CN101336236A - 用于治疗丙型肝炎病毒感染的邻氨基苯甲酸衍生物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及式(I)的化合物或其前药、药学上可接受的盐或药用活性代谢物：其中：R1选自－C(O)R和(a)，其中R6和R7独立地选自H、烷基、环烷基、杂环烷基、杂芳基或芳基，其中任何一个可任选被取代，G选自H或羟基，Y为O、NH或S，X选自H、卤代、烷基、环烷基、全氟烷基、烷氧基、烷硫基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基和CN，和n为0、1、2或3。本发明也涉及含有本发明化合物的组合物和使用本发明化合物及其组合物治疗或预防丙型肝炎病毒感染的方法或抑制丙型肝炎病毒复制的方法。

Description

用于治疗丙型肝炎病毒感染的邻氨基苯甲酸衍生物
发明背景
发明领域
[0001]本发明涉及用于治疗丙型肝炎病毒感染的一系列邻氨基苯甲酸化合物。
相关背景领域
[0002]丙型肝炎为一种可导致慢性肝炎、肝硬化、肝衰竭和肝细胞肿瘤的常见病毒感染。丙型肝炎病毒(HCV)感染导致至少85％慢性肝炎，为肝移植的首要原因，并且在美国造成每年至少10000人死亡(Hepatology，1997，26(增刊1)，2S-10S)。
[0003]丙型肝炎病毒为黄病毒科家族成员之一，并且HCV的基因组为单股线性正义RNA(Hepatology，1997，26(增刊1)，11S-14S)。HCV呈现广延的基因异质性，至少6个基因型和多于50个亚型已被鉴定。
[0004]预防HCV感染不存在有效的疫苗。用干扰素-α(INF-α)治疗或者INF-α与核苷类似物利巴韦林的联合疗法是现行仅有的可行的疗法(抗病毒化学和化学疗法(Antiviral Chemistry and Chemotherapy)，1997，8，281-301)。然而，仅有约40％受治疗的患者发生持续的应答，因此需要更有效的抗HCV治疗药物。
[0005]HCV基因组包含多种非结构蛋白：NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B(J.General Virology，2000，81，1631-1648)。NS5B为一种RNA依赖性RNA聚合酶，它是病毒复制所必须的，因此，NS5B的抑制对开发治疗药物是一个合适的靶标。
[0006]在美国专利5741926中，下式的苯胺衍生物，包括要求保护的邻氨基苯甲酸并且化合物被指出具有抗高血糖活性，
Figure A20068005197100101
其中R1、R2、R3、R4和R5独立地选自氢、卤素、OR11、CX3、C1-C6烷基、(CH2)nCH2OH、(CH2)nCO2R12和(CH2)n-5-四唑基，其中R1、R2、R3、R4或R5中的一个但是不多于一个选自(CH2)nCO2R12和(CH2)n-5-四唑基，R11和R12独立地选自氢和C1-C6烷基；X为卤素；n为0或1；R6、R7、R8、R9和R10独立地选自氢、卤素、OR13、SR14、C(Y)3、C1-C6烷基和苯基；Y为卤素；A为C＝O；和B选自NH、氧和硫。该参考文献没有讲授或提示这些化合物可用于治疗或预防丙型肝炎病毒感染。
发明概述
[0007]本发明涉及以下式(I)的化合物或其前药、药学上可接受的盐或药用活性代谢物：
Figure A20068005197100102
其中R1选自-C(O)R6和中R6和R7独立地选自H、C1-C12烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C2-C9杂芳基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代，G选自H或羟基，Y为O、NH或S，X选自H、卤代、C1-C12烷基、C3-C12环烷基、C1-C12全氟烷基、C1-C12烷氧基、C1-C12烷硫基、氨基、C1-C6烷基氨基、C2-C12二烷基氨基和CN，和n为0、1、2或3。
[0008]本发明也包括以下式(II)的化合物或其前药、药学上可接受的盐或药用活性代谢物：
其中R1选自-C(O)R6和
Figure A20068005197100112
其中R6和R7独立地选自C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C2-C9杂芳基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代，X选自H、卤代、1-4个碳原子的烷基、3-6个碳原子的环烷基、1-4个碳原子的全氟烷基、1-4个碳原子的烷氧基、1-6个碳原子的烷硫基、氨基、1-4个碳原子的烷基氨基、2-8个碳原子的二烷基氨基和CN，和G选自H或羟基。
[0009]本发明也涉及以下式(III)的化合物或其前药、药学上可接受的盐或药用活性代谢物：
Figure A20068005197100113
其中R1选自-C(O)R6和
Figure A20068005197100121
其中R6和R7独立地选自C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C2-C9杂芳基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代，X选自H、卤代、1-4个碳原子的烷基、3-6个碳原子的环烷基、1-4个碳原子的全氟烷基、1-4个碳原子的烷氧基、1-6个碳原子的烷硫基、氨基、1-6个碳原子的烷基氨基、2-12个碳原子的二烷基氨基和CN，和G选自H或羟基。
[0010]本发明也包括含有式(I)、(II)和(III)的化合物的组合物、采用这些化合物及其组合物治疗或预防丙型肝炎病毒感染或者抑制丙型肝炎病毒复制的方法。
发明详述
[0011]对于本发明的目的，术语“烷基”包括直形和分支烷基部分两者，其可含有多达12个碳原子。优选地，烷基部分含有1-6个碳原子，尽管1-4个碳原子更为优选。术语“环烷基”指具有3-12个碳原子的脂环族烃基，但是更优选地含有3-6个碳原子，并且包括(但不限于)：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、降冰片基或金刚烷基。这些部分可被进一步取代。
[0012]对于本发明的目的，术语“杂环烷基”指非芳族杂环系统(单环或双环)，其中所述部分含有1-4个选自S、N和O的杂原子，并且包括(但不限于)：吡咯烷、吡咯啉、1，3-二氧戊环、咪唑啉、咪唑烷、吡唑啉、吡唑烷、吡喃、哌啶、二氧六环、吗啉、二噻烷(dithioxane)、硫代吗啉、哌嗪、氮杂环丁烷基、六氢氮杂
Figure A20068005197100122
基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噁唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、二氢噁二唑基、二氢噁唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、二氢-1，4-二氧六环基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基和二氢吲哚基。杂环烷基部分优选地含有1-11个碳原子。这些部分可被进一步取代。
[0013]对于本发明的目的，术语“芳基”定义为芳烃部分并且可为取代或未取代的。芳基优选地含有6-12个碳原子并可选自(但不限于)：苯基、α-萘基、β-萘基、联苯基、蒽基、四氢萘基、菲基、芴基、2，3-二氢化茚基、亚联苯基、苊基、苊烯基或菲基。芳基可用选自(但不限于)以下的取代基任选地单-、二-、三-或四-取代：烷基、酰基、烷氧基羰基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、芳基烷基、烷基芳基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、氰基、卤素、羟基、硝基、三氟甲基、三氟甲氧基、三氟丙基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、二烷基氨基烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烷硫基、-SO3H、-SO2NH2、-SO2NH烷基、-SO2N(烷基)2、-CO2H、CO2NH2、CO2NH烷基和-CO2N(烷基)2。用于芳基部分的优选取代基包括：烷基、烷氧基、卤素、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、三氟甲基和三氟甲氧基。
[0014]对于本发明的目的，术语“杂芳基”定义为芳族杂环系统(单环或双环)，其中杂芳基部分为含有1-4个选自S、N和O的杂原子的5或6元环，并且包括(但不限于)：(1)呋喃、噻吩、吲哚、氮杂吲哚、噁唑、噻唑、异噁唑、异噻唑、咪唑、N-甲基咪唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、吡咯、N-甲基吡咯、吡唑、N-甲基吡唑、1，3，4-噁二唑、1，2，4-三唑、1-甲基-1，2，4-三唑、1H-四唑、1-甲基四唑、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并呋喃、苯并异噁唑、苯并咪唑、N-甲基苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、吲唑、喹唑啉、喹啉、吡咯烷基；(2)双环芳族杂环，其中苯基、吡啶、嘧啶或哒嗪环：(i)稠合于具有1个氮原子的6-元芳族(不饱和的)杂环；(ii)稠合于具有2个氮原子的5或6-元芳族(不饱和的)杂环；(iii)稠合于具有1个氮原子与1个氧或1个硫原子一起的5-元芳族(不饱和的)杂环；或(iv)稠合于具有1个选自O、N或S的杂原子的5-元芳族(不饱和的)杂环。优选地杂环基团含有2-9个碳原子。这些部分可用选自以下的取代基进一步取代：烷基、酰基、烷氧基羰基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、芳基烷基、烷基芳基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、氰基、卤素、羟基、硝基、三氟甲基、三氟甲氧基、三氟丙基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、二烷基氨基烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烷硫基、-SO3H、-SO2NH2、-SO2NH烷基、-SO2N(烷基)2、-CO2H、CO2NH2、CO2NH烷基和-CO2N(烷基)2。用于杂芳基部分的优选取代基包括：烷基、烷氧基、卤素、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、三氟甲基和三氟甲氧基。优选地杂芳基部分含有1-9个碳原子。
[0015]对于本发明的目的，术语“烷氧基”定义为C1-C6-烷基-O-；术语“芳氧基”定义为芳基-O-；术语“杂芳氧基”定义为杂芳基-O-；其中烷基、芳基和杂芳基如上定义。
