CN101555462B - 苯胺类炼油废水深度处理菌剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种采用生物法深度处理含有苯胺类炼油废水的菌剂及其制备方法，包括下列步骤：将好氧微生物与厌氧微生物共17株菌按体积百分含量为2％-7％的比例分别对应接入制备好的17个50-150ml液体种子培养基的三角瓶中，共同置于28-35℃的恒温振荡培养床中，振荡培养4-7天，然后将17个菌种液体种子分别对应接与17个固体扩大培养基，共同置于30-35℃温室中，培养7-11天，然后将13个好氧菌固体扩大培养物混合制得好氧微生物固体菌剂，将4个厌氧菌固体扩大培养物混合制得厌氧微生物固体菌剂；本发明采用生物法深度处理技术，其生产能耗低，可循环利用率高，降解率高，即可实现工厂化清洁连续深度处理含苯胺类炼油废水。
Description
技术领域
本发明涉及一种苯胺类炼油废水深度处理菌剂及其制备方法。
背景技术
炼油废水属高浓度难降解有机废水，对微生物毒性较大，可生化性差，且废水中含油成分复杂，含盐量大，酸碱度变化大，因此处理难度极大。其中所含的苯胺及苯胺类污染物深度处理较为困难，无法达到新排放标准要求的矛盾日益突出。目前国内大多数炼油行业均采用物理、化学方法加以处理，但这些方法处理能耗较高，处理中多采用强酸碱，处理后废水中残留的有机污染物难降解，难处理，难利用，易造成水体的重复污染，在实际应用中难以推广。
生物处理方法是处理苯胺类炼油废水的最有效方法。它是利用好氧与厌氧微生物交替作用，使苯胺及苯胺类化合物得到深度分解。由于采用生物处理方法比物理、化学方法成本低，生产能耗低，又无二次污染，且微生物又具有很强的恶劣环境适应性以及很高的循环利用率，因此生物处理方法已成为深度处理苯胺类炼油废水的理想方法。
高活性的苯胺类化合物降解菌使苯胺及苯胺类化合物的深度降解得以实现。目前许多化工厂已应用降解性微生物处理工业废水中的苯胺及苯胺类化合物，并取得显著效果，但污染环境中化合物成分复杂，pH波动大，含盐量大，很有可能抑制降解菌的生长或诱导其变异，致使降解菌对环境污染物降解速度减慢，很难达到实际需要的要求，受污染环境不能有效维持降解菌的生物活性，使降解菌菌数难以保持较高水平。
发明内容
本发明的目的在于提供一种采用生物法深度处理含有苯胺类炼油废水的菌剂及其制备方法。
本发明苯胺类炼油废水深度处理菌剂的制备方法，包括下列步骤：
将好氧微生物与厌氧微生物共17株菌按体积百分含量为2％-7％的比例分别对应接入制备好的17个50-150ml液体种子培养基的三角瓶中，好氧菌的液体种子培养基三角瓶用2层10μm的透气膜封口，厌氧菌的液体种子培养基三角瓶用三层厚封口膜封口，共同置于28-35℃的恒温振荡培养床中，振荡培养4-7天，然后将17个菌种液体种子分别对应接与17个固体扩大培养基，好氧菌固体扩大培养基采用3层200目纱布覆盖，厌氧菌固体扩大培养基采用2层牛皮纸覆盖，共同置于30-35℃温室中，培养7-11天，然后将13个好氧菌固体扩大培养物混合制得好氧微生物固体菌剂，将4个厌氧菌固体扩大培养物混合制得厌氧微生物固体菌剂；
好氧微生物由棒杆菌属、气单胞杆菌属、假单胞杆菌属、节杆菌属、芽孢杆菌属和微杆属组成，13个好氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
棒杆菌属HY1(GSICC 30337)∶棒杆菌属HY4(GSICC 30336)∶棒杆菌属HY5(GSICC 30338)∶气单胞杆菌属HY2(GSICC 30136)∶气单胞杆菌属HY3(GSICC30137)∶假单胞杆菌属HY6(GSICC31603)∶节杆菌属B-111(GSICC30144)∶芽孢杆菌属HY9(GSICC32824)∶芽孢杆菌属HY10(GSICC 32825)∶酚8(GSICC 32838)∶酚13(GSICC 32821)∶酚82(GSICC 32811)∶微杆属HY7(GSICC 31301)＝1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-7∶1-7∶1-7∶1-10，余量为固体扩大培养基；
