CN101361726A - 虾青素在制备预防和治疗脑卒中药物中的应用 - Google Patents

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朱俐
陆亚鹏
吴小梅
赵育
杨俊霞
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本发明公开了一种虾青素在制备预防和治疗脑卒中药物中的应用。本发明经有关虾青素抗脑缺血/再灌注损伤实验研究,实验证明,虾青素可明显改善大鼠脑缺血再灌注损伤引起的行为症状、缩小脑梗塞体积、降低脑缺血大鼠脑水肿。因此,虾青素可用于制备防治脑卒中的药物。

Description

虾青素在制备预防和治疗脑卒中药物中的应用
技术领域:
本发明涉及一种虾青素的医药用途。
背景技术:
虾青素,即3,3′-二羟基-4,4′-二酮基-β,β′-胡萝卜素,为萜烯类不饱和化合物,化学分子式为C40H52O4,广泛存在于自然界,如大多数甲壳类动物和鲑科鱼类体内,植物的叶、花、果,以及火烈鸟的羽毛中等(Methods in Enzymology,1992,213:386-391)。目前,天然虾青素的主要来源且含量极其丰富的为淡水藻、雨生红球藻和法夫酵母。天然虾青素的安全性已得到了许多国家的认可。虾青素具有极强的抗氧化性能,为维生素E的500倍(Fisheries Science,1996,62:134-137)。实验表明,虾青素不但可以直接清除自由基,还能阻断脂肪酸的链式反应。而且和其他类胡萝卜素不同的是,虾青素在高压氧条件下不会成为氧化强化剂(Redox Rep,2004,9(4):181-191)。目前,对超氧化物歧化酶-1(SOD-1)预防自由基损伤组织的研究中,实验证明虾青素可提高此酶的表达(J Exp Marine Biol Ecol,2003,297(1):107-118)。虾青素还能有效地防止磷脂和其它脂类的过氧化(J Agric Food Chem,2000,48:1150)。Hussein等(Biol Pharm Bull,2005,28(1):47-52)还证明虾青素具有显著的神经保护作用。除了具有极强的抗氧化性能外,虾青素还具有抗炎作用。实验证明,虾青素能够抑制炎性细胞因子类如NO、前列腺素E2(PGE2)的产生、NO合酶(NOS)、环氧合酶-2(COX-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)诱导作用的表达,它甚至能抑制NO,PGE2,TNF-a和IL-1β的血清水平(Mol Cells,2003,16(1):97-105)。Mara公司将天然虾青素并与其它26种著名的抗炎药物效果进行比较,结果显示虾青素和调查中的92%的抗炎药物有同等的效果或更高;和62种包括阿司匹林在内的非处方抗炎药相比,虾青素与其中76%的药物具有同等的效力或更好(Technical Report TR,3005.001.1999)。这些结果均说明虾青素的抗炎作用可用于治疗和预防由炎症引起的疾病。
心血管疾病中脑卒中的发病率一直居高不下,特别是缺血性脑卒中占多数。脑卒中患者约有1/3在发病后不久死亡,幸存者则由于偏瘫、失语等后遗症致残丧失工作能力甚至生活自理能力。脑卒中作为一种常见疾病,严重危害人类的健康,影响着人类的生活质量,并给患者家庭带来沉重的经济负担。抗脑缺血性卒中药物种类繁多,但多数药物只是改变脑缺血复杂的病理生理过程的某一环节,其疗效并不另人满意,且有些药物毒副作用较大。因此研究开发一种安全有效且能作用于脑缺血病理生理过程多环节的新药将是摆在我们面前的一项艰巨任务。
发明内容:
本发明的目的在于提供一种虾青素在制备预防和治疗脑卒中药物中的应用。
本发明的技术解决方案是:
虾青素在制备预防和治疗脑卒中药物中的应用。
本发明经有关虾青素抗脑缺血/再灌注损伤实验研究,实验证明,虾青素可明显改善大鼠脑缺血再灌注损伤引起的行为症状、缩小脑梗塞体积、降低脑缺血大鼠脑水肿。因此,虾青素可用于制备防治脑卒中的药物(包括食品)。
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
图1是一个试验例中虾青素对脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积德影响图。
图1中:A假手术组  B对照组  C尼莫地平组D虾青素低剂量组  E虾青素中剂量组  F虾青素高剂量组
具体实施方式:
虾青素在制备预防和治疗脑卒中药物中的应用。
试验例:
虾青素对SD(Sprague-Dawley)大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用(“再灌注”指恢复血流供应)
一、实验材料和方法
1材料