[0016]对于本发明的目的，术语“芳基烷基”定义为芳基-C1-C6-烷基-；芳基烷基部分包括苄基、1-苯基乙基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、2-苯基丙基等。
[0017]对于本发明的目的，术语“烷基芳基”定义为C1-C6-烷基-芳基，例如甲苯基。
[0018]对于本发明的目的，术语“烷硫基”定义为C1-C6-烷基-S-。对于本发明的目的，术语“硫代”和“巯基”指-SH基团。
[0019]对于本发明的目的，“烷硫基烷基”和“烷氧基烷基”意指用如上定义的烷氧基或烷硫基进一步取代的如上定义的烷基。
[0020]对于本发明的目的，“芳硫基”和“杂芳硫基”意指用如上定义的芳基或杂芳基进一步取代的硫代基团。
[0021]术语“烷基氨基”和“二烷基氨基”指具有1或2个烷基的部分，其中烷基链为1-6个碳或1-4个碳并且基团可为相同或不同的。术语“氨基烷基”指如在此定义的烷基，其用氨基进一步取代。术语“单烷基氨基烷基”和“二烷基氨基烷基”指具有1或2个键合于其连接于1-6个碳原子的烷基的氮原子的烷基(相同或不同的)的单烷基氨基和二烷基氨基。
[0022]“酰基”为式-(C＝O)-烷基或-(C＝O)-全氟烷基的基团，其中烷基或全氟烷基为1-6个碳原子；优选的实例包括(但不限于)乙酰基、丙酰基、丁酰基和三氟乙酰基。
[0023]对于本发明的目的，术语“烷基亚硫酰基”定义为R’SO-基团，其中R’为1-6个碳原子的烷基。烷基磺酰基为R’SO2-基团，其中R’为1-6个碳原子的烷基。
[0024]对于本发明的目的，术语“卤代烷基”定义为已经用至少1个卤原子取代的如在此定义的烷基。该部分也可用卤原子完全取代，例如三氟甲基。
[0025]对于本发明的目的，术语“全氟烷基”定义为已经完全用氟原子取代的烷基并因此用式-CnF2n+1定义的如在此定义。实例包括-CF3和-CF2CF3。
[0026]对于本发明的目的，术语“羟基烷基”定义为已经用至少1个羟基取代的如在此定义的烷基。
[0027]对于本发明的目的，术语“卤代烷氧基”和“卤代烷硫基”定义为用至少1个卤代原子进一步取代的如在此定义的烷氧基或烷硫基。
[0028]对于本发明的目的，术语“烷氧基烷氧基”和“烷硫基烷氧基”定义为用另一个烷氧基或烷硫基进一步取代的烷氧基，例如CH3-O-CH2CH2-O-。对于本发明的目的，术语“烷氧基烷硫基”和“烷硫基烷硫基”定义为用另一个烷氧基或烷硫基进一步取代的烷硫基。
[0029]对于本发明的目的，术语“氧代”定义为羰基(即C＝O)。
[0030]术语“取代基”在此用于指替代分子上的氢基团的原子基团、官能团或部分基团。除非另外清楚地阐明，应该假定在此描述的任何部分可用一个或更多个选自以下的基团任选取代：烷基、链烯基、链炔基、卤素、卤代烷基、羟基烷基、硝基、氨基、羟基、氰基、氨基烷基、烷基氨基、二烷基氨基、单烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、烷硫基烷氧基、烷氧基烷硫基、烷硫基烷硫基、氧代、烷硫基、-SH、卤代烷硫基、芳基、芳氧基、芳硫基、杂芳基、杂芳氧基、杂芳硫基、酰基、-CO2-烷基、-SO3H、-SO2NH2、-SO2NH-烷基、-SO2NH-(烷基)2、-CO2H、-CO2NH2、-CO2NH-烷基和-CO2N-(烷基)2。
[0031]对于本发明的目的，术语“取代的”指其中分子上的氢基团已经用另一个原子基团、官能团或部分基团替代；这些基团通常称为“取代基”。
[0032]本发明化合物可含有不对称碳原子并因此可产生立体异构体例如对映体和非对映体。本发明的立体异构体可按照Cahn-Ingold-Prelo系统(Cahn-Ingold-Prelog System)命名。尽管没有考虑式(I)、(II)和(III)的立体化学来显示，本发明包括所有各种可能的立体异构体，及外消旋混合物和R与S立体异构体的其它混合物(其为不等量对映体混合物的scalemic混合物)以及它们的前药、药学上可接受的盐和药用活性代谢物。然而，应该指出在手性中心具有相同相对构型的本发明立体异构体可具有不同的R和S构型，取决于所表明手性中心的取代。
[0033]本发明的实施方案为其中式(I)化合物用独立地选自以下的R6和R7定义：H、C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C2-C9杂芳基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代，X选自H、卤代、C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C1-C6全氟烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、C1-C6烷基氨基、C2-C12二烷基氨基和CN，并且任选的取代基选自C1-C6烷基、卤素、C1-C6卤代烷基、C1-C6羟基烷基、硝基、氨基、羟基、氰基、C1-C6烷基氨基、C2-C12二烷基氨基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C2-C12烷氧基烷基、C2-C12烷氧基烷氧基、氧代、C1-C6烷硫基、巯基、C1-C6卤代烷硫基、C6-C12芳基、C6-C12芳氧基、C6-C12芳硫基、C2-C9杂芳基、C2-C9杂芳氧基、C2-C9杂芳硫基、酰基、-CO2-C1-C6烷基、-SO3H、-SO2NH2、-SO2NH-C1-C6烷基、-SO2NH-(C1-C6烷基)2、-CO2H、-CO2NH2、-CO2NH-C1-C6烷基和-CO2N-(C1-C6烷基)2。
[0034]式(I)化合物的另一个实施方案为其中Y为O或NH和X选自H、卤代、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷基。
[0035]式(I)化合物一个更具体的实施方案为其中n为0、1或2和G为H。另一个具体的实施方案为其中R6和R7(存在时)为C1-C4烷基，其中甲基为优选，Y为NH。另一个更具体的实施方案为其中n为2和X为卤代，优选地为Cl或F。尤其更优选的是其中一个X为Cl和另一个X为F。
[0036]式(II)化合物的一个实施方案为其中R6和R7独立地选自H、C1-C6烷基、C3-C12环烷基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代，尽管更优选的是R6或R7为C1-C4烷基。
[0037]式(II)化合物的另一个实施方案为其中G为H。式(II)化合物的另一个实施方案为其中X选自H、卤代、C1-C4烷基、C1-C4全氟烷基和C1-C4烷氧基，最优选X为卤代。更具体的实施方案为其中n为0、1或2，和最具体的实施方案为其中式(II)化合物为-{[N-(2-乙酰基-5-氯-4-氟苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸或2-(2-([5-氯-4-氟-2-(1-甲氧基亚氨基-乙基)-苯基氨基]乙酰氨基}苯甲酸。
[0038]式(III)化合物的一个实施方案为其中R6和R7独立地选自H、C1-C6烷基、C3-C12环烷基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代，尽管更优选的是R6或R7为C1-C4烷基。
[0039]式(III)化合物的一个更具体实施方案为其中G为H。式(III)化合物的另一个实施方案为其中X选自H、卤代、C1-C4烷基、C1-C4全氟烷基和C1-C4烷氧基，最优选X为卤代。一个更具体的实施方案为其中n为1、2或3和至少一个X为卤代，尽管更优选的是n为1或2。
[0040]本发明的优选化合物为：
1.2-{[N-(6-乙酰基-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2.2-({[N-[2-乙酰基-4-氯-5-(甲硫基)苯基]甘氨酰}氨基)苯甲酸；
3.2-({[N-[2-乙酰基-4-氯-5-(二甲基氨基)苯基]甘氨酰}氨基)苯甲酸；
4.2-({[N-[2-乙酰基-4-氯-5-(甲基氨基)苯基]甘氨酰}氨基)苯甲酸；
5.2-{[N-[2-乙酰基-5-氯-4-氟苯基-N-甲基甘氨酰]氨基}苯甲酸；
6.2-({[N-[2-乙酰基-4-氯-5-(甲基亚硫酰基)苯基]甘氨酰}氨基)苯甲酸；
7.2-{[N-(2-乙酰基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
8.2-{[N-(5-氯-4-甲基-2-丙酰苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
9.2-{[N-(2-乙酰基-4，5-二甲基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
10.2-{[N-(2-乙酰基-4-溴-5-氯苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
11.2-{[N-(5-氯-4-氟-2-丙酰苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
12.2-{[N-(2-乙酰基-4，5-二氟苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
13.2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-乙氧基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
14.2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-氟苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
15.2-{[N-(2-乙酰基-4，5-二氯苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
16.2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-甲氧基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
17.2-{[N-(2-乙酰基-4-氟-5-甲基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
18.2-{[N-(2-乙酰基-5-氯-4-氟苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
19.2-{[N-(4-氯-2-丙酰苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
20.2-{[N-(2-乙酰基-4-氯苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
21.2-(2-([5-氯-4-氟-2-(1-甲氧基亚氨基-乙基)-苯基氨基]-乙酰氨基}-苯甲酸；
22.2-({[4，5-二甲基-2-(三氟乙酰基)苯氧基]乙酰基}氨基}苯甲酸；
23.2-{[(2-乙酰基-4，5-二甲氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