厌氧微生物由肠杆菌属、假单孢菌属、芽孢杆菌属和微杆菌属组成，4个厌氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
肠杆菌属YY2(GSICC 30509)∶假单孢菌属YY4(GSICC 31616)∶芽孢杆菌属YY5(GSICC 32812)∶微杆菌属YY7(GSICC 31302)＝1-10∶1-10∶1-10∶1-10，余量为固体扩大培养基，均在甘肃省工业微生物菌种保藏中心购得。
液体种子培养基的组成及重量百分含量为：蛋白胨0.05-0.3％、酵母膏0.1-0.3％、NaCl0.1-0.5％、蔗糖0.2-0.5％、牛肉膏0.1-0.3％、KH2PO40.01-0.04％、MgSO40.01-0.03％、CaCl20.01-0.03％和尿素0.01-0.05％，用水定容至50-150ml，pH值为6.4-7.0；
固体扩大培养基的组成及重量百分含量为：麦芽渣70-75％、麸皮15-22％、玉米粉2-3％、蛋白胨0.05-0.3％、酵母膏0.1-0.3％、NaCl0.1-0.5％、蔗糖0.2-0.5％、牛肉膏0.1-0.3％、KH2PO40.01-0.04％、MgSO40.01-0.03％、CaCl20.01-0.03％、尿素0.01-0.05％和水4.95-9.95％，pH值为6.4-7.2。
用本发明方法就能制得本发明产品苯胺类炼油废水深度处理菌剂，本发明终产品苯胺类炼油废水深度处理菌剂不需保藏。
菌剂的使用方法：将重量配比为10％-15％的好氧与厌氧固体菌剂分别装填至好氧菌曝气筒与厌氧菌曝气筒中，然后开启好氧曝气与厌氧废水循环连续处理装置，按0.5ml/min(装置的最大处理能力)的速度连续流加含有0-160mg/L苯胺及苯胺化合物的炼油废水，该废水按顺序分别流经沉淀筒、营养调配筒、酸碱度调整筒、温度平衡筒、初级曝气筒、好氧菌曝气筒、好氧菌曝气筒、酸碱度调整筒、厌氧菌循环筒、厌氧菌循环筒、酸碱度调整筒、好氧菌曝气筒、好氧菌曝气筒，共13个处理筒，即可连续深度处理含有苯胺类物质的炼油废水。
本发明解决了目前炼油废水处理中苯胺处理效率不高和处理后仍含有少量苯胺类难降解污染物等问题，具有如下优点：
1.节能环保，节能环保，现有的苯胺类炼油废水处理技术，多采用物理化学技术，其投资巨大，
同时水、电、煤以及强酸强碱的大量使用会导致二次污染，破坏生态环境。而本发明采用生物法深度处理技术，其生产能耗低，可循环利用率高，不会对环境造成重复污染，具有长远的生态效益。
2.本发明菌剂是通过多浓度苯胺类、硝基苯类、芳香烃类化合物和微生物必须营养元素的引导、驯化、筛选而来，其生物活性在含苯胺类化合物较宽浓度范围内均能达到最高。
3.本发明的菌剂是由多种好氧与厌氧微生物菌属组成，其在pH、温度、环境上有较宽的适应性，同时制备方法简单，易于操作。
4.降解率高，采用本发明的菌剂，将其通过自制的好氧曝气与厌氧循环连续处理装置实施在含有苯胺类炼油废水中，其降解率可达到95％-100％。
5.工厂化处理易于操作，采用本发明专利的菌剂，只须将自制好氧曝气与厌氧循环连续处理装置按比例、原理放大，即可实现工厂化清洁连续深度处理含苯胺类炼油废水。
具体实施方式
下面的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
在使用本发明产品苯胺类炼油废水深度处理菌剂处理废水时，用自制的好氧曝气与厌氧循环连续处理装置，该装置由沉淀筒、营养调配筒、酸碱度调整筒、温度平衡筒、初级曝气筒、好氧菌曝气筒、好氧菌曝气筒、酸碱度调整筒、厌氧菌循环筒、厌氧菌循环筒、酸碱度调整筒、好氧菌曝气筒和好氧菌曝气筒组成，容积为9.4L，其中厌氧菌循环筒采用全封闭式内置隔板循环，其余筒均采用不锈钢卷筒，该装置处理含有苯胺类炼油废水时，最大处理能力为0.5ml/mim。
