CN101480145B - 一种植物病害接种工具及其在针刺法接种中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种植物病害接种工具,它由钳体和接种带组成,接种带含有对应的A片和B片,其中:A片为接种垫,接种垫中设有针刺穿孔;B片含有垫板和接种板,接种板通过垫板与钳口连接,接种板上设有接种针,接种板上覆有菌液固定件。它在针刺法接种中是这样应用的:将植物病原细菌培养后,配制成3亿细胞/毫升的细菌悬浮液;将菌液固定件浸泡细菌悬浮液后覆盖在接种板上,接种针的针尖穿过菌液固定件外露;将叶片置于接种带的A片接种垫和B片中的中间,并将钳口合拢,使接种针穿过叶片进入A片接种垫的针刺穿孔中,将稍加挤压,将菌液固定件中的植物病原细菌接种于叶片中。

Description

一种植物病害接种工具及其在针刺法接种中的应用
技术领域
本发明涉及一种植物病原细菌接种工具及其应用,尤其是一种通过将植物病原细菌通过针刺法接种的工具和其应用。
背景技术
植物病害的接种是植物病原菌毒力、病原菌鉴定及其寄主抗病性的重要方法。测定病原菌的毒力、病原菌的鉴定等均要用通过病原菌的接种来完成,其中高效简便的接种工具非常重要,对病原菌和寄主的抗性研究具有重要的意义。
其中针刺接种是植物病原菌重要的接种方法。针刺法接种是植物病原菌细菌接种的主要方法,但缺乏高效简便的接种工具。一些病害的接种技术并不成熟,缺乏精准高效的针刺接种工具。目前是要的接种技术接种程序繁杂,接种效率低,接种速度慢,不能满足病原菌的接种鉴定的工作需要,尤其大批量病原菌或寄主抗性研究,工作量大,接种效果差,影响了研究工作的进度和质量。设计方便快捷、高效的接种工具对研究病原菌具有重要的意义。
目前采用针刺接种病原菌有细菌性条斑病菌、柑橘溃疡病菌和水稻白叶枯病等病病原菌,这些病原菌是水稻、柑橘等作物的主要病原菌,对作物的产量、品种等影响大,发明和设计高效的病原菌接种工具意义重大。
传统的接种技术比较繁杂。下面以水稻细菌性条斑病菌的接种为例进行说明传统的接种方法。目前使用的接种方法没有固定的工具,一般将接种针固定在橡皮塞上,在橡皮塞的一侧铺上棉花,将接种菌液滴加到棉花上面,接种,采用手工措施在水稻叶片的双侧挤压,使针刺穿叶片,达到接种的目的。这种接种工具的接种效率低,接种效果不够稳定。通常用此方法进行病原菌接种鉴定、病原菌的致病性测定、品种抗病行鉴定,由于接种工具的问题,费时费力,使用很不方便,影响对品种和病原菌的抗性进行准确合适的评价。
发明内容
本发明的目的在于:针对目前针刺法接种的工具使用中存在的接种效率低,接种效果不够稳定,使用很不方便,影响对品种和病原菌的抗性进行准确合适的评价的实际问题,提供一种植物病害接种工具及其应用。
本发明的目的是这样实现的:一种植物病害接种工具,其特征在于:由钳体和位于钳体端部钳口中的接种带组成,接种带包括分别固定在上下两个钳口上对应位置的A片和B片,其中:A片为接种垫,接种垫中设有针刺穿孔;B片包括匹配的垫板和接种板,接种板通过垫板与钳口连接,接种板上设有与接种垫中针刺穿孔对应的接种针,接种板上覆有菌液固定件,所述的接种垫和接种板均为橡胶板。
在本发明中:接种垫中的针刺穿孔直径为1mm,接种针为昆虫解剖针,所述的接种垫和接种板均为矩形橡胶板。
在本发明中:接种垫的长对称中轴线与一个钳口重合;垫板的长对称中轴线与另一个钳口重合。
在本发明中:所述的菌液固定件为海绵或棉花。
在本发明中:接种垫中的针刺穿孔分布于5×4mm矩形的四个角。
一种上述接种工具在针刺法接种中的应用,其特征在于:
a)将植物病原细菌培养后,用无菌水洗下,将病原菌配制成3亿细胞/毫升的细菌悬浮液;
b)将菌液固定件浸泡细菌悬浮液后覆盖在接种板上,接种针的针尖穿过菌液固定件外露;