24.2-[2-(2-乙酰基-5-甲基苯氧基)乙酰氨基]-苯甲酸；
25.2-{[(2-乙酰基-4-乙基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
26.2-{[(2-乙酰基-4-甲基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
27.2-{[(2-乙酰基-5-氟苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
28.2-{[(2-乙酰基-5-甲氧基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
29.2-{[(2-乙酰基-5-氯苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
30.2-{[(2-苯甲酰基-4-甲基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
31.2-{[(2-乙酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰]氨基}-5-羟基苯甲酸；
32.2-{[(2-乙酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
33.2-{[(2-异丁酰-4，5-二甲基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
34.2-{[(2-乙酰基-5-乙基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
35.2-{[(4，5-二甲基-2-戊酰苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
36.2-{[(2-丁酰-4，5-二甲基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
37.2-{[(4，5-二甲基-2-丙酰苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
38.2-{[(2-乙酰基-4-氯-5-氟苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
39.2-{[(2-乙酰基-5-氯-4-氟苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
40.2-{[(2-乙酰基-4-氟-5-甲基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
41.2-{[(2-乙酰基-4，5-二氟苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
42.2-{[(4-氯-2-丙酰苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
43.2-{[(2-乙酰基-4-氯-5-甲基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
44.2-{[(2-乙酰基-4-氟苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
45.2-{[(2-乙酰基-4-氯苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸；
46.2-{[N-(2-乙酰基-4-溴苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；和
47.2-{[(2-乙酰基-4-乙基-3-羟基苯氧基)乙酰]氨基}苯甲酸。
[0041]本发明化合物为酸并可通过本领域已知的任何合适的方法制备要求的盐，方法包括用无机或有机碱例如胺(伯、仲或叔)、碱金属或碱土金属氢氧化物等处理游离酸。合适盐的例证性实例包括衍生于氨基酸例如甘氨酸和精氨酸、氨；伯、仲和叔胺；环状胺例如哌啶、吗啡和哌嗪的有机盐；以及衍生于钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂的无机盐。
[0042]如果本发明化合物为碱，可通过本领域已知的任何合适的方法制备要求的盐，方法包括用无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等或用有机酸例如乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸(pyranosidyl acid)例如糖醛酸或半乳糖醛酸、α-羟基酸例如枸橼酸或酒石酸、氨基酸例如天冬氨酸或谷氨酸、芳族酸例如苯甲酸或肉桂酸、磺酸例如对-甲苯磺酸或乙磺酸等处理游离碱。
[0043]“前药”打算意指在生理条件下或者通过溶剂分解或代谢转化为具有药用活性的特定化合物的化合物。前药可为一种含有可在生理条件下或者通过溶剂分解裂解的部分例如-CO2R、-PO(OR)2或-C＝NR的本发明化合物的衍生物。可使用任何合适的R取代基提供药学上可接受的溶剂分解或裂解产物。可按照常规方法，通过用合适的试剂处理含有例如酰氨基、羧酸或羟基部分的本发明化合物制备含有这样部分的前药。“药用活性代谢物”打算意指通过规定化合物的体内代谢产生的药理学上活性的化合物。上述式的本发明化合物的前药和活性代谢物可采用本领域已知的技术例如通过代谢研究测定，参见例如：“前药设计(Design ofProdrugs)”，(Bundgaard编辑)，1985，ElsevierPublishers B.V.，阿姆斯特丹，荷兰。“药学上可接受的盐”打算意指保持特定化合物的游离酸和碱的生物有效性并且不是生物学或不合乎需要的盐。药学上可接受盐的实例包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐、γ-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐(甲磺酸盐)、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐和扁桃酸盐。在化合物或盐为固体的情况中，本领域技术人员应该理解本发明化合物或盐可以不同的晶形存在，其所有形式打算处于本发明和规定式的范围内。
[0044]在一个实施方案中，本发明也提供了抑制丙型肝炎RNA-依赖型RNA聚合酶NS5B的方法。方法包括使细胞与有效降低或预防NS5B功能的量的式(I)、(II)或(III)化合物接触。细胞可为哺乳动物细胞并且更具体地讲为人细胞。细胞也可为细菌细胞例如大肠杆菌。细胞可包括(但不限于)：神经元细胞、内皮细胞、神经胶质细胞、小神经胶质细胞、平滑肌细胞、体细胞、骨髓细胞、肝细胞、肠细胞、生殖细胞、肌细胞、单核吞噬细胞、内皮细胞、肿瘤细胞、淋巴细胞、肾小球细胞、视网膜上皮细胞、视网膜血管细胞、神经节细胞或干细胞。细胞可为正常细胞、活化细胞、肿瘤细胞、不健全细胞或受感染细胞。
[0045]本发明进一步提供了用作治疗或预防丙型肝炎感染的活性治疗物质的本发明化合物。式(I)、(II)和(III)化合物对于治疗或预防肝炎C病毒的感染具有特殊用途。
[0046]本发明方法的一个优选实施方案包括在哺乳动物中治疗或预防丙型肝炎病毒感染的方法，方法包括提供哺乳动物有效量的至少一种式(I)、(II)或(III)的化合物。该实施方案可进一步包括提供哺乳动物至少一种生物活性药物，后者可选自：干扰素、聚乙二醇化干扰素、利巴韦林、蛋白酶抑制剂、聚合酶抑制剂、小干扰RNA的化合物、反义化合物、核苷酸类似物、核苷类似物、免疫球蛋白、免疫调节剂、肝保护剂、抗炎药、抗生素、抗病毒药和抗感染化合物。该目录仅提供实例并且不认为是穷举的。
[0047]在另一个实施方案中，本发明包括抑制丙型肝炎病毒复制的方法，方法包括使丙型肝炎病毒与有效量的至少一种式(I)、(II)或(III)化合物接触。该实施方案可进一步包括提供哺乳动物至少一种生物活性药物，所述药物可选自：干扰素、聚乙二醇化干扰素、利巴韦林、蛋白酶抑制剂、聚合酶抑制剂、小干扰RNA的化合物、反义化合物、核苷酸类似物、核苷类似物、免疫球蛋白、免疫调节剂、肝保护剂、抗炎药、抗生素、抗病毒药和抗感染化合物。该目录仅提供实例并且不认为是穷举的。
[0048]本发明化合物或它们的前药、药用活性代谢物或药学上可接受的盐及药用组合物优选地经口服或皮下提供。化合物可通过病灶内、腹膜内、肌内或静脉注射、输注、脂质体介导的传递、局部、鼻、肛门、阴道、舌下、尿道、经皮、鞘内、眼或耳传递提供。为了在提供本发明化合物中得到一致性，优选的是本发明化合物以单位剂量的形式存在。合适的单位剂型包括片剂、胶囊剂和小药囊或小瓶中的粉剂。这样的单位剂型可含有0.1-100mg的本发明化合物并且优选地为2-50mg。仍然更优选的单位剂型含有5-25mg的本发明化合物。本发明化合物可以约0.01-100mg/kg的剂量范围，或优选地以0.1-10mg/kg的剂量范围口服给药。这样的化合物可以一天给药1-6次，更通常地为一天给药1-4次。有效量是本领域技术人员已知的，也应取决于化合物的形式。本领域技术人员可常规实施经验活性试验，以用生物实验确定化合物的生物活性并因此确定给于什么剂量。
[0049]本发明化合物或它们的前药、药用活性代谢物或药学上可接受的盐及药用组合物可用常规赋形剂例如填充剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、矫味剂、着色剂或载体配制。载体可为例如稀释剂、气溶胶、局部载体、水溶液、非水溶液或固体载体。载体可为聚合物或牙膏。本发明中的载体包括任何标准药学上可接受的载体例如磷酸盐缓冲盐水溶液、乙酸盐缓冲盐水溶液、水、乳剂例如水包油乳剂或甘油三酯乳剂、各种类型润湿剂、片料、包衣片剂和胶囊。
[0050]当口服或局部提供时，这样的化合物应通过以不同的载体传递提供给受治疗者。通常，这样的载体包括赋形剂例如淀粉、牛奶、糖、某些类型的粘土、明胶、硬脂酸、滑石、植物脂肪或油类、树胶或二醇类。具体的载体需要基于要求的递药方法进行选择，例如磷酸盐缓冲盐水(PBS)可用于静脉内或全身传递和植物脂肪、乳膏、软膏、油膏或凝胶可用于局部传递。
[0051]本发明化合物或它们的前药、药用活性代谢物或药学上可接受的盐及药用组合物可与合适的稀释剂、防腐剂、增溶剂、乳化剂、辅助剂和/或载体一起传递，用于治疗或预防丙型肝炎病毒感染。这样的组合物为液体或冻干或干燥的制剂并且包括各种缓冲内容物(例如Tris-HCl、乙酸盐、磷酸盐)的稀释剂、pH和离子强度、添加剂例如防止吸附于表面的白蛋白或明胶、去污剂(例如TWEEN 20、TWEEN 80、PLURONIC F68、胆汁酸盐)、增溶剂(例如甘油、聚乙二醇)、抗氧剂(例如抗坏血酸、偏亚硫酸氢钠(sodium metabisulfate))、防腐剂(例如硫柳汞、苄醇、对羟基苯甲酸酯类)、填充物或张力调节剂(例如乳糖、甘露醇)、聚合物的共价连接物(covalent attachment)例如聚乙二醇、与金属离子形成的配位化合物，或者向水凝胶或脂质体、微乳、微团、单层或多层囊泡、红细胞影或原生质球的颗粒制剂中或其上加入化合物。这样的组合物将影响化合物或组合物的物理状态、溶解性、稳定性、体内释放速率和体内清除速率。组合物的选择将取决于能够治疗或预防丙型肝炎病毒感染的化合物的物理和化学性质。