以下通过制备1Kg好氧微生物菌剂、制备1Kg厌氧微生物菌剂的具体实施方法来说明本发明，本发明制备好的混合前的终产品好氧微生物固体菌剂及厌氧微生物固体菌剂这17株菌的含水量分别为9％-14％。
实施例1
将好氧微生物与厌氧微生物共17株菌按体积百分含量为2％的比例分别对应接入制备好的17个装有150ml液体种子培养基的容积为500ml的三角瓶中，好氧菌的液体种子培养基三角瓶用2层10μm的透气膜封口，厌氧菌的液体种子培养基三角瓶用三层厚封口膜封口，共同置于35℃的恒温振荡培养床中，振荡培养6天，然后将17个菌种液体种子分别对应接与17个固体扩大培养基；好氧菌固体扩大培养基采用3层200目纱布覆盖，厌氧菌固体扩大培养基采用2层牛皮纸覆盖，共同置于30℃温室中，培养7天，然后将13个好氧菌固体扩大培养物混合制得好氧微生物固体菌剂，将4个厌氧菌固体扩大培养物混合制得厌氧微生物固体菌剂；
13个好氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
棒杆菌属HY1(GSICC 30337)∶棒杆菌属HY4(GSICC 30336)∶棒杆菌属HY5(GSICC 30338)∶气单胞杆菌属HY2(GSICC 30136)∶气单胞杆菌属HY3(GSICC30137)∶假单胞杆菌属HY6(GSICC31603)∶节杆菌属B-111(GSICC30144)∶芽孢杆菌属HY9(GSICC32824)∶芽孢杆菌属HY10(GSICC 32825)∶酚8(GSICC 32838)∶酚13(GSICC 32821)∶酚82(GSICC 32811)∶微杆属HY7(GSICC 31301)＝8∶8∶8∶7∶9∶8∶8∶8∶8∶7∶7∶7∶10，余量为固体扩大培养基；
4个厌氧菌固体扩大培养物的混合比例为：肠杆菌属YY2(GSICC 30509)∶假单孢菌属YY4(GSICC 31616)∶芽孢杆菌属YY5(GSICC 32812)∶微杆菌属YY7(GSICC 31302)＝9∶9∶10∶10，余量为固体扩大培养基。
液体种子培养基各组分用量为：蛋白胨0.45g、酵母膏0.45g、NaCl0.75g、蔗糖0.75g、牛肉膏0.45g、KH2PO40.06g、MgSO40.045g、CaCl20.045g、尿素0.075g，用水定容至150ml，pH7.0。
固体扩大培养基按各组分用量为：麦芽渣750g、麸皮100g、玉米粉30g、蛋白胨3g、酵母膏3g、NaCl5g、蔗糖5g、牛肉膏3g、KH2PO40.4g、MgSO40.3g、CaCl20.3g、尿素0.5g、水99.5g，pH7.2。
菌剂的使用方法：处理的含苯胺类炼油废水的主要成分为：苯胺及苯胺类化合物60mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、NaCl5g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、KH2PO40.4g/L、MgSO40.3g/L、CaCl20.3g/L、尿素0.5g/L，pH7.2。将重量配比为15％的好氧与厌氧固体菌剂分别装填至好氧菌曝气筒与厌氧菌曝气筒中，然后开启好氧曝气与厌氧废水循环连续处理装置，按0.5ml/min(装置的最大处理能力)的速度连续流加含有60mg/L苯胺及苯胺化合物的炼油废水，该废水按顺序分别流经沉淀筒、营养调配筒、酸碱度调整筒、温度平衡筒、初级曝气筒、好氧菌曝气筒、好氧菌曝气筒、酸碱度调整筒、厌氧菌循环筒、厌氧菌循环筒、酸碱度调整筒、好氧菌曝气筒、好氧菌曝气筒，共13个处理筒，取出水口水样，测得苯胺浓度下降至0.0mg/L，降解率可达100％。
对比例1
在好氧曝气与厌氧循环连续处理装置中不填加任何微生物菌剂，在装置开启后，取出水口水样，苯胺及苯胺化合物由初始浓度为60mg/L下降到57.3mg/L，降解率只达到4.5％。
