CN101233124A - 糖脂衍生物和包含它作为有效成分的药物 - Google Patents
糖脂衍生物和包含它作为有效成分的药物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101233124A CN101233124A CNA2006800278877A CN200680027887A CN101233124A CN 101233124 A CN101233124 A CN 101233124A CN A2006800278877 A CNA2006800278877 A CN A2006800278877A CN 200680027887 A CN200680027887 A CN 200680027887A CN 101233124 A CN101233124 A CN 101233124A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- integer
- compound
- general formula
- expression
- glycolipid derivative
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
通式(I)的糖脂衍生物,其中R1表示吡喃醛糖残基,R2表示氢原子或羟基,A表示-CH2-、-CH(OH)-CH2-或-CH=CHCH2-,Z表示-O-或-CH2-,当Z是-O-且x是4-16的整数时,y是26-35的整数,当Z是-O-且x表示17-25的整数时,y表示0-35的整数,当Z是-CH2-且x表示4-15的整数时,y表示26-35的整数,当Z是-CH2-且x表示16-25的整数时,y表示0-35的整数,和包含该糖脂衍生物的用于治疗自身免疫关节炎及其它自身免疫病,支气管哮喘及其它变态反应性疾病或其中已知NKT细胞或对NKT细胞的刺激导致疾病恶化的疾病的药物。
Description
技术领域
本发明涉及可用于多发性硬化、重症肌无力、慢性变形性关节炎、全身性红斑狼疮、干燥综合症、系统性硬皮病、多肌炎、皮肌炎、胰岛素依赖性糖尿病、特发性血小板减少性紫斑病、桥本甲状腺炎、巴塞多氏病、恶性贫血、阿狄森氏病、萎缩性胃炎、溶血性贫血、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、自身免疫肝炎、天疱疮、类天疱疮、脉管炎综合症、自身免疫性溶血性贫血、古德帕斯彻氏综合征、狼疮肾炎及其它自身免疫疾病和支气管哮喘、变应性哮喘、特应性皮炎、过敏性鼻炎、荨麻疹(urticarial eruption)、花粉症、药物过敏、接触性皮炎及其它变态反应性疾病和器官移植排斥的新型糖脂衍生物和它们的药理学可接受的水合和溶剂合物和包含它们的药物。
背景技术
免疫系统识别原本的自己和非自己,对非自己通过免疫反应排除,对于自己则诱导免疫无应答,从而保持生物体的恒常性。另外,对自己成分的免疫无应答的维持若破坏,变成免疫系统攻击自身的疾病是认为是“自身免疫疾病”,对于非自己的抗原(外来异物)所引起的免疫应答,由于过度的反应使生物体产生不好状况的疾病认为是“过敏”。
治疗自身免疫病和变态反应性疾病的常规方法主要是糖皮质激素和免疫抑制剂的非专门性免疫抑制治疗。然而,这些治疗方法具有许多副作用。自身抗原专门性免疫抑制剂的开发是迫切希望的。近年来,已经进行了自身抗原的肽治疗方法的试验,但是通过富含多形态的主要组织相容性基因配合物(MHC)提供肽,所以存在显著的个体差异。虽然存在改善的病例,但是还存在更大恶化的病例。终究难以临床应用。
NKT细胞是淋巴细胞,其既表达NK细胞标识物(NKT受体)又表达T细胞抗原受体(TCR)。虽然T细胞识别与MHC键接的肽,但是NKT细胞识别作为抗原的通过非多形态CD1d分子提供的糖脂衍生物并且当受到TCR激发时在极短时期内产生大量细胞因子。
例如,通式(II)的α-半乳糖基神经酰胺(α-GC):
已经报道作为第一糖脂衍生物配体用于激活CD1d限制的NKT细胞并且阐明它表达抗癌活性和免疫刺激作用(参见非专利文献1和专利文献1)。此外,本发明人报道α-GC的鞘氨醇碱的碳链长度缩短了的通式(III)的OCH
偏向朝向Th2的Th1/Th2免疫平衡并且在多发性硬化的动物模型:小鼠试验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)和变形性关节炎的动物模型:胶原引起的关节炎(CIA)中显示高的有效性(参见非专利文献2-4和专利文献2)。
即,通式(III)的OCH在上面自身免疫病动物模型中的作用表达可以基于通过由负责免疫反应的NKT细胞产生Th2型抑制细胞因子引起的“活性抑制”来解释。
另一方面,据报导,在关节炎及其它自身免疫病模型或支气管哮喘模型中,NKT细胞用作导致疾病条件恶化的效应细胞(参见非专利文献5)。因此,如果可以在这些疾病条件中建立抑制NKT细胞机能的药物疗法,则可能不但实现防止和治疗自身免疫疾病,而且实现变态反应性疾病的治疗。然而,还不知道使用抑制NKT细胞机能作为作用机理的有效药物治疗。
专利文献1:日本专利号3088461
专利文献2:WO2003/016326
非专利文献1:T.Kawano等人的Proc.Natl.Acad.Sci.USA.1998,95,5690
非专利文献2:K.Miyamoto等人的Nature 2001,413,531
非专利文献3:A.Chiba等人的Arthritis Rheum.2004,50,305
非专利文献4:T.Yamamura等人的Curr.Top.Med.Chem.2004,4,561
非专利文献5:O.Akbari等人的Curr.Opin.Immunol.2003,15,627
发明内容
考虑到上述情形,本发明的目的是提供通过抑制NKT细胞的机能、对自身免疫疾病、变态反应性疾病和其中已知与NKT细胞病态恶化相关的疾病有效的安全性高的改善或治疗药。
本发明的另一个目的是新型糖脂衍生物和它们的药理学可接受的盐、水合物和溶剂合物,该糖脂衍生物用作CD1d限制的NKT细胞的配体,但是几乎不从NKT细胞诱导细胞因子如IL-4和IFN-γ、或其它细胞因子产生,并且可用作上述药物。
本发明人已经合成了能够控制自身免疫反应的糖脂衍生物并且一直致力于开发治疗自身免疫疾病的药物(WO2003/016326;WO2004/072091;Karl O.A.Yu等人的,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,2005,102,3383)。在它们之中,本发明人发现,在比α-GC(II)具有更长的糖脂的鞘氨醇碱碳链长度的衍生物中或在具有更长的长链脂肪酸长度的衍生物中,令人惊讶地发现,通式(I)的糖脂衍生物对抗体诱导的关节炎的强烈抑制效果:
其中R1表示吡喃醛糖残基,R2表示氢原子或羟基,A表示-CH2-、-CH(OH)-CH2-或-CH=CHCH2-,Z表示-O-或-CH2-,当Z是-O-且x表示4-16的整数时,y表示26-35的整数,当Z是-O-且x表示17-25的整数时,y表示0-35的整数,当Z是-CH2-且x表示4-15的整数时,y表示26-35的整数,当Z是-CH2-且x表示16-25的整数时,y表示0-35的整数(以下简称“ASG(即,关节炎抑制剂糖脂)”)。
通式(I)的ASG诱导NKT细胞的微小增殖和IFN-γ或其它细胞因子的微小产生,但是显著地抑制预刺激的NKT细胞的第二反应(免疫无应答性)。抗体关节炎模型据报道缓和没有NKT细胞的小白鼠的关节炎发作(J.Exp.Med.2005.201.41-7:Arthritis Rheum.2005,52,1941),但是本发明描述的糖脂强烈地抑制该关节炎的发作。此外,通式(I)的ASG抑制主要由嗜曙红细胞组成的细胞浸润到支气管哮喘动物模型中的气道,抑制IL-5、IL-13及其它细胞因子在肺泡洗液中的产生,和抑制气道敏感性。即,发明人发现通式(I)的ASG是抑制自身抗体引起的炎症性反应的有效糖脂衍生物,并且可以形成治疗自身免疫关节炎或其它自身免疫疾病和支气管哮喘或其它过敏性的疾病的药物,因此,达到了本发明的目的。
附图说明
图1是显示合成的糖脂衍生物对K/BxN血清转移关节炎(关节炎得分)的抑制效果的曲线图。
图2是显示合成的糖脂衍生物对K/BxN血清转移关节炎(病理得分)的抑制效果的曲线图。
图3是显示合成的糖脂衍生物对K/BxN血清转移关节炎(当NKT细胞不存在时的关节炎得分)的抑制效果的曲线图。
图4是显示本发明化合物对NKT细胞的效果的曲线图。
图5是将本发明化合物预给药对NKT细胞的效果的曲线图。
图6是在支气管哮喘模型中通过本发明化合物抑制肺泡洗液中的细胞浸润的曲线图。
图7是在支气管哮喘模型中通过本发明化合物抑制肺泡洗液中细胞因子水平的曲线图。
图8是显示在支气管哮喘模型中本发明化合物对气道阻力的抑制效果的曲线图。
图9是在支气管哮喘模型中通过本发明化合物抑制肺泡洗液中的细胞浸润的曲线图。
图10是在支气管哮喘模型中通过本发明化合物抑制肺泡洗液中细胞因子水平的曲线图。
图11是在支气管哮喘模型中本发明化合物在肺泡洗液中对气道阻力的抑制效果的曲线图。
具体实施方式
在本发明中,作为自身免疫病,可以提及例如,多发性硬化、重症肌无力、慢性变形性关节炎、全身性红斑狼疮、干燥综合症、系统性硬皮病、多肌炎、皮肌炎、胰岛素依赖性糖尿病、特发性血小板减少性紫斑病、桥本甲状腺炎、巴塞多氏病、恶性贫血、阿狄森氏病、萎缩性胃炎、溶血性贫血、克罗恩氏病、溃疡性大肠炎、自身免疫肝炎、天疱疮、类天疱疮、脉管炎综合症、自身免疫性溶血性贫血、古德帕斯彻氏综合征、狼疮肾炎等。此外,作为本发明中的变态反应性疾病,可以提及例如,支气管哮喘、变应性哮喘、特应性皮炎、过敏性鼻炎、荨麻疹、花粉症、药物过敏、接触性皮炎、器官移植排斥等。
具有根据本发明通式(I)的化合物包括具有通式(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的化合物。
其中m表示17-25的整数,n表示0-35的整数,R1、R2和A与上面所限定的相同。
在通式(Ia)中,作为由R1所示的吡喃醛糖残基的优选实例,可以提及α-D-葡糖基、α-D-半乳糖基、α-D-甘露糖基、β-D-葡糖基、β-D-半乳糖基、β-D-甘露糖基、2-脱氧-2-氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-氨基-β-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-β-D-半乳糖基、β-D-阿洛吡喃糖基(β-D-allopyranasyl)、β-D-阿卓糖吡喃糖基(β-D-altropyranosyl)、β-D-伊杜糖基等,尤其优选α-D-葡糖基、α-D-半乳糖基、α-D-甘露糖基、2-脱氧-2氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-α-D-半乳糖基或其它α-异构体。R2表示氢原子或羟基,但是优选氢原子。A表示-CH2-、-CH(OH)-CH2-或-CH=CHCH2-,优选-CH2-或-CH(OH)-CH2-,尤其优选-CH(OH)-CH2-。m表示17-25的整数,优选17-22的整数。n表示0-35的整数,但是优选15-35的整数,更优选18-31,最优选20-28的整数。
其中p表示4-16的整数,q表示26-35的整数,R1、R2和A与上面所限定的相同。
在通式(Ib)中,作为R1所示的吡喃醛糖残基的优选实例,可以提及α-D-葡糖基、α-D-半乳糖基、α-D-甘露糖基、β-D-葡糖基、β-D-半乳糖基、β-D-甘露糖基、2-脱氧-2-氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-氨基-β-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-β-D-半乳糖基、β-D-阿洛吡喃糖基、β-D-阿卓糖吡喃糖基、β-D-伊杜糖基等,尤其优选α-D-葡糖基、α-D-半乳糖基、α-D-甘露糖基、2-脱氧-氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-α-D-半乳糖基或其它α-异构体。R2表示氢原子或羟基,但是优选氢原子。A表示-CH2-、-CH(OH)-CH2-或-CH=CHCH2-,但是优选-CH2-或-CH(OH)-CH2-,尤其优选-CH(OH)-CH2-。p表示4-16的整数,优选12-16的整数。q表示26-35的整数,优选26-32的整数。
