CN101658479B - 纳米级珍珠粉在美容护肤品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了涉及纳米级珍珠粉在美容护肤中的应用，该营养物质由微米珍珠粉改造成1000nm以下的珍珠粉作用于美容护肤的营养物质，该纳米珍珠粉具有优于原始微米的渗透性；珍珠主要成分碳酸钙是由谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、牛磺酸等多种氨基酸(珍珠素)及微量元素组成，主要涉及营养免疫学领域，更具体涉及肌肤营养物质等多种生物活性和功能作用。

Description

纳米级珍珠粉在美容护肤品中的应用

技术领域

本发明涉及纳米级珍珠粉作为制备在美容护肤品中的应用，特别涉及纳米级珍珠粉制备用于美容护肤营养物质的技术。

背景技术

自古以来，珍珠就是名贵的药材及美容护肤之珍品，在《本草纲目》中就有所记载其功用：“珍珠……安魂魄，止遗精、白浊、解痘疗毒……镇惊安神，解毒生肌，明日去翳；涂面，令人润泽好颜色，涂手中去皮肤逆胪，能化面去黩，令光泽洁白。”此外，珍珠粉还具有抗衰老和增加免疫功能的作用，珍珠主要成分碳酸钙，以及由谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸等多种氨基酸(珍珠素)组成的蛋白质、牛磺酸及微量元素，如铁、铝、镁、锌、硒、铜、锰、锗、钾和锶等，这些成分对人体皮肤，尤其是面部肌肤的营养具有良好的生物活性和功能作用。但是，因珍珠的质地坚硬，难溶于水，若不经过特殊工艺处理，人体对它的吸收利用率很低。目前，市面销售珍珠粉的粒径主要在微米级别。一般认为降低珍珠粉的粒径有利于人体对其吸收利用率，但关于二种不同粒径珍珠粉的皮肤渗透能力的研究报道甚少，且缺乏实验数据，说服力不强。本发明以离体无毛小鼠皮肤为模型，比较微米级与纳米级珍珠中碳酸钙在经皮渗透性方面的差异；实验证实纳米级珍珠粉用于美容护肤中具有较好效果。

皮肤分为两层。里面或者说下面一层叫做真皮，它包含了真皮细胞(皮肤细胞之源)，是一个血管网，腺体以及神经末梢；皮肤的外层叫做表皮，它由一些真皮细胞组成，但这些真皮细胞在向皮肤表面移动的过程中已经失去了水分，变得又平又硬，主要由一种角蛋白的蛋白质构成，皮肤表面就是由重叠着的死去的真皮细胞所构成的，这些细胞会脱落，并不断地被更新换代。真皮含有大量的胶原质，它赋予皮肤力量，并维持皮肤的结构，交织在胶原质之中的是弹性纤维，它可以使皮肤富有弹性。营养在皮肤形成的每个环节上都至关重要，源于真皮层的胶原质是由氨基酸转化成为羟基脯氨酸时形成的。因此，没有氨基酸就没有胶原质，胶原质和弹性纤维的灵活性会受自由基造成损坏的影响而随时变化。这种损坏受抗氧化剂的限制，如氨基酸、维生素A、维生素C、维生素E，硒以及其他一些物质。维生素A帮助控制角质素在皮肤中聚集的速度，缺乏维生素A会引起皮肤干燥和粗糙；皮肤细胞膜是由必需脂肪构成的，如果必需脂肪缺乏就会使这些细胞迅速干瘪，造成皮肤干燥，并需要大量的加湿剂。皮肤细胞的健康依赖于充足的氨基酸及锌元素，它可以确保人体能够正确无误地生成新的皮肤细胞；缺少了锌，皮肤就会发生皲裂，并且不易愈合。与此同时，从痤疮到湿疹的一系列皮肤病都和锌紧密关系。皮肤细胞还会产生一种化学物质，它能在阳光下转化成维生素D，而维生素D对于维持体内钙的平衡意义重大。所以，从很多方面看，人体肌肤出现缺乏氨基酸时造成胶原质流失引起皮肤干燥和粗糙及斑色等现象。

