CN101541952A - 细胞培养系统、用于生产所述系统的方法及其在临床前研究中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种细胞培养系统，尤其是用于活性物质的临床前检测的细胞培养系统，所述系统包括第一和第二室，所述第一和第二室经第一和第二室之间的分隔层彼此连通，所述分隔层对于被筛选的细胞物质来说是可透过性的，其中第一室包括具有组织细胞和免疫细胞的同室培养物，第二室包括具有血细胞的培养物。本发明进一步涉及在这一点上的方法和试剂盒以及用于活性物质的临床前检测的用途。

Description

细胞培养系统、用于生产所述系统的方法及其在临床前研究中的用途
技术领域
本发明涉及细胞培养系统，用于生产所述系统的方法、试剂盒以及用于活性物质的临床前检测的用途。
背景技术
在人类的临床研究中，临床前活性物质筛选或者活性物质的临床前检测对于在这些物质被检测之前、在成功通过这种临床前检测阶段之后物质的医学验证来说尤其重要。除了确定待测物质的主要医疗效果之外，临床前检测的进一步的优越性在于还评估了临床研究中活性物质发生效力时的副作用。
因此，例如，不期望的副作用的早期识别使其能够节约成本。另外，对于临床测试患者的风险可通过活性物质的复杂的临床前研究而明显地被降低。
特别合适的临床前研究模型是实验动物。动物实验具有的优点在于，待研究的活性物质可在体内描述其特征。但是，由于在一些情况下在动物与人之间的显著(serious)差别，从动物实验得到的信息仅仅以有限程度应用于人类。
细胞培养物也在检测活性物质的临床前中作为研究模型被采用。采用细胞培养物的优点在于，它们可相对容易地被实施。另外，细胞培养物允许高样品通量率和非常容易控制的检测条件。另外，不存在有关细胞培养的伦理关系。缺点在于，作为体外研究模型，细胞培养可仅仅不充分地模拟在人体组织中实际发生的细胞过程。
所谓的共培养(co-culture)代表了感兴趣的细胞培养的进一步发展。所述共培养包括空间上彼此分离但在它们之间可能进行物质交换的两种细胞培养。一种细胞培养物通常包括特定组织类型的细胞，而另一种细胞培养包括特定血细胞，尤其是外周血单核细胞(PBMC)。对于活性物质的临床前检测来说，细胞培养在待测活性物质的存在下进行孵育。在共培养中发生的物质流动(flux)在培养阶段之后被研究并评估。例如，所述共培养在论文“IL-10 producing CD14low monocytes inhibitlymphocyte-dependent activation of intestinal epithelial cells by commensalbacteria”(Haller D，Microbiol.Immunol.2002；46：195-205)和“Monocyte/Macrophage Regulation of Vascular Calcification In Vitro”(Tintut Y，Circulation 2002，105：650-655)中公开。关于这一点，其缺点在于最终的共培养物也仅仅能够不充分地反映人类和动物体内的实际环境，在免疫调节过程的领域尤其如此。在所述共培养的帮助下得到的关于测定的活性物质的可靠性评估或特征的信息必须怀疑地对待。但是，相反，由于可能的临床风险和对于开发药物来说通常连续增加的成本的原因，临床前活性物质筛选的性质所提出的要求正在继续增加。
发明内容
因此，本发明的目的在于提供用于活性物质的临床前监测的体外研究模型，所述模型能够通过与来自现有技术的已知研究模型进行比较以更好地表示人和/或动物体内的复杂生理关系，特别是着眼于其他临床研究更可靠地描述活性物质的特征。
该目的通过细胞培养系统尤其是用于活性物质的临床前检测的细胞培养系统来实现，所述系统包括第一和第二室，所述第一和第二室经第一和第二室之间的分隔层彼此连通，所述分隔层对于被筛选的细胞物质来说是可透过性的，其中第一室包括具有组织细胞和免疫细胞的同室培养物(syntopic culture)，第二室包括具有血细胞的培养物(血细胞培养)。
