CN101543512A - 蚯蚓干燥粉末的生产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及蚯蚓干燥粉末的生产方法,该方法包括将活蚯蚓在明亮处放置10~50小时后,除去附着于体表的污物,再与有机酸接触,然后用水迅速稀释调整pH至2~5,在所述条件下保持3~180分钟后,水洗,磨碎,将所述磨碎物在-18℃~-35℃下冷冻20~240小时,在真空下进行冷冻干燥,同时进行脱气,从而不降低蚯蚓体力且效率良好地从蚯蚓活体排泄残留在其消化道内的消化物,除去附着于体表的污物,而不会降低有用的药理作用,由此生产蚯蚓的干燥粉末。
Description
技术领域
本发明涉及一种生产对治疗各种疾病有效的蚯蚓干燥粉末的方法,该方法不会降低蚯蚓原有的药理作用,并可以除去附着于消化道内、体表的污物。
背景技术
自古以来主要在东洋各国中,蚯蚓作为各种疾病的预防剂、治疗剂而被应用,目前已知有膀胱结石缩小剂及排出促进剂、黄疸治疗剂、分娩促进剂、强壮剂、育毛剂、强精剂、解热剂、痉挛治疗剂、血液循环促进剂、半身不遂治疗剂、间接镇痛剂、排尿剂、支气管哮喘剂、高血压治疗剂等用途。
但是,以蚯蚓活体为原料制备口服给药的药物制剂时,必须除去残留在蚯蚓消化道内的消化物、附着于体表的污物等,迄今为止,提出了多种以此为目的的方法。
直至目前,提出了以下方法,例如,将蚯蚓活体浸泡在钠盐或钾盐等碱盐的水溶液中,排泄出消化道内的粪土后,湿式粉碎,将得到的悬浊液真空冷冻干燥,来生产作为糖尿病治疗剂、抗高血脂剂或血压调节剂有效的蚯蚓干燥粉末的方法(JP1-47718A、JP1-47719A、JP1-47720A及JP1-268639A);将蚯蚓活体在维持于6~26℃的酸性水溶液中浸泡0.1~5小时,除去蚯蚓消化道内的粪土后磨碎,对磨碎物进行脱气,然后进行阶段性升温,同时真空干燥生产血栓病患者治疗药物的方法(JP3-72427A)等。
然而,蚯蚓活体在碱盐水溶液或酸水溶液中长时间浸泡,蚯蚓的体力下降,其结果是,由于活体内所含的蛋白质发生变性,酶作用下降,从而使所得蚯蚓粉末的药理作用变差。
发明内容
本发明的目的在于,提供一种在保持良好药理作用的状态下,生产蚯蚓干燥粉末的方法,该方法不会降低蚯蚓体力,且效率良好地从蚯蚓活体排泄残留在其消化道内的消化物或附着于体表的污物。
本发明人等为了有效使残留在蚯蚓活体消化道内的消化物排泄出来,而不损失蚯蚓的体力,进行反复深入研究的结果发现:先对活蚯蚓进行加工,通过在明亮处放置及再与有机酸接触,制造蚯蚓不喜欢的环境,在该条件下培育蚯蚓一定时间,蚯蚓为了适应所述环境,排泄出消化道内的消化物,由于所述排泄物覆盖全身,所以除去附着于体表的污物即排泄物就可以得到除去杂质的活体,基于该发现完成本发明。
即,本发明提供一种蚯蚓干燥粉末的生产方法,该方法包括,将活蚯蚓在明亮处放置10~50小时后,用无纺布等吸附除去附着于体表的污物,再与有机酸接触,然后用水迅速稀释调整pH至2~5,在该条件下保持3~180分钟后,水洗,磨碎,将该磨碎物在-18℃~-35℃下冷冻20~240小时,再在真空下进行冷冻干燥,同时进行脱气。
以下对本发明的方法进行详细说明。
