CN101589728A - 橘小实蝇蛋白引诱剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种橘小实蝇(Bactrocera dorsalis Hendel)蛋白引诱剂及其制备方法,橘小实蝇蛋白引诱剂由水解蛋白液和甲基丁香酚的混配而成,水解蛋白液采用啤酒工业的副产品废啤酒酵母生产。产品经室内生物测定结果表明,对橘小实蝇的引诱率平均可达71.7%,其中雌性和雄性的引诱率分别为58.3%和85.0%。本发明具有生产工艺简单,原料丰富等优点;产品对橘小实蝇雌性和雄性成虫都具有引诱作用,同时对环境无污染,对人和其他有益昆虫无毒,具有良好的应用前景。

Description

橘小实蝇蛋白引诱剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种昆虫引诱剂及其制备方法,具体涉及一种橘小实蝇(Bactrocera dorsalis Hendel)蛋白引诱剂及其制备方法。
背景技术
橘小实蝇(Bactrocera dorsalis Hendel)属双翅目实蝇科果实蝇属,又称东方果实蝇,是一种世界性检疫害虫。主要发生在热带和亚热带地区,1947年传入夏威夷群岛,现已成为东南亚、印度次大陆和夏威夷群岛一带的危险性果蔬害虫。危害的植物种类在250种以上,尤其对蔬菜和水果危害严重。橘小实蝇不仅被我国农业部列入1992年发布的《中华人民共和国进境植物检疫危险性病、虫、杂草名录》,而且于1995年被农业部确定为全国植物检疫对象。
目前防治橘小实蝇的方法主要有套袋技术、释放不育雄虫技术、ME灭雄和使用化学农药。采用套袋技术成本高,对于大部分水果而言是不可行。由于橘小实蝇的成虫在自然状态下存活时间长、飞行能力强,因此对于世界上大部分区域采用释放不育雄虫技术是不可行的,只对部分岛屿有效。ME对雌性成虫引诱效果不佳,随着人们环保、食品安全意识的加强,传统施用化学农药的方法受到质疑,虽然它能在短期内产生一定效果,但污染环境,对人和其他有益昆虫有毒,且易产生残留和抗药性。
申请号为200410051506.1的发明专利,介绍了“一种桔小实蝇引诱剂”,引诱剂采用甲基丁香酚和乙酸乙酯为原料,组分配比为:甲基丁香酚500-1体积分,乙酸乙酯1体积分。
申请号为200410026928.3的发明专利,介绍了一种“桔小实蝇缓释型引诱剂”,其组成成分中除甲基丁香酚和杀虫剂外,还有二氧化硅、甲基纤维素和苯甲酸钠。
申请号为200510048764.9的发明专利,介绍了二种“桔小实蝇引诱剂”,第一种引诱剂的配比为:甲基丁香酚1%-20%、糖4%-20%、酒精10%-30%、醋10%-30%、水30%-75%;第二种引诱剂的技术方案为:将甲基丁香酚1-30体积份、糖醋酒精混合液500-200000体积份;分开并配合使用。
申请号为200610037490.8的发明专利,介绍了“一种桔小实蝇引诱剂”,其组成按质量分数计:由甲基丁香酚5000-50份,丁酸乙酯1份组成。
现有技术中的橘小实蝇引诱剂,都以捕杀雄性的橘小实蝇为主,对雌性的橘小实蝇诱杀的效果甚微。
发明内容
本发明的目的是提供一种对雄性橘小实蝇和雌性橘小实蝇都具有高活性、高持效性的橘小实蝇蛋白引诱剂及其制备方法。
本发明的橘小实蝇蛋白引诱剂的制备方法,其特征在于由制备水解蛋白液和配制橘小实蝇蛋白引诱剂2个步骤组成,具体方法如下:
1、制备水解蛋白液:
A、浓缩:取1000ml啤酒废酵母,在恒温振荡器中加热至90~95℃,120r.min-1搅拌,并保温36~48h;
B、冷却:冷却至40~50℃;
C、酶解:加入1~2g.L-1木瓜蛋白酶,在恒温振荡器中120r.min-1搅拌,并在60~65℃条件下酶解24~36h,得水解蛋白液。