在本发明的上下文中同室培养物指的是在一个室中包括至少一种组织细胞类型和至少一种免疫系统的细胞类型的细胞培养。
在本发明的上下文中全血指的是具有所有血液成分的血液，包括血细胞和血浆以及其中的细胞因子，尤其是生物活性因子，例如诸如血液凝固因子、补体蛋白等。
在本发明的上下文中引发(priming)指的是由物质诱导的细胞预活化(preactivation)，特别是由信使诱导的细胞预活化。
本发明提供了细胞培养系统，由于考虑到具有组织细胞和免疫细胞的同室培养和具有血细胞的培养，其以它们的细胞复杂性明显地区别于现有技术中公开的共培养系统。本发明的细胞培养系统可被理解为特别是同室共培养。与已知的共培养系统相比，本发明的细胞培养系统能够复杂得多，特别是在细胞之间的更高分化的通讯。在细胞培养系统的细胞中发生的物质流动和调节机制允许在人和/或动物体中实际发生的细胞过程的明显提高的模拟。细胞分泌物质可特别与细胞培养系统中的适当靶细胞发生反应并且例如可重新被使用。因此本发明能够有利地避免在本发明的细胞培养系统中的异常过度浓缩。另外，在由其他细胞分泌的信使的影响下靶细胞改变它们自己的信号物质产生。本发明的细胞培养系统的整个调节网络由此以非常生理学的方式被调节。本发明的细胞培养系统尤其适用于活性物的临床前验证。出于该目的有利的是使用将在后来的诊断阶段被待测活性物质处理的物种的细胞。细胞培养系统与待测活性物质一起培养。所发生的物质流动和/或物质变化优选在培养阶段之后可被检测并且特别是可与在没有活性物质存在下培养的细胞培养系统的物质流动和/或物质变化进行比较。所得到的数据和信息可被用作用于被研究活性物质的可靠特征的基础。因此，特别能够得到有关活性物质的药效和有关可能风险的改进信息，尤其是着眼于后续诊断研究。
附图示意性地显示：
图1是细胞培养系统，
图2是经典共培养系统和本发明的细胞培养系统的信使或者媒介物的合成，
图3是双氯芬酸(diclofenac)对经典共培养系统和本发明的细胞培养系统中信使或者媒介物合成方面的影响。
附图说明
图1显示了本发明的细胞培养系统1，其包括被设计为第一室的上部容器2和被设计为第二室的下部容器3。上部容器2包括滑膜细胞4和单核细胞或巨噬细胞5的同室培养。滑膜细胞4是粘附性的并以层的形式覆盖上部容器2的基部6(被设计为分隔层)。单核细胞或者巨噬细胞5位于滑膜细胞4上并且与后者直接接触。滑膜细胞4和单核细胞或巨噬细胞5都来自人源的细胞系。上部容器2的基部6对于细胞分泌物来说是可透性的。以这种方式上部容器2与下部容器3之间的物质交换是可能的。下部容器3包括具有血细胞7和8的人源全血培养物。特别是，血细胞为单核细胞或者巨噬细胞5、淋巴细胞7和红细胞8。全血培养物被分离成上清液和沉淀。细胞培养系统1中存在的细胞和在细胞之间发生的物质流动使人体中的相应细胞过程的提高模拟成为可能。细胞培养系统1因此可以特别合适的方式被用于活性物质的临床前研究。从其得到的信息尤其是有关主要医学效果、任何副作用和合适的剂量或者活性物质的信息代表了用于活性物质的临床研究的可靠评估基础。
图2显示了在经典共培养系统和本发明的细胞培养系统两者中各种刺激物在信使或媒介物合成方面的影响。经典共培养系统是这样的培养系统，其包括在它们的上部室中具有滑膜细胞(“Syn”)的培养物或者巨噬细胞(“MPh”)的培养物，和在它们的下部室中的全血细胞的培养物(全血培养)。本发明的细胞培养系统在其上部室中包括滑膜细胞和巨噬细胞的同室培养物(“Syn+MPh”)，和在其下部室中的全血培养物(全血培养)。培养系统被暴露在三种不同的刺激条件下：
-无刺激(“0”)
-具有脂多糖刺激(“LPS”)
-具有酵母聚糖刺激(“Zym”)
