CN101747095B - 人参、西洋参微生物多抗菌肥及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

人参、西洋参微生物多抗菌肥及其制备方法，属于微生物肥料技术领域，采用泾阳细黄链霉菌和木霉混合制成，其中泾阳细黄链霉菌和木霉的重量份数比为2:3-7:3，制备方法由接种、发酵培养、菌剂复配等步骤完成。本发明提供了一种具有优化生态环境的复合微生物多抗菌肥，能够改善参根根际生态环境，能有效克服栽参土壤中致病微生物数量上升问题，促进参根生长，使参根组织功能旺盛，有效抑制病害发生，该肥成本低廉，原材料资源丰富，工艺流程简单，施用方便。

Description

人参、西洋参微生物多抗菌肥及其制备方法
技术领域：
本发明属于微生物肥料技术领域，是一种微生物多抗菌肥及制法。
背景技术：
人参、西洋参是名贵中药材，在人参，西洋参生产过程中，病虫害危害严重，防治难度大，一直是人参，西洋参生产的难点和重点问题，一般年度发病率在30％左右，严重地块高达70％以上。罹病药材之根伤肢残体，几乎失去商品价值和药用价值。长久以来，主要以农药、化肥等控制病虫害，提高产量，促进生产。由于长年依赖化学工业品，自然环境遭到破坏，水和空气遭受污染，土壤板结沙化，有害残留物质侵害人类健康，生态环境日益恶化。
采用生物防治技术不污染环境、不破坏生态平等平衡，减少参根中化学农药的残留，有利于人参出口创汇，具有很好的社会、生态和经济效益。孙玉良等发明人参生物复合菌肥专利，主要用来解决农田地老参地连作栽种人参、西洋参的问题。在人参锈腐病生物防治方面有较多文献报道，如：吴连举等筛选出拮抗细菌Bc009和Bc011对人参锈腐病的防效分别达73.9％和68.5％。马凤茹等报道5406菌对锈腐病的防效可达30％，提高产量38％。刘树良等应用11371复合剂防治人参锈腐病，最高防效可达70％。赵阿娜等使用两种木霉菌剂将人参种苗成活率和人参种子出苗率分别提高30％和16％以上。但以上研究者多以单一类型菌种进行防治，功能单一，有的效果不显著。
发明内容：
本发明要解决的技术问题是公开一种人参、西洋参微生物多抗菌肥。
本发明同时提出了人参、西洋参微生物多抗菌肥其制备方法。本发明解决技术问题的方案是采用泾阳细黄链霉菌和木霉混合制成人参、西洋参微生物多抗菌肥，其中泾阳细黄链霉菌和木霉的重量份数比为2:3-7:3。
本发明选用的两个菌种分别如下：
A、泾阳细黄链霉菌(Streptomyces jingyangensis)：中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心，菌种编号：ACCC40021；
B、木霉(Trichoderma spp.)：中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心，菌种编号：ACCC30371。
上述两个菌种公众可按菌种编号向中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心购买。
泾阳细黄链霉菌和木霉的优选重量份数比为3:3-5:3。
本发明的制备方法如下：
1、泾阳细黄链霉菌发酵
1)培养基：
斜面：马铃薯蔗糖琼脂培养基
摇瓶用培养基：马铃薯蔗糖培养基
固体发酵：玉米粉50-80％，玉米杆粉10-30％，麦麸10-30％，K2HPO40.4％，生石灰1％，料：水＝1:0.6-1:0.8。
2)发酵工艺：
将平板菌种用100mL无菌水洗下，取10mL接入200mL马铃薯蔗糖液体培养基，32℃，140转/分钟，培养24h，将固体培养基121℃，灭菌40分钟，每个托盘装入培养基3Kg，然后将发酵液按1:0.2-1:0.5的比例(固液质量比)接入固体培养基中，25-34℃，发酵48-72h，40℃烘干。
2、木霉发酵
1)培养基：
斜面及保存用培养基：马铃薯蔗糖琼脂培养基
固体发酵：麦麸70-90％，豆饼粉10-30％，KH2PO40.5％。料：水＝1：0.6-1:0.8。
2)发酵工艺：
一级菌种：每个三角瓶装入培养基40g，然后将平板菌种按一个平板接四瓶的比例接种，22℃，培养48小时。
固体发酵：将固体培养基121℃，灭菌40分钟，每个托盘中装入培养基3Kg，按接种量4-10％接种，22-26℃，培养72-84h，40℃烘干。
3、菌剂复配
将泾阳细黄链霉菌和木霉混合在一起，重量比为2:3-7:3。
人参、西洋参微生物多抗菌肥的试验结果如下：
针对目前严重为害我国西洋参生产的立枯病及由多种病原(锈腐病、黑斑病和疫病等)复合侵染引起的根腐病，我们进行了微生物多抗菌肥在西洋参防病增产方面的盆栽和田间小区试验。
