CN101571485A - 葡萄糖测定方法及其测定试剂盒 - Google Patents
葡萄糖测定方法及其测定试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101571485A CN101571485A CNA2008101053284A CN200810105328A CN101571485A CN 101571485 A CN101571485 A CN 101571485A CN A2008101053284 A CNA2008101053284 A CN A2008101053284A CN 200810105328 A CN200810105328 A CN 200810105328A CN 101571485 A CN101571485 A CN 101571485A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hole
- glucose
- reagent
- titer
- add
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
葡萄糖测定方法及其测定试剂盒属于体外诊断试剂技术领域。本发明提供的葡萄糖测定方法及其测定试剂盒用于酶标仪检测，特别适用于城镇、社区医院和农村医疗单位。
Description
技术领域
本发明涉及葡萄糖测定方法及其测定试剂盒，用于测定血清或血浆中葡萄糖含量，属于体外诊断试剂技术领域。
背景技术
葡萄糖含量是重要的人体生理指标，在临床上应用广泛，需求量很大。血液中葡萄糖，主要来自于食物。它是糖在体内的运输形式，通过糖元生成与糖元分解、糖元异生与糖元酵解、脂肪形成与解脂作用间的相互调节和平衡，血糖的相对恒定对维持机体的正常生理功能有重要意义。目前，葡萄糖含量偏高或偏低的临床表现为：1、葡萄糖升高：高血糖症最常见的是糖尿病。胰腺炎、胰腺癌等弥漫性胰腺疾患，空腹血糖可增高，除严重病例外，一般不超过83mmol/L。抽搐及某些疾病终期，糖元分解加速可出现轻度高血糖；窒息可引起酸中毒及糖元分解增多，结果出现高血糖。感染性疾病、毒血症以及颅内疾患，由于机体内对病理损伤的反应，可能出现明显的高血糖症。麻醉往往可出现高血糖，血糖升高的程度与麻醉种类和时间长短有关，并出现尿糖。2、葡萄糖降低：血糖值低于2.8mmol/L，可诊断为低血糖。最多见于接受超剂量胰岛素治疗的糖尿病患者。甲状腺功能低下和肾上腺皮质功能低下患者，血糖可降至正常值范围以下。由于肝糖元分解过程中某些酶的缺陷而引起的肝糖元累积病，糖元不能转化为葡萄糖，也可能出现低血糖。慢性腹泻吸收不良及脂肪泻，由于葡萄糖吸收障碍可使血糖降低；剧烈运动可产生低血糖，肝脏病由于肝糖元储备不足，有时可出现低血糖。
目前临床常规实验室直接分离测定葡萄糖的方法大致可分为两种。第1种为葡萄糖氧化酶法，葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOD)催化下，生成葡萄糖酸和过氧化氢。过氧化氢与4-氨基安替吡啉和对溴苯酚生成红色化合物。在一定范围内，红色深浅与葡萄糖量成正比，从而可求得血清中葡萄糖浓度。第2种采用己糖激酶法，葡萄糖与ATP在己糖激酶催化下生成葡萄糖-6磷酸和ADP。G6PDH催化G6P与NAD+，形成6-磷酸葡萄糖内酯(6-PG)及NADH。NADH生成与样本中葡萄糖浓度成正比。这两种方法中葡萄糖氧化酶测定法成本低廉，使用范围较广、更易被临床接受，因此采用葡萄糖氧化酶法进行葡萄糖试剂盒的研制。
发明内容
葡萄糖含量测定试剂盒采用葡萄糖氧化酶法的反应原理，血清(血浆)中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下分解为葡萄糖酸和H2O2，生成H2O2应用Trinder显色反应测定葡萄糖的含量，该显色反应生成醌式染料，此染料在492nm/620nm有最大吸收，吸收强度与样本中的葡萄糖含量成正比。
根据此反应原理，葡萄糖含量测定试剂盒包括酶标板、试剂1和标准液，试剂1由葡萄糖氧化酶、过氧化物酶等成份组成。标准液为葡萄糖标准液。
采用的测定方法为，于酶标板上，设一孔试剂空白孔，两孔标准孔，其余为测定孔。加试剂1：200μl，空白孔内加蒸馏水2μl，标准孔内分别加校准液2μl，测定孔分别加入待测血清(血浆)2μl，混匀置37℃温育10分钟。于酶标仪比色，在主波长492nm副波长620nm下，试剂空白孔调零，进行检测。测定结果按以下公式计算葡萄糖含量：血清(血浆)葡萄糖浓度＝测定孔吸光度/标准孔吸光度×100(mg/dL)。
本发明测定葡萄糖的方法和测定试剂盒，适用于酶标仪，由于酶标仪成本低廉，设备要求简单，无需购买昂贵的全自动生化仪，同时弥补了半自动生化仪对同一指标大规模检测能力的不足，比手工操作肉眼比色大大减少了工作量和人为误差；实验操作简便，一次可以检测近百份样本，几十分钟即可得到检测结果。测定结果计算方便，数据可保留或打印，利于实验室标准化管理及网络化建设。
具体实施方式
