CN101690451B

CN101690451B - 烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法

Info

Publication number: CN101690451B
Application number: CN2009101449854A
Authority: CN
Inventors: 孙学永; 祖朝龙; 高正良; 周应兵; 阮龙; 杨华应
Original assignee: INSTITUTE OF TOBACCO ANHUI ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES
Current assignee: INSTITUTE OF TOBACCO ANHUI ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES
Priority date: 2009-09-18
Filing date: 2009-09-18
Publication date: 2011-04-20
Anticipated expiration: 2029-09-18
Also published as: CN101690451A

Abstract

一种烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法，包括：1)培育烟草青枯病病圃；2)适时整理病圃田地：在病圃的烟草移栽前，平整土地达到土壤细碎能够起垄起畦地膜覆盖的要求，按照每畦宽1.5m～2.5m，畦间沟宽0.5m～0.7m作畦，畦面平整，长度根据地块大小调整；3)确定栽培密度，采取平畦移栽方式：在每畦上栽植3-5行以上，株距0.2m～0.4m；4)合理施肥，加强田间管理：氮磷钾肥料施用的重量比例为1∶1-2∶1-2，采用地膜覆盖方式，重视田间灌溉；5)病情调查与分级。本发明的优点在于：提高了烟草青枯病抗性的大田鉴定效率，不仅能够应用于烟草品种的抗性鉴定，而且能在同样资金及病圃面积状况下使鉴定材料在4-6倍以上的增加，且同样应用于烟草抗青枯病育种。

Description

烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法

【技术领域】

本发明涉及作物抗病性鉴定方法，具体为烟草青枯病抗性田间鉴定方法的改进。

【背景技术】

烟草青枯病是由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种细菌性病害，是典型的维管束病害，最显著的病状是枯萎，一旦发病即可造成全株死亡，对烟草的产量和质量影响极大，是烟草上一大毁灭性病害。该病广泛分布于全世界的热带、亚热带和一些温暖的地区。在我国的福建、安徽、江苏、云南、广西、河北、湖南、广东等地普遍发生。利用抗病品种是防治烟草青枯病的一项根本、有效、经济的措施。由于烟草相比其它大田作物来说是大株作物，种植成本较高，受经费等条件的限制，如何经济快速地鉴定烟草对青枯病的抗性程度成为育种的关键措施。据《中华人民共和国烟草行业标准--烟草品种抗病性鉴定》标准号：YC/T 41-1996介绍，烟草青枯病抗性现鉴定方法分为两种：1.田间鉴定方法：测定烟草品种抗青枯病的程度，一般在病区的连作田块自然发病，可以不经过人工接种观察对青枯病的抗性。随机或顺序排列，三次以上重复，每品种种植一行，每行20株，设抗病品种DB101，感病品种长脖黄为对照。各地增设当地抗、中、感品种为对照，在田间发病初期、盛期和末期进行田间调查。调查时病害严重度分级应符合YC/T 39的规定。2.烟草苗期鉴定：将苗龄40天的烟苗，移栽至瓦盆，待烟苗成活后，用根灌菌液的方法，每株灌20ml的细菌悬浮液(3×108/m1)，接种后置于28～30℃恒温室中，并将瓦盆放在盛水的瓷盘中保湿，观察发病情况。于接种后第7、10、15、21、30天，按YC/T 39的规定进行调查，计算发病率和病情指数。

上述田间鉴定方法能够较好的反应品种的抗性，且可以考察其株型等农艺性状。烟草相比其它大田作物来说是大株作物，其大田栽培模式为生产栽培密度1200株/666.7m²左右，其它大田作物如玉米栽培密度4000株/666.7m²以上，小麦稀播时栽培密度至少在20000株/666.7m²以上，正常种植时更多。如果据此作为品种选育来应用，尤其是低代分离材料时，其鉴定效率较低，在同样资金及病圃面积的状况下不易选出抗病且优质的烟草株系，这是烟草相对其它大田作物出品种较少的原因之一。既保证烟草青枯病抗性大田鉴定的准确性又提高效率，使其能够应用于一般烟草育种课题是本领域的技术人员要解决的技术问题。