[0052]本发明化合物或它们的前药、药用活性代谢物或药学上可接受的盐及药用组合物可经使得化合物能够在一定时间期间内缓释的胶囊局部传递。控释或缓释组合物包括以亲脂性贮库制剂(例如脂肪酸、蜡、油类)。
[0053]本发明进一步提供了用于其中向传递系统中加入组分的药用组合物的控释治疗剂型。剂型以可在延长的时间期间内保持血液中组合物的有效浓度的方式控制药用组合物的释放，而且组合物的释放应使血液中的浓度在延长的时间期间内保持相对恒定，以改善治疗结果和/或使副作用减至最小。另外，控释系统将影响药用组合物的血浆水平的最低峰-谷波动。
[0054]本发明进一步提供了治疗人丙型肝炎感染的方法，该方法包括给予被感染的个体有效量的本发明化合物或药用组合物。
[0055]本发明也涉及含有以下式(I)化合物或其前药、药学上可接受的盐或药用活性代谢物与药学上可接受的载体的药用组合物：
Figure A20068005197100241
其中R1选自-C(O)R6和
Figure A20068005197100242
其中R6和R7独立地选自H、烷基、环烷基、杂环烷基、杂芳基或芳基，其中任何一个可任选被取代，G选自H或羟基，Y为O、NH或S，X选自H、卤代、烷基、环烷基、全氟烷基、烷氧基、烷硫基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基和CN，和n为0、1、2或3。
[0056]本发明也涉及含有以下式(II)化合物或其前药、药学上可接受的盐或药用活性代谢物与药学上可接受的载体的药用组合物：
Figure A20068005197100243
[0057]其中R1选自-C(O)R6和
Figure A20068005197100244
其中R6和R7独立地选自C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C2-C9杂芳基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代，X选自H、卤代、1-4个碳原子的烷基、3-6个碳原子的环烷基、全氟烷基、1-4个碳原子的烷氧基、1-6个碳原子的烷硫基、氨基、1-4个碳原子的烷基氨基、2-8个碳原子的二烷基氨基和CN，和G选自H或羟基。
[0058]本发明也涉及含有以下式(III)化合物或其前药、药学上可接受的盐或药用活性代谢物与药学上可接受的载体的药用组合物：
Figure A20068005197100251
其中R1选自-C(O)R6和
Figure A20068005197100252
其中R6和R7独立地选自C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C2-C9杂芳基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代，X选自H、卤代、1-4个碳原子的烷基、3-6个碳原子的环烷基、全氟烷基、1-4个碳原子的烷氧基、1-6个碳原子的烷硫基、氨基、1-6个碳原子的烷基氨基、2-12个碳原子的二烷基氨基和CN，和G选自H或羟基。
[0059]本发明提供了在哺乳动物中治疗或预防丙型肝炎病毒感染的方法，该方法包括提供哺乳动物有效量的至少一种药用组合物，其中至少一种药用组合物包含式(I)、(II)或(III)的化合物。
[0060]本发明的方法进一步包括提供哺乳动物有效量的至少一种生物活性药物。在本发明方法的一个实施方案中，至少一种生物活性药物在至少一种药用组合物之前、与至少一种药用组合物同时或在至少一种药用组合物之后提供，其中生物活性药物选自干扰素、聚乙二醇化干扰素、利巴韦林、蛋白酶抑制剂、聚合酶抑制剂、小干扰RNA的化合物、反义化合物、核苷酸类似物、核苷类似物、免疫球蛋白、免疫调节剂、肝保护剂、抗炎药、抗生素、抗病毒药和抗感染化合物。
[0061]当彼此联合使用(即含有所述化合物、它们的前药或药学上可接受的盐的药用组合物彼此同时或以任何顺序连续给药)时，本发明化合物或它们的前药、药用活性代谢物或药学上可接受的盐、或其异构体也用于治疗和预防病毒感染，尤其是丙型肝炎感染，以及活宿主的疾病。在此提供的化合物组合可以相应药用组合物与其它生物活性药物同时或连续进一步提供给受治疗者，其它生物活性药物包括(但不限于)：干扰素、聚乙二醇化干扰素、利巴韦林、蛋白酶抑制剂、聚合酶抑制剂、小干扰RNA的化合物、反义化合物、核苷酸类似物、核苷类似物、免疫球蛋白、免疫调节剂、肝保护剂、抗炎药、抗生素、抗病毒药和抗感染化合物。本发明进一步提供了与一种或更多种邻氨基苯甲酸衍生物的联合疗法，即每一种含有不同的本发明化合物或其前药或药学上可接受盐的至少两种药用组合物彼此同时或连续地被提供给需要它的受治疗者，并且这样的疗法可进一步包括同时或连续地提供其它药物或增效剂例如阿昔洛韦、泛昔洛韦、缬更昔洛韦和相关化合物、利巴韦林和相关化合物、金刚烷胺和相关化合物、各种干扰素例如干扰素-α、干扰素-β、干扰素-γ等以及替代形式的干扰素例如聚乙二醇化干扰素。另外，例如利巴韦林与干扰素的联合可作为用于与至少一种本发明化合物的多联合疗法的另外联合给药。
[0062]所述联合疗法与任何一种上述生物活性药物也可以是连续的，即用含有本发明化合物或其前药或药学上可接受盐的第一种药用组合物治疗，随后用含有第二种本发明化合物的第二种药用组合物治疗，其中第二种化合物不同于第一种化合物；或者，可同时用两种或更多种药用组合物治疗，其中每一种药用组合物包含不同的本发明化合物或其前药或药学上可接受盐。连续疗法可在完成用药用组合物的第一个疗法后的合理时间内。同时用每一种含有不同的本发明化合物或其前药或药学上可接受盐的相应药用组合物治疗可以相同的每天剂量或分开的剂量提供。也可提供联合疗法，其中含有至少一种本发明化合物或其前药或药学上可接受盐的药用组合物与另外含有至少一种生物活性药物的组合物即以单剂量给药。用于同时与连续联合疗法两者(用于含有至少两种本发明化合物或其前药或药学上可接受盐的联合药用组合物或含有至少一种本发明化合物或其前药或药学上可接受的盐与至少一种生物活性药物的组合物)的剂量应取决于药用组合物组分的吸收、分布、代谢和排泄速率以及本领域技术人员已知的其它因素。药用组合物的剂量值也应随着所缓解病症的严重性变化。应该进一步理解对于任何具体的受治疗者，具体给药方案和时间表可根据个体需要和给予或监控药用组合物给药的人员的专业判断进行调整。
[0063]在另一个实施方案中，本发明化合物可以与其它HCV聚合酶抑制剂的联合疗法模式用于治疗人HCV。
[0064]在仍然另一个实施方案中，本发明化合物或它们的前药、药用活性代谢物或药学上可接受的盐可以与其它HCV生活周期抑制剂例如HCV细胞附着或病毒进入、HCV翻译、HCV RNA转录或复制、HCV成熟、装配或病毒释放抑制剂或者HCV酶活性例如HCV核苷酸转移酶、解旋酶、蛋白酶或聚合酶的抑制剂的联合疗法模式用于治疗人HCV。
[0065]意欲使药用组合物的联合疗法包括本发明化合物或其前药或药学上可接受的盐与其它本发明化合物或它们的前药或药学上可接受的盐或超出本发明以外的其它化合物的任何化学上适配的组合，只要所述组合不消除本发明化合物的抗病毒活性或药用组合物本身的抗病毒活性。
[0066]如在此使用的术语“干扰素-α”意指抑制病毒复制和细胞增殖并调节免疫应答的高同源性种特异性蛋白。典型合适的干扰素-α包括(但不限于)重组干扰素α-2b例如可得自Schering Corporation，Kenilworth，NJ的INTRON-A INTERFERON(内含子-A干扰素)、重组干扰素α-2a例如可得自Hofman-La Roche，Nutley，NJ的Roferon干扰素、重组干扰素α-2C例如可得自Boehringer Ingelheim Pharmaceutical，Inc.，Ridgefield，Conn.的BEROFOR ALPHA 2 INTERFERON；干扰素α-n1，天然α干扰素的一种纯化掺合物例如可得自Sumitomo，Japan的SUMIFERON或例如可得自Glaxo-Wellcome公司，伦敦，大不列颠的Wellferon干扰素α-n1(INS)或者共有α干扰素例如在美国专利第4897471和4695623号中描述的那些(其内容在此通过参照全部结合到本文中，具体地讲是其实施例7、8或9)以及可得自Amgen，Inc.，Newbury Park，Calif.的具体产物；或干扰素α-n3，由Interferon Sciences制备和在ALFERON商标下可得自Purdue Frederick Co.，Norwalk，Conn.的天然干扰素的一种混合物。使用干扰素α-2a或α-2b为优选。因为在所有干扰素中干扰素α-2b在全世界范围内得到最广泛的批准以用于治疗慢性丙型肝炎感染，它是最优选的。干扰素α-2b的制备在美国专利第4503901号中有描述。
[0067]如在此使用的术语“聚乙二醇化干扰素”意指聚乙二醇修饰的干扰素缀合物，优选地为干扰素α-2a和α-2b。优选的聚乙二醇-干扰素α-2b缀合物为PEG.12000以下-干扰素α-2b。如在此使用的短语“PEG.12000以下-IFNα”意指例如按照国际专利申请第WO 95/13090号的方法制备并在干扰素α-2a或α-2b氨基之间含有聚氨酯键和具有12000平均分子量的聚乙二醇的缀合物。
[0068]阐述以下实验细节以帮助理解本发明并且不打算和不应该以任何方式构成对在随后权利要求中阐述的本发明的限制。
[0069]按照以下反应流程或其修饰可易于制备本发明化合物。
[0070]如在以下流程(流程1和2)中描述的那样，可合成本发明化合物，其中R1为含有羰基的部分。随后，通过以下在流程3-6中描述的方法，或通过本领域专业人员已知的其它方法，这些化合物可转化为相应的肟，其中R1为
Figure A20068005197100281
流程1
Figure A20068005197100291
流程2
Figure A20068005197100292
[0071]通过如在流程1中描述的方法1制备本发明苯胺衍生物。因此，邻氨基苯甲酸甲酯衍生物用式L1-CH2C(O)L2试剂酰化，得到化合物2，其中L1为离去基团例如卤代、O-甲磺酰基、O-甲苯基或O-三氟甲磺酸根和L2为离去基团例如卤代。优选试剂为溴乙酰溴。按照Sugasawa的方法(Sugasawa，Tsuotomu，Toyoda，Tatsuo，Adachi，Makoto；Sasakura，Kazuyuki.有机合成中的氨基卤代硼烷(Aminohaloborane inOrganic Synthesis).1.苯胺的特异性邻位取代反应(Specific OrthoSubstitution Reaction of Anilines).J.Am.Chem.Soc.(1978)，100(15)，4842-52)，通过用路易斯酸或路易斯酸的组合例如三溴化硼、三氯化铝和相应的腈处理化合物，随后酸水解，实现化合物3的邻位酰化，得到氨基酮4。在碱存在下，优选地在叔胺碱例如N，N-二乙基异丙胺、三乙胺和吡啶存在下，N-乙酰基邻氨基苯甲酸甲酯2与氨基酮4反应，得到酰化产物5。技术人员应意识到，其它碱可用于影响该烷基化。在标准条件下酯水解，得到最终产物1。这些化合物可被进一步衍化形成相应的肟(参见流程3和4)。