发明内容

本发明的目的在于提供一种纳米级珍珠粉在美容护肤品中的应用。该美容护肤品具有去痘、祛斑、消除皱纹、增加肌肤光泽等作用。

一种纳米级珍珠粉(10-1000nm，下同)在制备具有祛斑、消除皱纹、修复暗疮疤痕的美容护肤品中的应用。

本发明还提供一种纳米级珍珠粉和辅酶Q10的复合在制备具有祛斑、消除皱纹、修复暗疮疤痕的美容护肤品中的应用。

本发明还提供一种纳米级珍珠粉、辅酶Q10和天然保湿因子的复合在制备具有去痘、祛斑、消除皱纹、修复暗疮疤痕的美容护肤品中的应用。

上述纳米级珍珠粉主要成分为碳酸钙，有效成分为包括谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、脯氨酸、牛磺酸、珍珠素的任何一种成分或任意两种或两种以上不同成分的组合。

上述美容护肤品为护肤面膜。

上述美容护肤品包括下述重量百分比的组份，纳米珍珠粉为3-80％，凡士林1-5％，乳化剂1-2％，天然保湿因子1-3％，余量为蒸馏水。

上述美容护肤品包括辅酶Q10 0.5-3％，还包括下述重量百分比的组份，白油1-3％，肉豆蔻酸异丙酯3-5％，硬酸酯1-3％，丙二醇4-8％。

本发明将纳米级珍珠粉应用在美容护肤营养物质中，珍珠素可经表皮渗透的碳酸钙到真皮层内，补充真皮细胞的胶原质；赋予皮肤能量，并维持皮肤的结构，增强皮肤纤维，可使皮肤富有弹性，有效消除皱纹、暗疮疤痕、色斑等效果。

附图说明

图1是未使用本发明实施例1时的状态图。

图2是使用本发明实施例1后20天的状态图。

图3是未使用本发明实施例2时的状态图。

图4是使用本发明实施例2后20天的状态图。

具体实施方式

由于因珍珠粉粒其质地坚硬，难溶于水，相对分子质量较大，难以经表皮渗透的碳酸钙到真皮层内。将微米珍珠粉改造成为10-1000nm的珍珠粉，即纳米粒珍珠粉；该纳米粒珍珠粉用于美容护肤营养物质，具有优于微米级珍珠粉对皮肤的渗透性。其原因在于，当珍珠粉粒径降至纳米级别后，其极小的粒子更有利于珍珠粉中主要成分碳酸钙通过细胞间隙扩散，被皮肤累积渗量及透皮速率吸收和利用，纳米微粒应用机制相比于载体材料具有生物利用度与提高难溶解物质水溶性及制备工艺简单等优点。解决微米珍珠粉对表皮吸收方式，是通过微米珍珠粉制备成纳米微粒后，将制成乳液剂，涂在肌皮上可经腺体以及神经末梢吸收，从而克服大颗粒微米珍珠粉难以穿透常态下无法逾越的毛细血管网的障碍，可经血循环到达实体真皮的深处；解决了因缺乏营养物质引起皮肤干燥和粗糙问题，可消除氧自由基，延缓皮肤衰老，提高皮肤生物利用率，调理肌肤，增强肌肤弹性，消除皱纹，收缩扩张微血管，修复毛细血管壁，激发细胞能量可能。经过纳米生物技术改善珍珠物质功效提高的潜在价值，纳米粒珍珠粉的应用具有重要意义和广阔前景。

纳米级珍珠粉的得到方法是先采用高压均质机将珍珠粉碎成粒径为2～5微米的颗粒；然后再用浓度为30～50wt％的柠檬酸或葡萄糖酸水溶液溶解珍珠颗粒，获得浓度为20～30wt％的珍珠粉溶液；用碳酸氢钠将水解珍珠粉溶液的pH值调节到中性，在室温下静置后得到珍珠粉胶体，再将所得胶体液用超音速喷雾负压干燥得到纳米级珍珠粉。