所述啤酒废酵母为生产啤酒的副产物,其所含蛋白质的重量百分率为4%~7%、含糖的重量百分率为8%~12%;所述木瓜蛋白酶为化学纯,固体,由广西庞博生物有限公司生产。
2、配制橘小实蝇蛋白引诱剂:以上述水解蛋白液和甲基丁香酚(C11H14O)为原料混配橘小实蝇蛋白引诱剂,各原料所占的体积份如下:
水解蛋白液95~97体积份
甲基丁香酚3~5体积份。
所述甲基丁香酚(C11H14O),购自江苏禾丰生化研究所。
中国是一个啤酒生产大国,废啤酒酵母是啤酒工业的副产物,在啤酒生产过程中,经主发酵和后发酵的酿造工艺之后大量产生,属于真菌类,含有丰富的蛋白质、核酸、维生素和矿物质,其有效成分为:蛋白质4-7%、糖8-12%。我国现有啤酒企业500多家,年产啤酒近3000多万吨,每年产啤酒废酵母60~90万吨,对其进行综合利用有很大的实际意义。
橘小实蝇雌虫和雄虫都必须取食蛋白才能生长发育,本发明的橘小实蝇蛋白引诱剂对雌雄成虫都有效。目前使用的橘小实蝇引诱剂,一般只对雄性成虫有引诱作用,而橘小实蝇成虫的危害特点是雌虫在果实上产卵,从而造成烂果或影响其品质。因此,橘小实蝇的雌虫对生产的危害更大。而且,橘小实蝇雌性成虫的寿命长,产卵量大,飞行能力强,活动范围广,成虫寿命一般长达60~70天,可多次交配、产卵,每雌成虫产卵量400~1000多粒。虽然诱杀雄虫,能减少交配机会,但橘小实蝇可多次交配,且世代重叠,只要田间有性成熟的雄虫,雌虫的交配机会仍很大,故单一控制雄虫的效果十分有限,本发明的橘小实蝇蛋白引诱剂对雌雄成虫都具引诱作用,且对雌虫的引诱率达到60%,对防控雌虫的效果显著,是一种能从根本上减少橘小实蝇为害的生物防治方法。
蛋白质是橘小实蝇生长过程中必不可少的营养源,尤其对于生殖系统发育作用明显,成虫羽化后必须补充营养,性成熟后才能交尾产卵。
水解蛋白液中的小肽、氨基酸、降解过程产生的氨等物质具有一定的挥发性,对橘小实蝇成虫有良好的引诱作用。
蛋白引诱剂是目前能有效引诱橘小实蝇雌虫的引诱剂。虽然糖醋液几乎对所有昆虫都具有引诱作用,但由于其价格、效果及实用等方面局限性,一般不用于田间防控害虫。
本发明以啤酒废酵母为主要原料生产橘小实蝇蛋白引诱剂,具有原材料来源广,生产工艺简单,成本低的特点;本发明的橘小实蝇蛋白引诱剂是具有高活性、高持效性,引诱雌虫效果好、且对雌雄橘小实蝇都有引诱作用的蛋白引诱剂。
具体实施方式
为了充分公开本发明的橘小实蝇蛋白引诱剂,以下结合实施例加以说明。
实施例一、一种橘小实蝇蛋白引诱剂的制备方法如下:
1、制备水解蛋白液:
A、浓缩:取1000ml啤酒废酵母,在SHZ-82A恒温振荡器中加热至95℃,120r.min-1搅拌,并保温40h;
B、冷却:取出冷却至45℃;
C、酶解:加入2g.L-1木瓜蛋白酶后,在SHZ-82A恒温振荡器中120r.min-1搅拌,并且在62℃条件下酶解30h,酶解后的酶解液即水解蛋白液,4℃保存备用。
所述啤酒废酵母为生产啤酒的副产物,其所含蛋白质的重量百分率为4%~7%、含糖的重量百分率为8%~12%;所述木瓜蛋白酶为化学纯,固体,由广西庞博生物有限公司生产;所述保温搅拌,使用常州国华仪器有限公司生产的SHZ-82A恒温振荡器。
2、配制蛋白引诱剂:按水解蛋白液为96体积份,甲基丁香酚为4体积份混配,即为本发明的橘小实蝇蛋白引诱剂。
国内啤酒工业的副产物啤酒废酵母,一般都含蛋白质4%~7%、含糖8%~12%,符合生产橘小实蝇蛋白引诱剂所需的水解蛋白液的要求。如果啤酒废酵母的蛋白质和糖的含量达不到上述标准,可先浓缩至标准含量后再投入生产水解蛋白液。
实施例二:一种橘小实蝇蛋白引诱剂的使用效果
1、室内生物测定方法
