CN101762561B - 一种采用紫外监测法在线检测超滤膜完整性的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种采用紫外监测法在线检测超滤膜完整性的方法，步骤如下：将样品用管道与超滤器进样口连接，管道中间放置设置有用于传输样品的蠕动泵，超滤器进样管道与盛装收获液的样品瓶出样口相连接，在超滤器的滤过液管道中接上一台紫外监测仪和记录仪，回流管道与盛装收获液的样品瓶相连接；超滤器滤过液出口管道置另一废液收集容器中；滤膜一旦发生破漏有蛋白漏出可立即被监测仪识别而在记录仪中出现一个蛋白吸收峰，提醒操作人员已出现滤膜破漏或安装错误，应及时检查重新安装或/和更换滤膜。本发明的优点在于：能及时地检查超滤膜是否破漏或安装错误，提醒工作人员需重新安装或/和更换滤膜，避免大量样品损失。

Description

一种采用紫外监测法在线检测超滤膜完整性的方法
所属技术领域
本发明属于检测超滤膜完整性的方法，主要是一种采用紫外监测法在线检测超滤膜完整性的方法。
背景技术
超滤法广泛应用于疫苗生产中，它的作用是对蛋白质等样品进行浓缩、除盐、除糖等。其原理是将蛋白质样品通过蠕动泵打入装有一定分子量孔径滤膜的超滤器中，分子量大于滤膜孔径的蛋白等被截留，而小分子蛋白、盐、糖等则可通过滤膜被排出。
超滤中检测滤膜完整性的最可靠方法是采用生物方法检测滤过液中是否有活性物质。但此法的缺点是需要将大量(几百立升)滤过液先收集取样检测，并冷藏等待检测结果，不仅费时费力而且检测结果严重滞后，不能及时发现滤膜破漏。
紫外检测器是一种基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质，所以在液相色谱中应用最广泛。它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。
发明内容
本发明的目的在于克服上述技术的不足，而提供一种采用紫外监测法在线检测超滤膜完整性的方法。
为解决上述技术问题，本发明是提出以下技术方案实现的：这种采用紫外监测法在线检测超滤膜完整性的方法，步骤如下：
(1)、将样品用管道与超滤器进样口连接，管道中间放置设置有用于传输样品的蠕动泵，超滤器进样管道与盛装收获液的样品瓶出样口相连接，在超滤器的滤过液管道中接上一台紫外监测仪和记录仪，回流管道与盛装收获液的样品瓶相连接；超滤器滤过液出口管道置另一废液收集容器中；
(2)、滤膜一旦发生破漏有蛋白漏出可立即被监测仪识别而在记录仪中出现一个蛋白吸收峰，提醒操作人员已出现滤膜破漏或安装错误，应及时检查重新安装或/和更换滤膜。
作为优选，开启超滤器进行超滤浓缩，调节泵速和阀门，控制进口压力0.07～0.15MPa，回流压力0.02～0.03Mpa，流速保持600-800ml/m2.Min，紫外监测仪设置波长为280nm。
作为优选，收获液浓缩至1/40倍体积时，补加等量无菌pH7.2磷酸盐缓冲液；重复洗滤至少5倍量无菌pH7.2磷酸盐缓冲液；最终收集液量控制在该批投入收获液量1/40-1/50浓缩量。
本发明的优点在于：在超滤器的滤过液管道中接上一台紫外监测仪和记录仪，实现在线检测，本发明所提供的紫外监测法监测超滤膜完整性的方法，能及时地检查超滤膜是否破漏或安装错误，提醒工作人员需重新安装或/和更换滤膜，避免大量样品损失。该法成本低、效率高、可靠性好，可以应用于所有超滤工序中。
附图说明
图1为本发明的结构示意图；
具体实施方式
下面结合附图和实施例对发明作进一步说明：
如图所示，这种采用紫外监测法在线检测超滤膜完整性的方法，步骤如下：
(1)、将样品用管道与超滤器进样口连接，管道中间放置设置有用于传输样品的蠕动泵，超滤器进样管道与盛装收获液的样品瓶出样口相连接，在超滤器的滤过液管道中接上一台紫外监测仪和记录仪，回流管道与盛装收获液的样品瓶相连接；超滤器滤过液出口管道置另一废液收集容器中；
(2)、滤膜一旦发生破漏有蛋白漏出可立即被监测仪识别而在记录仪中出现一个蛋白吸收峰，提醒操作人员已出现滤膜破漏或安装错误，应及时检查重新安装或/和更换滤膜。
作为优选，开启超滤器进行超滤浓缩，调节泵速和阀门，控制进口压力0.07～0.15MPa，回流压力0.02～0.03Mpa，流速保持600-800ml/m2.Min，紫外监测仪设置波长为280nm。
作为优选，收获液浓缩至1/40倍体积时，补加等量无菌pH7.2磷酸盐缓冲液(PBS溶液)；重复洗滤至少5倍量无菌pH7.2磷酸盐缓冲液(PBS溶液)；最终收集液量控制在该批投入收获液量1/40-1/50浓缩量。
工作原理：被检测物质具有特定的吸收波长，在该波长下，响应值与浓度成正比。既可测190--350nm范围的光吸收变化，也可向可见光范围350---700nm延伸。在对蛋白质等样品进行超滤时于滤过液管道中接上一台紫外监测仪和记录仪，实现在线检测，当滤膜一旦发生破漏有蛋白漏出便可立即被监测仪识别而在记录仪中出现一个蛋白吸收峰，提醒操作人员可能滤膜破漏或安装错误，应及时检查重新安装或/和更换滤膜，从而避免大量样品损失。
以上对本发明的描述不具有限制性，如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明权利要求的保护的情况，作出本发明的其它结构变形和实施方式，均属于本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种采用紫外监测法在线检测超滤膜完整性的方法，其特征在于：步骤如下：
(1)、将样品用管道与超滤器进样口连接，管道中间放置设置有用于传输样品的蠕动泵，超滤器进样管道与盛装收获液的样品瓶出样口相连接，在超滤器的滤过液管道中接上一台紫外监测仪和记录仪，回流管道与盛装收获液的样品瓶相连接；超滤器滤过液出口管道置另一废液收集容器中；
(2)、滤膜一旦发生破漏有蛋白漏出可立即被监测仪识别而在记录仪中出现一个蛋白吸收峰，提醒操作人员已出现滤膜破漏或安装错误，应及时检查重新安装或/和更换滤膜。
2.根据权利要求1所述的采用紫外监测法在线检测超滤膜完整性的方法，其特征在于：开启超滤器进行超滤浓缩，调节泵速和阀门，控制进口压力0.07～0.15MPa，回流压力0.02～0.03Mpa，流速保持600-800ml/m2.Min，紫外监测仪设置波长为280nm。
3.根据权利要求1所述的采用紫外监测法在线检测超滤膜完整性的方法，其特征在于：收获液浓缩至1/40倍体积时，补加等量无菌pH7.2磷酸盐缓冲液；重复洗滤至少5倍量无菌pH7.2磷酸盐缓冲液；最终收集液量控制在该批投入收获液量1/40-1/50浓缩量。
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