其中r表示16-25的整数,s表示0-35的整数,R1、R2和A与上面所限定的相同。
在通式(Ic)中,作为R1所示的吡喃醛糖残基的优选实例,可以提及α-D-葡糖基、α-D-半乳糖基、α-D-甘露糖基、β-D-葡糖基、β-D-半乳糖基、β-D-甘露糖基、2-脱氧-2-氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-氨基-β-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-β-D-半乳糖基、β-D-阿洛吡喃糖基、β-D-阿卓糖吡喃糖基、β-D-伊杜糖基等,尤其优选α-D-葡糖基、α-D-半乳糖基、α-D-甘露糖基、2-脱氧-2氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-α-D-半乳糖基和其它α-异构体。R2表示氢原子或羟基,但是优选氢原子。A表示-CH2-、-CH(OH)-CH2-或-CH=CHCH2-,优选-CH2-或-CH(OH)-CH2-,尤其优选-CH(OH)-CH2-。r表示16-25的整数,优选16-22的整数。s表示0-35的整数,但是优选15-35的整数,更优选18-31,最优选20-28的整数。
其中t表示4-15的整数,u表示26-35的整数,R1、R2和A与上面所限定的相同。
在通式(Id)中,作为R1所示的吡喃醛糖残基的优选实例,可以提及α-D-葡糖基、α-D-半乳糖基、α-D-甘露糖基、β-D-葡糖基、β-D-半乳糖基、β-D-甘露糖基、2-脱氧-2-氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-氨基-β-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-β-D-半乳糖基、β-D-阿洛吡喃糖基、β-D-阿卓糖吡喃糖基、β-D-伊杜糖基等,尤其优选α-D-葡糖基、α-D-半乳糖基、α-D-甘露糖基、2-脱氧-2氨基-α-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-α-D-半乳糖基和其它α取代基。R2表示氢原子或羟基,但是优选氢原子。A表示-CH2-、-CH(OH)-CH2-或-CH=CHCH2-,但是优选-CH2-或-CH(OH)-CH2-,尤其优选-CH(OH)-CH2-。t表示4-15的整数,优选12-15的整数。u表示26-35的整数,优选26-32的整数。
在通式(I)的化合物之中,尤其优选的实例例示如下:即,可以提及2-二十六烷酰基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇、2-二十九烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇、2-二十六烷酰基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十五烷三醇、2-二十六烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十七烷三醇、2-三十烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-十八烷三醇、2-三十四烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-十八烷三醇、2-二十四烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇、2-二十六烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十四烷三醇、2-二十九烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十四烷三醇、2-二十九烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十五烷三醇、2-二十九烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十二烷三醇、2-三十烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-十九烷三醇、2-三十烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十烷三醇、2-三十烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十一烷三醇、2-三十烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十二烷三醇、2-二十五烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇、2-二十七烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇、2-二十八烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇、(3S,4S,5R)-1-α-D-吡喃半乳糖基-3-二十六烷酰氨基-4,5-二十四烷二醇等。
通式(I)的糖脂衍生物可以通过各种方法合成。例如,在衍生物(Ia)和(Ib)的情况下,其中Z是-O-,它们可以根据如下所述的方法合成。现将依次说明这些方法。
首先,由已知的起始物质(IVa)获得化合物(VIa)(WO2004/072091;K.Murata等人的,J.Org.Chem.2005,70,2398)。此外,遵循已知的方法(例如,M.Morita等人的,J.Med.Chem.1995,38,2176)获得化合物(IVb)和(IVc),然后将化合物(IVb)的双键还原以将该化合物转化成化合物(VIb)(步骤1)。从化合物(VIa)、(VIb)或(IVc),获得化合物(VIIa)、(VIIb)或(VIIc)(步骤2),然后使用叠氮基的选择性还原和酰胺化反应获得化合物(VIIIa)、(VIIIb)或(VIIIc)(步骤3)。然后使用化合物(VIIa)、(VIIb)或(VIIc)和化合物(IX)的糖基化反应获得化合物(Xa)、(Xb)或(Xc)(步骤4)。使用化合物(Xa)、(Xb)或(Xc)的叠氮基选择性还原和酰胺化反应获得化合物(XIa)、(XIb)或(XIc)。此外,可以通过化合物(VIIIa)、(VIIIb)或(VIIIc)和化合物(IX)的糖基化反应获得化合物(XIa)、(XIb)或(XIc)(步骤5)。最后,可以除去化合物(XIa)、(XIb)或(XIc)的保护基以获得所需的化合物(Ia)或(Ib)(步骤6)。
步骤1
有可能从已知的起始材料(IVa)合成化合物(VIa)。此外,有可能通过已知的方法获得(IVb)和(IVc)。可以将(IVb)转变成化合物(VIb)。
其中x如上面所限定,R3和R4可以相同或不同并且表示氢原子,被甲基、乙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、氯原子、氟原子等取代或未取代的烷基,被甲基、乙基、异丙基、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子、硝基、甲氧基、甲氧基甲基、三氟甲基等取代或未取代的芳基,被甲基、乙基、异丙基、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子、硝基、甲氧基、甲氧基甲基、三氟甲基等取代或未取代的芳烷基,或者R3和R4键接在一起形成亚丙基、亚丁基、或亚戊基的环状结构,R5表示苄基、对甲氧苄基、对硝基苄基、对甲氧基甲氧基苄基、对苄氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、二苯甲基或二(对硝基苯基)甲基,M表示Li、MgCl、MgBr或MgI,Z表示氯原子、溴原子或碘原子。
在从化合物(IVa)到化合物(VIa)的步骤中,在二乙醚、四氢呋喃、二烷、甲苯、二甲苯、己烷、环己烷或其它惰性溶剂或它们的包含碘化铜(I)、溴化铜(I)、氯化铜(I)或氟硼化盐的混合溶剂中,在-78℃至0℃,优选-50至-10℃下将1-6当量烷基锂试剂或格利雅试剂添加到化合物(IVa)中,在相同温度下搅拌该混合物,例如,搅拌1-5小时,向其中添加化合物(IVa),然后,进一步搅拌该混合物1-5小时而获得所需的化合物(VIa)。此外,在从化合物(IVb)到化合物(VIb)的步骤中,可以在二乙醚、二甲氧基乙烷、四氢呋喃、二烷、甲苯、二甲苯、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、水、乙醇、异丙醇或其它溶剂或它们的混合物中,如果有必要的话,在乙酸钠、乙酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠或其它碱存在下在30-150℃下将化合物(IVb)与肼或甲苯磺酰基肼一同搅拌,或者在室温下在Pd-C、Pd-CaCO3-Pb、Pd-BaSO4、PtO2等存在下将化合物(IVb)氢化从而使化合物(VIb)转化成化合物(IVb)。
通过这一反应获得的化合物可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤2
有可能将步骤1获得的化合物(VIa)转化成化合物(VIIa)或(VIIb)。此外,有可能将步骤1获得的化合物(VIb)或(IVc)转化成化合物(VIIc)。
其中x和R5与上面所限定的相同,R6和R7可以相同或不同并且表示氢原子,被甲基、乙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、氯原子、氟原子等取代或未取代的烷基,被甲基、乙基、异丙基、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子、硝基、甲氧基、甲氧基甲基、三氟甲基等取代或未取代的芳基,被甲基、乙基、异丙基、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子、硝基、甲氧基、甲氧基甲基、三氟甲基等取代或未取代的芳烷基,或者R6和R7键接在一起形成亚丙基、亚丁基、或亚戊基的环状结构,A′表示-CH2-或-CH=CHCH2-。
