CN101559087B - 暴马丁香树皮提取物的制备新工艺和新用途 - Google Patents

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Abstract

本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及以暴马丁香Syringa amurensis Rupr.树皮为原料制备提取物的新工艺和新用途。取暴马丁香树皮，用8-10倍量20％-30％的乙醇室温下浸提4-6h后超声1-1.5h，温度为30℃功率为80W，然后用绸布与滤纸分别过滤一次，滤渣再分别用6倍量与4倍量20％-30％的乙醇重复以上步骤各一次，合并三次滤液，回收乙醇，得暴马丁香树皮提取物。本发明产品对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏菌、链球菌、沙门氏菌均有不同程度的抑制作用，可开发为天然抗菌剂应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。

Description

暴马丁香树皮提取物的制备新工艺和新用途
技术领域
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及以暴马丁香Syringa amurensis Rupr.树皮为原料制备提取物的新工艺和新用途。
背景技术
暴马丁香Syringa amurensis Rupr.为长白山常见药用植物之一，在我国主要分布在吉林、辽宁、华北、西北和华中地区，资源丰富。树皮、树干及枝条均可药用，味苦，性微寒，经现代药理实验证明具有清肺祛痰、止咳、平喘、消炎、利尿的功能。
目前，关于暴马丁香树皮提取物和化学成分及药理作用研究鲜见报道，仅有几篇报道从树皮、树枝中分离得到数个化合物，未对暴马丁香树皮提取物做过抑菌研究。因此，本发明采用乙醇冷浸并结合超声波法对药用植物暴马丁香树皮化学成分进行了提取，获得了暴马丁香树皮提取物并进行了抑菌试验。
本发明的暴马丁香树皮提取物对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌具有抑制作用，这种抑菌作用具有积极的应用价值，这对于扩大暴马丁香药源，并对其进行合理开发利用具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有抑菌活性的暴马丁香树皮提取物的制备新工艺并将暴马丁香树皮提取物在具有抑菌作用的产品中进行开发应用。
本发明的暴马丁香树皮提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏菌、链球菌、沙门氏菌均有不同程度的抑制作用，可开发为天然抗菌剂应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。
1.以暴马丁香树皮为原料制备提取物的新工艺和新用途，并将暴马丁香树皮挥发油在具有抑菌作用的产品中进行开发应用。
本发明的暴马丁香树皮提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏菌、链球菌、沙门氏菌均有不同程度的抑制作用，可开发为天然抗菌剂应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。
2.一种制备暴马丁香树皮提取物的新工艺，其特征在于该工艺包括以下过程：
(1)取暴马丁香树皮，挑去杂物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8-10倍量20％-30％的乙醇室温下浸提4-6h后超声1-1.5h，温度为30℃功率为80W，然后用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤；
(2)暴马丁香树皮经(1)处理后的滤渣再分别用6倍量与4倍量20％-30％的乙醇重复(1)步骤各一次，分别得到滤液，合并三次滤液；
(3)将上述(2)滤液回收乙醇，得暴马丁香树皮提取物。
3.根据本发明所述的制备暴马丁香树皮提取物的原料为暴马丁香Syringa amurensisRupr.的树皮。
4.根据本发明，暴马丁香树皮提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏菌、链球菌、沙门氏菌均有不同程度的抑制作用。
5.根据本发明所述的暴马丁香树皮提取物，其特征在于该树皮提取物可作为天然抗菌剂用于食品、药品等行业，代替有毒副作用的合成抗菌剂。
根据本发明，本发明中的“％”是重量百分比。
具体实施方式
本发明所述的暴马丁香树皮提取物制备新工艺包括以下实施例，下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1：
(1)取暴马丁香树皮5kg，挑去杂物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8倍量20％的乙醇室温下浸提4h，再超声1h，温度为30℃功率为80W，然后用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液；
(2)暴马丁香树皮经(1)处理后的滤渣再分别用6倍量与4倍量20％的乙醇重复(1)步骤各一次，分别得到滤液，合并三次滤液；
(3)将上述(2)滤液回收乙醇，得到暴马丁香树皮提取物，收率为28％。
实施例2：