实施例2
将好氧微生物与厌氧微生物共17株菌按体积百分含量为5％的比例分别对应接入制备好的17个装有100ml液体种子培养基的容积为250ml的三角瓶中，好氧菌的液体种子培养基三角瓶用2层10μm的透气膜封口，厌氧菌的液体种子培养基三角瓶用三层厚封口膜封口，共同置于33℃的恒温振荡培养床中，振荡培养7天，然后将17个菌种液体种子分别对应接与17个固体扩大培养基；好氧菌固体扩大培养基采用3层200目纱布覆盖，厌氧菌固体扩大培养基采用2层牛皮纸覆盖，共同置于35℃温室中，培养11天，然后将13个好氧菌固体扩大培养物混合制得好氧微生物固体菌剂，将4个厌氧菌固体扩大培养物混合制得厌氧微生物固体菌剂；
13个好氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
棒杆菌属HY1(GSICC 30337)∶棒杆菌属HY4(GSICC 30336)∶棒杆菌属HY5(GSICC 30338)∶气单胞杆菌属HY2(GSICC 30136)∶气单胞杆菌属HY3(GSICC30137)∶假单胞杆菌属HY6(GSICC31603)∶节杆菌属B-111(GSICC30144)∶芽孢杆菌属HY9(GSICC32824)∶芽孢杆菌属HY10(GSICC 32825)∶酚8(GSICC 32838)∶酚13(GSICC 32821)∶酚82(GSICC 32811)∶微杆属HY7(GSICC 31301)＝10∶10∶10∶10∶10∶10∶10∶10∶10∶7∶7∶7∶10，余量为固体扩大培养基；
4个厌氧菌固体扩大培养物的混合比例为：肠杆菌属YY2(GSICC 30509)∶假单孢菌属YY4(GSICC 31616)∶芽孢杆菌属YY5(GSICC 32812)∶微杆菌属YY7(GSICC 31302)＝10∶10∶10∶10，余量为固体扩大培养基。
液体种子培养基的用量为：蛋白胨0.3g、酵母膏0.3g、NaCl0.5g、蔗糖0.5g、牛肉膏0.3g、KH2PO40.04g、MgSO40.03g、CaCl20.03g、尿素0.05g、用水定容至100ml，pH7.0。
固体扩大培养基按重量组成计为：麦芽渣750g、麸皮150g、玉米粉30g、蛋白胨3g、酵母膏3g、NaCl5g、蔗糖5g、牛肉膏3g、KH2PO40.4g、MgSO40.3g、CaCl20.3g、尿素0.5g、水49.5g，pH7.2。
菌剂的使用方法：处理的含苯胺类炼油废水的主要成分为：苯胺及苯胺类化合物100mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、NaCl5g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、KH2PO40.4g/L、MgSO40.3g/L、CaCl20.3g/L、尿素0.5g/L、pH7.2。将重量配比为20％的好氧与厌氧固体菌剂分别装填至好氧菌曝气筒与厌氧菌曝气筒中，然后开启好氧曝气与厌氧废水循环连续处理装置，按0.5ml/min(自制装置的最大处理能力)的速度连续流加含有100mg/L苯胺及苯胺化合物的炼油废水，取出水口水样，测得苯胺浓度下降至1.4mg/L，降解率可达98.6％。
对比例2
在好氧曝气与厌氧循环连续处理装置中不填加任何微生物菌剂，在装置开启后，取出水口水样，苯胺及苯胺化合物由初始浓度为100mg/L下降至96.7mg/L，降解率达到3.3％。
实施例3
将好氧微生物与厌氧微生物共17株菌按体积百分含量为5％的比例分别对应接入制备好的17个装有50ml液体种子培养基的容积为150ml的三角瓶中，好氧菌的液体种子培养基三角瓶用2层10μm的透气膜封口，厌氧菌的液体种子培养基三角瓶用三层厚封口膜封口，共同置于33℃的恒温振荡培养床中，振荡培养7天，然后将17个菌种液体种子分别对应接与17个固体扩大培养基；好氧菌固体扩大培养基采用3层200目纱布覆盖，厌氧菌固体扩大培养基采用2层牛皮纸覆盖，共同置于35℃温室中，培养9天，然后将13个好氧菌固体扩大培养物混合制得好氧微生物固体菌剂，将4个厌氧菌固体扩大培养物混合制得厌氧微生物固体菌剂；