化合物(VIa)可以在二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、四氯化碳、乙腈、二乙醚、四氢呋喃、二烷、苯、甲苯、二甲苯、乙酸乙酯或其它惰性溶剂中在三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾或其它碱存在下在-20℃至100℃,优选-10℃至80℃下与1-5当量甲烷磺酰氯、甲烷磺酸酐、乙烷磺酰氯、1-丙烷磺酰氯、1-丁烷磺酰氯、三氟甲烷磺酰氯、α-甲苯磺酰氯、苯磺酰氯、对甲苯磺酰氯、对甲苯磺酸酐、4-甲氧基苯磺酰氯、4-氯代苯磺酰氯、2-硝基苯磺酰氯、3-硝基苯磺酰氯、4-硝基苯磺酰氯或其它磺酰化试剂反应例如、1-72小时并通过普通方法加以脱缩醛化。对于脱缩醛化条件,可以使用“Protective Groups In Organic Synthesis”(John Wiely& Sons)等中描述的许多方法。例如,可以在盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、三氟乙酸、甲烷磺酸、三氟甲烷磺酸或其它无机酸或有机酸和甲醇、乙醇、2-丙醇、二烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、四氯化碳、苯、甲苯、二甲苯、水或其它惰性溶剂的混合物中在-10℃至100℃,优选0-50℃下搅拌该化合物,以致获得所需物质。接下来,使所获得的化合物在乙腈、二乙醚、四氢呋喃、二烷、苯、甲苯、二甲苯、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺或其它惰性溶剂中在0-200℃,优选20-120℃下与1-50当量叠氮化钠、叠氮化锂、叠氮化四正丁基铵等反应。在这个时候,如果有必要的话,还可以添加三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾或其它碱。将所获得的化合物缩醛化以获得化合物(VIIa)。作为缩醛条件,可以使用“Protective Groups In Organic Synthesis”(John Wiely & Sons)等中描述的各种方法。即,可以在有机酸或无机酸存在下在无溶剂条件下或在二乙醚、二烷、苯、甲苯、二甲苯或其它惰性溶剂中使该化合物与缩醛化试剂在0-200℃,优选20-120℃下反应,以致获得所需化合物(VIIa)。在这个时候,作为缩醛化试剂,可以使用丙酮、2,2-二甲氧基丙烷、2-甲氧基丙烯、2-乙氧基丙烯、苯甲醛、苯甲醛二甲缩醛、环己酮、环己酮二甲缩醛、环戊酮、环戊酮二甲缩醛等。此外,在叠氮化之后获得的化合物可以在伯羟基的三苯甲基化或甲硅烷基化并且,然后,其它仲羟基的芳基甲基化之后被脱三甲苯基化以致获得化合物(VIIb)。作为三苯甲基化或甲硅烷基化条件,例如,可以提及在-50℃至120℃,优选-20℃至80℃下在碳酸锂、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钠、氢化钾、钠、钾、三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、二甲基吡啶或其它碱存在下在二乙醚、四氢呋喃、二烷、苯、甲苯、二甲苯、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或其它惰性溶剂中0.8-2当量三苯甲基溴、三苯甲基氯或三甲基甲硅烷基氯、叔丁基二甲基甲硅烷基氯、苯基二甲基甲硅烷基氯、叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯的反应条件。此外,作为芳基甲基化试剂,可以提及苄基氯、苄基溴、对甲氧苄基氯、间甲氧苄基氯、对硝基苄基氯、对硝基苄基溴等。作为芳基甲基化反应条件,可以使用上述三苯甲基化条件。此外,作为脱三苯甲基化的条件,可以使用“Protective Groups In Organic Synthesis”(JohnWiely & Sons)等中描述的各种方法。例如,可以提及在甲酸、乙酸、三氟乙酸、盐酸、硫酸、硝酸或其它酸或硫酸铜(II)存在下在-50℃至150℃,优选-20℃至100℃下在无溶剂条件下的反应条件或在二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、四氢呋喃、乙腈、苯、甲苯、二甲苯、二烷、水、甲醇、乙醇、2-丙醇、叔丁醇或其它溶剂中的反应条件。作为脱甲硅烷基条件,除了上述脱三苯甲基化条件之外,还可以提及在四氢呋喃、乙腈、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷或其它溶剂中在氟化四丁基铵、氟化钾氢、氟酸、氢氟酸吡啶等存在下在-50℃至150℃,优选-20℃至100℃下的反应条件。
通过这一反应获得的化合物可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤3
在步骤2获得的化合物(VIIa)、(VIIb)和(VIIc)的叠氮基可以还原成氨基,然后转变成酰胺基从而获得化合物(VIIIa)、(VIIIb)和(VIIIc)。
其中R2、R5、R6、R7、x、y和A′与上面所限定的相同。
首先,用锌/盐酸,氢化锂铝或其它金属试剂或三苯基膦、三甲基膦、三乙基磷、三丁基膦或其它三芳基膦或三烷基膦处理化合物(VIIa)、(VIIb)或(VIIc)或在室温下在Pd-C、Pd-CaCO3-Pb、Pd-BaSO4、PtO2等存在下将它们氢化以选择性地将叠氮基还原成氨基,然后使用与羧酸的酰胺化反应以获得化合物(VIIIa)、(VIIIb)或(VIIIc)。对于酰胺化反应,可以使用“Compendium for Organic Synthesis”(Wiely-Interscience;A Division of John Wiely & Sons)等描述的各种方法。作为一个实例,通过在惰性溶剂如二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、二乙醚、四氢呋喃、二烷、乙腈、苯、甲苯、二甲苯、二甲基甲酰胺中在羧酸的活化试剂存在下在-50℃至120℃,优选-20℃至80℃下使胺与相应的羧酸反应,可以获得所需的化合物(VIIIa)、(VIIIb)或(VIIIc)。作为羧酸的活化试剂,可以提及四氯化硅、乙酸酐、乙酰氯、氯代碳酸乙酯、碘化2-碘-1-甲基吡啶、碘化2-氯-1-甲基吡啶、二苯基氧膦基氯、N,N′-二环己基碳化二亚胺(DCC)、N-羟基苯并三唑/DCC、1-乙基-3-(3-二乙基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐、乙氧基乙炔、三甲基甲硅烷基乙氧基乙炔、碳化二咪唑、二苯基磷酰基叠氮化物、二乙基磷酰氰等。此外,如果有必要的话,可以添加对甲苯磺酸、多磷酸或其它酸,或三乙胺、二异丙基乙胺、N-甲基吗啉、吡啶、2,6-二甲基吡啶、4-二甲基氨基吡啶或其它碱。
通过上述反应获得的化合物可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤4
在步骤2获得的化合物(VIIa)、(VIIb)或(VIIc)和化合物(IX)的苷化反应可以用来获得化合物(Xa)、(Xb)或(Xc)。
其中R5、R6、R7、X和A′与上面所限定的相同,R8表示被羟基或氨基保护的吡喃醛糖基,L表示氯原子、溴原子、氟原子或碘原子。
化合物(VIIa)、(VIIb)或(VIIc)可以在惰性溶剂如己烷、环己烷、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、醚、四氢呋喃、乙腈、苯、甲苯、二甲苯、二烷、二甲基甲酰胺、二氯甲烷或它们的混合溶剂中在三氟化硼、高氯酸银、氯化亚锡(II)、四氯化钛、四氯化亚锡或其它路易斯酸存在下或在溴化四正丁基铵或其它卤化铵盐存在下,例如,在-100℃至50℃,优选-78℃至30℃下与化合物(IX)起反应,以获得化合物(Xa)、(Xb)或(Xc)。用于这一反应的路易斯酸或卤化铵盐可以单独地使用或以它们的任何组合使用。此外,在那时,如果有必要的话,可以添加分子筛。
此外,作为形成R8的羟基或氨基受保护的吡喃醛糖残基,可以提及2,3,4,6-四-O-苄基-D-葡糖基、2,3,4,6-四-O-苄基-D-半乳糖基、2,3,4,6-四-O-苄基-D-甘露糖基、3,4,6-三-O-苄基-2-脱氧-2-(叔丁氧基羰基氨基)-D-半乳糖基、3,4,6-三-O-苄基-2-脱氧-2-乙酰氨基-D-半乳糖基、2,3,4,6-四-O-苄基-D-阿洛吡喃糖基、2,3,4,6-四-O-苄基-β-D-阿卓糖吡喃糖基、2,3,4,6-四-O-苄基-β-D-伊杜糖基、3,4,6-三-O-苄基-2-脱氧-2-(二苄基氨基)-D-半乳糖基等。
通过上述反应获得的化合物(Xa)、(Xb)或(Xc)可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤5
通过将在步骤4获得的化合物(Xa)、(Xb)或(Xc)的叠氮基还原成氨基,然后将它转化转化成酰胺基,有可能获得化合物(XIa)、(XIb)或(XIc)。此外,在步骤3获得的化合物(VIIIa)、(VIIIb)或(VIIIc)和化合物(IX)的苷化反应可以用来获得化合物(XIa)、(XIb)或(XIc)。
其中R2、R5、R6、R7、R8、x、y和A′与上面所限定的相同。
可以通过步骤3中相同的方法将化合物(Xa)、(Xb)或(Xc)转变成化合物(XIa)、(XIb)或(XIc)。此外,可以通过步骤4中相同的方法将化合物(VIIIa)、(VIIIb)或(VIIIc)转变成化合物(XIa)、(XIb)或(XIc)。
通过上述反应获得的化合物可以直接地用作下一步的材料,但是,如果有必要的话,也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤6
在步骤5获得的化合物可以经脱缩醛化和脱芳基甲基化或化合物(XIb)或(XIc)可以经脱芳基甲基化而获得化合物(Ia)或(Ib)。
其中R1、R2、R5、R6、R7、R8、x、y、A和A′与上面所限定的相同。
此外,作为脱缩醛化和脱芳基甲基化条件,可以使用“ProtectiveGroups In Organic Synthesis”(John Wiely & Sons)等中描述的各种方法。例如,作为脱缩醛化条件,可以使用步骤2中示出的方法。此外,作为脱芳基甲基化条件,可以提及在甲醇、乙醇、2-丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、二甲基甲酰胺或其它不参与反应的溶剂中在Pd-C、Pd(OH)2、PtO2等存在下添加4-甲基环己烯的条件用于在室温下加热和回流或氢化。通过反应获得的化合物如果有必要可以通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化。
在通式(I)的糖脂衍生物中,其中Z是-CH2-的衍生物(Ic)和(Id)例如可以通过如下示出的方法合成。现将依次说明这些方法,但是合成方法不限于这些方法。
在其中Z是-CH2-的通式(I)的糖脂衍生物之中,即,在衍生物(Ic)和(Id)之中,其中A是-CH2-或-CH(OH)CH2-的那些可以由以下起始物质合成:已知的起始物质(XIIa)(例如,Sabino,A.A.等人的,Tetrahedron Lett.2002,43,2819;Toba,T.等人的Tetrahedron Lett.2005,46,5043),已知的起始物质(XIIb)(例如,Bestmann,H.J.等人的,Angew.Chem.1991,103,78)或已知的起始物质(XIIc)(例如,Chen,X.等人的,Tetrahedron Lett.2002,43,3529)。首先,将(XIIa)、(XIIb)或(XIIc)分别转变成化合物(XIVa)、(XIVb)或(XIVc)(步骤7),然后氧化以获得化合物(XVa)、(XVb)或(XVc)(步骤8)。使化合物(XVa)、(XVb)或(XVc)和已知的乙炔基吡喃醛糖衍生物(XVI)(例如,Dondoni,A.等人的,J.Org.Chem.2002,67,4475;Toba,T.etal.Tetrahedron Lett.2005,46,5043)反应以获得化合物(XVIIa)、(XVIIb)或(XVIIc)(步骤9),衍生化合物(XVIIIa)、(XVIIIb)或(XVIIIc)(步骤10),然后将叠氮基选择性地还原以获得胺,然后将它与羧酸(XIX)缩合以获得化合物(XXa)、(XXb)或(XXc)(步骤11)。除去化合物(XXa)、(XXb)或(XXc)的所有保护基以获得所需的化合物(Ic)或(Id)(步骤12)。
此外,在其中Z是-CH2-的通式(I)的糖脂衍生物之中,即,在衍生物(Ic)和(Id)之中,其中A是-CH=CH2CH2-的那些可以如下合成:在与已知的起始物质(XXI)(Toyota,M.等人的,Heterocycles1995,40,115)和已知的起始物质(XVI)(例如,Dondoni,A.等人的,J.Org.Chem.2002,67,4475;Toba,T.等人的,Tetrahedron Lett.2005,46,5043)的反应之后,然后还原不饱和键,获得了化合物(XXII)(步骤13)。将羟基转变成叠氮基以获得化合物(XXIII)(步骤14)。从化合物(XXIII)除去保护,将伯羟基选择性地保护以获得化合物(XXIV)(步骤15),然后将叠氮基选择性地还原而获得胺主体;然后将该胺主体与羧酸(XIX)缩合以获得化合物(XXV)(步骤16)。将化合物(XXV)的羟基保护,然后仅选择性地除去伯羟基的保护基以将该化合物转化成化合物(XXVI)(步骤17),然后将该伯羟基氧化,然后增加碳以获得化合物(XXVIII)(步骤18)。除去化合物(XXVIII)的所有保护基以获得目标化合物(Ic)或(Id)(步骤19)。
