定：鉴于尚不能充分证实酮康唑作为化妆品原料使用的安全性，经研究，酮康唑不能作为化妆品原料使用。尽管酮康唑已被禁止添加到化妆品中，但仍有不少不法商家为达宣传效果，牟取暴利，将酮康唑加入到化妆品中，损害消费者利益。
卫生部印发的《化妆品卫生规范》(2007年版)记载了采用高效液相色谱检测去屑剂中酮康唑的方法，但是该方法需要特殊的仪器设备，操作繁琐，不利于现场检测。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种适用于现场检测的去头屑洗发类化妆品中非法添加酮康唑的快速筛查方法。
本发明解决上述问题的技术方案是：
去头屑洗发类化妆品中非法添加酮康唑的快速筛查方法，该方法由以下步骤组成：
(1)取待检样品，加入到2～3体积倍的乙酸乙酯中，轻轻振摇使其充分混合，静置至液体分层；
(2)吸取上层液体，加入到1/2体积倍的浓度为4～6％(v/v)的盐酸溶液中，摇匀，静置至液体分层；
(3)吸取下层液体，过滤，往滤液滴入2～3滴三硝基苯酚的饱和水溶液，若出现黄色沉淀，则说明样品中含有酮康唑，反之则无。
本发明方法的原理是：首先利用酮康唑既可溶于有机溶剂也可溶于无机酸溶液的特性将可能含有酮康唑的部分分离出来并尽量排除其他干扰物质，再根据酮康唑与生物碱沉淀剂反应产生沉淀的现象判断受检的样品中是否含有酮康唑。然而，仅根据上述原理要设计出本发明所述方案并获得理想的技术效果仍有一些技术问题需要解决，因为洗发剂里有许多因素影响了有机溶剂的提取效果和沉淀剂的检测准确性，如洗发剂里含有大量的乳化剂严重影响了有机溶剂提取后的分层效果，为酮康唑的分离增加了不少难度；再如洗发剂里含有不少植物提取成分，这些成分可能与酮康唑有相似的物性和化性，对最后一个步骤用沉淀剂指示检测结果的准确性造成干扰。本发明人通过实验发现，在众多的有机溶剂和生物沉淀剂中，乙酸乙酯具有较好的提取和分层效果，三硝基苯酚对酮康唑的选择性最佳。基于上述研究结果，本发明选择乙酸乙酯作为提取酮康唑的有机溶剂，三硝基苯酚作为指示检测结果的沉淀剂，使检测准确率和灵敏度分别高达97.8％和100％，误检率低至2.2％，漏检率为0％。
本发明方法操作简便易行、专属性强、检验结果可靠，不需专门的仪器，分析成本低，适用于现场化妆品中非法添加的酮康唑快速筛查。
以下为本发明所述方法的相关研究和效果实验。
1、不同溶剂对提取乳液状洗发剂中酮康唑效果的影响
(1)实验材料：
洗发剂：添加了2.14％酮康唑的乳液状洗发剂；
有机溶剂：三氯甲烷(因毒性较大，不作为首选提取溶剂故未考察)，二氯甲烷，乙酸乙酯
(2)实验方法：
取洗发剂1.5g，加入到4ml的有机溶剂中，轻轻振摇1min，静置3min，观察分层效果；
吸取上层液体2ml，注入到1ml的5％的稀盐酸中，上下颠倒3次使其充分混匀，静置2min，观察分层效果；
吸取下层液体0.5ml，过滤，采用高效液相色谱法检测滤液中酮康唑的含量。
(3)实验结果：结果如表1所示。
表1
在用有机溶剂提取酮康唑时，有机溶剂的选择应符合以下条件：1、可以溶解酮康唑；2、与无机酸溶液互不相容；3、对酮康唑有较好的选择性以尽量排除其余干扰物质对后面沉淀反应的影响；4、受乳化剂影响小以便分层。我们对众多有机溶剂进行了筛选，发现乙酸乙酯、二氯甲烷可以较好地满足以上条件(如表1所示)，其中乙酸乙酯是最人体健康的影响最小，且能提取出洗发剂中酮康唑的20％以上(含2.14％酮康唑的膏状洗发剂样品1.5g用乙酸乙酯提取出了7.16mg酮康唑，含2.14％酮康唑的乳液状洗发剂样品1.5g用乙酸乙酯提取出了7.22mg酮康唑)。
2、不同沉淀剂对检测效果的影响
(1)实验材料：
洗发剂：添加了0.74～2.14％酮康唑的洗发剂(5个样品)；不含酮康唑的洗发剂(10个样品)。
有机溶剂：乙酸乙酯；
沉淀剂：碘化铋钾试液【取次硝酸铋0.85g，加冰醋酸10mL与水40mL溶解后，加碘化钾溶液(4→10)20mL，摇匀】，三硝基苯酚试液(组成：三硝基苯酚的饱和水溶液，经本人试验：该饱和水溶液约为3～4％三硝基苯酚溶液)，硅钨酸试液(取硅钨酸10g，加水使溶解成100mL)，碘化汞钾试液(取二氯化汞1.36g，加水60mL使溶解；另取碘化钾5g，加水10mL使溶解，将两液混合)。
(2)实验方法：
取洗发剂1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，轻轻振摇1min，静置3min；
吸取上层液体2ml，注入到1ml的5％的稀盐酸中，上下颠倒3次使其充分混匀，静置2min；
吸取上层液体约0.8ml，过滤，往滤液滴入沉淀剂。
(3)实验结果：结果如表2所示。
表2
由表2所示结果可以看出，三硝基苯酚与其他沉淀剂相比，对酮康唑有很好的选择性。
3、本发明方法市售商品的效果实验
(1)供试样品：共188批次，其中180批次，系2008年由汕头、佛山、惠州、韶关、云浮、清远、江门、汕尾、揭阳等共9个市局分别对所在地辖区内的化妆品生产企业、批发市场、商场、药店的宣称具有去头屑功能的洗发用化妆品进行抽查所得(20批次/市)，市场购买8个批次。
(2)实验方法：
采用本发明方法检测，并同时按《化妆品卫生规范》(2007年版)记载的高效液相色谱法检测作为对照。
(3)实验结果：统计结果如表3所示。