c)将叶片置于接种带的A片接种垫和B片中的中间,并将钳口合拢,使接种针穿过叶片进入A片接种垫的针刺穿孔中,将稍加挤压,将菌液固定件中的植物病原细菌接种于叶片中。
在具体应用的过程中:浸沾一次细菌悬浮液的菌液固定件可以接种3~5张叶片。
本发明的优点在于:结构简单,利于加工,使用中,便于操作,接种效率高,接种效果稳定。
附图说明:
图1是本发明实施例的结构示意图;
图2是图1中A片的结构示意图;
图3是图1中B片的结构示意图。
图中:1、钳体,2、接种垫,3、针刺穿孔,4、垫板,5、接种板,6、接种针,7、菌液固定件。
具体实施方式
附图非限制性地公开了本发明实施例的具体结构,下面结合附图对本发明作进一步的描述。
由图1~3可见,本发明由钳体1和位于钳体1端部钳口中的接种带组成,接种带包括分别固定在上下两个钳口上对应位置的A片和B片,其中:A片为接种垫2,接种垫中设有针刺穿孔3;B片包括匹配的垫板4和接种板5,接种板5通过垫板4与钳口连接,接种板5上设有与接种垫2中针刺穿孔3对应的接种针6,接种板5上覆有菌液固定件7,所述的接种垫2和接种板5均为橡胶板。
实施例1
利用医用钳制作植物病害接种工具:
A片部分的制作:
接种垫2为8×6×4mm(长×宽×厚)的矩形橡胶板,用穿孔机制作4个针刺穿孔3,针刺穿孔3为直径1mm的圆孔,它们分布在一个5×4mm(长×宽)的矩形角上,孔中心距离长边边缘为1.5mm,距离短边边缘为1mm。制作好后以A片长对称中轴线与一个钳口重合,固定在钳口前端。固定可以采用502胶水粘贴。如果工业化生产,可以将A片部分直接固定在医用钳的钳口。
B部分的制作:
垫板4为铜片或铝片裁剪的8×6×0.5mm(长×宽×厚)的矩形,接种板5为8×6×3mm(长×宽×厚)的矩形橡胶板,接种针6由昆虫解剖针制成,长度为9mm,4个接种针同样分布在接种板5中5×4mm(长×宽)的矩形四个角,使它们穿过接种板5,最后将带有接种针6的接种板5用502胶水固定在垫板4上。制作好后以B片长对称中轴线与一个钳口重合,固定在钳口前端,B片与钳口之间可以采用502胶水粘贴,也可以通过焊接固定。然后再在接种板5上配置菌液固定件7,菌液固定件7可以采用7×5×2mm的海绵或棉花,使用时,所述的接种针6应该穿过浸有菌液的菌液固定件7,浸沾一次细菌悬浮液的菌液固定件7可以接种3~5张叶片。
制作好后,应该保证钳口闭合时A片与B片完全重合,B片中的接种针6置于A片的针刺穿孔3中。
实施例2
植物病原细菌:
将细菌性条斑病菌JSb1-1移植在斜本氏培养基上,培养48小时后,用无菌水洗下,将病原菌配制成3亿细胞/毫升的细菌悬浮液供接种使用。
接种方法:
针刺法
使用工具:
分别为传统的接种工具和实施例制作的工具
供试品种和接种时机:
水稻品种金刚30,品种生长处于分蘖盛期
调查时间:
在接种后21天的调查结果,调查结果参见表1
表1:两种接种工具接种病原菌JSB1-1后病菌发病情况
Figure G2009100250330D00041
结论:本发明接种的发病情况和传统接种工具相当,且本发明接种后病情比较稳定,重复性好,比传统接种工具稳定,且接种株病情稳定,能够体现出病原菌的毒力水平。
实施例3
本实施例与实施例2的区别仅在于:植物病原细菌、供试品种和接种时机不同。其中:
植物病原细菌:
将细菌性条斑病菌GD414移植在斜本氏培养基上,培养48小时后,用无菌水洗下,将病原菌配制成3亿细胞/毫升的细菌悬浮液供接种使用。
供试品种和接种时机:
郑选2号、金科3号、郑稻040285、D0J01(H040744)、D0J08(连粳05045)、迟粳12、迟粳生01,品种生长时期处于孕穗期。
调查结果参见表2
表2:两种接种工具接种病原菌GD414在不同品种上发病情况
接种方法   使用本发明接种(mm)   原来接种工具接种(mm)
  郑选2号   11.3   10.4