图2a到2d中的坐标显示每毫升中研究的合成信使的皮克量(pg/ml)。刺激条件在图2a到2d的横坐标上详细示出。
图2a到2d显示了不同量的信使基于刺激条件、测定端点(在图2a的情况下合成MCP-1，在图2b的情况下合成IL-10，在图2c的情况下合成IL-8，在图2d的情况下合成IL-6)以及使用的培养系统被合成。
图3显示了双氯芬酸(非甾体止痛药)对经典共培养系统和本发明的细胞培养系统中信使和媒介物合成的影响。关于经典共培养系统和本发明的细胞培养系统可参照图2中的附图说明。MCP-1和IL-6的合成被测定作为终点。通过脂多糖的细胞活化被选择作为刺激条件。图3的纵坐标显示了所谓的刺激指示。测定的终点在图3的横坐标上列出。
图2和3中显示的结果在Luminex(TM)的帮助下通过基于所谓的小珠阵列检测多元分析进行分析。出于该目的，具有专一性抗体的彩色编码的小珠被用于与信使结合。信使的含量在荧光标记的第二抗体的帮助下被测定。
具体实施方式
在优选实施方式中，第一室的组织细胞是粘附性的。组织细胞优选粘附于分隔层的表面。分隔层可以合适的物质预先包被。物质例如可以是蛋白质，尤其是胞外基质蛋白质。分隔层例如可以包被有胶原、层粘连蛋白(laminin)、肌腱蛋白(tenascin)等。
第一室的组织细胞在分隔层的表面上有利地进行预培养。特别是本发明提供了组织细胞以覆盖至少部分，优选整个分隔层。组织细胞可覆盖分隔层，特别是以层的形式，优选单层的形式覆盖分隔层。
在特别优选的实施方式中，免疫细胞是吞噬细胞免疫细胞，尤其是单核细胞和/或巨噬细胞。单核细胞和巨噬细胞代表了免疫系统中的免疫调节转换中心。它们特别参与到人和/或动物体的炎症过程中。第一室的同室培养优选为组织细胞和免疫细胞的同室培养。
免疫细胞常常聚集在组织细胞上，优选使用分子间粘着形成。免疫细胞的聚集特别是在定位在细胞表面的受体的基础上发生。通过考虑本发明的细胞培养系统中的免疫细胞，对于在人和/或动物体中发生的炎症过程能够更清楚地被模仿。在本发明的细胞培养系统的帮助下，在临床前活性物质筛选的框架内通过其得到的结果能够更可靠地描述被测活性物质的特征。
本发明的组织细胞优选组成在患有炎症疾病的组织中尤其是在患有慢性炎症疾病的组织中发生的细胞类型。组织可特别代表器官。组织细胞可特别代表一种组织类型的细胞。在进一步的实施方式中，同室培养可包括多个组织细胞类型。这增加了本发明的细胞培养系统的细胞之间的通讯和调节的特定程度。以这种方式能够以特别有效的方式模仿人和/或动物体中的生理关系，尤其是在细胞水平。
在优选实施方式中，组织细胞为上皮细胞和/或类上皮细胞(epitheloid cell)。组织细胞特别优选表皮细胞、支气管细胞和/或肠上皮细胞。
在进一步的实施方式中，组织细胞为内皮细胞，优选血管内皮细胞。对于组织细胞进一步优选的是皮肤细胞，尤其是角化细胞、成纤维细胞和/或滑膜细胞(被称为synoviocyte)和/或软骨细胞。其他合适的组织细胞为神经细胞和/或肌肉细胞，尤其是平滑肌细胞。第一室优选包括具有肌肉细胞尤其是平滑肌细胞和免疫细胞的同室培养，其中免疫细胞优选被施加到分隔层的上侧。特别是，内皮细胞可被施加到分隔层的下侧。以这种方式能够模拟天然血管的关系。
在进一步的实施方式中，本发明的细胞培养系统的细胞，尤其是同室培养的细胞(组织细胞和免疫细胞)来自于细胞系。细胞系优选为人源的。
在进一步的实施方式中，本发明的细胞培养系统的细胞来自于组织样品和/或体液样品。特别是样品可以是初步分离的，即已经从人和/或动物体得到的样品。组织样品和/或体液样品优选为人源的。特别是体液可以是血液或尿液，优选为血液。第一室的同室培养的细胞例如可来自组织样品，而第二室的细胞通常来自于体液，优选来自于血液。
根据本发明进一步能够提供细胞培养系统，其包括来自细胞系的细胞和来自组织样品和/或来自体液样品的细胞两者。本发明的细胞培养系统的室有利地每个都包括来自细胞系的细胞或者来自组织样品和或来自体液样品的细胞。