步骤7:
从已知的起始物质(XIIa)(例如,Sabino,A.A.等人的,Tetrahedron Lett.2002,43,2819;Toba,T.等人的,Tetrahedron Lett.2005,46,5043)或已知的起始物质(XIIb)(例如,Bestmann,H.J.等人的,Angew.Chem.1991,103,78)或已知的起始物质(XIIc)(例如,Chen,X.等人的,Tetrahedron Lett.2002,43,3529),可以合成通式(XIVa)、(XIVb)和(XIVc)的化合物。
其中x与上面所限定的相同,R9和R10可以相同或不同,氢原子,取代或未取代的烷基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳烷基,或R9和R10可以键接在一起形成亚丙基、亚丁基或亚戊基的环状结构,R11和R12可以相同或不同,苄基,对甲氧苄基,对硝基苄基,对甲氧基甲氧基苄基,对苄氧基苄基,3,4-二甲氧基苄基,二苯甲基,二(对硝基苯基)甲基,甲氧基甲基,苄氧基甲基,对甲氧基苄氧基,硝基苄氧基,2,2,2-三氯乙氧基甲基,四氢吡喃基。
通过在-78至50℃,优选-78至0℃下在四氢呋喃、醚、甲苯、六甲基磷酰胺或其它不参与反应的溶剂或它们的混合溶剂中将钠、钾、氢化钠、氢化钾、正丁基锂、二异丙基酰胺锂、双(三甲基甲硅烷基)酰胺钾、双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂或其它碱添加到相应的磷盐或烷基磷酸酯中,以制备phosphoylide化合物(XIIIa)或(XIIIb)并使该反应产物在相同条件下与化合物(XIIa)、(XIIb)或(XIIc)反应,可以获得所需化合物(XIVa)、(XIVb)或(XIVc)的不饱和主体。
通过还原该不饱和化合物,可以获得所需的化合物(XIVa)、(XIVb)或(XIVc)。作为双键的还原条件,可以使用“Shinjikken Kagaku Koza”(New Experimental Chemistry Seminar)(Maruzen)等中描述的各种方法。例如,可以提及在甲醇、乙醇、2-丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、二甲基甲酰胺或其它不参与反应的溶剂中在Pd-C、Pd(OH)2、PtO2、Rh-C、Ru-C或其它过渡金属催化剂等存在下添加4-甲基环己烯的条件用于在室温下加热和还原或氢化。
通过上述方法获得的化合物(XIVa)、(XIVb)或(XIVc)可以直接地用作制备化合物(XVa)、(XVb)或(XVc)的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤8:
可以将在步骤7获得的化合物(XIVa)、(XIVb)或(XIVc)氧化而获得化合物(XVa)、(XVb)或(XVc)
其中x、R9、R10、R11和R12与上面所限定的相同。
对于将伯羟基氧化成醛基的氧化反应,可以使用“Compendium forOrganic Synthesis”(Wiely Interscience;Adivision of John Wiely&Sons)等中描述的各种方法。例如,通过在四氢呋喃、二烷、乙腈、二氯甲烷、氯仿、二甲基甲酰胺、吡啶或其它不参与反应的溶剂或它们的混合溶剂中在室温到50℃下使化合物(XIVa)、(XIVb)或(XIVc)与1-20当量,优选1-5当量Dess-Martin试剂[1,1,1-三(乙酰氧基)-1,1-脱氢-1,2-benziodoxole-3-(1H)-酮](D.B.Dess andJ.C.Martin,J.Am.Chem.Soc.1991,113,7277)反应,可以获得化合物(XVa)、(XVb)和(XVc)。
通过上述反应获得的化合物(XVa)、(XVb)和(XVc)可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以通过常用的纯化方法,例如,重结晶和柱层析加以纯化之后使用。
步骤9:
在步骤8获得的化合物(XVa)、(XVb)和(XVc)可以与已知的乙炔基吡喃醛糖衍生物(XVI)起反应(例如,Dondoni,A.等人的,J.Org.Chem.2002,67,4475;Toba,T.等人的,Tetrahedron Lett.2005,46,5043),然后将不饱和键还原而获得化合物(XVIIa)、(XVIIb)和(XVIIc)。
其中x、R8、R9、R10、R11和R12与上面所限定的相同。
醛和端炔烃衍生物的加成反应可以通过各种方法进行,但是,例如,可以在二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、四氯化碳、二乙醚、四氢呋喃、二烷、苯、甲苯、二甲苯或其它不参与反应的惰性溶剂中在-78至150℃,优选-78至50℃下通过1-2当量三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、二甲基吡啶、1,8-二氮杂双环[5,4,0]-7-十一碳烯(DBU)或其它有机碱或碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯、氟化铯、钠、钾、氢化钠、氢化钾、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钾、正丁基锂、二异丙基酰胺锂、双(三甲基甲硅烷基)酰胺钾、双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂或其它无机碱处理端炔烃衍生物,然后使该反应产物在-78至150℃,优选-78至50℃,更优选-78至-20℃下与醛反应。
不饱和键的还原可以在步骤7示出的条件下进行以及在以下条件下进行:使用通过肼的氧化,偶氮基二羧酸盐的分解,作为还原剂的过量的N-磺酰基酰肼的分解体系中的分解制备的二酰亚胺并且使其在1,2-二氯乙烷、1,2-二甲氧基乙烷、四氯化碳、二乙醚、四氢呋喃、二烷、苯、甲苯、二甲苯、乙腈或其它不参与反应的惰性溶剂中在-40至150℃,优选50至100℃下反应。
通过上述反应获得的化合物(XVIIa)、(XVIIb)和(XVIIc)可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤10:
在步骤9获得的化合物(XVIIa)、(XVIIb)或(XVIIc)可以用来获得化合物(XVIIIa)、(XVIIIb)或(XVIIIc)。
其中x、R8、R9、R10、R11和R12与上面所限定的相同。
在二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、四氯化碳、乙腈、二乙醚、四氢呋喃、二烷、苯、甲苯、二甲苯、乙酸乙酯、二甲基甲酰胺或其它惰性溶剂中在三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾或其它碱存在下在-20至100℃,优选-10至80℃下使化合物(XVIIa)、(XVIIb)或(XVIIc)与1-5当量甲烷磺酰氯、甲烷磺酸酐、乙烷磺酰氯、1-丙烷磺酰氯、1-丁烷磺酰氯、三氟甲烷磺酰氯、α-甲苯磺酰氯、苯磺酰氯、对甲苯磺酰氯、对甲苯磺酸酐、4-甲氧基苯磺酰氯、4-氯代苯磺酰氯、2-硝基苯磺酰氯、3-硝基苯磺酰氯、4-硝基苯磺酰氯或其它磺酰化试剂反应1-72小时并使用普通方法形成磺酸酯。然后,使所获得的化合物在乙腈、二乙醚、四氢呋喃、二烷、苯、甲苯、二甲苯、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺或其它惰性溶剂中在0-200℃,优选20-120℃下与1-50当量叠氮化钠、叠氮化锂、叠氮化四丁基铵或其它叠氮化试剂反应。在这个时候,如果有必要的话,还可以添加三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾或其它碱。
通过上述反应获得的化合物(XVIIIa)、(XVIIIb)和(XVIIIc)可以直接地用作下一步的起始材料,但是,根据需要,也可以通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步聚11:
在步骤10获得的化合物(XVIIIa)、(XVIIIb)或(XVIIIc)的叠氮基可以还原成氨基,然后酰胺化而形成化合物(XXa)、(XXb)或(XXc)。
其中x、y、R2、R8、R9、R10、R11和R12与上面所限定的相同。
首先,用锌/盐酸,氢化锂铝或其它金属试剂或三苯基膦、三甲基膦、三乙基磷、三丁基膦或其它三芳基膦或三烷基膦处理化合物(XVIIIa)、(XVIIIb)或(XVIIIc)或在室温下在Pd-C、Pd-CaCO3-Pb、Pd-BaSO4、PtO2等存在下将它们氢化以选择性地将叠氮基还原成氨基,然后使用与羧酸的酰胺化反应以获得化合物(XXa)、(XXb)或(XXc)。对于酰胺化反应,可以使用“Compendium for Organic Synthesis”(Wiely-Interscience;A Division of John Wiely & Sons)等描述的各种方法。作为一个实例,可以使胺化合物在二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、二乙醚、四氢呋喃、二烷、乙腈、苯、甲苯、二甲苯、二甲基甲酰胺或其它惰性溶剂中在羧酸活化剂存在下在-50至120℃,优选-20至80℃下与相应的羧酸起反应以获得目标化合物(XXa)、(XXb)或(XXc)。作为羧酸的活化试剂,可以提及四氯化硅、乙酸酐、乙酰氯、氯代碳酸乙酯、碘化2-碘-1-甲基吡啶、碘化2-氯-1-甲基吡啶、二苯基氧膦基氯、N,N′-二环己基碳化二亚胺(DCC)、N-羟基苯并三唑/DCC、1-乙基-3-(3-二乙基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐、乙氧基乙炔、三甲基甲硅烷基乙氧基乙炔、碳二咪唑、二苯基磷酰基叠氮化物、二乙基磷酰氰等。此外,如果有必要的话,还可以添加对甲苯磺酸、多磷酸或其它酸或三乙胺、二异丙基乙胺、N-甲基吗啉、吡啶、2,6-二甲基吡啶、二甲基氨基吡啶或其它碱、N-羟基苯并三唑、1-羟基-7-氮杂苯并三唑或其它活化剂。
通过上述反应获得的化合物可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤12:
在步骤11获得的化合物(XXa)、(XXb)或(XXc)可以经脱缩醛化和脱芳基甲基化而获得化合物(Ic)或(Id)。
其中A表示-CH2-或-CH(OH)CH2-,x、y、R1、R2、R8、R9、R10、R11和R12与上面所限定的相同。
作为脱保护条件,可以使用“Protective Groups In OrganicSynthesis”(John Wiely & Sons)等中描述的各种方法。例如,作为脱缩醛化条件,可以提及以下方法:在甲醇、乙醇、2-丙醇、二烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、四氯化碳、苯、甲苯、二甲苯或其它惰性溶剂的混合溶液中添加到盐酸、硫酸、硝酸、乙酸或其它无机酸,三氟乙酸、甲烷磺酸、三氟甲烷磺酸或其它有机酸或惰性溶剂、氯化亚锡、氯化铝、二甲基溴代硼烷、三氟硼烷二乙醚配合物、碘化三甲基甲硅烷或其它路易斯酸和,如果有必要的话,苯硫酚或其它软成核剂中并在-10至100℃,优选0至50℃下搅拌。此外,作为脱芳基甲基化条件,可以提及在甲醇、乙醇、2-丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、二甲基甲酰胺或其它不参与反应的溶剂中在Pd-C、Pd(OH)2、PtO2、Rh-C、Ru-C或其它过渡金属催化剂存在下添加4-甲基环己烯并且将它们加热和回流或在室温下氢化的条件和进而在此类惰性溶剂中搅拌氯化亚锡、氯化铝三氟硼烷二乙醚配合物、碘化三甲基甲硅烷或其它路易斯酸的方法,在惰性溶剂中与DDQ、CAN、或其它氧化剂一同搅拌的方法,电气氧化的方法等。如果有必要的话,通过上述反应获得的化合物可以通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化。