1.1实验动物:健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,清洁级,体重240-260g,南通大学实验动物中心提供。
1.2主要试剂:虾青素购自Sigma-Aldrich;红四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium,TTC)粉剂购自上海灵锦精细化工有限公司。
2 方法
2.1 模型制备:参照Longa EZ方法并稍作改良的大脑中动脉线栓法(middle cerebral artery occlusion,MCAo)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。尼龙线插入深度平均为18.5土0.5mm(从ECA分叉处算起)。结扎固定尼龙线,缝合皮肤,栓线外留lcm线头。2h后再灌注,勿需再次麻醉和切开颈部,提拉栓线至有阻力时表明尼龙线头端己达到ICA分叉切口处,血流再通。假手术组栓线只插入1.0cm,其余步骤同模型组。动物苏醒后出现血管栓塞的同侧Hornor征和对侧肢体运动障碍即为模型成功。
2.2 神经行为学评分:参考Zea Longa 6分制评分。评分标准:0分:无神经损伤症状;1分:不能完全伸展对侧前爪;2分:向外侧转圈;3分:向对侧倾倒;4分:不能自发行走,意识丧失;5分:死亡。
2.3 脑梗死灶测量:大鼠迅速取脑,去除嗅脑、小脑和低位脑干,冰冻10min,从额极到枕极作2mm厚度的连续额状切片,切片置0.5%TTC溶液中,于37℃避光孵育30分钟,间隔5分钟摇动切片。再将切片置于4%多聚甲醛缓冲液中固定。24h后拍照并输入计算机,用Image J&ScionImage图像处理软件计算梗死面积(红色区为正常脑组织,白色区为梗死区),各脑片梗死面积之和乘以厚度(2mm)为总的梗死体积,脑梗死灶体积与全脑体积比为脑梗死体积百分比。
2.4 脑含水量测定:缺血2h再灌注24h后,将大鼠迅速断头取脑,用干湿法测脑组织含水率,在冰块上迅速取脑,将取出的脑组织放在一个内有生理盐水湿润的定性滤纸的培养皿中,以防水分蒸发,同时快速去掉脑皮质表面的软脑膜和凝血块。用分析天秤准确称取两个半球的重量,然后置于100℃烤箱24小时后,再次称重,以〔(湿重—干重)/湿重〕×100%即为相对含水量。
2.5 数据处理及统计分析:所有数据用均数±标准误表示(mean士S.E.M),采用Stata8.0统计软件处理数据,两组间比较采用t检验。
二、实验结果
1 神经行为学评分
假手术组动物无神经功能缺损,其它各组均有不同程度的神经功能缺损分值。缺血2h再灌注24h后,尼莫地平组与对照组神经行为学评分具有统计学意义(p<0.05),虾青素高剂量组、中剂量组与对照组神经行为学评分具有非常显著的差异(p<0.001);虾青素高剂量组与尼莫地平组亦有统计学意义(p<0.05)。说明虾青素能明显改善缺血再灌注大鼠的行为学功能,且有剂量有依赖性,作用效果优于尼莫地平。(参见表1)
表1:虾青素对缺血再灌注大鼠行为学功能评分的影响
Figure A200810195924D00071
注:与对照组相比,*p<0.05;**p<0.01;***p<0.001
          与尼莫地平组相比,p<0.05
2 脑梗死体积的测定
缺血2h再灌注24h后,进行TTC染色,梗死区内坏死组织呈白色,未坏死组织呈红色。观测发现梗死区域与MCA支配的脑区基本一致,与对照组相比,各药物组脑梗死百分体积均明显缩小,以虾青素高剂量组作用最为显著(p<0.001),作用效果明显优于尼莫地平组(p<0.01)。(参见表2、图1)。
表2:虾青素对缺血再灌注大鼠脑梗死体积的影响
Figure A200810195924D00081
注:与对照组相比,*p<0.05;**p<0.01;***p<0.00
    与尼莫地平组相比,p<0.05;△△p<0.01
3 脑组织含水量的测定
从表3看出,尼莫地平组的脑组织含水量低于对照组(p<0.05),虾青素低剂量组同对照组相比无显著性差异(p>0.05),虾青素中剂量组和高剂量组的脑组织含水量显著低于对照组(P<0.01),作用效果优于尼莫地平。实验结果表明,虾青素可显著降低缺血再灌注损伤脑组织的含水量,减轻缺血侧脑半球水肿程度。
表3:虾青素对缺血再灌注大鼠脑组织含水量的影响
注:与对照组相比,*p<0.05;**p<0.01
    与尼莫地平组相比,p<0.05;△△p<0.01
三、实验结论
实验结果表明虾青素能显著改善SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤引起的行为症状,减轻损伤侧脑水肿,缩小脑梗塞体积,作用效果明显优于尼莫地平。因而虾青素可用于制备防治缺血性脑卒中的药物和食品。

Claims (1)

1、虾青素在制备预防和治疗脑卒中药物中的应用。
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