[0072]通过如在流程2中图解说明的方法2制备本发明苯氧基和苯硫基(thiophenyl)衍生物。因此，通过使相应的酰氯和路易斯酸与取代苯酚或苯硫酚6反应制备邻-酰基苯酚或邻-酰基苯硫酚衍生物7。该方法学在Mewshaw等(Mewshaw，R.E.；Marquis，K.L.；Shi，X.；McGaughey，G.；Stack，G.等；Tetrahedron；EN；54；25；1998；7081-7108)中有描述。用式R’OC(O)L2试剂烷基化，得到酯8，其中R’选自烷基或芳基和L2为卤代。优选地试剂为碘乙酸乙酯。然后通过碱水解酯8而转化为酸9。然后采用标准肽偶合方法，使化合物9偶合于邻氨基苯甲酸衍生物，得到终产物10。标准偶合方法的一个实例为使化合物9转化为相应的酰卤，然后后者可在非反应性溶剂中与邻氨基苯甲酸衍生物反应。该转化可用试剂象草酰氯、亚硫酰氯、三氯化磷、五氯化磷、Ph3PBr2、Ph3P/CBrCl3、Ph3P/CCl4等实现。本领域技术人员应意识到可用于自羧酸形成酰卤的其它类似试剂。然后这些化合物可进一步衍化形成相应的肟，如在流程5和6中显示的那样。
流程3
Figure A20068005197100311
流程4
Figure A20068005197100312
流程5
Figure A20068005197100321
流程6
Figure A20068005197100322
流程7
Figure A20068005197100323
[0073]流程3图解说明了自相应的氨基酮4开始制备肟衍生物13的通法。在酸或碱存在下，氨基酮4与羟胺或其衍生物例如烷氧基胺(即CH3ONH2)、H2NOSO3H或HON(SO3Na)反应，得到肟11。使用酸是优选的，例如HCl。然后如本文先前描述的那样，在碱性条件下肟与苄基酯2反应，形成肟基酯12，然后皂化，得到终产物13。
[0074]流程4显示了通过在流程1中描述的不同合成位点引入肟官能团得到终产物13的另一种可供选择的方法。因此，酯5可首先与羟胺或其如在此描述的衍生物反应，形成肟，然后后者可皂化，得到最终化合物13。或者，酸化合物1(其为在流程1中显示的终产物)可与羟胺或其如在此描述的衍生物反应，形成肟终产物。
[0075]流程5显示了制备本发明苯酚或苯硫酚衍生物的相应肟的方法。在酸或碱存在下，2-酰基苯酚或2-酰基苯硫酚7与羟胺或其衍生物例如烷氧基胺(即CH3ONH2)、H2NOSO3H或HON(SO3Na)反应，然后在如本文先前描述的路易斯酸存在下与合适的酰卤反应，得到肟14。使用酸是优选的，例如HCl。然后如本文先前描述的那样，在碱性条件下水解肟，形成肟酸15。然后采用如在此描述的标准肽偶合方法使后者偶合于邻氨基苯甲酸衍生物，得到终产物16。
[0076]流程6图解说明了自相应的酸10(其为流程2中的终产物)开始，通过在酸或碱存在下，使其与羟胺或其衍生物例如烷氧基胺、H2NOSO3H或HON(SO3NA)反应制备肟16的方法。使用酸例如HCl是优选的。
[0077]流程7显示了采用在流程1中描述的通法特异性合成2-{[N-(2-乙酰基-5-氯-4-氟苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸。
[0078]以下为本发明化合物的实例。这些实例不打算包括本发明整个范围并且不应视为对本发明范围的限制。
表1
实施例号       名称                                        合成方法
1              2-{[(2-乙酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰基]氨   2
               基}苯甲酸
2              2-{[(2-乙酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰基]氨   2
               基}-5-羟基苯甲酸
3              2-{[(2-苯甲酰基-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}   2
               苯甲酸
4      2-{[(2-乙酰基-5-氯苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲        2
       酸
5      2-{[(2-乙酰基-4-氯苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲        2
       酸
6      2-{[(4-氯-2-丙酰基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲        2
       酸
7      2-{[(2-乙酰基-4-氟苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲        2
       酸
8      2-{[(2-乙酰基-5-甲氧基苯氧基)乙酰基]氨基}        2
       苯甲酸
9      2-{[(2-乙酰基-5-氟苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲        2
       酸
10     2-{[(2-乙酰基-4-氯-5-甲基苯氧基)乙酰基]氨        2
       基}苯甲酸
11     2-{[(2-乙酰基-4-乙基-3-羟基苯氧基)乙酰基]        2
       氨基}苯甲酸
12     2-{[(2-乙酰基-4-乙基苯氧基)乙酰基]氨基}苯        2
       甲酸
13     2-{[N-(2-乙酰基-4，5-二甲基苯基)甘氨酰]氨        1
       基}苯甲酸
14     2-{[(2-乙酰基-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯        2
       甲酸
15     2-{[(2-乙酰基-4，5-二甲氧基苯氧基)乙酰基]氨      2
       基}苯甲酸
16     2-[2-(2-乙酰基-5-甲基-苯氧基)-乙酰氨基]-苯       2
       甲酸
17     2-{[(4，5-二甲基-2-丙酰苯氧基)乙酰基]氨基}       2
       苯甲酸
18   2-{[(2-丁酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰基]氨       2
     基}苯甲酸
19   2-{[(4，5-二甲基-2-戊酰基苯氧基)乙酰基]氨       2
     基}苯甲酸
20   2-[2-(4，5-二甲基-2-丙酰基-苯基氨基)-乙酰氨     1
     基]-苯甲酸
21   2-{[(2-乙酰基-4，5-二氟苯氧基)乙酰基]氨基}      2
     苯甲酸
22   2-({[4，5-二甲基-2-(三氟乙酰基)苯氧基]乙酰      2
     基}氨基)苯甲酸
23   2-{[(2-乙酰基-4-氟-5-甲基苯氧基)乙酰基]氨       2
     基}苯甲酸
24   2-{[(2-乙酰基-5-乙基苯氧基)乙酰基]氨基}苯       2
     甲酸
25   2-{[N-(2-乙酰基-4-氯苯基)甘氨酰]氨基}苯甲       2
     酸
26   2-{[N-(5-氯-4-甲基-2-丙酰苯基)甘氨酰]氨基}      1
     苯甲酸
27   2-{[(2-异丁酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰基]氨     2
     基}苯甲酸
28   2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-甲基苯基)甘氨酰]氨       1
     基}苯甲酸
29   2-{[N-(2-乙酰基-4-溴苯基)甘氨酰]氨基}苯甲       1
     酸
30   2-{[N-(2-乙酰基-5-氯-4-甲基苯基)甘氨酰]氨       1
     基}苯甲酸
31   2-{[N-(4-氯-2-丙酰基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲       1
     酸
33      2-{[N-(2-乙酰基-5-氯-4-氟苯基)甘氨酰]氨基}      1
        苯甲酸
34      2-{[N-(2-乙酰基-4-氟-5-甲基苯基)甘氨酰]氨       1
        基}苯甲酸
35      2-{[(2-乙酰基-4-氯-5-氟苯氧基)乙酰基]氨基}      1
        苯甲酸
36      2-{[(2-乙酰基-5-氯-4-氟苯氧基)乙酰基]氨基}      2
        苯甲酸
37      2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-氟苯基)甘氨酰]氨基}      2
        苯甲酸
38      2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-甲氧基苯基)甘氨酰]       1
        氨基}苯甲酸
39      2-{[N-(6-乙酰基-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-      1
        基)甘氨酰]氨基}苯甲酸
40      2-{[N-(2-乙酰基-4，5-二氯苯基)甘氨酰]氨基}      1
        苯甲酸
41      2-({N-[2-乙酰基-4-氯-5-(甲硫基)苯基]甘氨        1
        酰}氨基)苯甲酸
42      2-{[N-(5-氯-4-氟-2-丙酰基苯基)甘氨酰]氨基}      1
        苯甲酸
43      2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-乙氧基苯基)甘氨酰]       1
        氨基}苯甲酸
44      2-({N-[2-乙酰基-4-氯-5-(二甲基氨基)苯基]甘      1
        氨酰}氨基)苯甲酸
45      2-({N-[2-乙酰基-4-氯-5-(甲基氨基)苯基]甘氨      1
        酰}氨基)苯甲酸
46      2-{[N-(2-乙酰基-4-溴-5-氯苯基)甘氨酰]氨基}      1
        苯甲酸
47    2-{[N-(2-乙酰基-4，5-二氟苯基)甘氨酰]氨基}     1
      苯甲酸
48    2-{[N-(2-乙酰基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸         1
49    2-{[N-(2-乙酰基-5-氯-4-氟苯基)-N-甲基甘氨      1
      酰]氨基}苯甲酸
50    2-({N-[2-乙酰基-4-氯-5-(甲基亚硫酰基)苯基]
      甘氨酰}氨基)苯甲酸
