CN101234193B - 含有重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液 - Google Patents
含有重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101234193B CN101234193B CN2008100339157A CN200810033915A CN101234193B CN 101234193 B CN101234193 B CN 101234193B CN 2008100339157 A CN2008100339157 A CN 2008100339157A CN 200810033915 A CN200810033915 A CN 200810033915A CN 101234193 B CN101234193 B CN 101234193B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- serum albumin
- human serum
- interferon
- stable
- albumin fusion
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 title claims abstract description 63
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 title claims abstract description 63
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 title claims abstract description 61
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 title claims abstract description 51
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 title claims abstract description 51
- 238000005215 recombination Methods 0.000 title claims description 54
- 230000006798 recombination Effects 0.000 title claims description 54
- 230000004927 fusion Effects 0.000 title claims description 42
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 23
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims abstract description 7
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 19
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 16
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 14
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 11
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical group [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 claims description 6
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 6
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical group [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 5
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 claims description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 5
- 235000003969 glutathione Nutrition 0.000 claims description 4
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 claims description 4
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910052816 inorganic phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 abstract description 14
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 abstract description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 12
- 230000008859 change Effects 0.000 abstract description 6
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 abstract description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 abstract description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract 1
- -1 DTT Chemical compound 0.000 description 18
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 10
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 10