  金科3号   9.4   9.1
  郑稻040285   7.3   7.0
  D0J01(H040744)   8.3   7.9
  D0J08(连粳05045)   6.6   6.5
  迟粳12   7.0   6.8
  迟粳生01   5.7   5.7
结论:同一病原菌在不同品种上的发病情况稳定,重复性好,说明实施例1制作的工具可以代替原来传统的接种工具。
实施例4
本实施例仅使用实施例1制作的工具,它与实施例2和实施例3的区别还在于:植物病原细菌、供试品种和接种时机不同。其中:
植物病原细菌:
将植物病原细菌YN11、YN18、HEN11、YN7、GD414、YN24、FUJ、YN1、Scrc-6等病原菌分别移植在斜本氏培养基上,培养48小时后,用无菌水洗下,将各病原菌分别配制成3亿细胞/毫升的细菌悬浮液供接种使用。
供试品种和接种时机:
水稻品种为金刚30,水稻处于孕穗期
调查结果参见表3
表3:使用本发明接种不同病原菌接种不同品种的效果。
  菌株\接种方法   使用本发明接种(mm)   原来接种工具接种(mm)
  YN11   3.7   3.5
  YN18   3.6   3.3
  HEN11   3.7   3.5
  菌株\接种方法   使用本发明接种(mm)   原来接种工具接种(mm)
YN7 4.3 4.1
  GD414   1.2   0.9
  YN24   6.6   6.4
  FUJ   3.5   3.3
  YN1   3.1   2.8
  Scrc-6   1.5   1.3
结论:采用实施例1的接种工具后,不同病原菌的接种结果发病况相当,但是实施例1的接种工具接种后重复性好,发病稳定,说明实施例1的接种工具可以代替原来传统的接种工具。
在实施例2和实施例3中:采用实施例1制作的接种工具,平均接种一张叶片需要时间为3-8秒钟,而传统的接种工具,平均接种一张叶片需要30-60秒。因此实施例1制作的接种工具可以大大加快接种速度,简化接种程序,同时具有较好的接种质量和较高的接种效率。

Claims (7)

1.一种植物病害接种工具,其特征在于:由钳体和位于钳体端部钳口中的接种带组成,接种带含有分别固定在上下两个钳口上对应位置的A片和B片,其中:A片为接种垫,接种垫中设有针刺穿孔;B片含有匹配的垫板和接种板,接种板通过垫板与钳口连接,接种板上设有与接种垫中针刺穿孔对应的接种针,接种板上覆有菌液固定件,所述的接种垫和接种板均为橡胶板。
2.根据权利要求1所述的植物病害接种工具,其特征在于:接种垫中的针刺穿孔直径为1mm,接种针为昆虫解剖针,所述的接种垫和接种板均为矩形橡胶板。
3.根据权利要求2所述的植物病害接种工具,其特征在于:接种垫的长对称中轴线与一个钳口重合;垫板的长对称中轴线与另一个钳口重合。
4.根据权利要求1或2或3所述的植物病害接种工具,其特征在于:所述的菌液固定件为海绵或棉花。
5.根据权利要求4所述的植物病害接种工具,其特征在于:接种垫中的针刺穿孔分布于5×4mm矩形的四个角。
6.一种如权利要求1所述接种工具在针刺法接种中的应用,其特征在于:
a)将植物病原细菌培养后,用无菌水洗下,将病原菌配制成3亿细胞/毫升的细菌悬浮液;
b)将菌液固定件浸泡细菌悬浮液后覆盖在接种板上,接种针的针尖穿过菌液固定件外露;
c)将叶片置于接种带的A片接种垫和B片中的中间,并将钳口合拢,使接种针穿过叶片进入A片接种垫的针刺穿孔中,将稍加挤压,将菌液固定件中的植物病原细菌接种于叶片中。
7.根据权利要求6所述接种工具在针刺法接种中的应用,其特征在于:浸沾一次细菌悬浮液的菌液固定件可以接种3~5张叶片。
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