步骤13:
已知的起始物质(XXI)(Toyota,M.等人的,Heterocycles1995,40,115)和已知的起始物质(XVI)(例如,Toba,T.等人的,Tetrahedron Lett.2005,46,5043)的反应接着还原可用来获得化合物(XXII)。
其中R8、R9和R10与上面所限定的相同。
作为加成反应和不饱和键的还原的条件,可以使用步骤9中示出的方法。
通过上述反应获得的化合物(XXII)可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤14:
在步骤13获得的化合物(XXII)可以转变成化合物(XXIII)。
其中R8、R9和R10与上面所限定的相同。
磺酸酯的衍生和叠氮化反应可以通过步骤10中示出的方法进行。
通过上述反应获得的化合物(XXIII)可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤15:
在除去保护之后,在步骤14获得的化合物(XXIII),伯羟基可以选择性地受到保护以获得化合物(XXIV)。
其中R8、R9和R10与上面所限定的相同,R13是取代或未取代的烷基,取代或未取代的芳烷基,取代或未取代的甲硅烷基,取代或未取代的酰基,取代或未取代的烷氧羰基或取代或未取代的烷基氨基羰基。
作为脱缩醛化条件,可以使用步骤12中示出的方法。作为伯羟基的选择性保护方法,利用反应性差异,在低温,优选-78℃至-20℃下引入保护基,添加催化量至1.2当量的氧化二正丁基锡以改进伯羟基的选择性或者可以按1-1.5当量的量使用三苯甲基氯、叔丁基二甲基甲硅烷基氯、t-butyldiphenyl silyl triflate或其它空间位阻保护剂。例如,作为叔丁基二甲基甲硅烷基化条件,可以提及以下条件:在二乙醚、四氢呋喃、二烷、苯、甲苯、二甲苯、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或其它惰性溶剂中在碳酸锂、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、氢化钾、钠、钾、三乙胺、异丙基乙基胺、吡啶、二甲基吡啶或其它碱存在下在-50至120℃,优选-20至80℃下使0.8-2当量叔丁基二甲基甲硅烷基氯或叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯反应。
通过上述反应获得的化合物(XXIV)可以直接地用作下一步的起始材料,但是根据需要也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤16:
可以选择性地将在工序15获得的化合物(XXIV)的叠氮基还原以获得胺化合物然后与羧酸(XIX)缩合以获得化合物(XXV)。
其中,y、R2、R8和R13与上面所限定的相同。
叠氮基的还原和与羧酸的缩合反应可以通过步骤11示出的方法进行。
通过上述反应获得的化合物(XXV)可以直接地用作下一步的起始材料,但是根据需要也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤17:
可以保护在步骤16获得的化合物(XXV)的羟基后,仅选择性地除去伯羟基的保护基而将该化合物转化成化合物(XXVI)。
其中,y、R2、R8和R13与上面所限定的相同。R14表示氢或OR15,R15表示苄基,对甲氧基苄基,对硝基苄基,对甲氧基甲氧基苄基,对苄氧基苄基,3,4-二甲氧基苄基,二苯甲基,二(对硝基苯基)甲基,甲氧基甲基,苄氧基甲基,对甲氧基苄氧基,硝基苄氧基,2,2,2-三氯乙氧基甲基或四氢吡喃基。
作为羟基的保护,例如,可以提及以下条件:在二乙醚、四氢呋喃、二烷、苯、甲苯、二甲苯、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或其它惰性溶剂中在碳酸锂、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、氢化钾、钠、钾、三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、二甲基吡啶或其它碱存在下在-50至120℃,优选-20至80℃下使0.8-5当量芳基甲基化剂反应。作为芳基甲基化试剂,可以提及苄基氯、苄基溴、对甲氧苄基氯、间甲氧苄基氯、对硝基苄基氯、对硝基苄基溴等。或者,作为烷氧基甲基化方法,可以提及以下条件:在与所述芳基甲基化相似的条件下使烷氧基甲基氯或烷氧基甲基溴反应或在二乙醚、二烷、苯、甲苯、二甲苯、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或其它惰性溶剂中在盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、三氟乙酸、甲烷磺酸、三氟甲烷磺酸或其它无机酸或有机酸或三氟甲烷磺酸三甲基甲硅烷基酯或其它路易氏酸催化剂存在下在-10至100℃,优选0-50℃下搅拌二烷氧基甲烷。
在伯羟基的保护基的选择性除去的情况下,例如,在取代的甲硅烷基的情况下,不同于其它保护基,有可能如下进行该选择性除去以选择性地将它们除去:在戊烷、己烷、庚烷、环己烷、苯、甲苯、二甲苯、二乙醚、二异丙醚、叔丁基甲基醚、环戊基甲基醚、四氢呋喃、二烷、1,2-二甲氧基乙烷、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、三氯乙烯、乙腈、乙酸乙酯、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或其它惰性溶剂中在-10至100℃,优选0至50℃下使该保护基与氟化四正丁基铵、HF-吡啶络盐、HF-KF、氟化钾或其它具有氟离子的脱甲硅烷剂反应。此外,与基于芳烷基的羟基的保护基不同,可以如下除去乙缩醛类的保护基或其中叔丁基与杂原子键接的保护基:在-20至100℃,优选0至50℃下与盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、三氟乙酸、甲烷磺酸、三氟甲基磺酸或其它无机酸或有机酸反应。与甲硅烷基类、乙缩醛类和烷基类的保护基不同,可以如下选择性地除去烷基羰基类或烷氧羰基类的保护基:使氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡、碳酸钠、碳酸锂、碳酸钾和其它无机碱的水溶液或甲醇钠、乙醇钠、乙醇钾或其它金属醇盐中在-20至100℃,优选0至50℃下作用。
通过上述反应获得的化合物(XXVI)可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步聚18:
可以将在步骤17获得的化合物(XXVI)的伯羟基氧化,然后获得(XXVIII)。
其中x、y、R8、R14和R15与上面所限定的相同。
可以通过步骤8中示出的方法进行伯羟基的氧化。此外,可以通过步骤7中示出的方法进行由醛到不饱和化合物的碳酸化(carbonation)反应。
通过上述反应获得的化合物(XXVIII)可以直接地用作下一步的起始材料,但是,如果有必要的话,也可以在通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化之后使用。
步骤19:
在步骤18获得的化合物(XXVIII)可以经脱缩醛化和脱芳基甲基化而获得化合物(Ic)或(Id)。
其中A表示-CH=CH2CH2-,x、y、R1、R2、R8、R14和R15与上面所限定的相同。
作为脱保护条件,可以使用步骤6中示出的方法。
如果有必要的话,通过上述反应获得的化合物可以通过常用的纯化方法,例如,重结晶或柱层析加以纯化。
本发明的通式(I)的化合物可以单独地给药或者可以根据需要与其它普通的药理学可接受的已知常用的载体一起制备成制剂,该制剂用于改善或治疗自身免疫病、变态反应性疾病或其中已知NKT细胞或NKT细胞的刺激导致疾病条件恶化的疾病。例如,该有效成分可以单独地给药,或与作为胶囊、锭剂、注射剂或其它适合剂型的常用赋形剂一起经口或非经口给药。例如,胶囊如下制备:将该粉末材料与乳糖、淀粉或其衍生物,纤维素衍生物或其它赋形剂混合并将该混合物包装在明胶胶囊中。此外,除了赋形剂之外,还添加羧甲基纤维素钠、藻酸、阿拉伯胶或其它粘结剂和水并捏合,将该混合物制粒,如果有必要的话,然后进一步添加滑石、硬脂酸或其它润滑剂并使用常规压片机制备。在通过注射进行非经口给药的时候,可以在灭菌蒸馏水或消灭菌生理盐水中将有效成分与溶解助剂一起溶解并封入安瓶用于注射剂的制备。如果有必要的话,可以包括稳定剂或缓冲剂。
用于改善或治疗自身免疫疾病、变态反应性疾病或其中已知NKT细胞或NKT细胞的刺激导致本发明疾病条件的恶化的疾病的药物的剂量取决于各种因素如待治疗病人的症状、年龄、给药途径、药物形式、剂量数值等,但是通常0.001mg-5000mg/天/人,优选0.01mg-500mg/天/人,更优选0.1mg-100mg/天/人是适合的。
实施例
现将使用实施例更具体地说明本发明,但是本发明的范围当然不限于这些实施例。
实施例1:1,3-O-苄叉基(benzylidene)-D-阿拉伯糖基-1,2,3,4-
二十三烷四醇(化合物1)的合成
在-40℃下,向碘化铜(I)(2.14g,11.2mmol)在脱水四氢呋喃(50ml)中的悬浮液中逐滴添加1.58M正十八烷基溴化镁(49.5mmol,在四氢呋喃溶液中),然后在-10℃搅拌该混合物10分钟。接下来,在-10℃逐滴添加已知的4,5-脱水-1,3-O-苄叉基-D-阿拉伯糖醇(WO2004/072091;K.Murata等人的,J.Org.Chem.2005,70,2398)(5.01g,22.5mmol)的脱水四氢呋喃(100ml)溶液,然后在-10℃搅拌该混合物2.5小时。向该反应混合溶液中添加饱和氯化铵水溶液,用乙酸乙酯萃取该产物,用饱和盐水洗涤该有机层,并且用硫酸钠干燥所得混合物,过滤,并在减压下浓缩。通过硅胶柱层析(氯仿∶乙酸乙酯=1∶2)纯化所获得的残余物,以3.05g的量获得上面确定的化合物(产率28%)。
实施例2:1,3-O-苄叉基-2-O-甲烷磺酰基-D-阿拉伯糖基
-1,2,3,4-二十三烷四醇(化合物2)的合成
在室温下向实施例1中合成的化合物1(1.64g,3.44mmol)的脱水吡啶(30ml)和氯仿(30ml)的溶液中逐滴添加甲烷磺酰氯(0.84ml),然后在室温下搅拌该反应混合物2天2夜。将该反应混合物浓缩,然后使用庚烷以共沸方式除去溶剂(两次),然后将所获得的残余物溶于氯仿(300ml)并用水洗涤(两次)。分取有机层,然后用硫酸钠干燥,过滤,并在减压下浓缩。通过硅胶柱层析(氯仿∶乙酸乙酯=2∶l)纯化所获得的残余物,以1.00g的量获得上面确定的化合物(产率53%)。
实施例3:2-O-甲烷磺酰基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇(化合物
3)的合成
向实施例2中合成的化合物2(555mg,1.00mmol)在乙醇(50ml)和氯仿(25ml)的溶液中,添加20%Pd(OH)2/C(198mg),然后在氢气氛下在室温下搅拌该混合物一整夜。通过硅藻土(serite)滤出催化剂,然后在减压下浓缩该滤液,以445mg的量获得上面确定的化合物(产率95%)。
实施例4:2-叠氮基-D-核糖-1,2,3,4-二十三烷三醇(化合物4)
的合成
向实施例2中合成的化合物2(416mg,0.89mmol)的脱水二甲基甲酰胺(15ml)溶液中,添加叠氮化钠(237mg),然后在90℃下搅拌该混合物6小时。向该反应混合物中添加乙酸乙酯(400ml),然后用水洗涤所得混合物(两次),用硫酸钠干燥,过滤,然后在减压下浓缩。通过硅胶柱层析(正己烷∶乙酸乙酯=1∶1)纯化所获得的残余物,以149mg的量获得上面确定的化合物(产率41%)。