下面用实施例进一步说明本发明。本发明的实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照本领域的常规条件进行。
实施例一：
试剂盒的组成为：试剂1和标准液，
其中试剂1的组成为对溴苯酚5mmol/L，磷酸盐缓冲液pH7.0，葡萄糖氧化酶5KU，过氧化物酶5KU，4-氨基安替吡啉5mmol/L。
葡萄糖标准液100mg/dL。
实施例二：
测定方法如下：
1.于96孔酶标板上，设一孔试剂空白孔，两孔标准孔，其余为测定孔。加试剂1：200μl，空白孔内加蒸馏水2μl，标准孔内分别加校准液2μl，测定孔分别加入待测血清(血浆)2μl，混匀置37℃温育10分钟。
2.于酶标仪比色。在主波长492nm副波长620nm下，试剂空白孔调零，进行检测。
3.测定结果按以下公式计算葡萄糖含量：
血清(血浆)葡萄糖浓度＝测定孔吸光度/标准孔吸光度×100(mg/dL)。
实施例三：
本发明测定试剂盒按照实施例一配置，按照实施例二进行操作。准确度：测定值在质控血清(Randox的质控血清)正常及异常质控血清靶值±20％范围内。试剂空白吸光度：A＜0.30(主波长492nm副波长620nm；37℃)。
经过临床考核试验，本发明的试剂盒与现有技术相比相关性均大于0.9无显著性差异，可应用于临床，并且具有适用于社区、农村、城镇医疗系统，具有更广的适用范围。
Claims (3)
1、一种用于酶标仪的葡萄糖测定试剂盒，该试剂盒包括酶标板、试剂1和标准液，试剂1由葡萄糖氧化酶、过氧化物酶等成份组成。标准液为葡萄糖标准液。
2、一种用于酶标仪的葡萄糖测定方法：于酶标板上，设一孔试剂空白孔，两孔标准孔，其余为测定孔。加试剂1：200μl，空白孔内加蒸馏水2μl，标准孔内加标准液2μl，测定孔分别加入待测血清(血浆)2μl，混匀置37℃温育10分钟。于酶标仪比色。在主波长492nm副波长620nm下，以试剂空白孔调零，进行检测。测定结果按以下公式计算葡萄糖含量：血清(血浆)葡萄糖浓度＝测定孔吸光度/标准孔吸光度×100(mg/dL)。
3、根据权力要求2所述的用于酶标仪的葡萄糖测定方法，其特征在于：于酶标板上，设一孔试剂空白孔，两孔标准孔，其余为测定孔。加试剂1：200μl，空白孔内加蒸馏水2μl，标准孔内分别加校准液2μl，测定孔分别加入待测血清(血浆)2μl。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA2008101053284A CN101571485A (zh) | 2008-04-28 | 2008-04-28 | 葡萄糖测定方法及其测定试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA2008101053284A CN101571485A (zh) | 2008-04-28 | 2008-04-28 | 葡萄糖测定方法及其测定试剂盒 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101571485A true CN101571485A (zh) | 2009-11-04 |
Family
ID=41230892
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNA2008101053284A Pending CN101571485A (zh) | 2008-04-28 | 2008-04-28 | 葡萄糖测定方法及其测定试剂盒 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101571485A (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103760161A (zh) * | 2014-01-25 | 2014-04-30 | 福州大学 | 一种葡萄糖的比色检测方法 |
| CN103837685A (zh) * | 2014-03-19 | 2014-06-04 | 潍坊鑫泽生物科技有限公司 | 一种血葡萄糖的检测方法及检测试剂盒 |
| CN105572065A (zh) * | 2016-01-29 | 2016-05-11 | 福建医科大学 | 基于铂铋纳米模拟过氧化物酶的葡萄糖检测试剂盒 |
| CN105717101A (zh) * | 2014-10-31 | 2016-06-29 | 郑兆珉 | 检测装置及其制造方法 |
| CN107155349A (zh) * | 2014-08-18 | 2017-09-12 | 福斯分析仪器公司 | 多成分样品的成分相关特性的确定 |
-
2008
- 2008-04-28 CN CNA2008101053284A patent/CN101571485A/zh active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103760161A (zh) * | 2014-01-25 | 2014-04-30 | 福州大学 | 一种葡萄糖的比色检测方法 |
