CN101637779A - 一种有机磷降解制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及微生物技术，具体的说是具体的说是一种可加速有机磷降解生物制剂及其制备方法。有机磷降解制剂由混合菌种发酵液与干草炭土混合即得有机磷降解制剂，所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶1－3。制备方法为将混合菌种发酵液与干草炭土搅拌均匀，进行造粒后在40－50℃干燥3－6小时，过2.0－4.0mm筛，即得到有机磷降解的复合制剂；所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶1－3。本发明制剂具有加速有机磷降解的功效，可为有机磷污染修复提供一条新的处理途径，且降解后产生的磷可进一步被植物利用。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术，具体的说是具体的说是一种可加速有机磷降解生物制剂及其制备方法。
背景技术
有机磷是广谱性杀虫剂，具有高效广谱、用量少、价格低廉等优点，从60年代起广泛用于蔬菜、果树和多种农田作物的主要杀虫剂之一。由于有机磷的残留造成环境、地下水的污染，也对食品安全造成严重危害，因而解决有机磷残留的问题已成为当前农残降解领域研究的热点之一。
目前，国内外主要采取一系列化学方法降解残留有机磷，但是化学方法处理后的磷往往不能进一步被土壤中的植物利用，降低土壤养分的利用率。另外化学处理方法价格高，且易造成二次污染。
发明内容
本发明的目的是提供一种工艺简单的，可加速有机磷降解生物制剂及其制备方法。
为实现上述目的，本发明所采用的技术方案为：
有机磷降解制剂：由混合菌种发酵液与干草炭土混合即得有机磷降解制剂，所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶1-3。
所述混合菌种发酵液为巨大芽胞杆菌、假单胞菌和甲基杆菌的发酵液，按体积分数计，巨大芽胞杆菌的发酵液∶假单胞菌的发酵液∶甲基杆菌的发酵液＝(2.5-3.5)∶(2-3)∶(1-2)。所述混合菌种发酵液为将混合菌种以25-30℃在细菌培养集中振动培养10-15小时；而后将其在25-30℃压力0.02-0.06MPa，通气量1∶1.0-1.5v/v/mi n、搅拌速度300-400转/分钟、发酵10-15小时后所得混合菌种发酵液。
有机磷降解制剂的制备方法：将混合菌种发酵液与干草炭土搅拌均匀，进行造粒后在40-50℃干燥3-6小时，过2.0-4.0mm筛，即得到有机磷降解的复合制剂；所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶1-3。
所述混合菌种发酵液为巨大芽胞杆菌、假单胞菌和甲基杆菌的发酵液，按体积分数计，巨大芽胞杆菌的发酵液∶假单胞菌的发酵液∶甲基杆菌的发酵液＝(2.5-3.5)∶(2-3)∶(1-2)。所述混合菌种发酵液为将混合菌种以25-30℃在细菌培养集中振动培养10-15小时；而后将其在25-30℃压力0.02-0.06MPa，通气量1∶1.0-1.5v/v/mi n、搅拌速度300-400转/分钟、发酵10-15小时后所得混合菌种发酵液。所述造粒时将搅拌均匀的混合菌种发酵液与干草炭土在主轴转速为40-50转/分钟，转盘倾角40°-50的圆盘造粒机上进行造粒，造粒时间为5-10min。所述混合菌种振动培养后按重量百分比2-5％的接种量将摇瓶菌液移入种子罐，进行发酵培养而后将发酵培养物再重量百分比按5-8％的接种量移种到发酵罐按同样条件进行发酵培养15-20小时。
本发明的优点在于：
1.本发明制剂具有加速有机磷降解的功效，可为有机磷污染修复提供一条新的处理途径。
2.本发明制剂中的菌是均是从自然环境中分离纯化所得，因此本发明来源于自然环境，又应用于自然环境，不会破坏原有的生态环境。
3.降解后产生无机磷，可以进一步被植物所利用。
4.生产方法简单，易于实现大规模生产。
具体实施方式
实施例1
有机磷降解制剂：由混合菌种发酵液与干草炭土混合即得有机磷降解制剂，所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶1。