实施例5:2-叠氮基-3,4-O-异丙叉基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三
醇(化合物5)的合成
向实施例4中合成的化合物4(144mg,2.56mmol)的丙酮(20ml)溶液中添加浓盐酸(20μl),然后在室温下搅拌该混合物1小时。接下来,用过量的氢氧化钙中和该反应混合物,通过棉栓过滤除去无机盐,然后在减压下浓缩所得混合物。通过硅胶柱层析(正己烷∶乙酸乙酯=6∶1)纯化所获得的残余物,以76.7mg的量获得上面确定的化合物(产率48%)。
实施例6:2-叠氮基-1-O-(2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃半乳糖
基)-3,4-O-异丙叉基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇(化合物6)的合
成
向干燥分子筛(4A,粉末)(250mg)中添加实施例5中合成的化合物5(100mg,0.28mmol)和2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃半乳糖基溴(280mg,0.46mmol)的甲苯(4.5ml)和二甲基甲酰胺(4.5ml)溶液,然后添加溴化四正丁基铵(218mg,0.68mmol)并搅拌所得混合物4天。向该反应混合物中添加乙酸乙酯(200ml),然后用饱和碳酸氢钠水溶液和水洗涤该混合物。用硫酸钠干燥有机层,过滤并在减压下浓缩,然后通过硅胶柱层析(正己烷∶乙酸乙酯=25∶1-8∶1)纯化所获得的残余物,以91.3mg的量(产率42%)获得上面确定的化合物。
实施例7:2-氨基-1-O-(2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃半乳糖基)
-3,4-O-异丙叉基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇(化合物7)的合成
向实施例6中合成的化合物6(45mg,0.046mmol)在乙醇(4.5ml)和二氯甲烷(1.5ml)的溶液中添加钯-碳酸钙(铅中毒的)(林德拉催化剂)(145mg),然后在常压下在室温下搅拌该混合物一夜以便氢化。滤出催化剂,然后在减压下浓缩该滤液,以38.4mg的量获得上面确定的化合物(产率87%)。
实施例8:2-二十六烷酰氨基-1-O-(2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-
吡喃半乳糖基)-3,4-O-异丙叉基-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇(化合
物8)的合成
在冰冷却下向实施例7合成的化合物7(38mg,0.04mmol)、正二十六酸(18mg,0.046mmol)和1-羟基氮杂苯并三唑(7.8mg,0.057mmol)在二甲基甲酰胺(3ml)和二氯甲烷(1.5ml)的混合悬浮液中添加三乙胺(13μl,0.093mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(14mg,0.073mmol),然后在室温下搅拌所得混合物5天。用乙酸乙酯(100ml)稀释该反应混合物,然后用饱和碳酸氢钠水溶液和水洗涤,然后用硫酸钠干燥有机层,过滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱层析(正己烷∶乙酸乙酯=4∶1)纯化所获得的残余物,以51mg的量获得上面确定的化合物(产率96%)。
实施例9:2-二十六烷酰氨基-1-O-(2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-
吡喃半乳糖基)-D-核糖-1,3,4-二十三烷三醇(化合物9)的合成
在室温下搅拌实施例8中合成的化合物8(35mg,0.027mmol)的甲醇(0.8ml)/二氯甲烷(5ml)/4N盐酸-二烷(100μl)混合溶液2小时,然后在减压下浓缩。通过硅胶柱层析(正己烷∶乙酸乙酯=2∶1)纯化所获得的残余物,以20mg的量获得上面确定的化合物(产率59%)。
实施例10:2-二十六烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-二十三烷三醇(化合物10)的合成
向实施例9中合成的化合物9(20mg,0.016mmol)在甲醇(3ml)/二氯甲烷(1.5ml)的混合溶液中添加氢氧化钯(9.8mg)并通过在常压和室温下搅拌4小时将该混合物氢化。滤出催化剂并在减压下浓缩该滤液,以13mg的量获得上面确定的化合物(产率92%)。
实施例11:2-二十九烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-二十三烷三醇(化合物11)的合成
从实施例7中合成的化合物7和正二十九烷酸,进行与实施例8-10中相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例12:2-二十六烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-二十五烷三醇(化合物12)的合成
从已知的4,5-脱水-1,3-O-苄叉基-D-阿拉伯糖醇和正二十烷基溴化镁,使用与实施例1-7相同的实验程序获得2-氨基-1-O-(2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃半乳糖基)-3,4-O-异丙叉基-D-核糖-1,3,4-二十五烷三醇。从所得化合物和正二十六烷酸,进行与实施例8-10中相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例13:2-二十六烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-二十七烷三醇(化合物13)的合成
从已知的4,5-脱水-1,3-O-苄叉基-D-阿拉伯糖醇和正二十二烷基溴化镁,使用与实施例1-7相同的实验程序获得2-氨基-1-O-(2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃半乳糖基)-3,4-O-异丙叉基-D-核糖-1,3,4-二十七烷三醇。从所得化合物和正二十六烷酸,进行与实施例8-10中相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例14:2-三十烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-十八烷三醇(化合物14)的合成
从已知的4,5-脱水-1,3-O-苄叉基-D-阿拉伯糖醇和正十三烷基溴化镁,使用与实施例1-7相同的实验程序获得2-氨基-1-O-(2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃半乳糖基)-3,4-O-异丙叉基-D-核糖-1,3,4-十八烷三醇。从所得化合物和正三十烷酸,进行与实施例8-10中相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例15:2-三十四烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-十八烷三醇(化合物15)的合成
从已知的4,5-脱水-1,3-O-苄叉基-D-阿拉伯糖醇和正十三烷基溴化镁,使用与实施例1-7相同的实验程序获得2-氨基-1-O-(2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃半乳糖基)-3,4-O-异丙叉基-D-核糖-1,3,4-十八烷三醇。从所得化合物和正三十四烷酸,进行与实施例8-10中相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例16:2-二十四烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-二十三烷三醇(化合物16)的合成
从实施例7中合成的化合物7和正二十四烷酸,进行与实施例8-10中相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例17:2-二十六烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-二十四烷三醇(化合物17)的合成
从已知的4,5-脱水-1,3-O-苄叉基-D-阿拉伯糖醇和正十九烷基溴化镁,使用与实施例1-7相同的实验程序获得2-氨基-1-O-(2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃半乳糖基)-3,4-O-异丙叉基-D-核糖-1,3,4-二十四烷三醇。从所得化合物和正二十六烷酸,进行与实施例8-10中相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例18:2-二十九烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-二十四烷三醇(化合物18)的合成
从已知的4,5-脱水-1,3-O-苄叉基-D-阿拉伯糖醇和正十九烷基溴化镁,使用与实施例1-7相同的实验程序获得2-氨基-1-O-(2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃半乳糖基)-3,4-O-异丙叉基-D-核糖-1,3,4-二十四烷三醇。从所得化合物和正二十九烷酸,进行与实施例8-10中相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例19:2-二十五烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-二十三烷三醇(化合物19)的合成
从在实施例7合成的化合物7和正二十五烷酸,进行与实施例8-10相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例20:2-二十七烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-二十四烷三醇(化合物20)的合成
从在实施例7合成的化合物7和正二十七烷酸,进行与实施例8-10相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例21:2-二十八烷酰氨基-1-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-核糖
-1,3,4-二十四烷三醇(化合物21)的合成
从在实施例7合成的化合物7和正二十八烷酸,进行与实施例8-10相同的实验程序获得上面确定的化合物。
实施例22:4S,5R-2,3-O-异丙叉基-1,2,3-二十二烷三醇(化合物
22)的合成
在-78℃下向由溴代十八烷和三苯基膦制备的鏻盐(5.97g,10.0mmol)的THF(30ml)悬浮液中逐滴添加1.6M正丁基锂己烷溶液(6.3ml,10.1mmol),然后将该混合物的温度增加到-45℃并搅拌30分钟。逐滴添加已知的2,3-O-异丙叉基-L-赤藓糖(Sabino,A.A.Pilli,R.A.Tetrahedron Lett.2002,43,2819;808mg,5.0mmol)的THF(10ml)溶液,然后于3.5小时内逐渐将混合物的温度增加到室温并搅拌一整夜。添加半饱和的碳酸氢钠水,用乙酸乙酯萃取该混合物,合并有机层,并用硫酸钠干燥所得混合物,然后浓缩。通过硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯=7∶1→5∶1)纯化所获得的残余物而获得707mg(产率35%)作为立体异构体的混合物(E∶Z=大约1∶5)的含双键的中间体。在氢气氛下将所获得的中间体(690mg,1.74mmol)在乙酸乙酯(6ml)中与20%氢氧化钯(70mg)一起搅拌1小时。通过膜式过滤器滤出不溶物并用氯仿/甲醇混合溶液充分洗涤。合并滤液并浓缩所得混合物并通过硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯=5∶1)纯化而获得585mg(产率84%)上面确定的化合物。