| CN103837685A (zh) * | 2014-03-19 | 2014-06-04 | 潍坊鑫泽生物科技有限公司 | 一种血葡萄糖的检测方法及检测试剂盒 |
| CN103837685B (zh) * | 2014-03-19 | 2016-06-29 | 潍坊鑫泽生物科技有限公司 | 一种血葡萄糖的检测方法及检测试剂盒 |
| CN107155349A (zh) * | 2014-08-18 | 2017-09-12 | 福斯分析仪器公司 | 多成分样品的成分相关特性的确定 |
| CN105717101A (zh) * | 2014-10-31 | 2016-06-29 | 郑兆珉 | 检测装置及其制造方法 |
| CN105572065A (zh) * | 2016-01-29 | 2016-05-11 | 福建医科大学 | 基于铂铋纳米模拟过氧化物酶的葡萄糖检测试剂盒 |
| CN105572065B (zh) * | 2016-01-29 | 2018-08-21 | 福建医科大学 | 基于铂铋纳米模拟过氧化物酶的葡萄糖检测试剂盒 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Rao et al. | Accuracy evaluation of a new glucometer with automated hematocrit measurement and correction | |
| CN104198473B (zh) | 一种稳定的尿酸检测试剂盒 | |
| CN107703071B (zh) | 一种检测1,5-ag的试剂盒及方法 | |
| Wiener | Whole blood glucose: what are we actually measuring? | |
| CN101571485A (zh) | 葡萄糖测定方法及其测定试剂盒 | |
| CN104483487A (zh) | 检测人血液中1,5-脱水山梨醇的试剂盒 | |
| CN107236785A (zh) | 一种肌酸激酶检测试剂盒 | |
| Lockyer et al. | Evaluation of the Nova StatStrip glucometer in a pediatric hospital setting | |
| CN112029817B (zh) | 一种肌酐检测试剂盒及其使用方法 | |
| CN112662736B (zh) | 一种快速简易消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂盒的制备方法 | |
| Wahl | How accurately do we measure blood glucose levels in intensive care unit (ICU) patients? | |
| CN104990913B (zh) | 一种基于金纳米颗粒生长检测葡萄糖的方法 | |
| Kopp et al. | Assessment of ranges plasma indices in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) reared under conditions of intensive aquaculture | |
| CN103837685B (zh) | 一种血葡萄糖的检测方法及检测试剂盒 | |
| CN101565740A (zh) | 检测轻症葡萄糖耐量异常或胰岛素分泌缺陷的方法 | |
| CN106047988A (zh) | 一种测定1,5‑脱水葡糖醇的试剂盒及其制备方法 | |
| CN112255219A (zh) | 一种1,5-脱水山梨醇的测定试剂盒及其制备方法和应用 | |
| CN105223192B (zh) | 一种糖化血清蛋白检测试剂及其应用 | |
| CN116804630A (zh) | 一种血清同型半胱氨酸测定试剂盒 | |
| CN103725749A (zh) | 一种1,5-脱水葡糖醇的氧化酶法测定方法 | |
| CN106092924A (zh) | 一种测定游离脂肪酸的试剂盒及其制备方法 | |
| CN101709324A (zh) | 一种定标测定腺苷脱氨酶活性的方法及其配用的试剂盒和其用途 | |
| CN109837270B (zh) | 一种使肌醇脱氢酶、酮胺氧化酶和鞘磷脂酶在液体中长期稳定的方法 | |
| JP4217815B2 (ja) | グルコースデヒドロゲナーゼによるグルコースの定量方法およびグルコース定量用試薬 | |
| CN101571489A (zh) | 胆固醇测定方法及其测定试剂盒 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20091104 |