第二室的培养血细胞可以是一种血细胞类型的血细胞。血细胞优选为免疫系统的细胞，尤其是外周血细胞。血细胞例如可以是外周血单核细胞(PBMC)。第二室的血细胞此外可包括多种血细胞类型，特别是淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、血小板和/或红细胞。第二室的培养物优选为全血培养物(被称为全血培养)。在天然血液中存在的所有血细胞通常都存在于全血培养物的培养中。
在进一步的实施方式中，全血为人源的。全血优选为新鲜血液。在特别优选的实施方式中，本发明的细胞培养系统专门包括人源细胞。这使得在人体中的生理学关系的改善的模拟成为可能。本发明的细胞培养系统的细胞优选来源于相同有机体，特别是来源于同一患者。
第二室的血细胞培养物优选被分成上清液和沉淀。上清液通常包括血浆。特别是，全血培养的沉淀包括血细胞，例如红细胞、血小板和白细胞。
在本发明的特别优选的实施方式中，组织细胞被活化，优选具有炎症变化。组织细胞特别是由于在细胞培养系统中存在的活化剂特别是前炎症(proinflammatory)活化剂的原因而处于活化状态。合适的活化剂的例子为抗原或其部分，尤其是抗原表位。活化剂还可以是超抗原。活化剂可以是微生物特别是细菌来源的。活化剂优选为细菌细胞壁组成成分。活化剂可以特别是多糖，优选肽聚糖，例如酵母聚糖。脂多糖也是合适的活化剂。此外活化剂可以是毒素，例如内毒素。通过组织细胞的活化模拟炎症的体内过程是可能的。例如，炎症进程的疾病状态下的细胞过程可通过组织细胞的活化以令人满意的方式被模拟。特别是，可在本发明的细胞培养系统的帮助下被模拟的疾病可以是骨关节炎、风湿性关节炎、克罗恩式病、溃疡性结肠炎和炎性肺部疾病。
组织细胞优选通过信使活化，特别是通过糖基化蛋白和/或肽活化，优选由细胞因子活化。信使优选为前炎症媒介物，例如干扰素、白介素和/或肿瘤坏死因子(TNF)。因此，组织细胞可特别通过至少一种来自干扰素γ、白介素-1、白介素-6和肿瘤坏死因子α(TNFα)的信使被活化。具有炎性疾病的组织尤其是具有炎性疾病的器官中的细胞过程可有效地通过组织细胞的活化被模拟。
在进一步的实施方式中，在本发明的细胞培养系统中的细胞分泌物通常为所谓的细胞活动的指示剂(指示化合物)，尤其指信使。细胞分泌物优选细胞因子。细胞分泌物能够经过对于它们来说是可透性的分隔层扩散到本发明的细胞培养系统的两个室中并特别与其中存在的细胞发生反应。例如反应可以在每个室中存在的细胞的表面受体的分泌物反应的基础上进行。这不仅降低了本发明的细胞培养系统中的物质的非天然浓度的发生，尤其是降低了非天然过量浓度的出现。相反，检测的待测物质的副效应也可在第一时间以这种方式以相关方式显现。对于待测活性物质的剂量效应关系的研究来说这一点尤其重要。
在进一步的实施方式中，活性物质是天然和/或合成活性物质。活性物质还可以是活性物质代谢物。代谢物例如通过活性物质的细胞消化产生，尤其是在肝细胞的帮助下产生。用于细胞消化的细胞尤其是肝细胞还可以是本发明的细胞培养系统的组成成分。活性物质还可以以合适的给药形式存在，例如与药物学上合适的载体一起存在。活性物理例如可以是乳膏和/或软膏的组分。
位于第一和第二室之间对于细胞分泌物来说是可透性的分隔层有利地具有孔隙，特别是小孔，其直径在01和5μm之间特别是在0.2到0.45μm之间。特别是，分隔层可以是第一或者第二室的组成部分。分隔层优选为第一或第二室的基部。分隔层还可与第一或第二室形成一个部件，特别是与第一室形成一个部件。根据本发明对于分隔层来说特别优选地是被形成为膜或者横膈膜。本发明的细胞培养系统的室可以由不同材料形成。合适并优选的材料为塑料，优选聚苯乙烯或者聚碳酸酯。本发明的细胞培养系统的是优选被形成为容器，特别是杯子、小室或者孔。室还可以是优选具有多个室的支架的一部分。因此支架例如可以是带孔的板，特别是6孔、12孔、24孔或者96孔板。支架还可以是一般从市场上购买的用于共培养的跨孔系统(trans-well system)。在优选的实施方式中，第一室为细胞培养系统的上部室，第二室为细胞培养系统的下部室。