本发明营养物质使用结果表明，具有下列优点和功效：

纳米级珍珠粉作为制备用于美容护肤品中的应用可如下复合：

实施1(WT％)：

生产方法：

1、将白油、凡士林、十八醇和角沙烷调和至均匀，加热至75℃，保温20-30min；

2、然后将纳米珍珠粉、天然保湿因子、辅酶Q10一起放入上述步骤中的调和品中，搅拌溶解得油相；

3、再将成分肉豆蔻酸异丙酯、硬酸酯、丙二醇、Natramerge^TME₃(乳化剂)、蒸馏水加热溶解至75℃得水相，保温20-30min；

4、在搅拌的同时，将步骤2所得的油相加入到步骤3所得的水相中，搅拌降温至45℃时加入适量香精制备成乳液即可。

实施2(WT％)：

生产方法同实施例1。

实施3(WT％)：

生产方法同实施例1。

实施4(WT％)：

生产方法：

将纳米珍珠粉、天然保湿因子、凡士林、Natramerge^TME₃(乳化剂)、蒸馏水调和至均匀，加热至75℃，保温20-30min制备成乳液即可。在搅拌的同时，将步骤2所得的油相加入到步骤3所得的水相中，

实施5(WT％)：

生产方法同实施例4。

实施6(WT％)：

生产方法同实施例5。

实施7(WT％)：

将纳米珍珠粉、凡士林、Natramerge^TME₃(乳化剂)、蒸馏水调和至均匀，加热至75℃，保温20-30min制备成乳液即可。

实施8(WT％)：

纳米级珍珠粉，100％。可以直接作用于皮肤上，也具有同样效果。

上述各种实施例中的还可以加以适当香精可以制成相应的带香味的美容护肤品。

经将纳米级珍珠对离体小鼠皮肤渗透性的实验，说明本发明在美容护肤品中的应用十分有效。试验方法如下：

材料与方法

药品与试剂，纳米级珍珠粉与微米级珍珠由香港中药与天然药物研究所提供；十二烷基硫酸纳(上海化学试剂公司)；钙测定试剂盒(广州健成生物科技公司)。

动物与仪器设备 昆明种小鼠，体重(30.0±3.0)g由中国药科大学动物试验中心提供，TP-3型透皮扩散实验仪(南京红蓝电子科技中心)。

检测方法

1、检测原理 珍珠粉中含有90％以上的碳酸钙因此可用溶液中钙离子的含量指示经皮渗透的碳酸钙，本检测可通过钙测定试剂盒完成，该试剂盒包括：甲基百里秋酚蓝(MTB)试剂：碱性溶液；2.5mmoL钙标准液，检测原理的采用MTB比色法，测定溶液中钙离子的含量。钙离子在碱性溶液中与MTB结合，生在蓝色络合物，通过比色与同样处理的钙标准液进行比较，可计算出钙的含量。

2、操作过程：如表1所示，将各液体混匀，静置5min后，于波长610nm处，采用玻璃比色皿测定，以空白管调零，测定标准管及测定管的吸光度。

案1甲基百里香酚蓝(MTB)法测定钙离子浓度的操作方法

3、计算方法：钙离子含量(mmol·L)＝(测定管吸光度/标准管吸光度)×2.5mmol·L；珍珠粉中碳酸钙含量(mg·L)＝钙离子含量×100方法学研究

1、专一性试验：考察空白皮肤及扩散介质对接受液中钙离子含量测定的影响。离体皮肤制备，取小鼠处死，剪去腹部绒毛，用8％硫货钠脱毛，生理盐水冲洗干净，剥离皮肤，除去皮下散室与接受室之间，渗透面积为214cm²。渗透扩散装置置于透皮扩散仪中，温度维持在(37.0±0.5)oC，接受室内以搅拌子维持动态环境，控制转速在250转·mim^-1。在接受室中加入pH5.0的生理盐水(以枸橼酸及枸橼酸钠进行调节，在pH5.0的生理盐水中碳酸钙的溶解性较好，可满足漏槽条件)作为接受液，使液面与皮肤内层完全接触；在扩散室加入2ml扩散介质，不含珍珠粉，用保鲜膜覆盖扩散室顶部及接受室取拉口。持续搅伴，24h后在接受液中取样5ml，过滤，滤液的测定方法如“操作过程”中所示。