(1)取暴马丁香树皮10kg，挑去杂物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用10倍量30％的乙醇室温下浸提6h，再超声1.5h，温度为30℃功率为80W，然后用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液；
(2)暴马丁香树皮经(1)处理后的滤渣再分别用6倍量与4倍量30％的乙醇重复(1)步骤各一次，分别得到滤液，合并三次滤液；
(3)将上述(2)滤液回收乙醇，得到暴马丁香树皮提取物，收率为30％。
药理试验例：暴马丁香树皮提取物的抑菌作用
1实验材料
大肠杆菌、链球菌、沙门氏菌、巴氏菌和金黄色葡萄球菌均来自于美国菌种保藏中心(ATCC)，37℃在蛋白胨牛肉汤中培养12h。
培养基为牛肉膏蛋白胨培养基。菌的活化与培养时用液体培养基，组成为：牛肉膏∶蛋白胨∶氯化钠∶蒸馏水(3∶10∶5∶1000)。菌的保存及抑菌实验时用固体培养基，组成为：牛肉膏∶蛋白胨∶氯化钠∶琼脂∶蒸馏水(3∶10∶5∶22∶1000)。
2实验方法
2.1培养基的配制
取牛肉膏0.6g、蛋白胨2g、氯化钠1g、蒸馏水200ml，混合并搅拌使其完全溶解，配成液体培养基。用量筒量取液体培养基，将其平均分装在10个50ml的三角瓶内，每瓶20ml。取牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂22g、蒸馏水1000ml，混合后将其置于电炉子上加热，使琼脂完全溶解，配成固体培养基。用量筒量取固体培养基，将其平均分装在5个150ml的三角瓶内，每瓶100ml。三角瓶瓶口均用棉塞塞紧并用牛皮纸包扎。
2.2灭菌
将配好的固体培养基、液体培养基均放入高压灭菌锅中灭菌，温度上升到121℃时，开始计时20min。培养皿、量筒、镊子、剪刀、6mm滤纸片(放在小烧杯中)、滴管、氨瓶等实验器材均放入烘箱中170℃灭菌2h。实验前用75％乙醇擦拭超净工作台并紫外灭菌20min。37℃恒温培养箱在使用前需用75％乙醇擦拭灭菌。
2.3菌的培养与查菌
将5个菌种在超净工作台上、酒精灯环境下倒入装有液体培养基的三角瓶中，每种菌培养两份。将这10个三角瓶放入摇床37℃摇菌6h。显微镜做镜检后开始查菌，记录数据并计算菌浓度，若5个中方格总菌数为A，菌液稀释倍数为B，则1ml菌液中总菌数＝A/5×25×10000×13＝50000AB
2.4样品液及滤纸片的制备
将暴马丁香树皮提取物配制成5mg/ml的溶液(可加0～4μL二甲基亚砜助容)，按1∶2n稀释成2.5mg/ml、1.25mg/ml、0.625mg/ml、0.3125mg/ml的溶液。将滤纸片用打孔器打成直径为6mm的圆片，在超净工作台将滤纸片放进各梯度样品中浸泡2h。
2.5有菌琼脂平板的制备
将稀释好的菌液与固体培养基混合并摇晃均匀，此时菌的浓度应达到3.6×108CFU/ml。将有菌培养基依次倒入各培养皿中，晃动培养皿使培养基均匀地铺在培养皿底部，冷却至凝固。
2.6抑菌实验方法
用记号笔在有菌琼脂平板上标号，将浸泡好的滤纸片用镊子夹出，放入写相应对照编号的培养皿中，每个样品做三个平行，放入37℃恒温培养箱培养。
3.实验结果
3.1抑菌效果用抑菌圈直径DD表示(单位mm)
在抑菌实验结束后的第12h、24h、36h、48h观察菌的生长情况，测量抑菌圈直径并记录。
表1暴马丁香树皮提取物的抑菌活性
Figure G2009101457278D00041
3.2最小抑菌浓度MIC的测定(单位mg/ml)
用水做阴性对照，链霉素做阳性对照，提取物的抑菌效果与二者对比得出最小抑菌浓度。
表2暴马丁香树皮提取物的最小抑菌浓度MIC(单位mg/ml)
结果表明：暴马丁香树皮提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏菌、链球菌、沙门氏菌均有不同程度的抑制作用。提取物对五种菌的最小抑菌浓度在0.63mg/ml～2.50mg/ml之间。
通过具体实施实例说明暴马丁香树皮提取物抑菌效果很好，可作为天然抗菌剂用于食品、药品等行业，代替有毒副作用的合成抗菌剂。暴马丁香提取物对链球菌有良好的抑制作用，可以制备各种剂型的药品，用于治疗化脓性炎症、猩红热、风湿热、急性肾小球肾炎等疾病。对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌有良好的抑制作用；可以制备食品添加剂以及各种剂型的药品，用于预防与治疗因食物被细菌污染而导致的食物中毒。

Claims (2)

1.一种以暴马丁香树皮为原料制备提取物的工艺，其特征在于包括以下步骤：
(1)取暴马丁香树皮，挑去杂物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8-10倍量20％-30％的乙醇室温下浸提4-6h后超声1-1.5h，温度为30℃，功率为80W，然后用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液；
(2)暴马丁香树皮经(1)处理后的滤渣再分别用6倍量与4倍量20％-30％的乙醇重复(1)步骤各一次，分别得到滤液，合并三次滤液；
(3)将上述(2)滤液回收乙醇，得暴马丁香树皮提取物。
2.权利要求1所述的制备暴马丁香树皮提取物的原料为暴马丁香Syringa amurensisRupr.的树皮。
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