表3
| 结果 | 阳性 | 假阳性 | 阴性 | 假阴性 |
| 本发明方法 | 5 | 4 | 179 | 0 |
| 高效液相色谱法 | 5 | 0 | 183 | 0 |
根据表3所示的统计结果进行下述计算：
正确率AR＝(真阳性+真阴性)/总数＝(5+179)/188＝97.9％
漏检率OT(假阴性率)＝假阴性/(假阴性+真阳性)＝0/(0+5)＝0
误检率MT(假阳性率)＝假阳性/(假阳性+真阴性)＝4/(4+179)＝2.2％
灵敏度Se＝真阳性/(真阳性+假阴性)＝5/(5+0)＝100.0％
特异度Sp＝真阴性/(真阴性+假阳性)＝179/(179+4)＝97.8％
正确指数AI＝1-OT-MT＝1-0-0.022＝0.978
由上述计算结果可见，本发明所述的方法虽然有2.2％的假阳性率，对有黄色沉淀产生的受检产品还要带回检验机构采用更精准的方法(如高效液相色谱法)进一步确认，但是，其假阴性率为零，这说明不会出现漏检，符合科学、公正的检验原则。
具体实施方式
例1
待检样品：编号为HZ080017海飞丝
新生去屑洗发露(怡神冰凉型)。
检测方法：取上述样晶1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，轻轻振摇1min，静置3min；吸取上层液体约2ml，注入到1ml的5％的稀盐酸中，上下颠倒3次使其充分混匀，静置2min；吸取下层液体约0.8ml，过滤，往滤液滴入3滴三硝基苯酚的饱和水溶液，没有沉淀产生。
同时取上述样品按《化妆品卫生规范》(2007年版)记载的高效液相色谱法检测，结果显示该样品中不含酮康唑。
例2
待检样品：编号为HZ080048澳雪中药养发洗发露(皂角田七去屑精华)。
检测方法：取上述样品1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，轻轻振摇1min，静置3min；吸取上层液体约2ml，注入到1ml的5％的稀盐酸中，上下颠倒3次使其充分混匀，静置2min；吸取下层液体约0.8ml，过滤，往滤液滴入3滴三硝基苯酚的饱和水溶液，没有沉淀产生。
同时取上述样品按《化妆品卫生规范》(2007年版)记载的高效液相色谱法检测，结果显示该样品中不含酮康唑。
例3
待检样品：编号为HZ080015霸王
皂角去屑天然植物洗发露。
检测方法：取上述样品1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，轻轻振摇1min，静置3min；吸取上层液体约2ml，注入到1ml的5％的稀盐酸中，上下颠倒3次使其充分混匀，静置2min；吸取下层液体约0.8ml，过滤，往滤液滴入3滴三硝基苯酚的饱和水溶液，没有沉淀产生。
同时取上述样品按《化妆品卫生规范》(2007年版)记载的高效液相色谱法检测，结果显示该样品中不含酮康唑。
例4
待检样品：编号为HZ080018的碧彩
去屑王。
检测方法：取上述样品1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，轻轻振摇1min，静置3min；吸取上层液体约2ml，注入到1ml的5％的稀盐酸中，上下颠倒3次使其充分混匀，静置2min；吸取下层液体约0.8ml，过滤，3滴三硝基苯酚的饱和水溶液，有黄色沉淀产生。
同时取上述样品按《化妆品卫生规范》(2007年版)记载的高效液相色谱法检测，结果显示该样品中含酮康唑。
例5
待检样品：编号为HZ080103美晨
顶彩TM去屑养发洗剂。
检测方法：取上述样品1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，轻轻振摇1min，静置3min；吸取上层液体约2ml，注入到1ml的5％的稀盐酸中，上下颠倒3次使其充分混匀，静置2min；吸取下层液体约0.8ml，过滤，往滤液2滴三硝基苯酚的饱和水溶液，有黄色沉淀产生。
同时取上述样品按《化妆品卫生规范》(2007年版)记载的高效液相色谱法检测，结果显示该样品中含酮康唑。
例6
待检样品：编号为HZ080107百草堂去卸王TM洗发剂。
检测方法：取上述样品1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，轻轻振摇1min，静置3min；吸取上层液体约2ml，注入到1ml的5％的稀盐酸中，上下颠倒3次使其充分混匀，静置2min；吸取下层液体约0.8ml，过滤，往滤液滴入3滴三硝基苯酚的饱和水溶液，有黄色沉淀产生。
同时取上述样品按《化妆品卫生规范》(2007年版)记载的高效液相色谱法检测，结果显示该样品中含酮康唑。
Claims (1)
1.去头屑洗发类化妆品中非法添加酮康唑的快速筛查方法，该方法由以下步骤组成：
(1)取待检样品，加入到2～3体积倍的乙酸乙酯中，轻轻振摇使其充分混合，静置至液体分层；
(2)吸取上层液体，加入到1/2体积的浓度为4～6％(v/v)的盐酸溶液中，摇匀，静置至液体分层；
(3)吸取下层液体，过滤，往滤液滴入2～3滴三硝基苯酚的饱和水溶液，若出现黄色沉淀，则说明样品中含有酮康唑，反之则无。
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