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 6
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 5
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 3
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 108010062065 albumin interferon Proteins 0.000 description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005556 chlorobutyl Polymers 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012407 engineering method Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 108700036903 human serum albumin-interferon-alpha-2b fusion Proteins 0.000 description 2
- 102000045683 human serum albumin-interferon-alpha-2b fusion Human genes 0.000 description 2
- NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N iminodiacetic acid Chemical compound OC(=O)CNCC(O)=O NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- AGBQKNBQESQNJD-SSDOTTSWSA-N (R)-lipoic acid Chemical compound OC(=O)CCCC[C@@H]1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-AAKVHIHISA-N 2,3-bis[[(z)-12-hydroxyoctadec-9-enoyl]oxy]propyl (z)-12-hydroxyoctadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCC(O)C\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(O)CCCCCC)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-AAKVHIHISA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MNJSYRKQHUMXNB-UHFFFAOYSA-N C(O)CN.[S] Chemical compound C(O)CN.[S] MNJSYRKQHUMXNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005635 Caprylic acid (CAS 124-07-2) Substances 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010062317 Condyloma latum Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N D-araboascorbic acid Natural products OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- 101000959794 Homo sapiens Interferon alpha-2 Proteins 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010022004 Influenza like illness Diseases 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 1
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N alpha-Lipoic acid Natural products OC(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000004596 appetite loss Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940125717 barbiturate Drugs 0.000 description 1
- HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N barbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=O)N1 HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000337 buffer salt Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000010307 cell transformation Effects 0.000 description 1
- 239000007766 cera flava Substances 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 150000004696 coordination complex Chemical class 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 229960000935 dehydrated alcohol Drugs 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229940026231 erythorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010350 erythorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 1