每笼40头试虫,雌雄各20头,饲喂糖和水,测试前1h停止饲喂。在两个自制诱瓶中分别加入2ml蛋白饵剂和水(对照),放入养虫笼的对角线位置,15min后旋转180°,30min后统计两个诱瓶中实蝇的数量,并分别记录雌雄的数量。7:00A.M~8:30A.M间进行,测试前10min拿走饲料和水,测试时间为30min。
2、数据处理:引诱率=(蛋白饵剂引诱数量-对照引诱的数量)/40×100%
3、结果与分析
(1)水解蛋白对性成熟前期橘小实蝇成虫的室内生物测定结果如表1所示,水解蛋白对5日龄橘小实蝇成虫的引诱效果最佳,引诱率达到60.0%,其中雌性和雄性的引诱率分别为63.3%和56.7%。
表1水解蛋白对不同日龄橘小实蝇成虫的引诱率
Figure A20091011209400061
(2)甲基丁香酚对橘小实蝇成虫引诱效果的室内生物测定结果如表2所示。甲基丁香酚对雄虫的引诱效果较好,平均可达90.0%以上,对雌虫引诱效果差,总体引诱率只有47.5%。
表2甲基丁香酚对橘小实蝇引诱效果的测定结果
Figure A20091011209400062
(3)水解蛋白中添加不同比例的甲基丁香酚对橘小实蝇成虫引诱效果的室内生物测定结果如表3所示。添加3~5%的甲基丁香酚后,引诱率平均超过70.0%,最高可达71.7%,相对单独使用水解蛋白和甲基丁香酚,其效果分别增加10.8%和23.3%。当甲基丁香酚的添加比例超过5%时,引诱至诱集瓶中的橘小实蝇成虫很快就会抽搐死亡;而且,添加了较高比例的甲基丁香酚,会掩盖水解蛋白的挥发性味道,导致雌虫引诱效果降低。
表3水解蛋白中添加不同比例甲基丁香酚引诱效果的比较
Figure A20091011209400071
4、使用方法:本发明的橘小实蝇蛋白引诱剂在果园的使用量为100ml/亩,使用方法:于水果转色期至成熟期内,悬挂诱捕器于距地面1.0-1.5m处,每亩10个;每个诱捕器以棉花为诱芯,吸取10ml橘小实蝇蛋白引诱剂即可。
(1)橘小实蝇蛋白引诱剂对橘小实蝇的引诱率平均为70.8%,与单独使用水解蛋白和甲基丁香酚相比,引诱效果分别增加10.8%和23.3%;
(2)橘小实蝇蛋白引诱剂的使用成本为16.7元/亩.年,与单独使用GF-120和甲基丁香酚相比,价格分别降低了27.7%和89.6%。所述GF-120为美国陶氏益农公司开发的一种瓜实蝇蛋白饵剂,通常被用于替代橘小实蝇引诱剂,但使用效果较差。

Claims (3)

1、一种橘小实蝇蛋白引诱剂的制备方法,其特征在于由制备水解蛋白液和配制橘小实蝇蛋白引诱剂2个步骤组成,具体方法如下:
(1)制备水解蛋白液:
A、浓缩:取1000ml啤酒废酵母,在恒温振荡器中加热至90~95℃,120r.min-1搅拌,并保温36~48h;
B、冷却:冷却至40~50℃;
C、酶解:加入1~2g.L-1木瓜蛋白酶,在恒温振荡器中120r.min-1搅拌,并在60~65℃条件下酶解24~36h,得水解蛋白液;
(2)配制橘小实蝇蛋白引诱剂:以上述水解蛋白液和甲基丁香酚为原料混配橘小实蝇蛋白引诱剂,各原料所占的体积份如下:
水解蛋白液    95~97体积份
甲基丁香酚    3~5体积份。
2、根据权利要求1所述的一种橘小实蝇蛋白引诱剂的制备方法,其特征在于步骤如下:
(1)制备水解蛋白液:
A、浓缩:取1000ml啤酒废酵母,在SHZ-82A恒温振荡器中加热至95℃,120r.min-1搅拌,并保温40h;
B、冷却:取出冷却至45℃;
C、酶解:加入2g.L-1木瓜蛋白酶后,在SHZ-82A恒温振荡器中120r.min-1搅拌,并且在62℃条件下酶解30h,4℃保存备用;
(2)配制橘小实蝇蛋白引诱剂:按水解蛋白液为96体积份,甲基丁香酚为4体积份混配。
3、由权利要求1或2的方法制备的橘小实蝇蛋白引诱剂。
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