本发明进一步涉及使用细胞培养系统进行活性物质的临床前检测的方法，所述系统具有经分隔层彼此连通的第一和第二室，所述分隔层对于细胞分泌物来说是可透性的，并且位于第一和第二室之间，其中第一室包括具有组织细胞和免疫细胞的同室培养物，第二室包括具有血细胞的培养物(血细胞培养)，所述方法包括下列步骤：
-将活性物质加入到细胞培养系统中，
-在加入的活性物质存在下对细胞培养系统进行培养，
-研究在细胞培养系统中可检测的细胞物质的指示剂。
在优选的实施方式中，活性物质被加入到第一室的同室培养物中。在一些情况下可能需要研究当活性物质穿过血液循环进入相关组织中时活性物质对组织的影响。根据本发明在这些情况下优选将活性物质加入到第二室的血细胞培养物中。生理血液循环通过第二室的血细胞培养物被模拟，并且相关组织以这种方式通过第一室的同室培养被模拟。
在特别优选的实施方式中，组织细胞和免疫细胞尤其是吞噬免疫细胞优选单核细胞和/或巨噬细胞的同室培养被使用。
在进一步的实施方式中，细胞培养系统，尤其是同室培养在培养之前优选在加入活性物质之前受到所谓的引发。在另一种实施方式中，引发还可在加入活性物质之后进行。根据本发明还能够使第二室的血细胞培养受到引发。进一步可能地是同室培养和血细胞培养都受到引发。特别是，同室培养和血细胞培养的引发可使用分别不同的物质进行。用于引发的合适物质特别是媒介物或者活化剂，尤其是炎症活化剂。该特征的进一步的相关细节和特征可以参照之前的描述。
特别是，细胞培养系统在1到72小时优选2到48小时的时间段内被培养。细胞培养系统的孵育有利地在20℃到40℃之间的温度，特别是35℃到40℃之间的温度，优选在大约37℃的温度下进行。其中合适的是能够在细胞培养系统的孵育过程中进一步加入活化剂。
在本发明的方法的进一步的实施方式中，在细胞培养系统中的可检测的细胞活动的指示剂的研究通过分子生物学方法来进行，特别是在转录和/或翻译水平进行，优选在翻译后水平进行。
在进一步的实施方式中，第一和/或第二室的培养基，特别是培养液形式的培养基被研究以研究细胞活动的指示剂。由细胞培养系统的细胞分泌的物质优选被研究。细胞分泌物尤其是通过测定其浓度而被研究。因此，例如ELISA方法(酶联免疫吸附测定)或者电泳方法可被用于研究细胞分泌的物质。例如，能够进行凝胶电泳，特别是二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D PAGE)。进一步的可能性是使用阵列技术，特别是多元小珠阵列。理论上，本领域技术人员所熟知的所有生物检测都是合适的。
对于细胞活动的指示剂研究进一步优选地是研究细胞培养系统的细胞。根据本发明有利地是回收细胞优选在细胞培养系统孵育之后回收细胞以进行研究。
细胞活动的指示剂优选通过研究细胞相关活化参数进行研究。例如，进入细胞培养系统的细胞中的钙流入可被测定。细胞也可被研究用于它们的cAMP/cGAMP水平(环腺苷酸/环胍腺苷酸水平)。
合适并优选的细胞相关活动参数也是细胞培养系统的细胞中和/或上的信号传感器和/或受体的表达。细胞培养系统的细胞中和/或上的信号传感器和/或受体的密度优选被测定。特别是，合适的研究方法是表面标记物分析，例如组织学染色或者流式细胞计数法。
对于研究细胞相关活动参数的进一步可能是研究改变的细胞培养系统的细胞，特别是其基因的活化或阻止或者抑制。Northern杂交和/或Western印迹分析例如适于构建活化基因的图谱。同样合适的是平面阵列技术，尤其是基因芯片。基因优选在它们的基因产物基础上被研究。由细胞培养系统的细胞形成的RNA(核糖核酸)尤其是信使RNA(mRNA)优选被研究。RNA有利地从细胞中被分离，特别是被纯化。RNA例如可通过抽提从细胞中被分离。对于进一步的研究，形成的RNA优选进行扩增，特别是聚合酶链反应，优选使用逆转录酶(RT-PCR)。RNA的实际检测通常在Northern印迹技术的帮助下进行。