- 150000002327 glycerophospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical class [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 235000021266 loss of appetite Nutrition 0.000 description 1
- 208000019017 loss of appetite Diseases 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229960002446 octanoic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- DGPCSURYVBYWAT-UHFFFAOYSA-N propane-1,2,3-triol;tetradecanoic acid Chemical compound OCC(O)CO.CCCCCCCCCCCCCC(O)=O DGPCSURYVBYWAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- 239000012475 sodium chloride buffer Substances 0.000 description 1
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-N sulfurothioic S-acid Chemical compound OS(O)(=O)=S DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- DINKXUCRJBUQAZ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 5-bromopyridine-3-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)C1=CN=CC(Br)=C1 DINKXUCRJBUQAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 1
- YODZTKMDCQEPHD-UHFFFAOYSA-N thiodiglycol Chemical compound OCCSCCO YODZTKMDCQEPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006389 thiodiglycol Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Abstract
本发明涉及融合蛋白的医用稳定制剂，公开了一种含有重组人血清白蛋白融合于扰素的稳定水溶液，除了含有安全有效量的重组人血清白蛋白融合干扰素外，还含有磷酸盐和可药用的还原性物质。本发明的制剂可稳定保存重组人血清白蛋白融合干扰素，能够充分防止重组融合蛋白的聚集、降解、构象改变等理化性质的变化，从而保持其有效组分的生物学活性。
Description
技术领域
本发明涉及融合蛋白的医用稳定制剂，尤其涉及一种含重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定制剂。
背景技术
干扰素是具有广泛生物学活性的调节蛋白质，有抗病毒、免疫调节的作用，对多种肿瘤细胞具有辅助性杀灭或抑制增殖作用，还能抑制癌基因表达从而阻止或减慢正常细胞向肿瘤细胞转化的过程。自80年代开始研制出重组人干扰素以来，目前有60多个国家批准上市。广泛用于乙肝、丙肝；白血病；疱疹、湿疣；肾癌、膀胱癌；淋巴瘤、骨髓瘤、黑色素瘤等多种病毒性疾病和肿瘤的治疗。但普通干扰素也存在某些不够理想之处，由于干扰素分子量小，易被肾小球滤过，所以皮下注射后吸收很快，半衰期短，容易被酶水解等，一般要每天注射，至少每周注射三次，应用不够方便。而干扰素治疗肝炎、肿瘤、类风湿及多发性硬化症等疾病时，治疗周期常常长达数月甚至数年，这种长期大剂量频繁用药增加了病人的痛苦和治疗费用而且易产生发烧、疲乏、食欲减退及流感样症状等毒副作用。
人血清白蛋白融合干扰素是人血清白蛋白与干扰素蛋白的融合蛋白，能显著延长干扰素体内半衰期，增强抗病毒作用，提高治疗效果，并且减少注射给药频率。人血清白蛋白融合干扰素的相关专利已在国内外公开，如美国专利US6946134、US6905688、US6926898，中国专利01124110.1、200410042814.8、200610049070.1、200610023785.X。虽然，人血清白蛋白融合干扰素比普通干扰素的稳定性有所提高，但作为蛋白类药物，其稳定性还是无法与常规化学药物相比。根据以往的重组干扰素临床使用经验，在治疗病毒性肝炎性等疾病需要3-6个月的连续给药周期。因为给药时间较长，活性药物需要有较好的稳定性。众所周知，一般重组蛋白质的稳定性比较差，在保存过程中会受到多种环境因素的影响，例如温度，湿度，氧和紫外线等都可能使蛋白发生多种物理或化学变化，造成蛋白质的聚合、分解、氧化或变性等。这些变化使蛋白质活性丧失从而降低治疗效果，并且严重的可能引起毒副作用。因此，研究出一种能稳定保存人血清白蛋白融合干扰素，并适合于实际临床使用的制剂处方是很有意义的。本发明就涉及此方面内容。
发明内容
本发明的目的是提供一种含有重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液，该水溶液可稳定保存重组人血清白蛋白融合干扰素，能够充分防止重组融合蛋白的聚集、降解、构象改变等理化性质的变化，从而保持其有效组分的生物学活性。
本发明的技术方案基于下述理论及研究：
重组人血清白蛋白融合干扰素含有39个半胱氨酸，其中38个形成19对二硫键，还有1个半胱氨酸呈还原状态，能与分子外的半胱氨酸形成二硫键从而形成共价键的聚体。研究发现，在重组人血清白蛋白融合干扰素的保存过程中，随着时间的增加融合蛋白的聚体现象也逐渐增加，生物学活性逐渐降低。所以推测聚体化现象可能是导致重组人血清白蛋白融合干扰素在保存过程中生物学活性逐渐降低的主要原因。为了防止重组人血清白蛋白融合干扰素的聚体形成，认为需要在溶液中保持一个适合的还原环境，即在溶液中添加适合的还原剂。研究发现，在含适合的pH的缓冲盐的溶液中单独添加还原性物质就能明显的提高重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定性，其对制剂稳定性的影响要超过其它的常用辅料，如表面活性剂、金属离子络合物、糖类、多元醇类、氨基酸、中性无机盐等。