13个好氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
棒杆菌属HY1(GSICC 30337)∶棒杆菌属HY4(GSICC 30336)∶棒杆菌属HY5(GSICC 30338)∶气单胞杆菌属HY2(GSICC 30136)∶气单胞杆菌属HY3(GSICC30137)∶假单胞杆菌属HY6(GSICC31603)∶节杆菌属B-111(GSICC30144)∶芽孢杆菌属HY9(GSICC32824)∶芽孢杆菌属HY10(GSICC 32825)∶酚8(GSICC 32838)∶酚13(GSICC 32821)∶酚82(GSICC 32811)∶微杆属HY7(GSICC 31301)＝1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1，余量为固体扩大培养基；
4个厌氧菌固体扩大培养物的混合比例为：肠杆菌属YY2(GSICC 30509)∶假单孢菌属YY4(GSICC 31616)∶芽孢杆菌属YY5(GSICC 32812)∶微杆菌属YY7(GSICC 31302)＝1∶1∶1∶1余量为固体扩大培养基。
液体种子培养基的用量为：蛋白胨0.15g、酵母膏0.15g、NaCl0.25g、蔗糖0.25g、牛肉膏0.15g、KH2PO40.02g、MgSO40.015g、CaCl20.015g、尿素0.025g，用水定容至50ml，pH7.0。
固体扩大培养基按重量组成计为：麦芽渣750g、麸皮150g、玉米粉30g、蛋白胨3g、酵母膏3g、NaCl5g、蔗糖5g、牛肉膏3g、KH2PO40.4g、MgSO40.3g、CaCl20.3g、尿素0.5g、水49.5g，pH7.2。
菌剂的使用方法：处理的含苯胺类炼油废水的主要成分为：苯胺及苯胺类化合物160mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、NaCl5g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、KH2PO40.4g/L、MgSO40.3g/L、CaCl20.3g/L、尿素0.5g/L、pH7.2。将重量配比为20％的好氧与厌氧固体菌剂分别装填至好氧菌曝气筒与厌氧菌曝气筒中，然后开启好氧曝气与厌氧废水循环连续处理装置，按0.5ml/min(自制装置的最大处理能力)的速度连续流加含有160mg/L苯胺及苯胺化合物的炼油废水，取出水口水样，测得苯胺浓度下降至6.7mg/L，降解率可达95.8％。
对比例3
在好氧曝气与厌氧循环连续处理装置中不填加任何微生物菌剂，在装置开启后，取出水口水样，苯胺及苯胺化合物由初始浓度为160mg/L下降至156.5mg/L，降解率达到2.2％。
实施例4菌剂仅由好氧微生物组成，
将好氧微生物按按体积百分含量为5％的比例分别接入制备好的50ml液体种子培养基的容积为150ml的三角瓶中，液体种子培养基三角瓶用2层10μm的透气膜封口，置于33℃的恒温振荡培养床中，振荡培养7天，然后将13个菌种液体种子分别对应接与13个固体扩大培养基，好氧固体培养基采用3层200目纱布覆盖，置于35℃温室中，培养9天，然后将13个好氧菌固体扩大培养物混合，即制得好氧菌固体菌剂。
13个好氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