实施例23:4R,5R-2,3-O-异丙叉基-2,3-二羟基二十二烷醇(化合
物23)的合成
向冷却至-78℃的乙二酰氯(92μl)的二氯甲烷(2ml)溶液中添加100μl二甲基亚砜的二氯甲烷(1ml)溶液。搅拌该混合物15分钟,然后添加实施例22中合成的化合物22的二氯甲烷(2ml)溶液并搅拌该混合物20分钟。将该混合物的温度增加到-45℃,搅拌1小时,然后添加三乙胺(600μl)。然后于1小时或更长时间内逐渐将该混合物的温度增加到0℃。搅拌该混合物20分钟,然后在0℃下添加饱和的氯化铵溶液,进一步将该混合物的温度增加到室温,然后用二氯甲烷萃取该混合物。合并有机层并用硫酸钠干燥所得混合物并浓缩而获得103mg(产率57%)上面确定的化合物。将所获得的粗产物在没有纯化下用于接下来的工序。
实施例24:3R,4S,5R-4,5-O-异丙叉基-1-α-D-(四-O-苄基吡喃
半乳糖基)-1-tetracosine-3,4,5-三醇(化合物24)的合成
在-45℃下向已知的1-α-乙炔基-2,3,4,6-四-O-苄基-D-半乳糖(Dondoni,A.Mariotti,G.Marra,A.J.Org.Chem.2002,67,4475;103mg,0.188mmol)的THF(2ml)溶液中逐滴添加1.6M正丁基锂己烷溶液(140μl,0.224mmol),然后搅拌该混合物30分钟。向这一混合物中添加实施例23中合成的化合物23的THF(3.5ml)溶液,然后搅拌该混合物4小时。在-30℃下添加0.1M磷酸缓冲液(3ml),然后逐渐将该混合物提升到室温。此外,添加盐水,然后用乙酸乙酯萃取所得混合物,合并有机层,并且用硫酸钠干燥所得混合物。浓缩所得产物并通过硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯=6∶1→3∶1)纯化所获得的残余物而获得68.4mg(产率38%)上面确定的化合物。
实施例25:3R,4S,5R-4,5-O-异丙叉基-1-α-D-(四-O-苄基吡喃
半乳糖基)-二十四烷-3,4,5-三醇(化合物25)的合成
向实施例24合成的化合物24(68.4mg,0.072mmol)的二甲氧基乙烷(3ml)溶液中添加甲苯磺酰肼(137.9mg,0.74mmol)并将所得混合物加热到85℃。在加热和搅拌同时,每30分钟添加1N乙酸钠水溶液(73μl,0.073mmol)11次。在添加完成之后,进一步搅拌该混合物3小时。将该混合物冷却到室温,然后添加水并用二氯甲烷萃取所得混合物,合并有机层,并且用硫酸钠干燥该混合物。浓缩所得产物并通过硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯=4∶1)纯化所获得的残余物而获得55.8mg(产率81%)上面确定的化合物。
实施例26:3R,4S,5R-4,5-O-异丙叉基-3-甲烷磺酰氧基-1-α-D-
(四-O-苄基吡喃半乳糖基)-二十四烷-4,5-二醇(化合物26)的合成
在0℃下向实施例25中合成的化合物25(55.8mg,0.059mmol)的二氯甲烷/吡啶=2/1溶液中添加甲烷磺酰氯(4滴,大约66mg)。
用一整夜逐渐将混合物的温度增加到室温。在室温下进一步添加甲烷磺酰氯(10滴),然后在2.5小时之后,进一步添加甲烷磺酰氯(10滴)。搅拌该混合物1小时,然后用乙酸乙酯稀释,用饱和氯化铵水溶液和水洗涤,然后用硫酸钠干燥。浓缩所得产物并通过硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯=3∶1)纯化所获得的残余物而获得60.5mg(产率100%)上面确定的化合物。
实施例27:3S,4S,5R-4,5-O-异丙叉基-3-己酰氨基-1-α-D-(四
-O-苄基吡喃半乳糖基)-二十四烷-4,5-二醇(化合物27)的合成
向实施例26中合成的化合物26(60.5mg,0.021mmol)的DMF溶液中添加叠氮化钠(43.3mg,0.67mmol)并且在90℃下搅拌该混合物一整夜。用乙酸乙酯稀释该混合物,用水洗涤,然后用硫酸钠干燥。浓缩所得的混合物并通过硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯=6∶1)纯化所获得的残余物而获得叠氮化物化合物。接下来,将所得化合物溶于2-丙醇(3ml)中并在氢气氛下与林德拉催化剂一起搅拌1天。将反应减缓并且进度为大约50%,因此使用膜式过滤器通过过滤除去催化剂,然后浓缩滤液,然后将浓缩后全部量溶于乙醇(3ml)中,然后让所得溶液在氢气氛下与林德拉催化剂一起搅拌1天。材料基本上完全被消耗,因此使用膜式过滤器通过过滤除去催化剂并浓缩滤液而获得胺化合物。将所获得的胺溶于DMF/二氯甲烷=1/1溶剂,按顺序添加蜡酸(7.8mg,0.020mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(4.7mg,0.035mmol)、三乙胺(3滴)和N-二甲基氨基丙基N′-乙基羰基二咪唑盐酸盐(7.1mg,0.037mmol)并在室温下搅拌所得混合物3天。按60ml的量添加乙酸乙酯以稀释该混合物,然后通过饱和碳酸氢钠水和水洗涤所得产物并用硫酸钠干燥。浓缩所得产物并通过硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯=6∶1 →4∶1)纯化所获得的残余物而获得11.2mg(产率40%)上面确定的化合物。
实施例28:3S,4S,5R-1-α-D-吡喃半乳糖基-3-己酰氨基二十四烷
-4,5-二醇(化合物28)的合成
向实施例27中合成的化合物27(11.2mg,0.0084mmol)的二氯甲烷/甲醇=5/1溶液(4.8ml)中添加4N盐酸/二烷溶液(200μl)并搅拌该混合物1.5小时。然后将它冷却到0℃并用氢氧化钙(61.8mg)中和,然后通过膜式过滤器滤出不溶物。浓缩所得产物并通过硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯=2∶1→1∶1)纯化所获得的残余物而获得9.4mg不含异丙叉基的主体。将它溶于二氯甲烷/甲醇=1/2溶液(4.5ml)中并在氢气氛下与20%氢氧化钯(11mg)一起搅拌5.5小时。通过膜式过滤器滤出不溶物并用氯仿/甲醇混合溶液充分洗涤。合并滤液并浓缩所得化合物,以7.7mg(产率98%)获得上面确定的化合物。
通过上面实施例获得的物理化学数据在表I中示出。
表I
表I
表I(续)
表I(续)
表I(续)
表I(续)
表I(续)
表I(续)
表I(续)
合成的糖脂衍生物在K/Bxn血清转移关节炎中的抑制效果
(A)以150μl的量对C57BL/6J小白鼠(8周龄,雌性)进行腹内给予K/BxN血清以引起关节炎。通过按下列方式观察判断关节炎得分。
如下对关节炎评分:
0:没有症状,
1:仅四肢的指等一个小关节肿胀和变红,
2:两个或更多个小关节或较大关节如腕关节或脚关节肿胀和变红,
3:整个一个臂或腿肿胀和变红
4:一个臂或腿的总肿胀达到最大程度。
两个臂和两个腿的总计用作得分。将该化合物溶于10%DMSO/PBS,并从给予血清当天起每周两次腹内给予2μg/小白鼠。
对于对照组,仅给予10%DMSO/PBS。实验结果是,该化合物的给药使关节炎得分能够显著地被抑制(参见图1)。
(B)在血清转移之后第八天之后研究用于实验的小白鼠的病理组织。病理得分如下判断。
如下对病理评分:
0:正常,
1:具有滑液炎症的但是没有软骨和骨质病变轻度关节炎,
2:伴有滑液炎症和软骨和骨质损害的中度关节炎,
3:具有高度滑液炎症和软骨和骨质损害的严重关节炎。
两个臂和两个腿的总计用作得分。作为实验结果,该化合物的给药使病理得分能够显著地被抑制(参见图2)。
(C)在没有NKT细胞存在的Jα18基因缺损的小白鼠中,没有观察到该化合物的K/BxN血清转移关节炎的抑制效果。由此,可以领会到NKT细胞对根据本发明化合物对关节炎的抑制效果表达是必要的(参见图3)。
化合物对NKT细胞的影响
从C57BL/6J小白鼠(8周龄,雌性)的肝脏中分离单核细胞并与该化合物培养48小时。通过ELISA方法测量上清液中的细胞因子,同时通过氚胸腺嘧啶核苷的吸入测量细胞增殖反应。α-GC引起细胞增殖、IFN-γ产生和IL-4产生,但是该化合物不以任何方式反应。通过α-GC引起的反应和在化合物30ng/ml下观察到的很少的氚的吸入和微量细胞因子产生,在无NKT细胞的Jα18基因缺损小白鼠中没有看到,因此,证实这些反应是NKT细胞依赖性反应(参见图4)。
化合物的预给药对NKT细胞效果
用该化合物按2μg/小白鼠的量为C57BL/6J小白鼠(8周龄,雌性)每隔一天腹内给药三次。对于对照组,仅给药10%DMSO/PBS。在最后给药之后两天,从肝脏分离单核细胞并与α-GC一起培养48小时,通过ELISA方法测量上清液中的细胞因子,并通过氚胸腺嘧啶核苷的吸入测量细胞增殖反应。在用化合物预给药的组中,不能观察到归因于α-GC的细胞增殖、IFN-γ产生和IL-4产生。由此,可以看出本发明化合物抑制对于NKT细胞的抗原刺激的反应(参见图5)。
在支气管哮喘模型中在肺泡洗液中细胞浸润的抑制
在0天和7天ovalubumin(OVA)按50μg/小白鼠的量与明矾按2.25mg/小白鼠的量共混之后,对C57BL/6J小白鼠(8周龄,雌性)腹内给药。
从18天开始,使该小白鼠吸入10mg/ml浓度的OVA连续三天。在吸入之前,按2μg/小白鼠的量将该化合物腹内给药。在最后吸入日的次日,洗涤肺泡并研究细胞组成。与化合物组中的对照组(OVA/DMSO)相比,细胞浸润得到显著地抑制。此外,哮喘的嗜酸细胞浸润特征得到显著地抑制(参见图6)。
在支气管哮喘模型中在肺泡洗液中细胞因子的抑制
在0天和7天OVA按50μg/小白鼠的量与明矾按2.25mg/小白鼠的量共混之后,对C57BL/6J小白鼠(8周龄,雌性)腹内给药。从18天开始,使该小白鼠吸入10mg/ml浓度的OVA连续三天。在吸入之前,按2μg/小白鼠的量将该化合物腹内给药。在最后吸入日的次日,洗涤肺泡并使用ELISA方法测量肺泡洗液中的细胞因子。与对照组(OVA/DMSO)相比,在给予化合物组中IL-5和IL-13都得到显著地抑制(参见图7)。
在支气管哮喘模型中气道阻力的抑制
在0天和7天OVA按50μg/小白鼠的量与明矾按2.25mg/小白鼠的量共混之后,对C57BL/6J小白鼠(8周龄,雌性)腹内给药。从18天开始,使该小白鼠每隔一天吸入10mg/ml浓度的OVA三次。在吸入之前,按2μg/小白鼠的量将该化合物腹内给药。在最后吸入日的次日,使用体积描记法测量乙酰甲胆碱引起的气道阻力。与对照组(OVA/DMSO)相比,在化合物组中气道阻力得到抑制(参见图8)。
在支气管哮喘模型中在肺泡洗液中细胞浸润的抑制
在0天和7天ovalubumin(OVA)按20μg/小白鼠的量与明矾按2.25mg/小白鼠的量共混之后,对Balb/c小白鼠(8周龄,雌性)腹内给药。从18天开始,使该小白鼠吸入5mg/ml浓度的OVA连续三天。在吸入之前,按2μg/小白鼠的量将该化合物腹内给药。在最后吸入日的次日,洗涤肺泡并研究细胞组成。与对照组(OVA/DMSO)相比,化合物组中的细胞浸润得到显著地抑制。此外,哮喘的嗜酸细胞浸润特征得到显著地抑制(参见图9)。
在支气管哮喘模型中肺泡洗液中细胞因子的抑制
在0天和7天OVA按20μg/小白鼠的量与明矾按2.25mg/小白鼠的量共混之后,对Balb/c小白鼠(8周龄,雌性)腹内给药。从18天开始,使该小白鼠吸入5mg/ml浓度的OVA连续三天。在吸入之前,按2μg/小白鼠的量将该化合物腹内给药。在最后吸入日的次日,洗涤肺泡并使用ELISA方法测量肺泡洗液中的细胞因子。与对照组(OVA/DMSO)相比,在化合物组中IL-5和IL-13都得到显著地抑制(参见图10)。
支气管哮喘模型中对气道阻力的抑制效果