基于上述理论及研究，本发明采用了下述技术方案：
一种含有重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液的，它除了含有安全有效量的重组人血清白蛋白融合干扰素外，还含有磷酸盐和可药用的还原性物质。
上述磷酸盐在溶液或重建后的溶液中起到缓冲溶液pH值的作用。一般为无机磷酸盐。
蛋白质是两性物质，在环境的pH大于其等电点的情况下带负电荷，反之带正电荷，在极端的酸性或碱性情况下都会引起蛋白质构象的变化而导致生物学活性的丧失。重组人血清白蛋白融合干扰素的等电点在5.3左右，考虑到在等电点附近蛋白质的溶解性会下降而出现沉淀。前期的实验证明当溶液的pH小于4.5时重组融合蛋白会出现降解的现象，而pH在碱性状态下有利于半胱氨酸氧化形成二硫键。根据上述现象，优先pH范围为6.5-7.5。
可药用的还原性物质是指在溶液中能够优先被氧化，从而保护其它物质避免氧化。如含硫还原剂，包括硫辛酸、硫二甘醇、硫乙醇胺、硫代硫酸盐，硫氢酸钠，焦亚硫酸钠，亚硫酸钠，二硫苏糖醇、半胱氨酸和还原型谷胱甘肽等；如含有烯醇式结构的抗氧化剂，包括L-抗坏血酸、L-抗坏血酸盐、D-异抗坏血酸、D-异抗坏血酸盐等。较佳的，上述还原性物质选自焦亚硫酸钠、L-抗坏血酸、半胱氨酸或谷胱甘肽中的一种或几种的组合。实施例具体列举了加入不同量的L-抗坏血酸、焦亚硫酸钠、半胱氨酸，还原性谷胱甘肽进行实验。较合适的，还原剂浓度在0.1-10g/L的范围内能提高重组融合蛋白的稳定性，优选1-10g/L，特别含有L-抗坏血酸的体系能显著提高重组融合蛋白的稳定性。
本发明中，任何高度提纯的重组人血清白蛋白融合干扰素都可以作为主要活性成分加至本发明的稳定水溶液中，最好是具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的蛋白，或者是与上述蛋白有90％以上同源性并具有干扰素活性的蛋白，由酵母系统表达的重组蛋白。但本发明并不仅限于上述结构的重组人血清白蛋白融合干扰素。本专利所提供的方法，也适用于那些通过基因工程方法进行类似蛋白质突变所获得的其他重组人血清白蛋白融合干扰素，因为这些改变通过常规的方法很容易实现。因此在这方面的应用是受到本专利保护的。
进一步改进的，如果配方中再加入可药用的表面活性剂、金属离子络合物和除无机磷酸盐以外的无机盐中的一种或多种，则能进一步提高重组人血清白蛋白融合干扰素稳定性。其中，表面活性剂可以提高蛋白在水溶液中的溶解性、防止蛋白质析出或吸附于容器壁上或注射器上，从而避免活性物质的损失。金属离子络合物可以络合溶液中微量的二价金属离子，降低蛋白质的氧化变性失活。无机盐类可提高溶液的离子强度，增加蛋白的水溶性(盐溶作用)；可维持一个适合的pH环境，有利于蛋白的稳定；另外通过调节适合的渗透压使制剂易于被人体接受。
较为合适的，在上述表面活性剂在溶液或重建后的溶液中的浓度为0.1-10g/L，金属离子络合物在溶液或重建后的溶液中的浓度为0.1-10g/L，所述无机盐在溶液或重建后的溶液中的浓度为1-100g/L。优选的，上述表面活性剂为吐温80，金属离子络合物为依地酸二钠，无机盐为氯化钠。
适用于本发明的表面活性剂是具有6-13HLB的非离子表面活性剂，例如脱水山梨醇脂肪酸酯，甘油脂肪酸酯(如脱水山梨糖醇辛酸单酯，脱水山梨糖醇月桂酸单酯和脱水山梨糖棕榈酸单酯)，聚甘油脂肪酸酯(例如甘油辛酸单酯，甘油肉豆蔻酸单脂霜和甘油硬脂肪酸单酯)，聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯甘油脂肪酸酯，聚氧乙烯乙二醇脂肪酸酯，聚氧乙烯烷基醚，聚氧乙烯聚氧丙烯烷基醚，聚氧乙烯苯醚，聚氧乙基化硬蓖麻油，聚氧乙基化蜂蜡衍生物，聚氧乙烯化羊毛脂衍生物或者聚氧乙烯脂肪酸酰胺。天然表面活性剂是：卵磷脂，甘油磷脂。神经鞘磷脂，蔗糖脂肪酸酯等。这些表面活性剂既可以单独使用，也可以混合用。
适于本发明的金属离子络合物包括但不限于乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)、亚氨基二乙酸(IDA)、柠檬酸盐、组氨酸盐等。
适于本发明的无机盐包括但不限于氯化钠、氯化钾、磷酸盐、醋酸盐、巴比妥盐、三羟甲基氨基甲烷、硼酸盐等。
本发明的重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液中还可以加入一定量的防腐剂，如苯甲醇、三氯叔丁醇、尼泊金酯类等，防止微生物的污染。本发明的稳定水溶液最适合以非胃肠道方式使用，如肌肉、皮下或静脉注射等。
本发明的优点在于通过添加一些能被人体接受的成分，从而制备出一种适合临床使用，特别是注射使用而且稳定保存的重组人血清白蛋白融合干扰素制剂。这种制剂可以防止活性成分由于容器吸附，蛋白质变性、聚合、降解、氧化等多种因素而导致的结构变性或失活，从而方便运输、长期保存和临床使用。
具体实施方式
本发明实施例中涉及的重组人血清白蛋白融合干扰素是通过基因工程方法制备的重组产品，其制备方法可以根据本发明同一申请人递交的一份专利进行(发明名称：一种人血清白蛋白融合长效干扰素制备工艺，申请号：200610023785.X，公开号：CN1896106)获得。
本发明人为了提高含有重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定性，进行了深入的研究，发现在重组人血清白蛋白融合干扰素制剂配方中添加表面活性剂、金属离子络合物、多元醇、氨基酸、无机盐等物质中的一种或几种组合，能有效的提高重组融合蛋白的稳定性，但总体的稳定性还不能满足保存、运输和临床上方便使用的要求。而在合适pH下，还原性物质的单独添加即可起到显著提高融合蛋白的稳定性的作用，如果进一步添加可药用的表面活性剂，金属络合物、无机盐类中挑选至少一种加入制剂中，则可进一步改善提高融合蛋白的稳定性。
本发明所提的表面活性剂、金属离子络合物、无机盐类、还原性物质在实际应用时是几种物质组合使用。在本发明的基础上改变其浓度或加入其它一些物质，但对提高重组人血清白蛋白融合干扰素稳定性没有显著作用的改变，仍被视为本发明的一部分。
经实验研究证实，重组人血清白蛋白融合干扰素在以下配方的水溶液中的稳定性显著的提高：
每毫升水溶液含：
实施例中，采用下述方法确定重组人血清白蛋白融合干扰素的剩余生物学活性和聚体含量。
a)重组人血清白蛋白融合干扰素生物学活性检测方法
依据干扰素可以保护人羊膜细胞(WISH)免受水泡口炎病毒(VSV)破坏的作用，用结晶紫对存活的WISH细胞染色，于波长570nm处测定其吸光度，可得到干扰素对WISH细胞的保护效应曲线，以此测定重组人血清白蛋白-干扰素α2b融合蛋白的生物学活性。