棒杆菌属HY1(GSICC 30337)∶棒杆菌属HY4(GSICC 30336)∶棒杆菌属HY5(GSICC 30338)∶气单胞杆菌属HY2(GSICC 30136)∶气单胞杆菌属HY3(GSICC30137)∶假单胞杆菌属HY6(GSICC31603)∶节杆菌属B-111(GSICC30144)∶芽孢杆菌属HY9(GSICC32824)∶芽孢杆菌属HY10(GSICC 32825)∶酚8(GSICC 32838)∶酚13(GSICC 32821)∶酚82(GSICC 32811)∶微杆属HY7(GSICC 31301)＝1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1，余量为固体扩大培养基。
液体种子培养基的用量为：蛋白胨0.15g、酵母膏0.15g、NaCl0.25g、蔗糖0.25g、牛肉膏0.15g、KH2PO40.02g、MgSO40.015g、CaCl20.015g、尿素0.025g、用水定容至50ml，pH7.0。
固体扩大培养基的用量为：麦芽渣750g、麸皮150g、玉米粉30g、蛋白胨3g、酵母膏3g、NaCl5g、蔗糖5g、牛肉膏3g、KH2PO40.4g、MgSO40.3g、CaCl20.3g、尿素0.5g、水49.5g，pH7.2。
菌剂的使用方法：处理的含苯胺类炼油废水的主要成分为：苯胺及苯胺类化合物160mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、NaCl5g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、KH2PO40.4g/L、MgSO40.3g/L、CaCl20.3g/L、尿素0.5g/L、pH7.2。将重量配比为20％的好氧固体菌剂装填至自制的好氧曝气与厌氧循环连续处理装置中的好氧筒，厌氧筒中不装填菌剂，然后开启装置，按0.5ml/min(自制装置的最大处理能力)的速度连续流加含有160mg/L苯胺及苯胺化合物的炼油废水，取出水口水样，测得苯胺浓度下降至53.9mg/L，说明仅用好氧菌固体菌剂也能处理废水，降解率达66.3％，效果不如同时使用好氧微生物固体菌剂和厌氧微生物固体菌剂处理废水。
对比例4
在好氧曝气与厌氧循环连续处理装置中不填加任何微生物菌剂，在装置开启后，取出水口水样，苯胺及苯胺化合物由初始浓度为160mg/L下降至156.5mg/L，降解率达到2.2％。
实施例5菌剂仅由厌氧微生物组成，
将厌氧微生物按5％分别接入制备好的50ml液体种子培养基的容积为150ml的三角瓶中，液体种子培养基三角瓶用三层厚封口膜封口，置于33℃的恒温振荡培养床中，振荡培养7天，然后将4个菌种液体种子分别对应接与4个固体扩大培养基，厌氧固体培养基采用2层牛皮纸覆盖，置于35℃温室中，培养9天，然后将4个厌氧菌固体扩大培养物混合，即制得厌氧菌固体菌剂。
4个厌氧菌固体扩大培养物的混合比例为：肠杆菌属YY2(GSICC 30509)∶假单孢菌属YY4(GSICC 31616)∶芽孢杆菌属YY5(GSICC 32812)∶微杆菌属YY7(GSICC 31302)＝1∶1∶1∶1，余量固体扩大培养基。
液体种子培养基的用量：蛋白胨0.15g、酵母膏0.15g、NaCl0.25g、蔗糖0.25g、牛肉膏0.15g、KH2PO40.02g、MgSO40.015g、CaCl20.015g、尿素0.025g、用水定容至50ml，pH7.0。
固体扩大培养基的用量为：麦芽渣750g、麸皮150g、玉米粉30g、蛋白胨3g、酵母膏3g、NaCl5g、蔗糖5g、牛肉膏3g、KH2PO40.4g、MgSO40.3g、CaCl20.3g、尿素0.5g、水49.5g，pH7.2。
菌剂的使用方法：处理的含苯胺类炼油废水的主要成分为：苯胺及苯胺类化合物160mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、NaCl5g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、KH2PO40.4g/L、MgSO40.3g/L、CaCl20.3g/L、尿素0.5g/L、pH7.2。