采用均匀设计法，测试微生物多抗菌肥对西洋参种子、参栽的出苗率和发病率影响，其中西洋参种子接种立枯病菌，参栽接种锈腐病、黑斑病和疫病的病原菌；对照组不施用微生物多抗菌肥。
1)盆栽试验
         表1 微生物多抗菌肥对西洋参种子出苗率、发病率盆栽试验结果
Figure G2008100515337D00041
    表2 微生物多抗菌肥对二年生西洋参参栽出苗率、发病率盆栽试验结果
           表3 微生物多抗菌肥对西洋参参栽经济性状的影响
Figure G2008100515337D00043
Figure G2008100515337D00051
2)田间小区试验
     表4 微生物多抗菌肥对二年生西洋参栽出苗率、发病率田间试验结果
Figure G2008100515337D00052
本发明优点：提供一种具有优化生态环境的复合微生物多抗菌肥，能够改善参根根际生态环境，能有效克服栽参土壤中致病微生物数量上升问题，促进参根生长，使参根组织功能旺盛，有效抑制病害发生，该肥成本低廉，原材料资源丰富，工艺流程简单，施用方便。
具体实施方式：
例1、取泾阳细黄链霉菌种，按如下方法发酵培养
1)培养基：
斜面：马铃薯蔗糖琼脂培养基
摇瓶用培养基：马铃薯蔗糖培养基
固体发酵：玉米粉60％，玉米杆粉20％，麦麸20％，K2HPO40.4％，生石灰1％，料：水＝1:0.8。
2)发酵工艺：
将平板菌种用100mL无菌水洗下，取10mL接入200mL马铃薯蔗糖液体培养基，32℃，140转/分钟，培养24h，将固体培养基121℃，灭菌40分钟，每个托盘装入培养基3Kg，然后将发酵液按1:0.2的比例(固液质量比)接入固体培养基中，32℃，发酵60h，40℃烘干；取木霉菌种，发酵按如下方法发酵培养
1)培养基：
斜面及保存用培养基：马铃薯蔗糖琼脂培养基
固体发酵：麦麸90％，豆饼粉10％，KH2PO40.5％。料：水＝1:0.6。
2)发酵工艺：
一级菌种：每个三角瓶装入培养基40g，然后将平板菌种按一个平板接四瓶的比例接种，22℃，培养48小时。
固体发酵：将固体培养基121℃，灭菌40分钟，每个托盘中装入培养基3Kg，按接种量6％接种，22℃，培养78h，40℃烘干；
菌剂复配
将泾阳细黄链霉菌和木霉混合在一起，重量比为：1:1。
例2、取泾阳细黄链霉菌种，按如下方法发酵培养
1)培养基：
斜面：马铃薯蔗糖琼脂培养基
摇瓶用培养基：马铃薯蔗糖培养基
固体发酵：玉米粉80％，玉米杆粉10％，麦麸10％，K2HPO40.4％，生石灰1％，料：水＝1:0.7。
2)发酵工艺：
将平板菌种用100mL无菌水洗下，取10mL接入200mL马铃薯蔗糖液体培养基，32℃，140转/分钟，培养24h，将固体培养基121℃，灭菌40分钟，每个托盘装入培养基3Kg，然后将发酵液按1:0.5的比例(固液质量比)接入固体培养基中，32℃，发酵72h，40℃烘干；取木霉菌种，发酵按如下方法发酵培养
1)培养基：
斜面及保存用培养基：马铃薯蔗糖琼脂培养基
固体发酵：麦麸80％，豆饼粉20％，KH2PO40.5％。料：水＝1:0.7。
2)发酵工艺：
一级菌种：每个三角瓶装入培养基40g，然后将平板菌种按一个平板接四瓶的比例接种，22℃，培养48小时。
固体发酵：将固体培养基121℃，灭菌40分钟，每个托盘中装入培养基3Kg，按接种量6％接种，26℃，培养84h，40℃烘干；
菌剂复配
将泾阳细黄链霉菌和木霉混合在一起，重量比为：2:3。
例3、取泾阳细黄链霉菌种，按如下方法发酵培养
1)培养基：
斜面：马铃薯蔗糖琼脂培养基
摇瓶用培养基：马铃薯蔗糖培养基
固体发酵：玉米粉50％，玉米杆粉30％，麦麸25％，K2HPO40.4％，生石灰1％，料：水＝1:0.6。
2)发酵工艺：
将平板菌种用100mL无菌水洗下，取10mL接入200mL马铃薯蔗糖液体培养基，32℃，140转/分钟，培养24h，将固体培养基121℃，灭菌40分钟，每个托盘装入培养基3Kg，然后将发酵液按1:0.3的比例(固液质量比)接入固体培养基中，25℃，发酵48h，40℃烘干；取木霉菌种，发酵按如下方法发酵培养
1)培养基：
斜面及保存用培养基：马铃薯蔗糖琼脂培养基
固体发酵：麦麸70％，豆饼粉30％，KH2PO40.5％。料：水＝1:0.8。
2)发酵工艺：
一级菌种：每个三角瓶装入培养基40g，然后将平板菌种按一个平板接四瓶的比例接种，22℃，培养48小时。
固体发酵：将固体培养基121℃，灭菌40分钟，每个托盘中装入培养基3Kg，按接种量4％接种，26℃，培养72h，40℃烘干；
菌剂复配
将泾阳细黄链霉菌和木霉混合在一起，重量比为：7:3。
例4、菌种发酵培养方法与例1相同，将泾阳细黄链霉菌和木霉混合在一起，重量比为：5:3。
例5、菌种发酵培养方法与例1相同，将泾阳细黄链霉菌和木霉混合在一起，重量比为：4:3。