生物学
[0079]通过以下实验方法证实本发明化合物抑制丙型肝炎聚合酶的能力：
[0080]得自BK株(基因型1b)的NS5B在大肠杆菌中表达为蛋白，其中21种C-末端氨基酸用短连接子和六聚组氨酸标记(GSHHHHHH；SEQ ID NO：1)置换。纯化的蛋白与放射性核苷混合并且使之复制内源性小片段发夹已接触抗原的杂聚RNA底物，生成约760nt产物。在滤膜上捕集放射性产物并在除去未掺入的核苷酸后定量。
试剂：
10mM尿苷5’-三磷酸(UTP)(Promega#p116B)
10mM腺嘌呤5’-三磷酸(ATP)(Promega#p113B)
10mM胞苷5’-三磷酸(CTP)(Promega#p114B)
10mM鸟嘌呤5’-三磷酸(GTP)(Promega#p115B)
牛血清白蛋白(BSA)10mg/ml NEB(100X在10mg/ml下)#007-BSA
RNasein(Promega#N251X)40U/μl
A-[33P]-GTP(NEN-easytides NEG/606H 3000Ci/mmol，370MBq/ml，10mCi/ml)
Falcon聚丙烯96孔板(Becton Dickinson#351190)
微孔多重筛选(Millipore Multiscreen)实验系统-96孔-滤板#MADENOB 50
Fisher配制的Optiphase Supermix(Wallac)
用于microbeta 1450-106卡的微孔多筛选套管(MilliporeMultiscreen liner)[(Wallac)PerkinElmer#1450-433]
1M(N-[2-羟基乙基]哌嗪-N′-[2-乙磺酸])(HEPES)，pH 7.3Amersham Pharmacia Biotec(US 16924-500ml)
1M MgCl2(SIGMA#M1028)
二硫苏糖醇(DTT)(固体)(SIGMA#D9779)
不含RNase的水(GIBCO-BRL#10977-023)
二甲基亚砜(Aldrich#27685-5)
Basilen Blue(Sigma，B5520)
0.5M乙二胺四乙酸(EDTA)，pH 8(GIBCO-BRL#15575-020)
磷酸氢二钠(7-水合物)(Na2HPO4.7H2O；Baker#3824-07)
磷酸(Baker，#0262.02)
[0081]其他的试剂制备：
-0.5M磷酸钠缓冲液。每升，称量134克Na2HPO4.7H2O，加水至900ml。用磷酸调pH至7.0。用水加至1L。
-把核苷酸1∶1000至10μM(GTP和CTP)或者1∶100至100μM(ATP和UTP)稀释到不含RNase的水中。
[0082]方法：
(1)在15％二甲基亚砜(DMSO)中10μg/ml下的化合物10μl
[0083]当自100μg/ml化合物在1％DMSO中的储备液开始时：
每孔分配5μl 30％DMSO，
每孔分散5μl化合物(100μg/ml)。
[0084]当自50μg/ml化合物在15％DMSO中的储备液开始时：
每孔加入10μl化合物。
(2)酶混合物：
  储备液   终浓度(在50μl试验体积中)  每20μl混合物(1个反应)   每600个反应
  DEPC H2O  17.06μl   10236μl
  1M HEPES，pH 7.5   20mM  0.5μl   300μl
  1M MgCl2   5mM  0.25μl   150μl
  100mM DTT   1mM  0.5μl   300μl
  100μM UTP   0.5μM  0.25μl   150μl
  100μM ATP   1μM  0.5μl   300μl
  10μM CTP   0.08μM  0.4μl   240μl
  10μM GTP   0.025μM  0.125μl   75μl
  BSA，10mg/ml   0.05mg/ml  0.25μl   150μl
  HCV RdRp NS5Bd21BK(500μg/ml或～7.5μM)   24nM  0.16μl   96μl
总体积：20μl    12ml
[0085]把20μl酶混合物加入到试验板的每孔中。室温下把化合物和酶温育15分钟。
(3)模板混合物-提前制备
[0086]4℃下在微量离心机上缓慢旋转RNA试管20分钟(5μg/试管贮存在75％乙醇和0.3M乙酸钠中)。一只试管足以用于1-1.5个块板。通过反转试管自试管中尽可能除去更多的乙醇。小心温和，沉淀的RNA不可粘附到试管上。真空干燥RNA。通过加入1ml的DEPC水重新混悬RNA，紧密密闭试管盖。为溶解RNA，在冰上温育RNA溶液～60分钟并且温和涡旋。开启试管盖前短暂旋转以确保所有的RNA溶液沉至试管底部。把RNA溶液温和转移至5ml或者更大的试管中。加入另外3ml的DEPC水(总体积4ml)。
[0087]加入以下体积的试剂
  储备液   最终浓度  每20μl混合物(1个反应)  每600个反应
  不含RNAse的水   2.98μl   1788μl
  HEPES，1M   20mM   0.5μl   300μl
  RNase抑制剂(40U/μl)   0.4μ/μl   0.5μl   300μl
  33P-GTP 3000Ci/mmol，10μCi/μl(3.3μM)   0.025μM   0.0125μl   7.5μl
  POF RNA模板   3nM   16μl   9600μl
[0088]每一反应中加入Add 20μl模板混合液(即20ng的pOF各反应液或者～3nM)
(4)室温(22-25℃)下温育反应液2小时。
(5)通过加入50μl的170mM EDTA终止反应。
EDTA的最终浓度为85mM。
(6)通过向每孔中加入200μl的0.5M磷酸钠缓冲液(pH 7.0)预先润湿微孔多重筛选滤器。室温下静置2-3分钟。
(7)将多重筛选滤板放到Millipore Manifold上并且开启真空以使缓冲液流过。关闭真空。把80μl的反应产物转移至滤板的每孔中。静置2-3分钟。开启真空以过滤反应产物。
(8)关闭真空。每孔中加入200μl的0.5M磷酸钠缓冲液(pH 7.0)以冲洗滤膜。开启真空。
重复步骤(8)三次以上。
(9)移去聚丙烯底部。用纸巾在底部点干燥滤膜。桌面上空气干燥滤板1小时。加入40μl Super Mix闪烁体。用带子密封板的顶部。把板放入Packard载体或者micro-beta载体中。
(10)采用Packard Topcount或者micro-beta计数器对板读数。在Top count或者在micro-beta中的33P程序对33P计数(例如采用Program10)。
[0089]背景减去相对于阳性对照的百分比活性减少率计算百分比抑制(板的平均值不包括阴性对照组)。对初步筛选目标被选择显示≥75％抑制率。
[0090]参见Ferrari等，1999.J.Virology 73：1649-1654：“大肠杆菌中表达的可溶性丙型肝炎病毒RNA依赖型RNA聚合酶的表征(Characterization of soluble Hepatitis C virus RNA-dependent RNApolymerase expressed in E.coli)和Takamizawa等，1991”和J.Virology65：1105-1113：“自人载体分离的丙型肝炎病毒基因组的结构与表征(Structure and characterization of the Hepatitis C virus genome isolatedfrom human carriers)”，两篇文献在此通过参照结合到本文中。
[0091]在表II中概述了抑制丙型肝炎聚合酶的本发明化合物：
表II
生物数据
实施例      [M+1]+      HCV Pol BK    复制子ELISA    MTS
1           342         1.8           43.2           ＞147
2           358         0.23          136.3          ＞140
3           390         ＞6.4
4           348         0.53          21.9           ＞144
5           348         0.86          53.0           ＞144
6           332         1.5           111.3          ＞151
7           344         1.2           44.1           83.2
8           332         3.5           63.9           ＞151
9           362         0.14          22.1           115.6
10          358         ＞28          12.9           ＞140
11          341         0.21          31.9           ＞147
12          362         0.16          13.7           64.2
实施例        [M+1]+         HCV Pol BK        复制子ELISA     MTS
13            328            2.8               48.1            ＞153
14            342            25.1              7.8             ＞147
15            328            1.9               70.8            ＞153
16            374            2.1
17            356            4.8               ＞141           ＞141
18            370            2.4               ＞136           ＞136
19            384            0.6               51.8            36.8
20            350            0.3               26.3            ＞143
21            355            0.9               18.5            87.5
22            396            1.8
23            346            0.4               14.4            ＞145
24            342            1.0               22.0            ＞147
25            347            0.23              11.7            ＞144