有机磷降解制剂的制备方法：将混合菌种巨大芽胞杆菌、假单胞菌和甲基杆菌接种到装有细菌液体培养基中，进行摇瓶培养；条件为：温度30℃、转速200转/分钟、三角瓶装液量40％、培养时间15小时；而后按质量百分比5％的接种量将摇瓶菌液移入种子罐，进行发酵培养，条件为：罐温30℃、罐压0.05MPa、通气量1∶1.0v/v/mi n、搅拌速度400转/分钟、发酵时间15小时；而后再以质量百分比8％的接种量将上述种子液移种到发酵罐，培养条件为：罐温30℃、罐压0.05MPa、通气量1∶1.0v/v/min、搅拌速度400转/分钟、发酵时间15小时，发酵后得混合菌种发酵液。混合菌种发酵液按体积份分数计，巨大芽胞杆菌的发酵液∶假单胞菌的发酵液∶甲基杆菌的发酵液＝3∶3∶2混合，待用；将混合菌种发酵液与干草炭土重量比为1∶1搅拌均匀，搅拌后进行造粒，造粒时将搅拌均匀的混合菌种发酵液与干草炭土在主轴转速为40转/分钟，转盘倾角40°的圆盘造粒机上进行造粒，造粒时间为5min。进行造粒后在50℃干燥5小时，过3.0mm筛，即得到有机磷降解的复合制剂。
所述细菌液体培养基为选用牛肉膏蛋白胨培养基，调pH为7.0-7.5，灭菌备用。
实施例2
与实施例1不同之处在于：
有机磷降解制剂：有机磷降解制剂：由混合菌种发酵液与干草炭土混合即得有机磷降解制剂，所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶2。
有机磷降解制剂的制备方法：将混合菌种巨大芽胞杆菌、假单胞菌和甲基杆菌接种到装有细菌液体培养基中，进行摇瓶培养；条件为：温度2 5℃、转速150转/分钟、三角瓶装液量30％、培养时间10小时；而后按质量百分比2％的接种量将摇瓶菌液移入种子罐，进行发酵培养，条件为：罐温25℃、罐压0.02MPa、通气量1∶1.5v/v/mi n、搅拌速度300转/分钟、发酵时间10小时；而后再以质量百分比5％的接种量将上述种子液移种到发酵罐，培养条件为：罐温25℃、罐压0.02MPa、通气量1∶1.5v/v/min、搅拌速度300转/分钟、发酵时间20小时，发酵后得混合菌种发酵液。混合菌种发酵液按体积份分数计，巨大芽胞杆菌的发酵液∶假单胞菌的发酵液∶甲基杆菌的发酵液＝2.5∶2∶1混合，待用；将混合菌种发酵液与干草炭土重量比为1∶2搅拌均匀，搅拌后进行造粒，造粒时将搅拌均匀的混合菌种发酵液与干草炭土在主轴转速为50转/分钟，转盘倾角50°的圆盘造粒机上进行造粒，造粒时间为10min。进行造粒后在40℃干燥3小时，过2.0mm筛，即得到有机磷降解的复合制剂。
实施例3
与实施例1不同之处在于：
有机磷降解制剂：有机磷降解制剂：由混合菌种发酵液与干草炭土混合即得有机磷降解制剂，所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶3。
有机磷降解制剂的制备方法：将混合菌种巨大芽胞杆菌、假单胞菌和甲基杆菌接种到装有细菌液体培养基中，进行摇瓶培养；条件为：温度28℃、转速180转/分钟、三角瓶装液量35％、培养时间12小时；而后按质量百分比3％的接种量将摇瓶菌液移入种子罐，进行发酵培养，条件为：罐温28℃、罐压0.04MPa、通气量1∶1.2v/v/mi n、搅拌速度350转/分钟、发酵时间12小时；而后再以质量百分比6％的接种量将上述种子液移种到发酵罐，培养条件为：罐温28℃、罐压0.04MPa、通气量1∶1.2v/v/min、搅拌速度350转/分钟、发酵时间18小时，发酵后得混合菌种发酵液。混合菌种发酵液按体积份分数计，巨大芽胞杆菌的发酵液∶假单胞菌的发酵液∶甲基杆菌的发酵液＝3.5∶2.5∶1.5混合，待用；将混合菌种发酵液与干草炭土重量比为1∶3搅拌均匀，搅拌后进行造粒，造粒时将搅拌均匀的混合菌种发酵液与干草炭土在主轴转速为45转/分钟，转盘倾角45°的圆盘造粒机上进行造粒，造粒时间为8min。进行造粒后在45℃干燥5小时，过4.0mm筛，即得到有机磷降解的复合制剂。
实施例4
与实施例1不同之处在于：