2、标准曲线制作：，精密称取珍珠粉约30mg，转移至50mg容量瓶中，加pH5.0的生理盐水适量，超声、加热使珍珠粉溶解，补加pH5.0的生理盐水至刻度，混匀，得贮备液。

取上述贮备液分别精密吸取0.2，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0及8.0ml，转移至10ml容量瓶中，加Ph5.0生理盐水至刻度，混匀，应用钙试剂盒，采用MTB法在610nm处测定吸光度，计算碳酸钙的浓度，绘制标准曲线。

3、回收率及精密度试验，按照标准曲线确定的范围，配制含珍珠粉浓度约为0.010，0.20，0.40mg-L^-1溶液各3份，应用钙试剂盒，采用MTB法在610mm处测定吸光度，计算碳酸钙的浓度.同加入量比较，计算回收率。

同时取珍珠粉浓度约为0.010，0.20，0.40mg-L^-1的珍珠粉溶液各一份，分别于同一日内重复测定5次，以及连续测定3d。考察日内及日间精密度。

经皮渗透试验

1、体外透皮实验：按“专一性试验”项下操作，在扩散室内加入2ml珍珠粉混悬液，用保鲜膜覆盖扩散室顶部接受室取样口。持续搅拌，分别于1，2，4，6，8，12，24h取样2.5ml，经0.8μm微孔滤膜过滤，弃去1ml初滤液，保留剩余的续滤液，并及时在接受室中补加相同体积的新鲜接受液以排除接受室中的气泡。

2、数据处理：取续滤液50μl测定接受液中钙离子及珍珠粉中碳酸钙的含量。按下式计算累积渗透量(Q：Q(mg·cm^-2)＝Ca×17+∑c1×2.5)/S×10^-3，其中Ca为等N个点测得的药物浓度(mg·L^-1)；S为渗透面积(Cm2)；17为接受室的总体积(ml)；2.5为每次取样的体积(ml)。

统计学分析 应用SPSSII.0统计分析软件处理，计量数据用均数±标准差表示，二组间比较采用成组t检验，设定P＜0.05为差异有显著意义。

结果：

专一性试验：24Hrg，在接受液中未检测出钙离子.说明空白皮肤及扩散介质均对钙离子的含量测定无干扰。

标准曲线：经测定，贮备液中碳酸钙的浓度为495.6mg-L^-1，以吸光度对碳酸钙的浓度进行线性回归，得回归方程为：c＝1065.7A+1.8003，＝0.9991(n＝9)。溶液中碳酸钙的吸光度与其浓度在9.912-369.5mg·L^-1范围内具有良好的线性关系。

回收率试验：试验结果表时高、中、低3种浓度的回收率分别为(101±3)％，(99.4±2.4)％，(100.6±2.4)％。

精密度试验：高、中、低3种浓度的日内精密分别为8.54％，1.03％，1.12％.日间精密度为8.42％，1.21％，1.49％，说明本方法重现性良好。

经皮渗透实验

碳酸钙经皮累积渗透量二种珍珠粉在1h的Q值无显著差异；从2h后，纳米级珍珠粉的Q值大于微米级珍珠粉(P＜0.05)；从4h开始(4-24h)，纳米级珍珠粉的Q值显著高于微米级珍珠粉(P＜0.01).见

表2微米级与纳米级珍珠粉中碳酸钙经皮累积渗透量结果比较(n＝6，mg.·cm^-2)