【发明内容】

本发明所要解决的技术问题在于提供一种既提高了抗性鉴定的效率又保留了大田病圃鉴定结果的可靠性等优点，并且适合于烟草青枯病抗病育种的烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法。

本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的：本发明烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法包括下述步骤：

1)培育烟草青枯病病圃：选择病圃宜在烟草主产区相对独立的田块，多年连续种植感病品种至其病情指数生育末期达到或接近100时，次年即可做为病圃使用，种植在旱地或者水田上，水田必须每年坚持烟-稻连作，水稻收获后至烟草移栽前田间保持湿润状态，田间持水量40％～80％，田间持水量60％时效果最好，杜绝田间积水，以利青枯菌的存活，水田病圃当年发病烟株秸秆必须还田，以保证田间土壤菌量；

2)适时整理病圃田地：在病圃的烟草移栽前，平整土地，达到土壤细碎、能够起垄起畦，及地膜覆盖的要求，按照每畦宽1.5m～2.5m，畦间沟宽0.5m～0.7m作畦，畦面平整，长度根据地块大小适当调整，其中按照每畦宽2m，畦间沟宽0.6m作畦效果最好；

3)确定栽培密度，采取平畦移栽方式：本发明中的栽培密度是在常规栽培模式上增加，在每畦上栽植3-5行，株距0.2m～0.4m，株距0.3m时效果最好，即其田间密度为4444株/666.7m²-7407株/666.7m²，其三种及以上密度的确定是根据其对烟草株型鉴定的重要性确定，株型等农艺性状选择越重要宜越稀植；

4)合理施肥，强田间管理：青枯病病圃施肥采用增氮减磷钾的原则，高密度栽培条件下在当地一般大田生产的基础上增加10-15％的氮肥，即氮磷钾重量比例为1∶1-2∶1-2，增施的氮肥可以采取基肥或追肥的方式施用，采用地膜覆盖方式，重视田间灌溉，务必使各畦间沟灌溉水的畅通互流，以使田间菌量均一；

5)病情调查与分级：以烟草品种DB101为抗病对照，烟草品种长脖黄为感病对照，青枯病调查以田间始病期开始，每10天左右调查一次，调查以株为单位，病害严重度分级及调查方法按《中华人民共和国烟草行业标准-烟草病害分级及调查方法》YC/T 39-1996；

抗病性分级标准：

首先利用下述公式计算相对抗病性指数：

RRI＝ln(DI/(1-DI))-ln(DI₀/(1-DI₀)

DI：试品种病情指数；DI0：对照品种病情指数(本发明采用感病对照的病情指数)，然后按照下表1抗性分级标准划分各品种的抗病性。

表1抗性分级标准

本发明烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法的优点在于：

1)普通的大田病圃鉴定结果可靠，与大田生产一致，但其需病圃大、花费高，育种单位一般把此作为品种或高代材料的鉴定方法。本发明中提高了烟草种植密度，使其鉴定效率提高了4-7倍以上，且保留了普通大田病圃鉴定的其它优点；

2)烟草苗期鉴定，如采用盆栽试验及如专利“一种烟草青枯病抗性的苗期鉴定方法”公开号CN101496481-所述的苗期鉴定方法，虽然其鉴定的材料量大，成本相对较低，但其鉴定结果与田间鉴定结果有一定的差异且不能够与烟草株型选择同时开展。在本发明中随栽培密度增加其农艺性呈有规律变化，能够根据规律进行初步的烟草株型选择，而且根据鉴定株型重要性可以对栽培密度予以调整，更适合于烟草新品种选育流程，接近于烟草育种工作者的田间试验要求与习惯。

【具体实施方式】

下面结合实例对发明进一步详细说明，但实施例不是对本发明的限制：

从2005年开始，本专利申请的发明人在安徽省皖南烟区宣城市寒亭镇义兴村开展烟草育种、植保等试验，每年在2bm的水田上采取烟-稻连作的方式连续栽培烟草青枯病感病品种，至2007年试验结束，约有1.2hm的土地上感病品种在生育终期发病率达到80％以上。从2008年确定其为青枯病重发田块，开始利用其作为病圃开展烟草青枯病抗性品种鉴定及新品种选育研究。2008年-2009年开展国内烟草抗青枯病资源及安徽省地方烟草品种的筛选研究。