Claims (1)

1.一种人参、西洋参微生物多抗菌肥的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)泾阳细黄链霉菌发酵
1)培养基：
斜面：马铃薯蔗糖琼脂培养基
摇瓶用培养基：马铃薯蔗糖培养基
固体发酵培养基：玉米粉50-80％，玉米杆粉10-30％，麦麸10-30％，K2HPO40.4％，生石灰1％，料∶水＝1∶0.6-1∶0.8；
2)发酵工艺：
将平板菌种用100mL无菌水洗下，取10mL接入200mL马铃薯蔗糖液体培养基，32℃，140转/分钟，培养24h，将固体发酵培养基121℃，灭菌40分钟，每个托盘装入培养基3Kg，然后将发酵液按1∶0.2-1∶0.5的比例接入固体培养基中，25-34℃，发酵48-72h，40℃烘干；
(2)木霉发酵
1)培养基：
斜面及保存用培养基：马铃薯蔗糖琼脂培养基
固体发酵培养基：麦麸70-90％，豆饼粉10-30％，KH2PO40.5％，料∶水＝1∶0.6-1∶0.8；
2)发酵工艺：
一级菌种：每个三角瓶装入培养基40g，然后将平板菌种按一个平板接四瓶的比例接种，22℃，培养48小时；
固体发酵：将固体发酵培养基121℃，灭菌40分钟，每个托盘中装入培养基3Kg，按接种量4-10％接种，22-26℃，培养72-84h，40℃烘干；
(3)菌剂复配
将泾阳细黄链霉菌和木霉混合在一起，重量比为2∶3-7∶3。
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