将重量配比为20％的厌氧固体菌剂装填至好氧曝气与厌氧循环连续处理装置中的厌氧筒，好氧曝气筒中不填加菌剂，然后开启装置，按0.5ml/min(自制装置的最大处理能力)的速度连续流加含有160mg/L苯胺及苯胺化合物的炼油废水，取出水口水样，测得苯胺浓度下降至125.9mg/L，说明仅用厌氧微生物固体菌剂也能处理废水，效果不如同时使用好氧微生物固体菌剂和厌氧微生物固体菌剂处理废水。降解率只达21.3％。
对比例5
在好氧曝气与厌氧循环连续处理装置中不填加任何微生物菌剂，在装置开启后，取出水口水样，苯胺及苯胺化合物由初始浓度为160mg/L下降至156.5mg/L，降解率达到2.2％。
实施例6
将好氧微生物与厌氧微生物共17株菌按体积百分含量为2％的比例分别对应接入制备好的17个装有150ml液体种子培养基的容积为500ml的三角瓶中，好氧菌的液体种子培养基三角瓶用2层10μm的透气膜封口，厌氧菌的液体种子培养基三角瓶用三层厚封口膜封口，共同置于35℃的恒温振荡培养床中，振荡培养6天，然后将17个菌种液体种子分别对应接与17个固体扩大培养基；好氧菌固体扩大培养基采用3层200目纱布覆盖，厌氧菌固体扩大培养基采用2层牛皮纸覆盖，共同置于30℃温室中，培养7天，然后将13个好氧菌固体扩大培养物混合制得好氧微生物固体菌剂，将4个厌氧菌固体扩大培养物混合制得厌氧微生物固体菌剂；
13个好氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
棒杆菌属HY1(GSICC 30337)∶棒杆菌属HY4(GSICC 30336)∶棒杆菌属HY5(GSICC 30338)∶气单胞杆菌属HY2(GSICC 30136)∶气单胞杆菌属HY3(GSICC30137)∶假单胞杆菌属HY6(GSICC31603)∶节杆菌属B-111(GSICC30144)∶芽孢杆菌属HY9(GSICC32824)∶芽孢杆菌属HY10(GSICC 32825)∶酚8(GSICC 32838)∶酚13(GSICC 32821)∶酚82(GSICC 32811)∶微杆属HY7(GSICC 31301)＝8∶8∶8∶7∶9∶8∶8∶8∶8∶7∶7∶7∶10，余量为固体扩大培养基；
4个厌氧菌固体扩大培养物的混合比例为：肠杆菌属YY2(GSICC 30509)∶假单孢菌属YY4(GSICC 31616)∶芽孢杆菌属YY5(GSICC 32812)∶微杆菌属YY7(GSICC 31302)＝9∶9∶10∶10，余量为固体扩大培养基。
液体种子培养基的用量为：蛋白胨0.45g、酵母膏0.45g、NaCl0.75g、蔗糖0.75g、牛肉膏0.45g、KH2PO40.06g、MgSO40.045g、CaCl20.045g、尿素0.075g、用水定容至150ml，pH7.0。
固体扩大培养基的用量为：麦芽渣750g、麸皮100g、玉米粉30g、蛋白胨3g、酵母膏3g、NaCl5g、蔗糖5g、牛肉膏3g、KH2PO40.4g、MgSO40.3g、CaCl20.3g、尿素0.5g、水99.5g，pH7.2。
菌剂的使用方法：处理的含苯胺类炼油废水的主要成分为：苯胺及苯胺类化合物160mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、NaCl5g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、KH2PO40.4g/L、MgSO40.3g/L、CaCl20.3g/L、尿素0.5g/L、pH7.2。
将好氧固体菌剂按重量配比为15％接种于500ml含有苯胺及苯胺类化合物浓度160mg/L炼油废水的容积为1000ml的三角瓶中，置于35℃140r/min振荡培养4天，然后再将厌氧固体菌剂按重量配比为15％接种至其中，35℃静置培养4天，苯胺及苯胺类化合物浓度降至11.36mg/L，降解率达92.9％。
对比例6