本发明方法中,采用活蚯蚓作为原料,所述活蚯蚓,可以任意选自例如粉正蚓(Lumbricus rubellus)、陆正蚓(Lumbricus terrestris)、赤子爱胜蚓(Eiseniafoetida)、背闇异唇蚓(Allolobophora caliginosa)、八道住木蚓(Dendrobaenaoctaedra)、Allolobophora japonica Michaelsen(サクラミミズ)、Drawidahattamimizu Hatai(ハツタミミズ)、Pheretima divergens Michaelsen(セグロミミズ)、Pheretima communissima(フツウミミズ)、Pheretima agrestis(ハタケミミズ)、Pheretima sieboldi Horst(シ—ボルトミミズ)、Pheretima hilgendorfi(ヒトツモンミミズ)、Pontodrilus matsushimensis lizuka(イソミミズ)、丝蚯蚓(Tubifex hattai Nomura)、Limnodrilus gotoi Hatai=L.Socialis Stephenson(ゴトウイトミミズ(ユリミミズ))等一般统称为蚯蚓的环节动物门寡毛纲类生物。
本发明方法中,先将活蚯蚓在明亮处放置特定的时间。即,从养殖床中取出活蚯蚓,转移到托盘这样的平箱中,在阳光下或夜间在电照明下保持明亮放置10~50小时。这时平箱内的收纳量设置为形成30~60mm,优选40~50mm厚的量。由于蚯蚓具有夜行性,放置在明亮处,发挥自我防御的本能,为了阻断光,防止水分蒸发而附着的污物来覆盖体表,所以反复数次通过适当的方法除去这些污物,最后从肠道内排泄出固体物质或体液来覆盖体表。于是,在这期间内,在平箱中,大量的活蚯蚓呈相互叠在一起的状态,各个蚯蚓为了确保暗处而钻入其他蚯蚓的身体之下,相互接触,通过摩擦,将覆盖于体表的污物、排泄物擦落。于是,例如用无纺布等覆盖在活蚯蚓上,擦落的污物、排泄物就能够被其吸附,不费力即可除去。
本发明方法中,将这样除去污物或排泄物的活蚯蚓水洗后,与有机酸接触,急速形成让活蚯蚓产生不适感的生活环境。与该有机酸的接触,既可以将有机酸粉末直接撒在活蚯蚓上,也可喷洒高浓度的有机酸水溶液。
这时使用的有机酸,可以列举,例如醋酸、苹果酸、柠檬酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸等。所述物质既可单独使用,也可2种以上混合使用。特别优选的有机酸是柠檬酸。
这样的情况下,如果活蚯蚓长时间与有机酸粉末或高浓度的有机酸水溶液接触,就会死亡,或者失去生活能力,而不能排泄出消化道内的消化物,所以活蚯蚓与有机酸的接触要尽量快,通常在30秒以内,优选在20秒以内就必须用水稀释有机酸,调整pH至2~5的范围。所述的用水稀释必须迅速进行。时间过长将引起蚯蚓死亡,因此必须充分注意。
在本发明的方法中,利用有机酸的杀菌作用,暂时对活蚯蚓进行杀菌,然后,通过冷冻真空干燥进一步杀菌,能够切实更保证杀菌效果。
在本发明的方法中,将夜行性的活蚯蚓放置在难以行动的生活环境下即明亮处,然后,将该活蚯蚓放入迅速产生不适感的生活环境下,活蚯蚓由于自我保护本能释放出污物、排泄物等固体物质或体液以改善生活环境,自动地进行净化。
有机酸具有杀菌性,所以在本发明的方法中,如上所述,利用有机酸,发挥排泄残留在消化道内的消化物的作用,同时能够杀灭水洗无法除去的杂菌。
为了发挥所述的身体保护机能,必须存在水分,由于活蚯蚓的组织的65%是水分,所以用于发挥所述身体保护机能的时间尚且有些宽余,但是如果活蚯蚓死亡,就一无所得,所以将活蚯蚓放置在促使其产生不适感的生活环境下的时间必须慎重控制。所述时间受条件控制,通常在3~180分钟范围内。
将活蚯蚓放置在与有机酸接触而促使其产生不适感的生活环境下,不仅将残留在消化道内的消化物排出,还将含有产生恶臭的氨和对人体有毒的砷的体液排出,氨几乎被完全除去。