二种珍珠粉的累积渗适量比较，经t检验P＞0.05  tP＞0.05

2、碳酸钙经皮渗透速率 以累积渗透量为纵坐标，时间为横坐标，绘制纳米级与微米级珍珠粉经皮渗透典线，略图；对图曲线进行拟合，得到微米级和纳米级珍珠粉的体外透皮方程。分别为微米级珍珠粉：Q＝0.0891/+0.0360(n＝6，r＝0.996)，经皮渗透速率r＝0.0891mg·cm^-2·h^-1。纳米级珍珠粉：Q＝0.1261/+0.1102(n＝6，r＝0.991)，经皮渗透速率r＝0.0891mg·cm^-2·h^-1。

由上述拟合结果可知，微米级与纳米级珍珠粉的体外透皮过程符合零级速率方程，释放速率基本恒定，不随时间变化，且纳米级珍珠粉经表皮渗透速率明显高于微米级珍珠粉。

实验总结：

珍珠粉对皮肤细胞的直拉作用表现为提供一个具备充分营养的细胞外环境，从而达到增白皮肤、除去斑点、消除瘀痕、恢复皮肤弹性、减轻皮肤皱纹等作用。一般认为，珍珠粉中有效成分为氨基酸、角质蛋白以及微量无素。普遍认为珍珠中主要成分碳酸钙对改善皮肤细胞作用甚微，实际上组织化学和化学分析表明，皮脂腺的钙含量较高，有助于钙盐对角质层的浸透，它除了在骨骼系统和血凝、肌肉和神经过敏生理学方面起主要作用外，钙能通过细胞间的黏固分(可能是蛋白质盐)控制毛细血管的渗透性，这表明钙对皮肤有很大的重要性。

另外，活细胞赖以生存的重要依据是细胞内[Ca²⁺]低而细胞外[Ca²⁺]高，膜内外存在一浓度梯度，两者相差500倍时就构成一种跨膜活性状态。其分泌、收缩、兴奋均取决于这种[Ca²⁺]的浓度梯度。珍珠粉中大量[Ca²⁺]进入人体细胞间质，能促进ATP酶的活性，调节酸碳平衡，参与细胞缓冲系统的作用。更为重要的是[Ca²⁺]构建了细胞膜内外的浓度梯度，这使得外界信息能准确稳定地在细胞内传梯，来维持细胞的代谢平衡状态，从而延缓细胞衰老。

基于上述认识我们在体外透皮实验中，以珍珠粉中主要成分碳酸钙为指标，考察珍珠粉的透皮情况，以总结了纳米级珍珠粉与微米级珍珠粉的透皮能力。

本实验中，通过体外透皮试验考察，证明了纳米级珍珠粉中碳酸钙的累积渗量及透皮速率明显优于微米级珍珠粉。其原因在于，当珍珠粉粒径降至纳米级别后，其极小的粒子更有利于珍珠粉中主要成分碳酸钙通过细胞间隙扩散，被皮肤吸收和利用。由此可见，纳米级珍珠粉可以更充分地发挥出珍珠的美容及药用功效，因而其应用价值和市场前景的商业价值更为可观。

纳米珍珠粉复合乳液用于美容护肤的对照：

上述实施例(实施例1-8)，每种实施例各用200多名自愿者试用，使用本护肤品后，普遍认为：皮肤舒适、湿润、光滑无粗糙感、弹性良好、祛斑、无紧张异物感、无任何不良反应。

用法：用适量本品涂于脸部，避开眼部及唇部。其功效机理为：使用纳米珍珠粉复合乳液的营养活性成分可有效地渗进皮肤里，促成氨基酸转化成为羟基脯氨酸形成真皮层的胶原质，促进表皮组织上皮细胞、角质细胞等多种细胞的增殖生长、分裂，延缓细胞衰老，重组皮肤内层，促进皮肤新陈代谢，起到明显的营养护肤和作用。实施例1的具体效果见图1和图2的对比；实施例2的具体效果见图3和图4的对比。

纳米珍珠粉复合乳液的护肤保健功效依赖于它独特多种细胞因子的协同功效：

1、辅酶Q10具消除氧自由基，延缓皮肤衰老，提高皮肤生物利用率，调理肌肤，增强肌肤弹性，消除皱纹，收缩扩张微血管，修复毛细血管壁，激发细胞能量，保持细胞处于“活化”状态。而细胞的增殖能力理论上是呈几何级数的增长，使皮肤细胞处于“年轻”状态。