田间采用平畦栽培方式，即畦宽2m，畦间沟宽0.6m，深0.3m。施肥量为每666.7m²基肥7.5kgN、10kgP₂O₅、10kgK₂O，追肥每666.7m²5kgKNO₃，KNO₃溶入水中在移栽后40天内浇施。每畦栽4行，即田间密度为5555株/666.7m²，为一般大田栽培密度的4.6倍左右。如下表2所示，为采用上述栽培方式的烟草品种高密度田间鉴定种植示意表。

表2烟草品种高密度田间鉴定种植示意表(示每畦2区)

注：→为灌溉水流方向为S形流向。2m为平畦宽度，0.6m为畦间沟宽，＊为烟草植株，株距为0.3m，畦内小区间距0.6m。

于4月15日前后移栽，随后覆盖2m宽地膜。田间灌溉沿畦间沟呈“S”形流水。2008年感病对照烟草品种长脖黄始发病期为5月30日，2009年始发病期为5月17日。分别于2008年6月5日及2009年6月10日第一次调查青枯病病级，以株为单位，病害严重度分级及调查方法按《中华人民共和国烟草行业标准-烟草病害分级及调查方法》YC/T 39-1996。每10天左右调查病级一次直到7月底，下茬水稻移栽时。2008年度烟草田间采取烟-稻连作方式，烟草秸秆全部还田，水稻收割后翻耕，保持田间持水率60％左右。于2009年继续作为病圃使用。2008年共鉴定了35份国内文献公布的中抗以上烟草品种，108份安徽省地方烟草品种资源；每份材料三次重复，每小区32株，共用地3.5*666.7m²，2009年鉴定其中中感以上烟草品种68份，共用地区1.2*666.7m²。两年鉴定结果表明，抗感对照品种与公开文献表现一致，K 346，反帝三号-丙等中抗烟草品种在本例中表现一致；已筛选出歙圆四号等8份材料达中抗以上水平。

Claims

1.烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法，其特征在于：包括下述步骤：

1)培育烟草青枯病病圃：在烟草主产区相对独立的田块选择病圃，多年连续种植感病品种至其病情指数生育末期达到或接近100时，次年即可做为病圃使用，种植在旱地或者水田上，水田必须每年坚持烟-稻连作，水稻收获后至烟草移栽前田间保持湿润状态，田间持水量40％～80％，杜绝田间积水，以利青枯菌的存活，水田病圃当年发病烟株秸秆必须还田，以保证田间土壤菌量；

2)适时整理病圃田地：在病圃的烟草移栽前，平整土地，达到土壤细碎、能够起垄起畦，及地膜覆盖的要求，按照每畦宽1.5m～2.5m，畦间沟宽0.5m～0.7m作畦，畦面平整，长度根据地块大小调整；

3)确定栽培密度，采取平畦移栽方式：在每畦上栽植3-5行，株距0.2m～0.4m，即其田间密度为4444株/666.7m²--7407株/666.7m²；

4)合理施肥，加强田间管理：氮磷钾肥料施用的重量比例为1∶1-2∶1-2，采用地膜覆盖方式，重视田间灌溉，使各畦间沟灌溉水的畅通互流，以使田间菌量均一；

5)病情调查与分级：以烟草品种DB101为抗病对照，烟草品种长脖黄为感病对照，青枯病调查以田间始病期开始，每10天左右调查一次，调查以株为单位，病害严重度分级及调查方法按《中华人民共和国烟草行业标准-烟草病害分级及调查方法》YC/T 39-1996。

2.如权利要求1所述的烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法，其特征在于：所述步骤1)中，田间持水量为60％。

3.如权利要求1所述的烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法，其特征在于：所述步骤2)中，每畦宽2m，畦间沟宽0.6m。

4.如权利要求1所述的烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法，其特征在于：所述步骤3)中，每畦上栽植4行，株距0.3m。

5.如权利要求1所述的烟草青枯病抗病性田间高密度鉴定方法，其特征在于：所述步骤4)中，施肥量为每666.7m²基肥7.5kgN、10kgP²O⁵、10kgK₂O，每666.7m²追肥5kgKNO₃，KNO₃溶入水中在移栽后40天内浇施。