以往,由于将洗净的活蚯蚓直接进行磨碎冷冻,因此无法除去氨,在后续的冷冻真空干燥工序中除去氨,但不能完全除去氨,产品质量参差不齐,产品的品质管理出现困难。并且,在冷冻真空干燥工序中,为了除去氨,易损伤该工序中的装置,必须进行繁琐的维护,运行成本增加,无法避免成本方面的不利。而且,活蚯蚓的氨含量随季节变动,即使少量残留也会引起胃炎,所以出现制品的品质管理难的问题,但是根据本发明方法,在进行冷冻真空干燥前几乎完全除去氨,即使微量残留的量也可以通过冷冻真空干燥而完全地除去,所以具有能够生产均一品质的产品的优点。
其次,将实质上完全除去了污物的蚯蚓活体用纯水洗净后,磨碎形成液状至糊状的磨碎物。所述磨碎采用例如匀浆机、混合机、高速搅拌机、混砂机、加压型细胞破坏装置,通常在1~25℃,优选在2~15℃温度下进行。接着将所述磨碎物放入不锈钢盘中,干燥,这时,蚯蚓活体所含的酶不作用于活细胞而对死细胞瞬间作用,并发热、腐败产生强腐败性的气体,所以为了防止所述情况,必须迅速置于-18℃至-35℃的温度下,采用能够抑制酶作用的冷冻真空干燥。
为了不损失蚯蚓原有的药理作用进行粉末化,必须迅速冷冻,但是另一方面过短时间内冷冻,则使与作为蚯蚓糊主要成分的蛋白质同时存在的杂质形成点班状的不冷冻部分,无法分离,所以不优选过度迅速冷冻。因此,冷冻在-18℃~-35℃低温下进行20~240小时,优选进行50~170小时。
冷冻真空干燥时,选择在除去水分的同时也除去杂质的条件是重要的。因此,在50Pa以下的压力下,-60℃至+90℃的温度中,温度阶段性上升,优选控制在10~60小时的范围内。
例如,如上所述,磨碎物需要在-18℃至-35℃的温度下冷冻20~240小时,然后,使温度在-60℃~+90℃之间,压力在4~80Pa之间,分多阶段变化,冷冻真空干燥10~60小时,能够得到无菌状态的淡黄色蚯蚓干燥粉末。这时,通过真空抽吸进行脱气。
在本发明方法中,通过选择干燥条件,能够明显缩短以往冷冻干燥所需的100小时或100小时以上的时间。
这样所得的蚯蚓干燥粉末根据蚯蚓的种类、采集地点、采集时间会有一些变动,粉末100g中,含有精氨酸70~120mg、赖氨酸110~150mg、组氨酸35~60mg、苯丙氨酸55~80mg、酪氨酸50~75mg、亮氨酸100~150mg、异亮氨酸60~90mg、蛋氨酸25~40mg、缬氨酸70~105mg、丙氨酸85~135mg、甘氨酸75~105mg、脯氨酸60~85mg、谷氨酸210~300mg、丝氨酸80~110mg、苏氨酸75~110mg、天冬氨酸150~220mg、色氨酸15~30mg及胱氨酸20~35mg。
具体实施方式
以下,通过实施例对本发明的具体实施方式进行说明。
实施例1
将活的粉正蚓(Lumbricus rubellus)30kg放入平箱中,平铺成约5cm厚,在荧光灯照射下保持24小时,用无纺布覆盖在活蚯蚓上,体表上分离的污物、排泄物吸附在无纺布上,除去后进行水洗。再均匀地撒入柠檬酸粉末250g,过15秒后加入30升纯水稀释。刚加入水后的pH为2.25,完全稀释后的pH为2.74。
再将浸泡在所述稀释柠檬酸中的蚯蚓在20℃下放置60分钟,蚯蚓为了缓解对于其本身来讲不适的生活环境,体液随着消化道内的消化物排出体外,同时造成恶臭的氨和对人体有害的砷也一起排泄出来。
以往,由于必须在pH3~6.5的柠檬酸水溶液中至少浸泡1小时左右,蚯蚓变得虚弱,损失多,所以这样迅速与高浓度的柠檬酸接触的结果,蚯蚓没有变虚弱,且能够几乎完全除去氨。