2、纳米珍珠粉通过诱导短暂增殖细胞大量转化为成熟的表皮细胞，对皮肤细胞的直拉作用表现为提供一个具备充分营养的细胞外环境，从而达到增白皮肤、除去斑点、消除瘀痕、恢复皮肤弹性、减轻皮肤皱纹等作用。

3、天然保湿因子皮肤可以防止表面的皮脂膜水分蒸发，从而保持皮肤角质层中含有的水分。对皮肤的角质层中存在有吸附性的...尤其是角质细胞的脂质与蛋白质共同构成保护天然保湿因子的细胞膜，阻止了天然保湿因子的流失，并对水分的挥发起着适当的滋润及修复老化受损细胞，重塑完整的皮肤表皮层水质膜，缓解干燥，恢复肌肤健康的生理状态，修复日积月累的紫外线伤痕，为肌肤提供净白营养元素，全面阻断麦拉宁的形成，令暗淡、枯黄的肌肤明显柔滑均匀；为辅酶Q10、纳米珍珠的作用提供一个良好的细胞内、外环境，同时，由于其在对皮肤的角质层中存在有吸附性有强大的功效性，从而弥补辅酶Q10、纳米珍珠在这方面功效性的不足。

皮肤美容分项结果：(用双盲法)

样品	光泽	滋润	柔软	抗皱	综合结果
						微米珍珠粉	55.30％	53.66％	40.43％	46.25％	48.91％
纳米珍珠粉复合品	96.87％	94.82％	96.48％	85.32％	93.32％

样品	去粉刺	去色斑	增白	表皮组织修复	综合结果
						微米珍珠粉	46.68％	42.40％	58.24％	54.30％	50.40％
纳米珍珠粉复合乳液	94.32％	78.80％	92.42％	92.46％	89.5％

试验结果表明：纳米级珍珠粉粒用于美容护肤品明显渗透功能作用，该纳米珍珠粉复合乳液可经表皮渗透到真皮层内，补充真皮细胞的胶原质；赋予皮肤能量，并维持皮肤的结构，增强皮肤纤维，可使皮肤富有弹性，有效消除皱纹、暗疮疤痕、色斑等效果，并对水分的挥发起着适当的滋润及修复老化受损细胞，重塑完整的皮肤表皮层水质膜，缓解干燥，恢复肌肤健康的生理状态，修复日积月累的紫外线伤痕，为肌肤提供净白营养元素，全面阻断麦拉宁的形成，令暗淡、枯黄的肌肤明显柔滑均匀。

Claims (7)

1.纳米级珍珠粉在制备具有祛斑、消除皱纹、修复暗疮疤痕的美容护肤品中的应用。

2.纳米级珍珠粉和辅酶Q10的复合在制备具有祛斑、消除皱纹、修复暗疮疤痕的美容护肤品中的应用。

3.纳米级珍珠粉、辅酶Q10和天然保湿因子的复合在制备具有祛斑、消除皱纹、修复暗疮疤痕的美容护肤品中的应用。

4.根据权利要求1至3中任何一项权利要求所述应用中的纳米级珍珠粉主要成分为碳酸钙，有效成分为包括谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、脯氨酸、牛磺酸、珍珠素的任何一种成分或任意两种或两种以上不同成分的组合。

5.根据权利要求1至3中任何一项权利要求所述的应用中的美容护肤品为护肤面膜。

6.根据权利要求5所述应用中的美容护肤品包括下述重量百分比的组份，纳米珍珠粉为3-80%，凡士林1-5%，乳化剂1-2%，天然保湿因子1-3%，余量为蒸馏水。

7.根据权利要求6所述的应用中的美容护肤品，包括辅酶Q10  0.5-3%，还包括下述重量百分比的组份，白油1-3%,肉豆蔻酸异丙酯3-5%,硬酸酯1-3%,丙二醇4-8%。

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