材料和试剂
1)测活系统采用WISH细胞(人羊膜细胞)，传代培养于含10％FBS的RPMI-1640培养基中；攻击病毒为VSV病毒(水泡性口炎病毒)。
2)培养基完全培养基(含10％FBS RPMI1640)，测活培养基(含7％FBS RPMI1640)、攻击培养基(含3％FBS RPMI1640)。
3)PBS氯化钠8.0g、氯化钾0.20g、磷酸氢二钠1.44g、磷酸二氢钾0.24g，加水溶解并稀释至1000ml，经121℃15分钟灭菌。
4)消化液取乙二胺四乙酸二钠0.2g、氯化钠8.0g、氯化钾0.2g、磷酸氢二钠1.152g、磷酸二氢钾0.2g，加水溶解并稀释至1000ml，经121℃15分钟灭菌。
5)染色液取结晶紫50mg、乙酸0.1ml，加水稀释至100ml。
6)脱色液取无水乙醇50ml、乙酸0.1ml，加水稀释至100ml。
7)测活用标准品干扰素α活性标准品，-80℃保存。
8)供试品重组人血清白蛋白-干扰素α2b融合蛋白。
检测方法
1)收集对数生长期WISH细胞，计数并调整至细胞密度为2×105个/ml，接种于96孔细胞培养板中，每孔100ul。37℃，5％ CO2细胞培养箱培养4-6小时。
2)取干扰素α测活用标准品及重组人血清白蛋白-干扰素融合蛋白待测样品，干扰素α测活用标准品用测活培养基稀释至1000IU/ml，待测品用测活培养基稀释至2ug/ml，并分别以此浓度为起始浓度，用测活培养基四倍比稀释8个梯度。
3)将稀释后的活性标准品和待测样品加入到96孔板中，每孔100ul，复孔。取测活培养基100ul/孔作阴性对照。37℃，5％CO2细胞培养箱培养18-24小时。
4)取VSV病毒储液，用攻毒培养基稀释至100CCID50。弃去96孔细胞培养板中的上清液，加入稀释后的VSV病毒，每孔100ul。37℃，5％CO2细胞培养箱培养24小时。
5)弃去细胞培养板中的上清液，每孔加入染色液50ul，室温染色30分钟。用流动水洗去染色液，吸干残留水分，每孔加入脱色液100ul，室温放置5分钟。
6)混匀后，用酶标仪以630nm为参比波长，在波长570nm处测定吸光度，记录数据。
结果计算
实验数据采用origin数据处理软件，作四参数方程回归(横坐标为对数坐标(稀释倍数)，纵坐标为算术坐标(吸光度))：
Y＝(A-B)/[1+(X/C)D]+B
根据该方程，X＝+∞时(稀释倍数无穷大时，即供试品浓度无穷小)，Y＝B，即最低限；当X＝0时，Y＝A，即最高限；而当X＝C时，Y＝(A+B)/2，即半数有效。因此C的数值即为半数保护浓度(ED50)。
供试品的生物学活性(IU/ml)＝Pr×(Ds×Es)/(Dr×Er)
式中Pr为标准品生物学活性，1000IU/ml；
Ds为供试品预稀释倍数；
Dr为标准品预稀释倍数；
Es为供试品相当于标准品半效量的稀释倍数；
Er为标准品半效稀释倍数。
b)重组人血清白蛋白融合干扰素聚体检测方法
采用分子体积排阻色谱柱，根据待测组分的分子大小进行分离的液相色谱技术。其分离原理是色谱柱填充剂表面分布着不同尺寸的孔径，待测组分进入色谱柱后，它们中的不同组分按分子大小进入相应的孔径内，大于所有孔径的分子不能进入填充剂颗粒内部，在色谱过程中不被保留，最早被流动相洗脱至柱外，表现为保留时间较短；小于所有孔径的分子能自有进入填充剂表面的所有孔径，在色谱柱中滞留时间较长，表现为保留时间较长；其余分子则按分子大小依次被洗脱。
材料和试剂
1)检测柱：TSK-GEL(TOSOH)，SW2000XL，5um粒径，7.8mm×300mm。
2)HPLC系统：LC-10AT(SHIMADU，日本)，二级管阵列检测器。
3)流动相：0.1Mol/L磷酸盐，0.1Mol/L氯化钠缓冲液，pH 7.0。
检测步骤
洗脱充分平衡后即可开始检测，流速为0.5ml/min，上样量20ul，蛋白含量不低于20ug，检测时间为30分钟。
结果计算
按面积归-法计算重组人血清白蛋白-干扰素α2b聚体峰面积占总峰面积的百分率。
以下列举具体实施例来阐明本发明，应理解这些例子仅仅是为了说明本发明，而非限制本发明的范围。
实施例1
表1列出的各种稳定剂分别加至1.0mg/ml的重组人血清白蛋白干扰素融合蛋白中，混合物中含有20mM pH7.0磷酸盐缓冲液，0.22um除菌过滤后按1.0ml/支分装于药用的注射剂玻璃瓶中，瓶口以溴化丁基橡胶塞和铝塑复合盖密封。分装后的含有重组人血清白蛋白干扰素融合蛋白混合物放置于25℃中，1个月后取样测定重组人血清白蛋白干扰素融合蛋白的生物学活性和蛋白纯度。
实验可见，单独添加还原剂对稳定性的作用，优于添加表面活性剂、金属离子络合物和无机盐的组合，当还原剂浓度在0.5g/L-5g/L的范围内能提高重组融合蛋白的稳定性。
实施例2
表2列出的各种稳定剂分别加至1.0mg/ml的重组人血清白蛋白干扰素融合蛋白中，混合物中含有20mM pH7.0磷酸缓冲液，0.22um除菌过滤后按1.0ml/支分装于药用的注射剂玻璃瓶中，瓶口以溴化丁基橡胶塞和铝塑复合盖密封。分装后的含有重组人血清白蛋白干扰素融合蛋白混合物放置于25℃中，1个月后取样测定重组人血清白蛋白干扰素融合蛋白的生物学活性和蛋白纯度。
实验表明，其它条件相同的情况下，含有L-抗坏血酸的体系更能显著提高重组融合蛋白的稳定性。
Claims (6)
1.一种含有重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液，其特征在于，所述水溶液除了含有安全有效量的重组人血清白蛋白融合干扰素外，还含有磷酸盐和可药用的还原性物质，所述磷酸盐为在溶液中起到缓冲溶液pH值的作用的无机磷酸盐，所述可药用的还原性物质选自焦亚硫酸钠、L-抗坏血酸或谷胱甘肽中的一种或几种的组合，所述可药用的还原性物质在重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液中的浓度为0.1-10g/L，所述稳定水溶液的pH为6.5-7.5。
2.如权利要求1所述的重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液，其特征在于，所述的重组人血清白蛋白融合干扰素是具有SEQID NO：1的氨基酸序列的蛋白，或者是具有干扰素活性且与具有SEQ ID N0：1的氨基酸序列的蛋白有90％以上同源性的蛋白。
3.如权利要求1所述的重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液，其特征在于，所述重组人血清白蛋白融合干扰素是由酵母表达的重组蛋白。