26            370            16.2              63.4            ＞136
27            375            0.8               5.8             44
28            361            0.1               3.1             ＞139
29            392            0.14              3.3             ＞128
30            361            3.4
31            365            0.017             2               ＞137
32            345            7.5
33            366            0.23              13.1            ＞137
34            366            0.11              11.5            131
35            377            ＞27
36            357            11.8
37            381            0.11              1.7             61.7
38            365            0.18              16.7            ＞137
39            393            0.29              12.1            40
40            390            4.1               72.6            ＞128
41            391            0.14              8.5             122.6
42            376            0.17              21.0            ＞133
43            358            0.19              913.9           ＞140
44            379            0.08              4.1             81.0
45            426            0.11              2.0             61.7
46            313            7.9
47            379            0.88
48            409
[0092]通过以下实验方法证实本发明化合物抑制人肝细胞系中组成型表达的丙型肝炎病毒复制子的能力：
[0093]克隆A细胞(自Apath，LLC认证)衍生自Huh-7细胞(人肝癌细胞系)并且用伴生扩增的HCV复制子(Ib)基因组组成型表达HCV复制蛋白。维持细胞并在DMEM/10％FCS/1mg/ml G418(Geneticin fromGibco#1181 1-023；其他培养基组分在以下“elisa培养基”中描述)中传代。通过每3-4天1∶3或者1∶4传代在分汇合状态下小心维持单细胞层。复制子对细胞代谢/增殖状态极其敏感并且复制子拷贝数在汇合单层(其余细胞)中迅速下降。在理想条件下每一细胞具有平均1000份拷贝的HCV复制子基因组。
[0094]试剂：
Elisa培养基：
Dulbecco′s Modified Eagle Media(Dulbecco′s改良Eagle培养基)(DMEM)(Gibco #12430-047)
2％胎牛血清(FCS)(HyClone#SH30070.03)
1X青/链霉素(Gibco#15140-122)
1X非必需氨基酸(NEAA)(Gibco#11140-050)
no G418
戊二醛(Fisher#02957-4)
TWEEN(吐温)-20，10％(Roche#1332465)
TRITON X-100(Sigma#T-8787)
在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中的Superblock(Pierce#37515)
NS5a单克隆抗体(Virostat#1873)
羊抗小鼠-HRP单克隆抗体(BioRad#172-1011)
3，3′，5，5′四甲基联苯胺(TMB)底物(Sigma#T-0440)
[0095]化合物稀释/细胞铺展：
药物板制备(母板)
把10μl的化合物(在DMSO中)加入到母板的第3列中。把5μl的DMSO加入到其它列中。母板放置备用直到进行连续稀释。
[0096]对照药物
药物和细胞加入：
每板过程包括：
通过向每孔加入52μl的Elisa媒介物制备细胞板(子板)。
在母板中，自第3列-12列连续转移50μl/孔。
把8μl自母板转移至子板(全部96孔)。
把子板放入到温育器中直到细胞被制备。
收获克隆A细胞并且在0.7×105细胞/ml下直接铺展到子板上，100μl/孔。
所有板在37℃下于5％CO2中温育3天。
[0097]Elisa试验：
通过轻轻拍打到水槽中自96孔板移去培养基(细胞应为约80％汇合)。
加入130μl/孔1X PBS+0.05％戊二醛。
37℃下温育1小时。
通过轻轻拍打到水槽中除去。
用300μl/孔PBS冲洗3X，每次冲洗振摇5分钟。通过轻轻拍打到水槽中除去。
加入130μl/孔PBS+0.05％TWEEN(吐温)-20+0.1％TRITONX-100。
37℃下温育10分钟。
通过轻轻拍打到水槽中除去。
加入300μl/孔在PBS中的Superblock。
37℃下温育1小时。
通过轻轻拍打到水槽中除去。
用300μl/孔PBS冲洗3x，每次冲洗振摇5分钟。通过轻轻拍打到水槽中除去。
最后冲洗期间，制备NS5a单克隆抗体(Mab)在Superblock+0.02％TWEEN-20中的1∶100稀释液。
最后冲洗后，加入50μl/孔稀释的Mab。
37℃下温育1小时。
通过轻轻拍打到水槽中除去。
用300μl/孔PBS+0.02％TWEEN(吐温)-20冲洗3X，每次冲洗振摇5分钟。
通过轻轻拍打到水槽中除去。
最后冲洗期间，制备羊抗小鼠-HRP Mab在Superblock+0.02％TWEEN(吐温)-20中的1∶500稀释液。
最后冲洗后，加入50μl/孔稀释的Mab。
37℃下温育1小时。
通过轻轻拍打到水槽中除去。
用300μl/孔PBS+0.02％TWEEN(吐温)-20冲洗5X，每次冲洗振摇5分钟。通过轻轻拍打到水槽中除去。
用300μl/孔PBS冲洗3X，每次冲洗振摇5分钟。通过轻轻拍打到水槽中除去。
最后冲洗后，加入130μl/孔室温TMB底物。
温育直到呈现蓝色。
加入130μl/孔1N HCl以终止反应(颜色由蓝变黄)。
用光密度(O.D.)450滤波器读板。
结果分析：IC50(μM)，IC50(μg/ml)，％抑制率
对照化合物：干扰素-α2；4-30U/ml IC50
序列表
<110>Wyeth
<120>用于治疗丙型肝炎病毒感染的邻氨基苯甲酸衍生物
<130>03127.000900
<150>US 60/741,772
<151>2005-12-01
<160>1
<170>PatentIn版本3.3
<210>1
<211>8
<212>PRT
<213>人工
<220>
<223>六聚组氨酸标记的氨基酸序列
<400>1
Gly Ser His His His His His His
1               5

Claims (39)

1.一种式(I)的化合物或其前药、药学上可接受的盐或药用活性代谢物：
Figure A2006800519710002C1
其中：
R1选自-C(O)R6和
Figure A2006800519710002C2
其中R6和R7独立地选自H、C1-C12烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C2-C9杂芳基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代；
G选自H或羟基；
Y为O、NH或S；
X选自H、卤代、C1-C12烷基、C3-C12环烷基、C1-C12全氟烷基、C1-C12烷氧基、C1-C12烷硫基、氨基、C1-C6烷基氨基、C2-C12二烷基氨基和CN；和
n为0、1、2或3。
2.权利要求1的化合物，其中：
R6和R7独立地选自H、C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C2-C9杂芳基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代；
X选自H、卤代、C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C1-C6全氟烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、C1-C6烷基氨基、C2-C12二烷基氨基和CN；和
任选的取代基选自C1-C6烷基、卤素、C1-C6卤代烷基、C1-C6羟基烷基、硝基、氨基、羟基、氰基、C1-C6烷基氨基、C2-C12二烷基氨基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C2-C12烷氧基烷基、C2-C12烷氧基烷氧基、氧代、C1-C6烷硫基、巯基、C1-C6卤代烷硫基、C6-C12芳基、C6-C12芳氧基、C6-C12芳硫基、C2-C9杂芳基、C2-C9杂芳氧基、C2-C9杂芳硫基、C2-C7酰基、-CO2-C1-C6烷基、-SO3H、-SO2NH2、-SO2NH-C1-C6烷基、-SO2NH-(C1-C6烷基)2、-CO2H、-CO2NH2、-CO2NH-C1-C6烷基和-CO2N-(C1-C6烷基)2。
3.权利要求2的化合物，其中：
Y为O或NH；和
X选自H、卤代、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷基。
4.权利要求3的化合物，其中n为0、1或2和G为H。
5.权利要求4的化合物，其中：
R6为C1-C4烷基；
当存在时，R7为C1-C4烷基，和
Y为NH。
6.权利要求5的化合物，其中n为2和X为卤代。
7.权利要求6的化合物，其中R6为CH3，并且当存在时，R7为CH3。
8.权利要求7的化合物，其中X选自Cl和F。
9.权利要求8的化合物，其中一个X为Cl和另一个X为F。
10.一种式(II)的化合物或其前药、药学上可接受的盐或药用活性代谢物：
Figure A2006800519710003C1
其中：
R1选自-C(O)R6和其中R6和R7独立地选自C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C2-C9杂芳基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代；