在含有苯胺及苯胺类化合物浓度160mg/L炼油废水中添加15％蒸馏水当作菌剂，苯胺及苯胺化合物由初始浓度为160mg/L下降到158.1mg/L，降解率达到1.2％。
试验结果表明：
1.不加任何微生物，处理效果极低，而投加本发明微生物菌剂，处理效果明显提高；
2.单独使用本发明中的好氧或厌氧微生物菌剂虽然有一定的降解效果，但不能达到深度处理的目的；
3.配合使用本发明中的好氧与厌氧微生物菌剂能达到深度处理苯胺类炼油废水的目的；
4.本发明微生物菌剂配合自制的好氧曝气与厌氧循环连续处理装置能达到最佳处理效果。
Claims (2)
1.一种苯胺类炼油废水深度处理菌剂的制备方法，其特征在于它由下列步骤组成：
将好氧微生物与厌氧微生物共17株菌按体积百分含量为2％-7％的比例分别对应接入制备好的17个50-150ml液体种子培养基的三角瓶中，好氧菌的液体种子培养基三角瓶用2层10μm的透气膜封口，厌氧菌的液体种子培养基三角瓶用三层厚封口膜封口，共同置于28-35℃的恒温振荡培养床中，振荡培养4-7天，然后将17个菌种液体种子分别对应接与17个固体扩大培养基，好氧菌固体扩大培养基采用3层200目纱布覆盖，厌氧菌固体扩大培养基采用2层牛皮纸覆盖，共同置于30-35℃温室中，培养7-11天，然后将13个好氧菌固体扩大培养物混合制得好氧微生物固体菌剂，将4个厌氧菌固体扩大培养物混合制得厌氧微生物固体菌剂；
好氧微生物由棒杆菌属、气单胞杆菌属、假单胞杆菌属、节杆菌属、芽孢杆菌属和微杆属组成，13个好氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
棒杆菌属HY1 GSICC 30337∶棒杆菌属HY4 GSICC 30336∶棒杆菌属HY5GSICC 30338∶气单胞杆菌属HY2 GSICC 30136∶气单胞杆菌属HY3 GSICC30137∶假单胞杆菌属HY6 GSICC31603∶节杆菌属B-111 GSICC30144∶芽孢杆菌属HY9 GSICC32824∶芽孢杆菌属HY10 GSICC 32825∶酚8 GSICC 32838∶酚13 GSICC 32821∶酚82 GSICC 32811∶微杆属HY7 GSICC 31301＝1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-7∶1-7∶1-7∶1-10，余量为固体扩大培养基；
厌氧微生物由肠杆菌属、假单孢菌属、芽孢杆菌属和微杆菌属组成，4个厌氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
肠杆菌属YY2 GSICC 30509∶假单孢菌属YY4 GSICC 31616∶芽孢杆菌属YY5 GSICC 32812∶微杆菌属YY7 GSICC 31302＝1-10∶1-10∶1-10∶1-10，余量为固体扩大培养基；
液体种子培养基的组成及重量百分含量为：蛋白胨0.05-0.3％、酵母膏0.1-0.3％、NaCl0.1-0.5％、蔗糖0.2-0.5％、牛肉膏0.1-0.3％、KH2PO40.01-0.04％、MgSO40.01-0.03％、CaCl20.01-0.03％和尿素0.01-0.05％，用水定容至50-150ml，pH值为6.4-7.0；
固体扩大培养基的组成及重量百分含量为：麦芽渣70-75％、麸皮15-22％、玉米粉2-3％、蛋白胨0.05-0.3％、酵母膏0.1-0.3％、NaCl0.1-0.5％、蔗糖0.2-0.5％、牛肉膏0.1-0.3％、KH2PO40.01-0.04％、MgSO40.01-0.03％、CaCl20.01-0.03％、尿素0.01-0.05％和水4.95-9.95％，pH值为6.4-7.2。
2.根据权利要求1所述制备方法制得的苯胺类炼油废水深度处理菌剂。
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