4.如权利要求1-3中任一权利要求所述重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液，其特征在于，所述稳定水溶液中还含有表面活性剂、金属离子络合物、或无机盐中的一种或多种的组合。
5.如权利要求4所述重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液，其特征在于，所述表面活性剂为吐温80，所述金属离子络合物为依地酸二钠，所述无机盐为氯化钠。
6.如权利要求4所述重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液，其特征在于，所述表面活性剂在稳定水溶液中的浓度为0.1-10g/L，金属离子络合物在稳定水溶液中的浓度为0.1-10g/L，所述无机盐在稳定水溶液中的浓度为1-100g/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008100339157A CN101234193B (zh) | 2008-02-26 | 2008-02-26 | 含有重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008100339157A CN101234193B (zh) | 2008-02-26 | 2008-02-26 | 含有重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101234193A CN101234193A (zh) | 2008-08-06 |
| CN101234193B true CN101234193B (zh) | 2012-10-31 |
Family
ID=39918261
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2008100339157A Active CN101234193B (zh) | 2008-02-26 | 2008-02-26 | 含有重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101234193B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113797317A (zh) * | 2021-10-26 | 2021-12-17 | 科兴生物制药股份有限公司 | 一种组合物及其制备方法和应用 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103432573A (zh) * | 2010-08-25 | 2013-12-11 | 齐鲁制药有限公司 | 重组人血清白蛋白-干扰素α融合蛋白的水溶液及其制备方法 |
| CN101954067A (zh) * | 2010-08-25 | 2011-01-26 | 齐鲁制药有限公司 | 重组人血清白蛋白-干扰素α融合蛋白的水溶液及其制备方法 |
| CN103432569B (zh) * | 2010-08-25 | 2015-02-18 | 齐鲁制药有限公司 | 重组人血清白蛋白-干扰素α融合蛋白的水溶液及其制备方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101099722A (zh) * | 2006-07-07 | 2008-01-09 | 杭州九源基因工程有限公司 | 含有重组人血清白蛋白-干扰素α融合蛋白的注射用水剂 |
-
2008
- 2008-02-26 CN CN2008100339157A patent/CN101234193B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101099722A (zh) * | 2006-07-07 | 2008-01-09 | 杭州九源基因工程有限公司 | 含有重组人血清白蛋白-干扰素α融合蛋白的注射用水剂 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113797317A (zh) * | 2021-10-26 | 2021-12-17 | 科兴生物制药股份有限公司 | 一种组合物及其制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101234193A (zh) | 2008-08-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100597500B1 (ko) | 안정한 인슐린 제제 | |
| EP0970703B1 (en) | Use of metal chelating agents to stabilize preparations containing interferon | |
| KR100731559B1 (ko) | 장기 안정화 제제 | |
| ES2286868T3 (es) | Composicion acuosa a base de hormana del crecimiento humana. | |
| US9107821B2 (en) | Stable bortezomib formulations | |
| EA026226B1 (ru) | Не содержащие аргинина композиции слитого fc-полипептида и способы их применения | |
| US9636376B2 (en) | Stable compositions of peptide epoxy ketones | |
| JP5774561B2 (ja) | 安定なボルテゾミブ製剤 | |
| JPWO2015064591A1 (ja) | タンパク質水性懸濁剤 | |
| CN101234193B (zh) | 含有重组人血清白蛋白融合干扰素的稳定水溶液 | |
| CA2324467C (en) | Formulations for protection of peg-interferon alpha conjugates | |
| BRPI1101565A2 (pt) | novo conjugado de polietileno glicol estável de interferon alfa, representado por um isÈmero posicional | |
| US10603352B2 (en) | Formulations of hepalatide | |