X选自H、卤代、1-4个碳原子的烷基、3-6个碳原子的环烷基、1-4个碳原子的全氟烷基、1-4个碳原子的烷氧基、1-4个碳原子的烷硫基、氨基、1-4个碳原子的烷基氨基、2-8个碳原子的二烷基氨基和CN；和
G选自H或羟基。
11.权利要求10的化合物，其中R6和R7独立地选自C1-C6烷基、C3-C12环烷基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代。
12.权利要求11的化合物，其中G为H。
13.权利要求12的化合物，其中所述化合物为：
2-{[N-6-乙酰基-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-({[N-[2-乙酰基-4-氯-5-(甲硫基)苯基]甘氨酰}氨基)苯甲酸；
2-({[N-[2-乙酰基-4-氯-5-(二甲基氨基)苯基]甘氨酰}氨基)苯甲酸；
2-({[N-[2-乙酰基-4-氯-5-(甲基氨基)苯基]甘氨酰}氨基)苯甲酸；
2-{[N-[2-乙酰基-5-氯-4-(氟代苯基)-N-甲基甘氨酰]氨基}苯甲酸；和
2-({[N-[2-乙酰基-4-氯-5-(甲基亚硫酰基)苯基]甘氨酰}氨基)苯甲酸。
14.权利要求12的化合物，其中X选自基团H、卤代、C1-C4烷基、C1-C4全氟烷基和C1-C4烷氧基。
15.权利要求14的化合物，其中R6和R7为C1-C4烷基。
16.权利要求15的化合物，其中所述化合物为：
2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-乙氧基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-甲氧基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(2-乙酰基-4-氟-5-甲基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(2-乙酰基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(5-氯-4-甲基-2-丙酰基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-[2-(4，5-二甲基-2-丙酰基-苯基氨基)-乙酰氨基]-苯甲酸；
2-{[N-(2-乙酰基-5-氯-4-甲基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；和
2-{[N-(2-乙酰基-4，5-二甲基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸。
17.权利要求15的化合物，其中如果存在，X为卤代。
18.权利要求17的化合物，其中n为0、1或2。
19.权利要求18的化合物，其中所述化合物为：
2-{[N-(2-乙酰基-4-溴-5-氯苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(5-氯-4-氟-2-丙酰基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(2-乙酰基-4，5-二氟苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-氟苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(2-乙酰基-4，5-二氯苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(2-乙酰基-5-氯-4-氟苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(4-氯-2-丙酰基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(2-乙酰基-4-氯-5-甲基苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；
2-{[N-(2-乙酰基-4-氯苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸；和
2-{[N-(2-乙酰基-4-溴苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸。
20.权利要求15的化合物，其中化合物为2-{[N-(2-乙酰基-5-氯-4-氟苯基)甘氨酰]氨基}苯甲酸。
21.权利要求15的化合物，其中化合物为2-(2-([5-氯-4-氟-2-(1-甲氧基亚氨基-乙基)-苯基氨基]乙酰氨基}苯甲酸。
22.一种式(III)的化合物或其前药、药学上可接受的盐或药用活性代谢物：
Figure A2006800519710006C1
其中：
R1选自-C(O)R6和
Figure A2006800519710006C2
其中R6和R7独立地选自C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C1-C11杂环烷基、C2-C9杂芳基或C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代；
X选自H、卤代、1-4个碳原子的烷基、3-6个碳原子的环烷基、1-4个碳原子的全氟烷基、1-4个碳原子的烷氧基、1-6个碳原子的烷硫基、氨基、1-6个碳原子的烷基氨基、2-12个碳原子的二烷基氨基和CN；和
G选自H或羟基。
23.权利要求22的化合物，其中R6和R7独立地选自C1-C6烷基、C3-C12环烷基和C6-C12芳基，其中任何一个可任选被取代。
24.权利要求23的化合物，其中G为H。
25.权利要求24的化合物，其中化合物为2-{[(2-乙酰基-5-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸。
26.权利要求24的化合物，其中X选自H、卤代、C1-C4烷基、C1-C4全氟烷基和C1-C4烷氧基。
27.权利要求26的化合物，其中R6和R7为C1-C4烷基。
28.权利要求27的化合物，其中所述化合物为：
2-{[(2-乙酰基-5-乙基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(4，5-二甲基-2-戊酰基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-丁酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(4，5-二甲基-2-丙酰基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-({[4，5-二甲基-2-(三氟乙酰基)苯氧基]乙酰基}氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-5-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-4-乙基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-5-甲氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-苯甲酰基-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰基]氨基}-5-羟基苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；和
2-{[(2-异丁酰基-4，5-二甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸。
29.权利要求27的化合物，其中n为1、2或3和至少一个X为卤代。
30.权利要求29的化合物，其中n为1或2。
31.权利要求30的化合物，其中所述化合物为：
2-{[(2-乙酰基-4-氯-5-氟苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-5-氯-4-氟苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-4-氟-5-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-4，5-二氟苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(4-氯-2-丙酰基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-4-氯-5-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-5-氟苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-5-氯苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
2-{[(2-乙酰基-4-氟苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；和
2-{[(2-乙酰基-4-氯苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸。
32.一种抑制丙型肝炎病毒复制的方法，该方法包括使丙型肝炎病毒与有效量的至少一种选自权利要求1、10或22中任一项的化合物接触。
33.权利要求32的方法，该方法还包括使丙型肝炎病毒与至少一种选自干扰素、聚乙二醇化干扰素、利巴韦林、蛋白酶抑制剂、聚合酶抑制剂、小干扰RNA的化合物、反义化合物、核苷酸类似物、核苷类似物、免疫球蛋白、免疫调节剂、肝保护剂、抗炎药、抗生素、抗病毒药和抗感染化合物的生物活性药物接触。
34.一种治疗或预防哺乳动物的丙型肝炎病毒感染的方法，该方法包括提供给哺乳动物有效量的至少一种选自权利要求1、10或22中任一项的化合物。
35.权利要求34的方法，该方法还包括提供给哺乳动物至少一种选自干扰素、聚乙二醇化干扰素、利巴韦林、蛋白酶抑制剂、聚合酶抑制剂、小干扰RNA的化合物、反义化合物、核苷酸类似物、核苷类似物、免疫球蛋白、免疫调节剂、肝保护剂、抗炎药、抗生素、抗病毒药和抗感染化合物的生物活性药物。
36.一种抑制丙型肝炎RNA-依赖型RNA聚合酶NS5B的方法，该方法包括使细胞与有效量的权利要求1的化合物接触以降低或预防NS5B功能。
37.一种药用组合物，该组合物包含选自权利要求1、10或22中任一项的化合物与药学上可接受的载体。
38.一种治疗或预防哺乳动物的丙型肝炎病毒感染的方法，该方法包括提供给哺乳动物有效量的至少一种权利要求37的药用组合物。
39.权利要求38的方法，该方法还包括提供给哺乳动物有效量的至少一种选自干扰素、聚乙二醇化干扰素、利巴韦林、蛋白酶抑制剂、聚合酶抑制剂、小干扰RNA的化合物、反义化合物、核苷酸类似物、核苷类似物、免疫球蛋白、免疫调节剂、肝保护剂、抗炎药、抗生素、抗病毒药和抗感染化合物的生物活性药物。
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