有机磷降解制剂：有机磷降解制剂：由混合菌种发酵液与干草炭土混合即得有机磷降解制剂，所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶1.5。
有机磷降解制剂的制备方法：将混合菌种巨大芽胞杆菌、假单胞菌和甲基杆菌接种到装有细菌液体培养基中，进行摇瓶培养；条件为：温度26℃、转速160转/分钟、三角瓶装液量32％、培养时间13小时；而后按质量百分比4％的接种量将摇瓶菌液移入种子罐，进行发酵培养，条件为：罐温26℃、罐压0.05MPa、通气量1∶1.3v/v/min、搅拌速度350转/分钟、发酵时间12小时；而后再以质量百分比6％的接种量将上述种子液移种到发酵罐，培养条件为：罐温26℃、罐压0.05MPa、通气量1∶1.3v/v/min、搅拌速度380转/分钟、发酵时间17小时，发酵后得混合菌种发酵液。混合菌种发酵液按体积份分数计，巨大芽胞杆菌的发酵液∶假单胞菌的发酵液∶甲基杆菌的发酵液＝2.5∶2∶1混合，待用；将混合菌种发酵液与干草炭土重量比为1∶1.5搅拌均匀，搅拌后进行造粒，造粒时将搅拌均匀的混合菌种发酵液与干草炭土在主轴转速为48转/分钟，转盘倾角44°的圆盘造粒机上进行造粒，造粒时间为6min。进行造粒后在48℃干燥4小时，过2.5mm筛，即得到有机磷降解的复合制剂。
实施例5
与实施例1不同之处在于：
有机磷降解制剂：有机磷降解制剂：由混合菌种发酵液与干草炭土混合即得有机磷降解制剂，所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶2。
混合菌种发酵液按体积份分数计，巨大芽胞杆菌的发酵液∶假单胞菌的发酵液∶甲基杆菌的发酵液＝3∶3∶2混合。
所述微生物菌种是本领域普通技术人员所公知的菌种，并且其都是公众容易得到的菌种，都可通过商业途径获得。
Claims (8)
1.一种有机磷降解制剂，其特征在于：由混合菌种发酵液与干草炭土混合即得有机磷降解制剂，所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶1-3。
2.按权利要求1所述的有机磷降解制剂，其特征在于：所述混合菌种发酵液为巨大芽胞杆菌、假单胞菌和甲基杆菌的发酵液，按体积分数计，巨大芽胞杆菌的发酵液∶假单胞菌的发酵液∶甲基杆菌的发酵液＝(2.5-3.5)∶(2-3)∶(1-2)。
3.按权利要求1或2所述的有机磷降解制剂，其特征在于：所述混合菌种发酵液为将混合菌种以25-30℃在细菌培养集中振动培养10-15小时；而后将其在25-30℃压力0.02-0.06MPa，通气量1∶1.0-1.5v/v/min、搅拌速度300-400转/分钟、发酵10-15小时后所得混合菌种发酵液。
4.一种按权利要求1所述的有机磷降解制剂的制备方法，其特征在于：将混合菌种发酵液与干草炭土搅拌均匀，进行造粒后在40-50℃干燥3-6小时，过2.0-4.0mm筛，即得到有机磷降解的复合制剂；所述混合菌种发酵液与干草炭土的重量比为1∶1-3。
5.按权利要求4所述的有机磷降解制剂的制备方法，其特征在于：所述混合菌种发酵液为巨大芽胞杆菌、假单胞菌和甲基杆菌的发酵液，按体积分数计，巨大芽胞杆菌的发酵液∶假单胞菌的发酵液∶甲基杆菌的发酵液＝(2.5-3.5)∶(2-3)∶(1-2)。
6.按权利要求4所述的有机磷降解制剂的制备方法，其特征在于：所述混合菌种发酵液为将混合菌种以25-30℃在细菌培养集中振动培养10-15小时；而后将其在25-30℃压力0.02-0.06MPa，通气量1∶1.0-1.5v/v/min、搅拌速度300-400转/分钟、发酵10-15小时后所得混合菌种发酵液。
7.按权利要求4所述的有机磷降解制剂的制备方法，其特征在于：所述造粒时将搅拌均匀的混合菌种发酵液与干草炭土在主轴转速为40-50转/分钟，转盘倾角40°-50的圆盘造粒机上进行造粒，造粒时间为5-10min。
8.按权利要求4所述的有机磷降解制剂的制备方法，其特征在于：所述混合菌种振动培养后按重量百分比2-5％的接种量将摇瓶菌液移入种子罐，进行发酵培养而后将发酵培养物再重量百分比按5-8％的接种量移种到发酵罐按同样条件进行发酵培养15-20小时。
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