| CA2046861C (en) | K2p pro stabilisation | |
| WO2015190378A1 (ja) | 安定なアダリムマブ水性製剤 | |
| CN103143000B (zh) | 一种重组人干扰素α2b制剂 | |
| CN103432569B (zh) | 重组人血清白蛋白-干扰素α融合蛋白的水溶液及其制备方法 | |
| CN101954067A (zh) | 重组人血清白蛋白-干扰素α融合蛋白的水溶液及其制备方法 | |
| WO2022135395A1 (zh) | 稳定的抗体制剂及其制备方法和应用 | |
| CN103432573A (zh) | 重组人血清白蛋白-干扰素α融合蛋白的水溶液及其制备方法 | |
| TW534815B (en) | Stable protein and nucleic acid formulations using non-aqueous, anhydrous, aprotic, hydrophobic, non-polar vehicles with low reactivity | |
| AU2022223669A1 (en) | Aqueous composition of an engineered protein construct comprising an fc domain | |
| CN104998262B (zh) | Dpp4抑制剂在防治辐射诱导骨髓抑制药物中的应用 | |
| JPH0657662B2 (ja) | グリコシル化されていないｔ―ＰＡ誘導体Ｋ１Ｋ２Ｐｐｒｏの製薬学的製剤および医薬品ならびに該製剤の製造方法 | |
| CN111346048A (zh) | 一种血管内皮抑制素皮下注射剂 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: SHANGHAI JIANYUAN BIOLOGY SCIENCE CO., LTD. Free format text: FORMER OWNER: SHANGHAI XINBAINUO BIOLOGY SCIENCE CO., LTD. Effective date: 20091002 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20091002 Address after: Shanghai City, Pudong New Area Zhangjiang hi tech Park 720 Cailun Road No. 2 No. 304 Applicant after: Jianyuan Biological Science and Technology Co., Ltd., Shanghai Address before: Shanghai City, Pudong New Area Zhangjiang hi tech Park 720 Cailun Road No. 1 No. 316 Applicant before: Sinobio Biotech Co. |
|
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: SINOBIO BIOTECH CO. Free format text: FORMER OWNER: JIANYUAN BIOLOGICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY CO., LTD., SHANGHAI Effective date: 20111009 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20111009 Address after: 201203 Shanghai Zhangjiang hi tech Park 720 Cailun Road Lane 2 building room 304 Applicant after: Sinobio Biotech Co. Address before: 201203 Shanghai City, Pudong New Area Zhangjiang hi tech Park 720 Cailun Road No. 2 No. 304 Applicant before: Jianyuan Biological Science and Technology Co., Ltd., Shanghai |
|
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20210115 Address after: 215200 science and technology pioneer park complex building, Wujiang Economic Development Zone, Suzhou City, Jiangsu Province Patentee after: WUJIANG NOVOPROTEIN SCIENTIFIC Inc. Address before: 201203 room 304, building 2, Lane 720, Cailun Road, Zhangjiang hi tech park, Shanghai Patentee before: SHANGHAI XINBAINUO BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder | ||
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |
Address after: 215200 science and technology pioneer park complex building, Wujiang Economic Development Zone, Suzhou City, Jiangsu Province Patentee after: Suzhou inshore protein Technology Co.,Ltd. Address before: 215200 science and technology pioneer park complex building, Wujiang Economic Development Zone, Suzhou City, Jiangsu Province Patentee before: WUJIANG NOVOPROTEIN SCIENTIFIC Inc. |