在进一步的实施方式中，由细胞培养系统表达的蛋白质被研究，以研究细胞活动的指示剂。因此，例如，蛋白质的表达模式或图谱可被构建。特别是，能够使用质谱法研究蛋白质。特别是，蛋白质可以是信号传感器和/或受体。阵列技术的使用同样是可能的。凋亡信号(apoptoticsignaling)转导途径的特征和本发明的细胞培养系统中的过程作为相关终点也是可能的。在前述部分中描述的方法对本领域技术人员来说都是非常公知的，因此从这点上讲更详细的描述可被省略。
在本发明的方法的特别优选的实施方式中，细胞活动的指示剂被研究以便与无活性物质的细胞培养系统即在孵育的不存在活性物质的培养系统中的细胞活性的指示剂关联。从其得到的数据或信息允许被研究的活性物质更详细地被描述其特征。进一步的细节和特征可参照之前的描述。
本发明进一步涉及用于活性物质的临床前检测的试剂盒，所述试剂盒包括至少一个室，所述至少一个室包括具有组织细胞和免疫细胞尤其是单核细胞和/或巨噬细胞的同室培养。同室培养优选为组织细胞和免疫细胞的同室培养。本发明的试剂盒还可包括具有培养基的室，其中培养基优选适用于培养血细胞。特别是，培养基为培养液，例如培养溶液。本发明的试剂盒中可包括合适的血液采集装置。试剂盒的进一步的细节和特征可参照现有技术的描述。
本发明另外涉及用于活性物质的临床前检测的细胞培养系统的用途，特别是用于研究活性物质的剂量效应关系的用途。特别是，本发明提供了待使用的多个细胞培养系统，特别是平行方式形式的细胞培养系统，用于活性物质的临床前确认。例如，以这种方式能够同时比较地检测多种活性物质。类似地，每个细胞培养系统能够受到不同引发。根据本发明进一步能够提供以平行方式使用的待研究细胞培养系统用于细胞活动的不同指示。以这种方式能够产生有关待研究活性物质的全面的大量数据，由此使其能够另外改善活性物质的特性描述。进一步的细节和特征可参照之前的描述。
最后，本发明涉及使用组织细胞和免疫细胞的同室培养用于活性物质的临床前检测的用途，特别是用于研究活性物质的剂量效应关系的用途。免疫细胞优选为吞噬免疫细胞，尤其是单核细胞和/或巨噬细胞。同室培养优选为组织细胞和免疫细胞的同室培养。进一步的细节和特征可参照下列附图的描述。在这种关系同对于每个被独立实施的特征能够作为彼此结合中的多个。附图通过参考明确结合在说明书中。

Claims (29)

1、一种细胞培养系统，尤其是用于活性物质的临床前检测的细胞培养系统，所述系统包括第一和第二室，所述第一和第二室经第一和第二室之间的分隔层彼此连通，所述分隔层对于被筛选的细胞物质来说是可透过性的，其中第一室包括具有组织细胞和免疫细胞的同室培养物，第二室包括具有血细胞的培养物。
2、根据权利要求1所述的细胞培养系统，其特征在于，免疫细胞为吞噬免疫细胞，尤其是单核细胞和/或巨噬细胞。
3、根据权利要求1或2所述的细胞培养系统，其特征在于，组织细胞是在具有炎症疾病的组织中出现的细胞。
4、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，组织细胞为上皮细胞和/或类上皮细胞。
5、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，组织细胞为支气管细胞和/或肠上皮细胞。
6、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，组织细胞为内皮细胞，优选血管内皮细胞。
7、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，组织细胞是皮肤细胞，尤其是滑膜细胞和/或软骨细胞。