在0天和7天OVA按20μg/小白鼠的量与明矾按2.25mg/小白鼠的量共混之后,对Balb/c小白鼠(8周龄,雌性)腹内给药。从18天开始,使该小白鼠每隔一天吸入5mg/ml浓度的OVA三次。在吸入之前,按2μg/小白鼠的量将该化合物腹内给药。在最后吸入日的次日,使用体积描记法测量乙酰甲胆碱引起的气道阻力。与对照组(OVA/DMSO)相比,在化合物组中气道阻力得到抑制(参见图11)。
根据本发明的通式(I)的糖脂衍生物ASG抑制自身抗体引起的炎症反应,并且可用作治疗自身免疫关节炎及其它自身免疫疾病和支气管哮喘及其它变态反应性疾病的药物。
Claims (35)
2.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,Z表示-O-,x表示4-16的整数,y表示26-35的整数。
3.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,Z表示-O-,x表示17-25的整数,y表示0-35的整数。
4.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,Z表示-O-,x表示17-25的整数,y表示20-28的整数。
5.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,Z表示-CH2-,x表示4-15的整数,y表示26-35的整数。
6.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,Z表示-CH2-,x表示16-25的整数,y表示0-35的整数。
7.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,Z表示-CH2-,x表示16-25的整数,y表示20-28的整数。
8.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基。
9.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,Z表示-O-,x表示4-16的整数,y表示26-35的整数。
10.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,Z表示-O-,x表示17-25的整数,y表示0-35的整数。
11.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,Z表示-O-,x表示17-25的整数,y表示20-28的整数。
12.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,Z表示-CH2-,x表示4-15的整数,y表示26-35的整数。
13.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,Z表示-CH2-,x表示16-25的整数,y表示0-35的整数。
14.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,Z表示-CH2-,x表示16-25的整数,y表示20-28的整数。
15.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-O-,x表示4-16的整数,y表示26-35的整数。
16.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-O-,x表示17-25的整数,y表示0-35的整数。
17.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-O-,x表示17-25的整数,y表示20-28的整数。
18.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-CH2-,x表示4-15的整数,y表示26-35的整数。
19.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-CH2-,x表示16-25的整数,y表示0-35的整数。
20.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-CH2-,x表示16-25的整数,y表示20-28的整数。
21.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-O-,x表示4-16的整数,y表示26-35的整数。
22.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-O-,x表示17-25的整数,y表示0-35的整数。
23.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-O-,x表示17-25的整数,y表示20-28的整数。
24.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-CH2-,x表示4-15的整数,y表示26-35的整数。
25.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-CH2-,x表示16-25的整数,y表示0-35的整数。
26.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH2-或-CH(OH)-CH2-,Z表示-CH2-,x表示16-25的整数,y表示20-28的整数。
27.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH(OH)-CH2-,Z表示-O-,x表示4-16的整数,y表示26-35的整数。
28.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH(OH)-CH2-,Z表示-O-,x表示17-25的整数,y表示0-35的整数。
29.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH(OH)-CH2-,Z表示-O-,x表示17-25的整数,y表示20-28的整数。
30.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH(OH)-CH2-,Z表示-CH2-,x表示4-15的整数,y表示26-35的整数。
31.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH(OH)-CH2-,Z表示-CH2-,x表示16-25的整数,y表示0-35的整数。
32.根据权利要求1的糖脂衍生物,其中,在通式(I)中,R1表示α-D-吡喃半乳糖基,R2表示氢原子,A表示-CH(OH)-CH2-,Z表示-CH2-,x表示16-25的整数,y表示20-28的整数。
33.包含根据权利要求1-32中任一项的糖脂衍生物作为有效成分的用于治疗自身免疫病的药物。
34.包含根据权利要求1-32中任一项的糖脂衍生物作为有效成分的用于治疗变态反应性疾病的药物。
35.包含根据权利要求1-32中任一项的糖脂衍生物作为有效成分的用于治疗疾病的药物,在该疾病中,NKT细胞或对NKT细胞的刺激导致疾病的恶化。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005194116 | 2005-07-01 | ||
JP194116/2005 | 2005-07-01 | ||
JP265716/2005 | 2005-09-13 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101233124A true CN101233124A (zh) | 2008-07-30 |
Family
ID=39898927
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNA2006800278877A Pending CN101233124A (zh) | 2005-07-01 | 2006-06-30 | 糖脂衍生物和包含它作为有效成分的药物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101233124A (zh) |
-
2006
- 2006-06-30 CN CNA2006800278877A patent/CN101233124A/zh active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN100537585C (zh) | 糖脂衍生物及其制造方法,以及其合成中间体及其制造方法 | |
JP5564490B2 (ja) | 抗炎症性ファルマコアを含む化合物および使用法 | |
CN101228172B (zh) | 6,7-不饱和-7-氨基甲酰基取代的吗啡喃衍生物 | |
CN101675058A (zh) | 用于制备高纯度普拉格雷盐酸盐的方法 | |
CN108290871A (zh) | 具有抗癌活性的mdm2-p53相互作用的异吲哚啉酮抑制剂 | |
CN1035117A (zh) | 2′,3′-二脱氧-2′,2′-二氟核苷的制备方法 | |
CN106589055B (zh) | 取代的细胞酰二肽类化合物及其制备方法和用途 | |
AU6513094A (en) | Novel sphingoglycolipid and use thereof | |
WO2008001859A1 (fr) | AGONISTE DES RÉCEPTEURS δ DES OPIOÏDES | |
CN1050195A (zh) | 用作C17-20裂解酸抑制剂的4-取代的17β-(环丙氧基)雄甾-5-烯-3β-醇和与其相关的化合物 | |
JP2023507774A (ja) | タンパク質チロシンホスファターゼ阻害剤及びそれらの使用方法 | |
JP2013224263A (ja) | 4−イソプロピルフェニルグルシトール化合物 | |
CN1131238C (zh) | 3-取代-d-高-1,3,5(10)-雌三烯衍生物 | |
JPWO2007004705A1 (ja) | 糖脂質誘導体及びそれを有効成分とする治療剤 | |
CN101233124A (zh) | 糖脂衍生物和包含它作为有效成分的药物 | |
JPH03170497A (ja) | ステロイド | |
JPH0340034B2 (zh) | ||
CN101490076A (zh) | 3′-乙炔基胞嘧啶核苷衍生物 | |
WO2013173862A1 (en) | Improved synthesis | |
US20030022872A1 (en) | Vitamin d derivatives having substituents at the 2 alpha-position | |
WO1992019638A1 (fr) | DERIVE DE 1-β-D-ARABINOFURANOSYL-(E)-5-(2-HALOGENOVINYL)-URACILE | |
BRPI0618024A2 (pt) | fármaco terapêutico para supressão de funções de células nkt o qual contém derivado de glicolipìdeo como ingrediente ativo | |
IE43088B1 (en) | Cardenolide glycosides and methods of making the same | |
JP3195002B2 (ja) | 新規なプロスタグランジン誘導体 | |
AU1213999A (en) | Quinolinone glycoside, production process, and anti-allergic agent |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20080730 |