然后从脏的柠檬酸水溶液中取出活蚯蚓,水洗后,用匀浆机在10℃下进行磨碎,调制成蚯蚓糊。再将所述蚯蚓糊转移至不锈钢盘上,瞬间骤冷至-30℃,在该温度下维持50小时慢慢冷冻。
这样,冷冻的蚯蚓糊在-35℃下缓慢减压至50Pa并保持3小时后,温度升温至20℃,在40Pa的压力下保持12小时,再升温至40℃,在35Pa压力下保持25小时,最后升温至80℃,在20Pa压力下保持5小时,进行冷冻真空干燥。通过所述处理得到含水量8质量%的淡黄色蚯蚓干燥粉末。这样得到的干燥粉末的氨基酸含量如表1所示。
实施例2
用陆正蚓(Lumbricus terrestris)30kg代替实施例1中的粉正蚓30kg,与实施例1完全相同进行处理,得到淡黄色的蚯蚓干燥粉末。由此所得的干燥粉末的氨基酸含量如表1所示。
表1
氨基酸的含量 单位mg/100g
例 | 实施例1 | 实施例2 |
精氨酸 | 114 | 72.5 |
赖氨酸 | 148 | 128 |
组氨酸 | 55 | 40 |
苯丙氨酸 | 77 | 62.5 |
酪氨酸 | 73 | 57 |
亮氨酸 | 145 | 119.5 |
异亮氨酸 | 87 | 74 |
蛋氨酸 | 35 | 33 |
缬氨酸 | 104 | 89 |
丙氨酸 | 131 | 98 |
甘氨酸 | 103 | 82.5 |
脯氨酸 | 83 | 65.5 |
谷氨酸 | 296 | 245.5 |
丝氨酸 | 105 | 87 |
苏氨酸 | 104 | 81.5 |
天冬氨酸 | 212 | 167 |
色氨酸 | 28 | 20 |
胱氨酸 | 32 | 21.5 |
实施例3
用苹果酸160g取代实施例1中的柠檬酸250g,与实施例1完全相同进行处理,得到与实施例1所得物质几乎相同组成的深黄色蚯蚓干燥粉末。
参考例
实施例1所得的蚯蚓干燥粉末按照JP2716472B公报的实施例所记载的方法进行处理,调制成精制蛋白酶。
用所述精制蛋白酶0.5μg,加入精制人血纤维蛋白溶酶原(KABIAB社制0.05CU)反应,测定反应后的纤溶酶活性。再根据添加和未添加精制蛋白酶的情况的活性差异,算出纤溶酶水解活性,为0.145nmol/分。为了进行比较,使用采用上述专利公报中的以往方法所得的蚯蚓干燥粉末调制的精制蛋白酶同样求出纤溶酶水解活性,为0.112nmol/分,发现根据本发明方法生产的蚯蚓干燥粉末的酶活性约高1.3倍。
工业实用性
根据本发明方法,可以不需要任何人工操作,利用活蚯蚓自身的行为,除去污物、排泄物,能够得到不含细菌、没有氨臭等恶臭、低砷含量的优质蚯蚓干燥粉末。且根据本发明方法所得的蚯蚓干燥粉末,与以往方法所得的物质相比,含有效价高1.2~1.5倍的酶,且显示出对细胞的浸透性大的效果。
通过本发明方法生产的蚯蚓干燥粉末,与通过以往方法生产的蚯蚓干燥粉末相同,可作为血压调节剂、抗高血脂症剂、糖尿病治疗剂、血栓溶解剂等使用。从蚯蚓干燥粉末分离有效成分,能够用作美白剂、除皱剂、湿疹治疗药、脚癣治疗药等用途。
Claims (2)
1.一种蚯蚓干燥粉末的生产方法,该方法包括,将活蚯蚓在明亮处放置10~50小时后,除去附着于体表的污物,再与有机酸接触,然后,迅速用水稀释调整pH至2~5,在该条件下保持3~180分钟后,进行水洗,磨碎,将所述磨碎物在-18℃~-35℃下冷冻20~240小时,然后在真空下进行冷冻干燥,同时进行脱气。
2.权利要求1所述的蚯蚓干燥粉末的生产方法,其中,有机酸是选自醋酸、苹果酸、柠檬酸、乳酸、丙二酸及琥珀酸中的至少1种。
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