8、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，细胞培养系统的细胞来自于细胞系，细胞系优选为人源的。
9、根据权利要求1-7任意之一所述的细胞培养系统，其特征在于，细胞培养系统的细胞来自于组织样品和/或体液样品。
10、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，第二室中的培养物为全血培养物(全血培养)。
11、根据权利要求10所述的细胞培养系统，其特征在于，全血为新鲜血液，优选是人源的。
12、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，组织细胞被活化，优选具有炎症变化。
13、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，细胞分泌物是细胞活动的指示剂，尤其是信使，优选细胞因子。
14、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，待测活性物质为生物和/或合成活性物质。
15、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，分隔层具有孔隙，特别是直径在0.1和5μm之间特别是在0.2到0.45μm之间的小孔。
16、根据前述任意权利要求所述的细胞培养系统，其特征在于，细胞培养系统室形成容器，特别是杯子、小室或者孔。
17、一种使用细胞培养系统进行活性物质的临床前检测的方法，所述系统具有经分隔层彼此连通的第一和第二室，所述分隔层对于细胞分泌物来说是可透性的，并且位于第一和第二室之间，其中第一室包括具有组织细胞和免疫细胞的同室培养物，第二室包括具有血细胞的培养物，特别是根据前述权利要求1-16任意之一的系统，所述方法包括下列步骤：
-将活性物质加入到细胞培养系统中，
-在加入的活性物质存在下对细胞培养系统进行培养，
-研究在细胞培养系统中可检测的细胞物质的指示剂。
18、根据权利要求17所述的方法，其特征在于，细胞培养系统尤其是同室培养在孵育之前受到引发，优选在加入活性物质之前受到引发。
19、根据权利要求18所述的方法，其特征在于，媒介物或者活化剂，尤其是炎症活化剂被用于引发细胞培养系统。
20、根据权利要求17-19任意之一所述的方法，其特征在于，细胞活动的指示剂的研究通过分子生物学方法来进行，特别是在转录和/或翻译水平进行，优选在翻译后水平进行。
21、根据权利要求17-20任意之一所述的方法，其特征在于，由细胞培养系统的细胞分泌的物质被研究以研究细胞活动的指示剂。
22、根据权利要求17-21任意之一所述的方法，其特征在于，细胞培养系统的细胞被研究以研究细胞活动的指示剂。
23、根据权利要求22所述的方法，其特征在于，细胞培养系统的细胞被回收以便进行研究。
24、根据权利要求17-23任意之一所述的方法，其特征在于，细胞相关活动参数，尤其是细胞培养系统的细胞中和/或上的信号传感器和/或受体的表达被研究以研究细胞活动的指示剂。
25、根据权利要求17-24任意之一所述的方法，其特征在于，细胞活动的指示剂被研究以便与无活性物质的细胞培养系统中的细胞活性的指示剂关联。
26、一种用于活性物质的临床前检测的试剂盒，所述试剂盒至少包括一个室，所述室包括具有组织细胞和免疫细胞的同室培养，特别是根据权利要求1-16任意之一的同室培养。
27、根据权利要求26的试剂盒，其特征在于包括具有血细胞培养基的室。
28、根据权利要求1到16任意之一的细胞培养系统用于活性物质的临床前检测的用途，特别是用于研究活性物质的剂量效应关系的用途。
29、根据权利要求1到16任意之一的同室培养用于活性物质的临床前检测的用途，特别是用于研究活性物质的剂量效应关系的用途。
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